蔬菜水果中维c含量的测定.doc

蔬菜水果中维 c 含量的测定摘 要：利用维生素Ｃ对紫外产生吸收和对碱不稳定的特性，用紫外分光光度法测定５种常见果蔬中维生素Ｃ的含量最大吸收波长为２４３．４ｎｍ，标准曲线方程为Ａ＝０．０５２８ｃ－０．０５６８，相关系数为Ｒ２＝０．９９９６５种果蔬中维生素Ｃ含量［ｍｇ·（１００ｇ）－１］分别为：黄瓜２０．５、苹果１４．９、西红柿１８．４关键词：紫外分光光度法；维生素Ｃ；果蔬维生素Ｃ又称抗坏血酸，是一种水溶性维生素能预防牙龈出血及萎缩、提高人体免疫力，对坏血病、动脉硬化、贫血等有一定疗效实验１．１ 材料、试剂与仪器:青椒、橙子、黄瓜、苹果、西红柿，市售抗坏血酸、ＨＣｌ、ＮａＯＨ均为分析纯，实验用水为二次蒸馏水ＵＶ１１０２型紫外可见分光光度计，ＴＢ－２１４型电子天平１．２ 方法 １．２．１ 标准溶液的配制 准确称取０．０５０ｇ抗坏血酸，加１０ｍＬ １０％ＨＣｌ溶解，用蒸馏水定容至５００ｍＬ，混匀，即得１００μｇ· ｍＬ－１维生素Ｃ标准溶液１．２．２ 吸收曲线的绘制 移取１０ｍＬ维生素Ｃ标准溶液于５０ｍＬ比色管中，稀释至刻度，混匀用１ｃｍ石英比色皿，以蒸馏水为参比，在２００～３００ｎｍ波长范围内用紫外可见分光光度计自动扫描。

绘制吸光度与波长关系曲线，以最大吸收波长作为测定波长 １．２．３ 标准曲线的绘制 分别准确移取１００μｇ·ｍＬ－１维生素Ｃ标准溶液０．５ｍＬ、１．０ｍＬ、１．５ｍＬ、２．０ｍＬ、２．５ｍＬ、３．０ｍＬ、 ４．０ｍＬ、５．０ｍＬ于５０ｍＬ容量瓶中，定容至刻度以水为参比，在最大吸收波长处测定吸光度，以维生素Ｃ浓度为横坐标、吸光度为纵坐标，绘制标准曲线１．２．４ 果蔬样品的处理 将青椒、西红柿、黄瓜洗净晾干，橙子和苹果取肉，分别称取１０．００ｇ于研钵中，各加入１％ＨＣｌ １０ｍＬ，匀浆，转移到５０ｍＬ容量瓶中，稀释至刻度，混匀移至离心管中离心１０ｍｉｎ，取上清液即为待测果蔬提取液 １．２．５ 果蔬样品吸光度的测定１．２．５．１ 待测果蔬提取液. 取１．０ｍＬ待测果蔬提取液，放入盛有２ｍＬ １０％ＨＣｌ的５０ｍＬ容量瓶中，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀以蒸馏水为空白，在最大吸收波长处测定其吸光度１．２．５．２ 碱处理果蔬提取液 依次吸取１．０ｍＬ待测果蔬提取液、１０ｍＬ蒸馏水和４ｍＬ １ｍｏｌ·Ｌ－１ ＮａＯＨ溶液放入５０ｍＬ容量瓶中，摇匀；静置２０ｍｉｎ后加入４ｍＬ １０％ＨＣｌ，混匀，并定容至刻度。

以蒸馏水为空白，在最大吸收波长处测定其吸光度１．２．６ 维生素Ｃ含量的计算测得果蔬样品的吸光度后，依据标准曲线方程，即可计算出果蔬中维生素Ｃ的含量［ｍｇ·（１００ｇ）－１］ 维生素Ｃ含量＝ｃ×Ｖ总×Ｖ待测总×１００Ｖ１×Ｗ总×１０００式中：ｃ为依标准曲线方程计算得到的维生素Ｃ浓度，μｇ·ｍＬ－１；Ｖ１为测吸光度时吸取样品溶液的体积，ｍＬ；Ｖ总为吸取样品定容总体积，ｍＬ；Ｖ待测总为待测样品总体积，ｍＬ；Ｗ总为果蔬质量，ｇ；１００为１００ｇ果蔬２ 结果与讨论２．１ 吸收曲线（图１）图１维生素Ｃ溶液的吸收曲线Ｆｉｇ．１ Ａｂｓｏｒｂｉｎｇ ｃｕｒｖｅ ｏｆ ｖｉｔａｍｉｎ Ｃ ｓｏｌｕｔｉｏｎ由图１可知，在波长２００～３００ｎｍ范围内，维生素Ｃ有一最大吸收峰，最大吸收波长为２４３．４ｎｍ故本实验选择２４３．４ｎｍ作为测定波长２．２ 标准曲线（ 图２）由图２可知，在１．０～１２．０μｇ ·ｍＬ－１浓度范围内，维生素Ｃ浓度与吸光度符合朗伯－比尔定律，呈良好的线性关系所得线性回归方程为Ａ＝０．０５２８ｃ－０．０５６８ ，相关系数Ｒ２ ＝０．９９９６２．３ 静置时间的选择 由于维生素Ｃ在碱性介质中不稳定、易分解，从而影响吸光度的测定。

实验发现， 果蔬提取液加碱后的静置时间与提取量有关以青椒为例（最大取样量１．０ｍＬ） ，加入碱液后，考察室温下静置时间与吸光度之间的关系，结果见图３由图３可知，在室温静置１５～４０ｍｉｎ，吸光度最小且稳定故选择静置时间为２０ｍｉｎ２．４ 维生素Ｃ的含量测定（图４由图４可知，果蔬中维生素Ｃ的含量［ｍｇ·（１００ｇ）－１］分别为：青椒１１７．１、橙子６９．３、黄瓜２０．５、苹果１４．９、西红柿１８．４５种果蔬中维生素Ｃ的含量大小依次为青椒＞橙子＞黄瓜＞西红柿＞苹果３ 结论利用维生素Ｃ在紫外光区有明显的吸收和对碱不稳定的特性，建立了果蔬中维生素Ｃ含量的测定方法在１．０～１２．０μｇ·ｍＬ－１浓度范围内，维生素Ｃ浓度与紫外吸光度呈良好的线性关系，回归方程为：Ａ＝０．０５２８ｃ－０．０５６８，相关系数Ｒ２＝０．９９９６５种常见果蔬中维生素Ｃ的含量［ｍｇ·（１００ｇ）－１］分别为：青椒１１７．１、橙子６９．３、黄瓜２０．５、苹果１４．９、西红柿１８．４该方法简单易行、灵敏度高、结果准确，可快速测定果蔬中维生素Ｃ的含量，结果令人满意。