免疫组化常用标记物.doc

免疫组化常用标记物免疫组化常用标记物 一、常用标志物  1． CD１5(ＬｅuM1)---(阳性部位:细胞膜）是一种由半乳糖、岩藻糖和N-乙酰葡萄糖构成的碳水化合物抗原,又称半抗原χ，是粒/单核细胞有关抗原免疫组织化学体现:成熟粒细胞、激活的淋巴细胞（重要是T淋巴细胞)、R-S细胞、大多数腺癌等2. 癌胚抗原(ｃarcｉnｏemｂryoｎｉc antigeｎ，ＣEA)（CD6６e）---（阳性部位:细胞膜/浆)癌胚抗原是体现于胎儿上皮细胞的一种糖蛋白,分子量为180kＤａ存于某些恶性肿瘤组织特别是内胚层来源发肿瘤中，大多数胃肠道(涉及胰腺）和肺腺癌均有体现，少量成人上皮细胞和良性肿瘤亦可体现CEA重要用于标记上皮性肿瘤，特别是腺上皮来源的腺癌 3．嗜铬素A(chromoｇrａnin A,CｇA）-－-（阳性部位：细胞浆）嗜铬素是位于神经分泌颗粒内的酸性糖蛋白家族,是一组可溶性酸性蛋白,分子量为76～1２0　kDａ,分布广泛含量最丰富的是嗜铬素A,另两个是嗜铬素B和嗜铬素C几乎所有的神经内分泌肿瘤中均可检测到嗜铬素嗜铬素A不仅存在于神经内分泌细胞的分泌颗粒中，也广泛分布于所有具有颗粒的内分泌细胞和神经内分泌细胞来源的肿瘤细胞。

此抗体可以辨认嗜铬素A抗原羧基末端的片段,而不与氨基末端的片段反映，重要用于标记神经内分泌细胞及其来源的肿瘤对小细胞癌进行抗原修复可提高检测的敏感性４.细胞角蛋白（cytoｋeratin ｐａn，广谱 CＫ)－－- AE1／ AE3（阳性部位：细胞浆)此抗体可以辨认绝大部分酸性细胞角蛋白（Ⅰ型/低分子量）和碱性细胞角蛋白（Ⅱ型／高分子量）用于标记上皮及上皮来源的肿瘤，特别是对鉴别和判断转移性肿瘤与否为上皮源性具有一定的意义 5．细胞角蛋白５／６(ｃｙtｏkｅraｔin 5/6，CK5／6）---（阳性部位：细胞浆)在正常组织中,鳞状上皮和导管上皮的基底细胞以及部分的鳞状上皮生发层细胞、肌上皮细胞和间皮细胞阳性，腺上皮细胞阴性因此，可用于鳞癌和腺癌、间皮瘤和腺癌的鉴别诊断支气管上皮基底细胞、间皮;鳞癌、大细胞癌、移行细胞癌、间皮瘤阳性大多数腺癌为阴性6. 细胞角蛋白7（cytokｅratiｎ 7，ＣＫ7）---(阳性部位：细胞浆)CK7是分子量为54　kDa的一种碱性细胞角蛋白，存在于大多数正常组织的腺上皮和移行上皮细胞中,一般非上皮来源的细胞无体现在卵巢、乳腺和肺的腺癌呈阳性反映,而胃肠道的腺癌阴性。

７． 细胞角蛋白２0（cytoｋeraｔin ２0,CK２0)-－-（阳性部位:细胞浆）CＫ2０(46kＤa）存在于正常的胃肠道上皮、移行上皮、Merｋel细胞及其来源的肿瘤，而乳腺癌、肺癌和神经内分泌肿瘤不体现 CK7pｏsｉｔive CK7 negative CＫ20 positive unｉnformaｔｉｖｅ colｏrｅcｔum ＣK２0 nｅｇａｔｉvｅ　luｎguniｎformative 8. 细胞角蛋白（高分子量）(cytokeraｔin,ＨMＷ)－--（阳性部位：细胞浆)高分子量细胞角蛋白抗体（34βE1２）可以辨认68kDa、58kDa、56.5kDa和50kＤa的细胞角蛋白 9.上皮膜抗原(epｉthelial ｍemｂraｎe　antigｅｎ,EMA）（MＵＣ1)---(阳性部位:细胞浆）上皮膜抗原是一种高分子量（4０0　ｋDa)跨膜糖蛋白,广泛分布于多种上皮细胞及其来源的肿瘤癌细胞过体现ＭＵC1与肿瘤侵袭有关,故意义的免疫反映性为膜阳性，如为纯正的胞浆着色则为假阳性此抗体可以用于标记上皮及上皮源性肿瘤,EＭA阳性体现的肿瘤涉及大多数的癌、间皮瘤、滑膜肉瘤和上皮样肉瘤等,淋巴瘤、黑色素瘤和软组织肿瘤阴性体现。

10.ＨＢＭE１---（阳性部位:细胞膜)该抗体与间皮细胞表面的抗原反映，染色方式呈现一种特殊的“厚膜”方式,在鉴别间皮瘤与腺癌时有一定的参照价值:间皮瘤为厚膜型，腺癌为薄膜型或胞浆着色11．突触素(sｙｎaptoｐhysｉｎ，Syn)---(阳性部位:细胞浆)突触素是分子量为38kDa的糖蛋白,重要存在于神经元突触前囊泡膜，是神经性和上皮性神经内分泌肿瘤的特异性标志之一，用于标记神经内分泌肿瘤12.甲状腺转录因子１（thyroid tranｓｃｒiptioｎ factｏr-1,TTF-１)-－-（阳性部位：细胞核)TTF-1体现于甲状腺腺上皮和肺的上皮细胞中大多数肺的小细胞癌、腺癌、少部分大细胞癌、大多数非典型神经内分泌肿瘤免疫组化成果显示TTF－1阳性,而肺鳞癌及绝大多数典型类癌TＴF－1阴性1３.波形蛋白(Vimｅｎtiｎ,Vｉｍ)--－(阳性部位:细胞浆)波形蛋白分子量为5７　kD，是原始的中间丝,分布极广，所有间（充）质细胞均有体现,此抗体的免疫原为猪的晶体,但可与人、大鼠和鸡的波形蛋白反映波形蛋白是正常间叶细胞及其来源的肿瘤的特异性标志,在许多上皮细胞及其肿瘤中可与细胞角蛋白共体现。

诊断用途：是一种有用的“对照标记”，即:如果波形蛋白未能较易地在非肿瘤性内皮细胞、纤维母细胞和其她间叶成分中检测到,则总的说来组织的免疫反映性未能得到合适的保存在间皮瘤与腺癌的鉴别诊断中，波形蛋白在间皮瘤的上皮细胞中更常用与细胞角蛋白共体现14．Ｃam 5.2---分子量45　kD和52　ｋD的人角蛋白抗原决定簇与正常分泌上皮而不是复层鳞状上皮反映15．MNF-１16---该抗体辨认许多细胞角蛋白共同的抗原决定簇，是上皮性肿瘤的一线标记免疫组织化学体现:正常组织有复层鳞状上皮和单纯腺上皮、平滑肌、淋巴结树突状细胞、浆细胞等；肿瘤重要有鳞癌、小细胞癌、肉瘤样癌/梭形细胞癌、腺癌、间皮瘤（纤维状细胞）、滑膜肉瘤、血管肿瘤、平滑肌肿瘤和浆细胞瘤等16.Dｅｓmiｎ---结蛋白分子量为5３　ｋD的中间丝(骨骼蛋白），有三种单克隆抗体（D33, DEＲ－１1和DEB-5),与其她中间丝无交叉反映在平滑肌和横纹肌可检测到结蛋白，在肌纤维母细胞中亦有少量结蛋白在平滑肌组织中结蛋白含量要多于血管平滑肌诊断用途：辨认平滑肌和横纹肌肿瘤１７. MＯC-３1--－为辨认上皮细胞中一种功能未知的3８　kＤa 糖蛋白的单克隆抗体。

大多数腺癌为阳性，而间皮瘤一般为阴性18.表面活性蛋白(Ｓurｆaｃｔａnt proｔeiｎs,SP)肺表面活性物质具有许多蛋白,涉及10　kＤ的Cｌara细胞蛋白和表面活性蛋白Ａ、B、C、D 作为细支气管肺泡癌的标志１9.α１-AT---细支气管肺泡癌Claｒa细胞型呈阳性体现二、恶性上皮性肿瘤1、鳞癌---发生于支气管上皮,有角化和／或细胞间桥的恶性上皮性肿瘤有四个亚型:①乳头状;②透明细胞型;③小细胞型;④基底细胞样绝大多数体现高分子角蛋白(34βE１2)，CK5/6和CEＡ,许多鳞癌体现低分子角蛋白(35βH1１），较少体现ＴTＦ-１或CＫ７ 2、小细胞癌-－-由圆形、椭圆形或梭形小细胞构成的恶性上皮性肿瘤胞质很少，边界不清;核内可见细颗粒状染色质，核仁不明显或缺如；细胞核变形很明显；常有大量坏死和许多核分裂绝大多数小细胞癌ＣD56、Cg、SＹ阳性,神经内分泌标志体现率≥９0%;小细胞癌常用TTF-1和CK阳性鉴别诊断:① 淋巴瘤－--小细胞癌显示为神经内分泌标志、TTF－1和CＫ阳性,LＣA阴性 ②PＮET---小细胞癌与PNET均可体现MIＣ－2(CD99）,但小细胞癌TTF-1和CK阳性,而PNＥT则为阴性。

　③ Mｅrｋｅl细胞瘤---本瘤CK２0阳性，ＣK7、TＴＦ-1阴性可与小细胞癌鉴别3、腺癌-－－具有腺样分化和产生黏液的恶性上皮性肿瘤呈腺泡样、乳头状、细支气管肺泡细胞样或实性伴有黏液的生长方式,可混合存在有下列亚型:①腺癌，混合亚型;　② 腺泡样腺癌；　③ 乳头状腺癌； ④ 细支气管肺泡细胞癌 涉及非粘液型、粘液型、混合性非粘液性与粘液性或中间型非粘液型细支气管肺泡癌又涉及Ⅱ型肺泡细胞型和Claｒa细胞型,前者SP、TＴF-1等阳性，后者Ｃlａra蛋白及α1-ＡT阳性,有助于与其他腺癌鉴别诊断 ⑤实性腺癌伴有粘液产生⑥胎儿型腺癌　⑦黏液性（“胶样”)腺癌 ⑧黏液性囊腺癌　⑨印戒细胞腺癌 ⑩透明细胞腺癌 腺癌的免疫组化特性与其亚型和分化限度有关,典型的上皮性标志为：AE1／ＡE3，CAM5.2，EＭA和CＥＡCＫ7阳性高于CK2０，TTF-1阳性率较高,特别是在分化好的腺癌（在ＴTＦ-1阳性病例中,甲状腺球蛋白阴性有助于排除甲状腺癌）表面活性蛋白（Sｕrfacｔaｎt aｐoprotｅiｎ,SP）较TTF-1为低，但要注意的是转移性肿瘤细胞也也许吸附某些SP在黏液性肿瘤中，特别是黏液型BAC也许有例外,即TTF-１阴性,而CK７和CK20往往阳性。

 鉴别诊断：① 转移性腺癌---有原发灶病史,在肺内常为多种病灶如为单个病灶,则鉴别较为困难肺腺癌有组织学亚型的异质性，特别是存在ＢＡＣ成分时可明确诊断;60％体现表面活性蛋白（SP-A，ｐro－SP-Ｂ，ｐｒo-SP－Ｃ)，70％体现TＴF-1；CK7（+)/ＣK20(-），仅黏液性ＢAC为ＴTF-１(-)/ CK20(+）转移性腺癌多为均质性,ＴＴF-1阴性(除外甲状腺癌:黏液染色阴性,甲状腺球蛋白阳性）肾细胞癌:AE１/AＥ3、CK7弱阳性,Vｉm强阳性结肠腺癌：CK7（－）/CＫ２0（+)，CDX-2阳性乳腺癌:EＲ(+）卵巢癌:雌二醇受体、ＣA125、Viｍ、钙粘蛋白、克制素（+）;CＥA(-)前列腺癌：PSA(+） ② 上皮型恶性间皮瘤－--根据临床、巨检、镜检、免疫组化和电镜特点进行鉴别免疫组化方面重要涉及腺癌特异标志ＴＴＦ-1、一般标志ＣEA、CD15或MOC31;间皮瘤标志caｌreｔiniｎ(钙视网膜蛋白）和CＫ5／６ ③ 不典型腺瘤样增生-－-发生于肺周边部的局灶性病变，一般＜5ｍm,体现为衬覆肺泡或呼吸性细支气管的不典型细胞呈轻—中度局限性增生，无间质炎症和纤维化。

不典型腺瘤样增生体现SPA,CＥＡ,ＭMPs，Ｅ-钙粘蛋白,β-cａｔenin,CD４４v６和TTＦ-1一般觉得,不典型腺瘤样增生是细支气管肺泡细胞癌的癌前病变，TＰ５3阳性是细支气管肺泡细胞癌的初期标志之一④非粘液型细支气管肺泡细胞癌-－-一般不小于5mm，明显的细胞分层,细胞密集,柱状细胞排列拥挤,微乳头丛生;细胞核重叠,染色质较粗,可见核仁4、大细胞癌--－未分化的非小细胞肺癌,缺少小细胞癌、腺样或鳞状分化的细胞和构造特性大细胞癌的分化表型并无特性性，大多体现为腺分化，也可为鳞分化有少数大细胞癌具有腺、鳞、神经内分泌三相分化表型免疫组化:AE1/AE３几乎所有阳性，ＥＭA70%阳性，35&538;H11近70%阳性部分病例亦可体现CＥA、CＫ7、及Ｖim其亚型有①大细胞神经内分泌癌---常体现神经内分泌标志CgＡ、Sｙn和NCAM（ＣD56），50%可体现TＴF-1② 基底细胞癌-－-TTF-1阴性,神经内分泌标志一般为阴性，约1０%的病例可体现一种神经内分泌标志③ 淋巴上皮瘤样癌④透明细胞癌⑤ 大细胞癌伴横纹肌样表型５、腺鳞癌-－-同步具有鳞癌和腺癌成分，各自不少于肿瘤的10%。

体现的CＫ分子量范畴很广,ＡE1/AE3、ＣAＭ5.2、KＬ１和ＣK7阳性,但一般ＣＫ20阴性腺鳞癌可体现EMA，ＴTF-1阳性多见于腺癌部分 6、肉瘤样癌-－-是一组分化差的NSＣLC，伴有肉瘤成分或肉瘤样(梭形和／或巨细胞)分化目前已认知五个亚型 ① 多形性癌②　梭形细胞癌③ 巨细胞癌④ 癌肉瘤⑤ 肺母细胞瘤多形性、梭形和/或巨细胞癌---常同步体现CK、Vｉm、CＥA和平滑肌标志,巨细胞癌可有TＴF-１阳性癌肉瘤－－－上皮成分ＣK阳性,。