犬狂犬病毒抗体检测试剂盒使用说明书.doc

犬狂犬病毒抗体检测试剂盒使用说明书原理：本试剂盒采用酶联免疫方法（ELISA）检测犬血清中的特异性抗狂犬病毒抗体，用于全职面以后抗体监测试剂组成：1.预包被板 48T/96T 8.终止液 1 支2.酶结合物原液 2 支 9.临界对照品 1 支3.酶结合物稀释液 2 支 10.阴性对照品 1 支4.洗涤液（PBST 干粉） 1/2 支 11.自封袋 1 个5.底物（3 号液） 1 支 12.使用说明书 1 份6.显色液（4 号液） 1 支 7.样本稀释液（5 号液） 1 支操作程序：1. 酶结合物工作液配制：取 1 支酶结合物原液全部加入到 1 支酶结合物稀释液中，充分混匀即可使用 2. 洗涤液配制：每袋 PBST 干粉用蒸馏水 500ml 溶解均匀，即为洗涤液3. 加样反应：每滴孔加样品稀释液 2 滴，加待检样品各 50ul每次试验需设阴性对照，临界对照各 2 孔，空白孔 1 孔， （阴性对照、临界对照已稀释，试验时可直接取 100ul 加入孔内，空白孔仅加 2 滴样品稀释液） 。

放置 37 摄氏度 20 分钟倾去孔内液体，将已配制好的洗涤液加满每孔并静置 30 秒，倾去，甩干，共洗涤 5 次，拍干4. 加酶反应：除空白对照孔外，其余每孔加已稀释的酶结合物 2 滴，置 37 摄氏度 20 分钟，然后如上洗涤5. 显色反应：加底物（3 号液）和显色剂（4 号液）各 1 滴，混匀，37 摄氏度下避光显色 10 分钟，加终止液（6 号液）1 滴，混匀，终止反应后判读结果结果判断：以空白对照调零，用酶标仪于 450nm（630nm 作参比波长）读取吸光度（A 值） A 值>=临界对照均值为阳性，说明待检样品的抗体滴度 >=0.5IU/ml；低于者说明待检样品的当提浓度<0.5IU/ml注意事项：1. 试剂盒于 2—8 摄氏度保存，有效期 6 个月每次使用前应先平衡至室温2. 未使用完的板条应密封保存，已稀释的酶结合物工作液应尽快使用3. 试剂盒中终止液具有腐蚀性，要小心使用4. 瓶盖每次使用后要拧紧，各瓶盖之间不能混用不同批号试剂盒的试剂组分不可混用5. 试验样品应为无染菌、无血脂、无溶血的血清任何样本都应视为传染源妥善处理6. 37 摄氏度孵育时，建议使用水浴箱如无条件，可在温箱中放置湿盒进行反应并同时用不干胶膜封盖板孔。

特别提示：在使用酶结合物工作液之前，应确保酶结合物原液已加入酶结合物稀释液中并混匀！请在工作液瓶签上注明配置时间。