葡萄糖检测试剂盒(GOD.doc

葡萄糖检测试剂盒(GOD-POD微板法)简介：葡萄糖(Glucose, Dextrose , Glu)又称玉米葡糖，简称葡糖，化学式C6H12O6，分子 量为180.16，是自然界分布最广、最重要的一种单糖，属于多羟基醛用酶学方法测定葡 萄糖是生化检测中的常用方法，最常用的有葡萄糖氧化酶法、己糖激酶法上述酶学法特 点是：1、灵敏度、准确度、精密度均高；2、使用温和的反应条件；3、操作简便；4、适 用于自动分析仪Leage ne葡萄糖检测试剂盒(GOD-POD微板法)又称葡萄糖氧化酶法或葡萄糖氧化酶- 过氧化物酶偶联法等，其检测原理是在葡萄糖氧化酶的催化下，葡萄糖被氧化成葡萄糖酸， 同时消耗溶液中的氧，产生过氧化氢，过氧化氢与氧化色原物质反应生成有色化合物，初 始反应中过氧化氢的生成量与葡萄糖浓度成正比，酶标仪进行比色测定本试剂盒专门用 于人或动物的血清、血浆、脑脊液细胞、组织等样本中的葡萄糖含量定量测定，但不宜直 接检测尿液中的葡萄糖含量，其中Glu标准(5mmol/L)=90mg/dl本试剂盒仅用于科研 领域，不宜用于临床诊断或其他用途组成：编号名称 一TC0711200TTC0711500TStorage试剂(A):酚试剂30ml75mlRT避光试剂(B): 酶试剂磷酸盐缓冲液(pH7.0) 牛氨基安替比林 葡萄糖氧化酶 过氧化物酶30ml75ml-20°C避光临用刖，按酚试剂：酶试剂混匀，即GOD-POD工作液，4弋保存。

试剂(C): Glu 标准(5mmol/L)1ml1 ml-20C试剂(D): ddH2O1ml1mlRT使用说明书1份自备朋：1、 生理盐水或PBS2、 96孔板或离心管、小试管3、 水浴锅或恒温箱4、 酶标仪或分光光度计5、 全自动或半自动生化分析仪 操作步骤(仅供参考):1、 样本处理：① 血清、血浆、脑脊液样本：从待测样本中分理出的血清或血浆不应有溶血，直接检测， 如超过线性范围（25mmol/L），用生理盐水稀释后检测② 细胞样本：a、 取适量的细胞（一般推荐＞106以上），离心，弃上清，留取沉淀b、 用PBS或生理盐水清洗，离心，弃上清，留取沉淀c、 加入PBS或生理盐水匀浆，冰浴条件下超声破碎细胞，间隔30s亦可手动匀浆，制备 好的匀浆液不可离心，待用亦可用Trit on X-10 0冰浴，制备好的裂解液不可离心，待用③ 组织样本：准确称取适量组织样本，按质量（g）:生理盐水或PBS（ml）=比例，加入生理 盐水或PBS，冰浴条件下手动或机械匀浆离心，取上清待用2、 普通分光光度计（2ml比色杯）Glu测定操作：① 按下表依次加入试剂：空白管标准管待测管ddH2O(pl)20Glu 标准(5mmol/L)(pl)20待测样本（川）20GOD-POD 工作液(ml)2.02.02.0② 充分混匀,水浴中孵育。

③ 分光光度计测定吸光度以空白管调零，读取标准管和各待测管的吸光度3、分光光度计（1ml比色杯）、半自动生化分析仪Glu测定操作：① 按下表依次加入试剂：空白管标准管待测管ddH2O(pl)10Glu 标准(5mmol/L)(pl)10待测样本（川）10GOD-POD 工作液(ml)1.01.01.0② 充分混匀,水浴中孵育③ 分光光度计测定吸光度以空白管调零，读取标准管和各待测管的吸光度4、酶标仪Glu测定操作：① 按下表依次加入试剂：空白孔标准孔待测孔ddH2O(pl)3Glu 标准(5mmol/L)(pl)3待测样本（pl）3GOD-POD 工作液(pl)300300300② 充分混匀,水浴中孵育③ 酶标仪测定505 nm波长处吸光度以空白管调零，读取标准管和各待测管的吸光度5、全自动生化分析仪Glu测定操作：① 按下表依次加入试剂：空白管标准管待测管ddHgOWl)3Glu 标准(5mmol/L)(pl)3待测样本（pl）3GOD-POD 工作液(pl)300300300② 充分混匀,水浴中孵育③ 全自动生化分析仪测定吸光度以空白管调零，读取标准管和各待测管的吸光度机器参数:主波长505 nm反应类型终点法反应方向升反应（+）计算公式：血清、血浆等液体样本（空白调零）：葡萄糖（mmol/L）二｛（待测管吸光度-空白吸光度）/（标准管吸光度-空白吸光度）"5mmol/L血清、血浆等液体样本（全自动生化分析仪）:葡萄糖（mmol/L） = （待测管吸光度/（标准管吸光度）x5mmol/L细胞、组织等样本（空白调零）:葡萄糖（mmol/L）=｛（待测管吸光度-空白吸光度）/（标准管吸光度-空白吸光度）｝x5mmol/L-待测样本浓度（mg/ml）细胞、组织等样本（全自动生化分析仪）:葡萄糖（mmol/L） = （待测管吸光度/（标准管吸光度）x5mmol/L 一待测样本浓度（mg/ml）健康成年人空腹葡萄糖：3.9~6.1mmol/L（70~110mg/dl）备注：Glu 标准(5mmol/L)=90mg/dl性能指标：外观无色至淡黄色澄清液体线性范围0~25mmol/L, r>0.990变异系数批内＜2〜5%,批间＜5%空白吸光值<0.2(1cm 光径)稳定性密闭，12个月注意事项：1、 上述低温试剂避免反复冻融，以免失效或效率下降。

2、 本法可直接用于检测脑脊液中的葡萄糖含量，但不能直接检测尿液中的葡萄糖含量，因为未经处理的尿液中含有还原性物质，影响过氧化物酶反应3、 待测样本如不能及时测定，应置于2〜8弋保存，3天内稳定4、 本法线性范围可达25mmol/L，如果样本葡萄糖浓度过高，结果可能呈假性降低应用生理盐水稀释后重测，结果乘以稀释倍数5、 配制好的GOD-POD工作液，4弋避光保存，一个月有效有效期：12个月有效相关：编号名称DC0032Masson三色染色液DM0007瑞氏-姬姆萨复合染色液NR0001DEPC 处理水(0.1%)PW0053Western抗体洗脱液(碱性)TC1243甘油三脂(TG)检测试剂盒(单试剂GPO-PAP比色法)。