Cocktail探针药物法在中药细胞色素P450酶代谢研究中的应用.doc

Cocktail探针药物法在中药细胞色素P450酶代谢研究中的应用刘高峰 甄立棉(哈尔滨医科大学附属第二医院药学部，黑龙江省高校重点实验室，黑龙江 哈尔滨150086)摘 要：细胞色素P450是人体内最重要的药物代谢酶，中药可抑制或诱导某个或某些细胞色素P450亚酶，从而影响合用药物的代谢，导致药物相互作用发生对于中药的代谢研究，是中药现代化研究的重要方面，并可提高中药使用的有效性和安全性，促进临床合理用药Cocktail探针药物法能全面、真实地反映药物代谢的过程，其优点在于多个代谢途径的信息可在单个实验过程获得，并将个体间影响降至最低，此法省时、经济Cocktail探针药物法用于中药的代谢研究还是一个比较新的研究领域，近几年开始有文献报道本文介绍了Cocktail法在中药细胞色素P450酶代谢研究中的国内外应用进展，以期系统了解并指导该领域的研究关键词：细胞色素P450；中药；Cocktail探针药物法；代谢；研究进展Review on the effects of Traditional Chinese Medicines on cytochrome P450 system by Cocktail probe drugsLIU Gao-feng ZHEN Li-mian(Department of Pharmacy, the Second Affiliated Hospital of Harbin Medical University, Key Laboratory of University in Heilongjiang Province, Harbin 150086, China)[ABSTRACT] Cytochrome P450 are the most important enzymes for drug metabolism. Some Traditional Chinese Medicines (TCM) can reduce or induce one or some cytochrome P450, and therefore affect combined drug metabolism and result in drug interactions. Studies on metabolism of TCM could enhance effectiveness and safety of the drug use, and promote reasonable clinical use for drugs, meanwhile accelerate the modern study process of TCM. Cocktail probe drugs can reflect the process of drug metabolism wholly and actually. It can gain more information of several metabolic pathways in only one experiment. It can also reduce the interindividual variation to the lowest. It can save time and money. Studies development of the effects of TCM on cytochrome P450 System by Cocktail are introduced and summed up in this paper, in order to systematically understand and guide studies in this field.[KEY WORDS] cytochrome P450（CYP450）；Traditional Chinese Medicine；Cocktail probe drugs；metabolism；study development1 Cocktail探针药物法的应用特点细胞色素P450酶系(CYP450) 是人体内最重要的药物代谢酶，与药物代谢密切相关的同工酶有 CYP1A2,CYP2A6,CYP2C9,CYP2C19,CYP2D6,CYP2E1和CYP3A4[1]。

药物可显著影响药酶细胞色素P450的活性，使其诱导或抑制，并加速或减缓底物和其他药物代谢，这些构成了药物体内过程和药物相互作用的主要机制[2]探针药物法指经CYP450代谢的药物,以其代谢物和原型药的比例或速率衡量酶代谢能力变化的方法两种及两种以上经不同酶代谢的药物同时给予的方法称为“Cocktail”探针药物法,该方法可用于体内外测定CYP450 酶的活性[3]Cocktail”探针药物法可以采用探针药物的清除率或者是探针药物与代谢产物在尿中、血中和唾液中的浓度比值等指标来评价酶的活性，采用液相色谱或者液相色谱质谱串联法等进行测定[3]Cocktail 法的优点在于多个代谢途径的信息可在单个实验过程获得，并将个体间影响降至最低，此法省时、经济Cocktail”法摒弃了体外研究中实验模型与体内真实环境差异大、不能较好反应体内代谢全过程等的缺点，能全面、真实地反应药物代谢的过程[4]现就国内外Cocktail探针药物法在中药CYP450代谢研究中的应用进行综述,为该领域的研究工作提供参考2 用Cocktail法研究中药有效成分对CYP450的影响（见表1）2.1 倍半萜内脂类 Sara Asimus[5]等研究了有关青蒿素类药物对不同细胞色素P450酶的影响，用咖啡因，香豆素， 美芬妥英，美托洛尔，氯唑沙宗和咪唑安定6种探针药物分别考查青蒿素等药物对CYP1A2, CYP2A6，CYP2C19，CYP2D6，CYP2E1和CYP3A的活性的影响。

结果显示，二氢青蒿素、蒿甲醚对CYP1A2有抑制作用，青蒿素第1天使CYP1A2活性下降，第5天使CYP1A2活性增加；上述几种青蒿素类药物对CYP2A6的活性均无影响；青蒿素、蒿甲醚使CYP2C19的活性增加；二氢青蒿素对CYP2D6有抑制作用，青蒿素第1天使CYP2D6活性下降，第5天使CYP2D6活性增加；青蒿素对CYP2E1有抑制作用；上述几种青蒿素类药物均对CYP3A有诱导作用2.2 生物碱类Yong-Mei Yao[6]等利用Cocktail法对青藤碱的代谢进行了研究用6个探针药物（咖啡因CYP1A2、咪达唑仑CYP3A4、氯唑沙宗CYP2E1、S-美芬妥英CYP2C19、美托洛尔CYP2D6、甲苯磺丁脲CYP2C9）进行人体外研究,用5个探针药物（咖啡因CYP1A2、咪达唑仑CYP3A4、氯唑沙宗CYP2E1、S-美芬妥英CYP2C19、美托洛尔CYP2D6）进行人体内研究，发现青藤碱使CYP2C19的活性降低，对其它CYP450酶无显著影响2.3 黄酮类H-H.Sherry Chow [7]等用Cocktail法考查了绿茶儿茶素对CYP450的影响，健康志愿者经过四周的清洗期后，给予4个探针药物—咖啡因CYP1A2、右美沙芬CYP2D6、氯沙坦CYP2C9和丁螺环酮CYP3A4，再进行四周绿茶儿茶素的干预试验，结果发现绿茶儿茶素的干预并没有改变CYP1A2， CYP12D6， CYP12C9的活性，却使CYP3A4活性有稍微的降低。

2.4 皂苷类刘昌孝院士[4]等使用4种探针药物—氨苯矾、咖啡因、氯哇沙宗和奥美拉唑，评价人参皂苷Re对大鼠肝细胞色素氧化酶P450亚型CYP3A4、CYP1A2、CYP2E1、CYP2C19的诱导或抑制作用分两组进行:(l)大鼠尾静脉同时注射探针药物氨苯砜（CYP3A4）、咖啡因（CYP1A2）2)大鼠尾静脉同时注射探针药物氯唑沙宗（CYP2E1）、奥美拉唑（CYP2C19）结果表明人参皂苷Re对大鼠肝细胞色素氧化酶P450亚型CYP1A2、CYP3A4有诱导作用，对CYP2E1、CYP2C19无影响表1 Cocktail法研究中药有效成分对CYP450的影响中药有效成分 Cocktail法中CYP探针药物 对CYP各亚型的影响倍半萜内酯类青蒿素 二氢青蒿素 蒿甲醚 青蒿琥酯生物碱类青藤碱黄酮类化合物 绿茶儿茶素皂苷类 人参皂苷Re1A2 2A6 2C19 2D6 2E1 3A 咖啡因 香豆素 美芬妥英 美托洛尔 氯唑沙宗 咪唑安定 1A2 2C9 2C19 2D6 2E1 3A4 (体外) 咖啡因 甲苯磺丁脲 S-美芬妥英 美托洛尔 氯唑沙宗 咪达唑仑 1A2 2C19 2D6 2E1 3A4 (体内) 咖啡因 S-美芬妥英 美托洛尔 氯唑沙宗 咪达唑仑 1A2 2C9 2D6 3A4 咖啡因 氯沙坦 右美沙芬 丁螺环酮（1） 1A2 3A4 咖啡因 氨苯砜 （2） 2C19 2E1 奥美拉唑 氯唑沙宗 1A2 2A6 2C19 2D6 2E1 3A+ 0 + + - + - 0 0 - 0 + - 0 + 0 0 + 0 0 0 0 0 + 1A2 2C9 2C19 2D6 2E1 3A4 (体外) 0 0 - 0 0 0 1A2 2C19 2D6 2E1 3A4 (体内) 0 - 0 0 01A2 2C9 2D6 3A4 0 0 0 - （1）1A2 3A4 + + （2）2C19 2E1 0 0 。