肌肉植入试验.ppt

苏州大学卫生与环境技术研究所动物的选择n 短期植入（12周以内）试验首选动物为大鼠、兔 n 长期植入（12周以上）可选择兔、狗、羊、山羊 、猪等寿命相对长的动物n 我们目前选择的动物为新西兰白兔，体重》2kgn 对于短期植入，动物选择与植入周期如下 ：植入周期植入周期n对于长期植入，动物选择与植入周期如下：试验目的n 采用植入后局部反应试验，评估受试物 植入家兔肌肉组织后的刺激和毒性反应 植入样品的制备1. 固体材料（不包括粉剂）植入物应该经过与最终产品相同的制造 、处理、清洁和灭菌过程，确保植入物未被损 坏并且是无菌的规格要求：长10mm，宽1－3mm，边 缘光滑植入样品的制备2. 非固体材料（包括粉剂、液体、半固体等 ）植入物应该经过与最终产品相同的 制造、处理、清洁和灭菌过程无菌条件下将样品填充至两端开口 的PP、PE、或者PTFE空心小管内，填充 物与管口齐平，并防止中间有空气对照样品的制备对照样品的尺寸、形状、表面条件应尽 可能与试验样品一致对照样品的处理、清洗及灭菌方式应尽 可能与试验样品一致动物的麻醉n 10%水合氯醛耳缘静脉注射，2ml/kgn 氯胺酮肌肉注射，50mg/kg n 戊巴比妥钠耳缘静脉注射，30mg/kg n 实际麻醉过程中，由于动物体质状况等 的差异，需适量调整剂量。

n 固定兔，去除背部肌肉上方约10×20cm面积的 兔毛用碘伏和75%乙醇清洁暴露皮肤水合氯醛 麻醉 n 将载有对照样品的穿刺针与表面皮肤呈45º角插 入肌肉，当回抽穿刺针时,用细探针将样品留于肌肉 中每只家兔左侧肌肉植入四个对照样品；右侧直 接用样品肌肉注射四个点，每点0.2ml n 较大的不能用穿刺针植入的样品，用外科手术 方法植入 n 植入过程中需注意无菌 n 植入完成后注射适量青链霉素防止感染植入过程植入后临床观察n 植入后每天观察动物的一般状况，如 精 神状态、被毛光泽、眼神、反应等 n 植入后每天观察植入点皮肤反应，有无出 血、红肿、坏死和试验样品排出等异常现象 n 于四周后，将家兔无痛处死，解剖并观 察植入部位有无皮下和肌肉异常病变，在低 倍放大镜下观察组织反应（包括出血肿、水 肿、囊肿和增生），并记录解剖观察取出脊柱两侧肌肉，切取包裹试样周围 0.5～1.0cm的肌肉组织，然后放置于10％ 福尔马林溶液中固定组织保存组织学观察n 固定之后，肌肉组织标本经修整、包埋、切 片等步骤，再进行常规HE染色。

n 于光学显微镜下观察，比较供试品与对照品 周围的组织反应，纤维囊腔厚度，炎症细胞和其 他细胞存在情况及试样/组织界面处的其他异常 情况等 组织学评价体系评分01234嗜中性粒细胞0极少,1-5/phf5-10/phf大量浸润大量堆积淋巴细胞0极少,1-5/phf5-10/phf大量浸润大量堆积浆细 胞0极少,1-5/phf5-10/phf大量浸润大量堆积巨噬细胞0极少,1-5/phf5-10/phf大量浸润大量堆积巨细胞0极少,1-5/phf5-10/phf大量浸润大量堆积坏死0轻微轻度重度严重新生血管0局灶性 毛细血管增生 1-3个小芽4-7支毛细血管 增生并有成纤维 细胞支持大量毛细血管 增生并有成纤 维细 胞支持毛细血管广泛 增生并有成 纤维细 胞支持纤维 化0窄束中等厚度较厚广泛纤维 化脂肪浸润0极少脂肪浸 润和纤维 化少量脂肪浸 润和纤维 化植入部位大量 堆积脂肪细胞脂肪细胞完 全包裹植入物 phf= 每高倍视野（400×）评分标准无刺激0.0 – 2.9轻度刺激3.0 – 8.9重度刺激9.0 -15.0重度刺激>15样品组得分减去阴性对照组得分即为试验样 品的最终得分。

参考文献n医疗器械的生物学评价 第 6 部分: 植入后局 部反应试验ISO 10993-6:2007n医疗器械的生物学评价 第12部分: 样品制备 和参照样品ISO 10993-12:2007n医疗器械的生物学评价 第 2 部分: 动物保护 要求ISO 10993-2:2006谢 谢。