果实品质测定.doc

柑橘果实糖、酸、VC含量的测定措施熊庆娥(四川农业大学)Elevｅｎ手打第一部 分测定程序及计算公式建议先通读这些措施几遍,借好仪器,想好人员分派后,再到实验室一、 样品制备样品果至少１０个擦净果皮后，用水果刀在每个果对称位置切取两块去皮后，用纱布包裹好果肉,挤压果汁于干燥烧杯中，总量不低于100ml样品液混合搅拌均匀后，可供测定可溶性固性物（ＴSS)、糖、酸、Vc二、 总酸含量的测定1． 用移液管将5ｍl果汁转入10０ml三角瓶,加酚酞1—2滴,用0.1N NaOH(以标定浓度为准）滴至溶液浮现粉红色不消失至记录滴定所消耗NaOH量反复3次2． 总酸含量(g/10０ml）=V:NaOH滴定用量 　 　　 N:NａOＨ浓度(标定为准）B:被滴定样品用量(5mｌ） 　 0.0６4：柠檬酸折算系数Eｌｅveｎ补充足析:② N表达mol／L②　０.064的来历:　折算系数即1ml氢氧化钠溶液摩尔浓度柠檬酸的质量NaＯH与柠檬酸的反映中，NaOＨ与柠檬酸的比例是1：3柠檬酸的分子量为192．14假设氢氧化钠浓度为A 　moｌ／L,即Ａ　　moｌ/ml1mｌ氢氧化钠溶液与柠檬酸反映，则柠檬酸用量为A mｏl。

柠檬酸质量为A192.14=0.0６４05Ａ三、Vc含量的测定１．取果汁5ml,用1%草酸稀释，定容至50ml即稀释10倍用移液管吸取稀释液5ml至5０ｍl三角瓶,通过半微量滴定管滴入２,6Ｄ至溶液呈粉红色且30秒不退色记录所耗２,6D用量反复三次２. Ｖc含量(ｍg/1００ｍｌ)= V: 2,6-Ｄ滴定用量 　 　　 　 A：每毫升2,6-D相称的Ｖc量(ｍg)B:滴定所用样品量(５ml)　Ｃ: 样品稀释倍数（1０)Eleｖｅn分析补充:抗坏血酸在溶液中易氧化，在整个测定中，操作应迅速滴定开始时，染料迅速加入，直至红色不立即消失，而后逐滴加入 ,并不断摇动锥形瓶直至终点，整个滴定期间不适宜超过2.分钟所有试剂配制 ，都需用重蒸馏三、 糖含量的测定1. 还原糖的测定用移液管吸取果汁10ml,转入1０0ml容量瓶，加水稀释定容到刻度，装入酸式滴定管用移液管分别吸取斐林液A、B各５ml于200ｍｌ三角瓶,摇匀后，加蒸馏水约30mｌ,置电炉上煮至沸腾继续保持沸腾，并用样品液滴定至蓝色大部分减退,加次甲基蓝2滴,继续滴定至溶液刚好转砖红色止记录样品滴定值（ｍl),反复三次2. 转化糖的滴定用移液管吸取果汁10ml，转入100ml容量瓶,加６N HCl 5mｌ，置沸腾水浴上水解１5分钟。

溶液冷却后，用NａOH中和酸(先用6N　NaOＨ　5ｍl，后滴加0.5 N ＮａOH),以酚酞２滴批示加NａOH至溶液显红色即是终点,此为转化糖测定液将转化糖液装入酸式滴定管，用以滴定菲林液,措施同还原糖注: 无色的还原型亚甲基蓝极易被空气中的氧所氧化，应调节电炉温度使瓶内溶液始终保持沸腾状态,液面覆盖水蒸气不与空气接触 整个滴定过程锥形瓶不能离开电炉随意摇动.3. 糖含量的计算公式还原糖含量(ｇ/100ml)=　10００转化糖含量(ｇ/１00ml）＝ 1０00蔗糖含量（g/１0０ml)=(转化糖—还原糖）×０.95总糖含量(ｇ／10０ｍｌ）=还原糖+蔗糖D :10mｌ（5＋5)斐林液相称的葡萄糖含量(g),标定的为准还原糖液滴定值（ml)转化糖液滴定值(ml)Ｅleｖen补充足析：本来式子为“还原糖含量(g/ｍl）＝ 10０0”,Ｅlｅｖeｎ觉得应当是有100的式子表达每毫升果汁相称的葡萄糖的量10０0可分解为10100,１０是稀释倍数，１00就是100ml如果原式单位不加100,下面的蔗糖含量算法的100也不好解释还原糖：可以还原斐林试剂或托伦斯(B．Tollenｓ)试剂的糖称为还原糖,所有的单糖(除二羟丙酮）,不管醛糖、酮糖都是还原糖。

大部分双糖也是还原糖，蔗糖则例外转化糖:用稀酸或酶对蔗糖作用后所得含等量的葡萄糖和果糖的混合物蔗糖具右旋光性，而反映生成的混合物则具有左旋光性，旋光度由右旋变为左旋的水解过程称为转化故此类糖称转化糖式子分析：蔗糖含量（g/100ml)＝(转化糖—还原糖)×0.95蔗糖水解后生成葡萄糖和果糖，都能与斐林反映，相对分子质量也都是１80转化糖—还原糖）　=（蔗糖水解的葡萄糖　＋　果糖 +　未酸解时的还原糖 - 未酸解时的还原糖）就等于蔗糖的分子量加一种水,也就是36０,蔗糖分子量是342,因此乘以0.95补充阐明：以上补充参照，还原糖与转化糖参照百度百科0.95与０.０64属于本人推敲成果其他补充大都采用国标以及国标中特别提示的注意事项详情参见GＢ82１0—8７《中华人民共和国国标—出口柑桔鲜果检查措施》如下药物配制也是如此第二部 试剂配制与标定一、 滴定酸用试剂1. ０．1N ＮaOH　　 　 ２g NaOＨ溶于500ml蒸馏水2. 1％酚酞 　0.5g酚酞溶于50mｌ　　80%的乙醇3. 1%邻苯二钾酸氢钾　 　　称取经１０0—125 ℃烘干的邻苯二钾酸氢钾1ｇ左右(精确到0.０001g)加蒸馏水溶解。

定容至１00mｌ,用以标定ＮａOH4. ＮａＯＨ的标定,精确吸取邻苯二钾酸氢钾１0mｌ至三角瓶中,加酚酞1—2滴,用NaOH滴至粉色浮现止记录ＮａＯH消耗量(mｌ),反复三次NaOH浓度（N）=　W　：　邻苯二钾酸氢钾的质量（g） :用于标定邻苯二钾酸氢钾量（ml） ：记录NaOH消耗量(ml)２04.2：邻苯二钾酸氢钾的当量Eleven补充足析:原式应当＝，左边有字母一项应当不难理解，=NaOH摩尔质量,除以１０0就是摩尔浓度,乘以1０00是NaOＨ的那个单位(N）即是mol/L的意思GB指出应精确称取经1２0℃烘2ｈ以上的基准试剂邻苯二甲酸氢钾(精确至0.OO Oｌg）二、 滴定Vｃ用试剂1. 1%草酸 5ｇ草酸溶于500ｍl蒸馏水2. 2,6－D 称取52ｍg ＮaHC,溶于５0ml蒸馏水，煮沸再称取2，6－D 5０mg，加入沸腾的NａHＣ液，溶解后冷却,转入2５0mｌ容量瓶，加水定容3. Ｖc(用于标定2,6-D)　 称取烘干Vc(抗坏血酸)20mｇ（精确至0.1mg)，溶于1%的草酸,定容至1０0ｍl用移液管吸取5ml转入50mｌ容量瓶,加草酸定容（稀释了１0倍）现配现用。

精确吸取Vc稀释液5ml转入100ml容量瓶，用2，６-D滴至粉红色，30秒不消退止记录所耗2,6-Ｄ量(ml)，反复三次计算１ml 2，6-D相称的Ｖc毫克数(A)A = Ｗ：Vc重量（mg） 　 　 :滴定取Ｖc稀释液量(5ｍl）D：2，６-Ｄ滴定值 　 　　　　:Vc液总体积（ml),含稀释倍数三、 测定糖用试剂1. 斐林A　 硫酸铜(CｕS·５Ｏ)34.63９ｇ溶于蒸馏水，定容至5０0mｌ2. 斐林Ｂ　 酒石酸钾钠１７３g、 ＮaＯＨ 　50g溶于蒸馏水，定容至 5０0ml3. 6N HCl 取浓HCl 25０mｌ加入250ml蒸馏水中4. 6N NａＯＨ　　12０g　NaOH溶于500ｍl蒸馏水Ｅleven补充：第4项如果配的不是很精确也不用紧张,精确最佳但是5. 1% 亚甲基蓝 0.5g亚甲基蓝溶于５0ml蒸馏水6. 葡萄糖（标定用) 在分析天平上精确称取葡萄糖1g左右(精确至0.0００1g）,加水溶解定容于200ml容量瓶，即约5mg／ml葡萄糖7. 斐林液的标定 用上述葡萄糖液滴定１0ml斐林液,滴定措施同还原糖测定记录葡萄糖滴定值(ml），反复三次。

计算10mｌ斐林液相称的葡萄糖克数（D）Ｄ　＝ W　： 葡萄糖的重量（ｇ）葡萄糖液总体积(ml)葡萄糖滴定值(ｍl)第三部分 有关实验一、 有关仪器仪器方面不同样品量用的仪器稍有差别,记得自己先阅读本措施,然后根据自己状况借取仪器，电炉最佳能拿两个，六教比较不好借的就是电炉和称一般是找汤福义教师借药物如果导师没有可以到瑞进特买，她们送货上门(不加钱）,川农一般都是在那买(除了在学校开了账户的教师外）,蒸馏水用的是新区开水房特制的蒸馏水，她们也送货上门，1０元左右送货上门加2元二、 有关配药量配药要根据自己样品数量自己调节,因此去实验室前有必要将措施牢记于心,配药前最佳再看一遍三、 注意事项① 某些玻璃仪器不能混用，要混用时要记得洗干净例如斐林A、B的移液管② 三角瓶在电炉上加热时要保证瓶底我明显水迹③ 变色的原则要统一,切忌随意变化负责该项目的实验人员④ 离开实验室记得将酸、碱式滴定管取下，平放⑤ 做完实验不应当立即倒掉药物及分食水果,待将数据整顿保证无明显问题后才可四、 经验提示我觉得实验的核心是人员以及实验器材的分派协调要物尽其用，人尽其才,实验才干得以顺利进行品质分析的实验最重要的不是测定的过程，而是后来的数据分析，做后你自然明白。

但是并不是说测定过程不重要,毕竟巧妇难为无米之炊五、 有关该实验措施 　该实验措施是Eleｖen获得了熊教师的手稿后进行加工与修改的这个实验Ｅlｅven做了多次、涉及测定樱桃、李子、猕猴桃、柑橘类也就是说该实验措施适合于较多水果，但是对于不同蔬菜、水果,措施可以略作改动 　 改动原则建议登陆下载国标,进行整合后根据自己实验状况进行修改欢迎对该实验措施提出建议及意见,也欢迎与Eleven进行探讨熊庆娥：1998年12月8日于三台　 　　　 　　 　199９　年　1月修改于雅安　　　 　 　　 Eleｖｅn(香橼)：３月30日夜补充于10舍517 。