济脉通和硝苯地平对清醒肾性高血压大鼠血压的影响.doc

济脉通和硝苯地平对清醒肾性高血压大鼠血压的影响 作者：吕良忠 方晴霞 余晟 吕圭源 陈素红 吴晓冬【摘要】 观察济脉通与硝苯地平合用对RHR血压及波动性（BPV）的影响［方法］建立两肾一夹型肾性高血压大鼠模型，设立空白组、模型组、济脉通组（450mg/kg）、济脉通与硝苯地平联合用药组（300mg/kg＋0.5mg/kg）给药后，应用清醒自由活动大鼠血压的连续监测装置，观察各给药组对RHR的血压及BPV的影响［结果］给药后，与模型组比较，联合用药组可降低RHR的24h收缩压（SBP）、舒张压（DBP）和平均动脉压（MAP）；联合用药组还可降低RHR的24h短期收缩压波动性（SBPV）、短期舒张压波动性（DBPV）和短期平均动脉压波动性（MAPV）；而济脉通组仅对24h短期MAPV有影响［结论］济脉通与硝苯地平联合用药具有降低肾性高血压大鼠24h血压及24h血压波动性的作用，与单独给药相比，具有显著优势 【关键词】 济脉通；肾性高血压；硝苯地平；血压波动性；联合用药；大鼠 Fund project：Item supported Zhejiang Provincial Natural Scientific Foundation（No：2007CA097脉通片是由浙江中医药大学药物研究所研制的中药复方制剂，该制剂是决明子、夏枯草等中药复方的提取物，具有清肝热、平肝阳、养肝肾，辅以清热泻火、凉血散结的功效，可用于肝阳亢盛型原发性高血压的治疗。

本文选用中药复方制剂济脉通片联合硝苯地平，通过对清醒肾性高血压大鼠（RHR）的血压及血压波动性的测定，分析其联合应用的合理性和优势，为临床用药和开发利用提供参考　　1 实验材料和方法　　1.1 材料　　试验药物：济脉通片，浙江中医药大学药物研究自制，批号：090106；硝苯地平片，浙江万马药业有限公司，批号：080607实验试剂：0.9%氯化钠注射液，民生制药厂，批号为：40807242；肝素钠注射液，常州千红生化制药有限公司，批号为：080526戊巴比妥钠，国药集团化学试剂有限公司，批号为：F20041117主要实验仪器：CODA多通道无创测压系统，美国Kent Scientific CorPoration；ALC压力传感器，上海奥尔科特生物科技有限公司；WZ-50C6微量注射泵，浙江大学医学仪器有限公司；LP123电子天平，常熟市衡器厂实验动物：SD大鼠，雄性，体重160～180g，由浙江省医学科学院实验动物中心提供动物自由饮水和摄食，动物室温度为20～25℃，湿度为60%～70%　　1.2 实验方法　　1.2.1 两肾一夹（2K1C）型肾血管性高血压大鼠（RHR）模型制备［12］　　选用SD大鼠，体重160～180g，用戊巴比妥钠（40mg/kg）腹腔注射麻醉后，仰卧固定，剪去腹部手术野毛，皮肤消毒后于剑突下1.5cm沿腹中线切开皮肤及肌层，右食指伸入腹腔触及肾脏，左手指从腹部外侧配合将肾脏挤出，用浸有生理盐水棉花包住，然后用左手食指与拇指将其固定。

右手用自制的玻璃分针小心分离肾蒂部筋膜，沿肾静脉下方分离肾动脉，在近主动脉端用U形银夹（内径为0.2mm）套上，最后分层缝合手术切口，术后青霉素5万单位/只，腹腔注射，连续应用3天，以预防感染6～8周后，收缩压>150mmHg的SD大鼠被选入本试验　　1.2.2 中西药合用的剂量选择试验　　给药前先进行剂量确定预实验，使用CODA无创血压测量系统，在原有多次试验的基础上，选定济脉通片和硝苯地平的降压无效剂量分别为300mg/kg和0.5mg/kg将这两个剂量进行单用和合用试验，为确定联合给药组的剂量提供依据实验结果显示，将两药物无效剂量合用后，降压效果明显，因此，我们确定联合用药的剂量为300mg/kg（济脉通）和0.5mg/kg（硝苯地平）　　1.2.3 清醒自由活动大鼠血压连续监测［34］　　RHR动脉、静脉插管术后恢复2天，接上记录系统，采用计算机化清醒自由活动大鼠血压连续监测技术，实时记录每搏收缩压（SBP）、舒张压（DBP）、平均动脉压（MAP）心动间期（HP）等连续记录24h，而后脱机分析相关指标　　1.2.4 RHR分组及给药方法　　使用CODA多通道无创测压系统选取收缩压>150mmHg的RHR24只，并根据血压对其进行分组，共分为3组，即模型组，济脉通组（JMT），济脉通硝苯地平联合用药组（LHYY）。

另取8只正常SD大鼠作为空白对照组济脉通组的给药剂量为450mg/kg，联合用药组的给药剂量为300mg/kg（济脉通）和0.5mg/kg（硝苯地平），模型组和空白对照组给予生理盐水（0.5ml/kg）分组后，将RHR在清醒动物实验活动笼适应20h，第一次灌胃给药后用计算机连续记录血压24h，脱机分析数据吕良忠，等: 济脉通和硝苯地平对清醒肾性高血压大鼠血压的影响　　1.2.5 血压波动性及心率变异性的计算方法［56］　　记录时间按顺序每30min为一个时间段，将全部记录的一天24h连续划分为48个时间段，先计算出每个30min时间段内血压的平均值，共48个平均值，求出这48个平均值的标准差，即为长期波动性若先求出每个30min时间段内血压的标准差，再计算出这48个标准差的平均值，即为短期波动性因此，长期波动性表示每30min之间血压的波动程度，短期波动性表示每30min之内血压波动程度心率变异性以心动周期的变异性来表示，其长期与短期变异性的计算方法同血压波动性　　1.2.6 统计学处理 　　计量资料以（x±s）表示，给药前后的比较采用配对t检验，组间比较采用单因素方差分析　　2 实验结果　　2.1 对RHR的24h血压的影响　　直接灌胃给予RHR药物后，与空白组相比，模型组24h收缩压、舒张压和平均动脉压显著升高（P<0.01）。

与模型组相比，联合用药组能显著降低RHR的24h收缩压，舒张压和平均动脉压（P<0.01）济脉通组对RHR的24h收缩压、舒张压和平均动脉压无显著影响（P>0.05）结果见表1表1 对清醒RHR大鼠24h血压的影响（略） 模型组与空白组比较△P<0.05，△△P<0.01；给药组与模型组比较，*P<0.05，**P<0.01　　2.2 对RHR的24h短期血压波动性变异性的影响　　与空白组相比，模型组能显著升高24h短期收缩压波动性，短期舒张压波动性和平均动脉压波动性（P<0.01）与模型组相比，联合用药组能显著降低RHR的24h短期收缩压波动性（P<0.05）、短期舒张压波动性（（P<0.01）和短期平均动脉压波动性（P<0.01）济脉通组不能降低RHR的24h短期收缩压波动性（P>0.05）和短期舒张压波动性（P>0.05），仅对24h短期平均动脉压波动性有影响（P<0.05）表2 各给药组对清醒RHR大鼠24h短期血压波动性的影响（略） 模型组与空白组比较，△P<0.05，△△P<0.01；给药组与模型组比较，*P<0.05，**P<0.01　　2.3 对RHR的24h长期血压波动性变异性的影响　　与空白组相比，模型组24h长期收缩压、长期舒张压和长期平均动脉压的波动性均无显著性差异（P>0.05）。

与模型组相比，两给药组的24h长期收缩压、长期舒张压和长期平均动脉压的波动性亦均无明显差异（P>0.05）表3 各给药组对清醒RHR大鼠24h长期血压波动性的影响（略） 模型组与空白组比较，△P<0.05，△△P<0.01；给药组与模型组比较，*P<0.05，**P<0.01　　3 讨论 本实验研究在模型制备方面采用SD大鼠制备2K1C型肾性高血压大鼠模型此模型具有病理生理与人类的高血压相似、手术操作较简便、造模后高血压稳定、对降压药物的反应与高血压病人比较符合，适用于抗高血压药物筛选和疗效评价［5］等特点本实验造模后RHR血压升高，同时BPV增加，与文献报道相一致［6］2K1C肾性高血压大鼠BPV增高主要来源于RAS，这种高血压大鼠模型的交感神经功能，对BPV的准许控制作用较完整，因而能发挥部分削弱或掩盖体液、局部调节等多重因素对BPV的作用肾性高血压大鼠BPV的增高，提示神经、体液因子对BPV调节作用的重要性，BPV可能更能显现各种类型高血压的血流动力学特征 本研究采用计算机化清醒自由活动大鼠动态血压监测技术，测得联合用药组可降低RHR的24hSBP、DBP和MAP。

从治疗观点看，这对有效控制全天24h血压升高有重要的治疗意义 本实验结果显示，济脉通组可以降低24h短期MAPV，对24h长期SBPV波动性也有一定的作用；联合用药组可以降低24h短期SBPV、DBPV和MAPV；上述结果证实，济脉通与硝苯地平联合用药具有降低血压，降低BPV（稳定血压）的作用 由此可见，济脉通与硝苯地平联合用药降低血压，降低BPV（稳定血压）的作用，有助于改善TOD，减少高血压并发症发生率这与抗高血压中药能良好的平稳降压，同时突出整体观念，强调气血、脏腑、阴阳平衡，在临床上能保护及逆转TOD相一致 各给药组对24h长期BPV没有影响，原因可能是首次给药后血药浓度没有达到稳态，也可能是大鼠服药后的活动性增强，活动频繁所造成［7］，亦或是操作误差而造成，所以各给药组对24h长期BPV影响尚待进一步研究研究结果提示，由于血药浓度的变化，可以导致药源性血压不稳定，抗高血压治疗药物需要长期有规律地服用参考文献】 1］徐淑云，卞如濂，陈修.药理实验方法学［M］.第三版，北京：人民卫生出版社，2002：950951.　　［2］ 孔宪波，苏定冯.酮舍林对清醒高血压大鼠动脉压力感受性反射血压控制的影响［J］.中国药理学报，1992，13（6）：517520.　　［3］程勇，张洪，苏定冯，等.计算机化清醒自由活动大鼠血流动力学测定技术［J］.中国药理学通报，1990，6（6）：392396.　　［4］Su DF，Xu LP，Miao CY，et al.Two useful methods for evaluating antihypertensive drugs in conscious freely moving rats［J］.Acta Pharmacol Sin，2004，25：148151.　　［5］苏定冯，程勇，张洪.清醒大鼠血压波动性研究方法［J］.中国应用生理学杂志，1992，8（2）：159160.　　［6］Shan ZZ，Dai SM，Su DF.Artetial baroreflex deficit induced organ damage in sinoaortic denervated rats［J］.Cardiovasc Pharmacol，200l，38：427437.　　［7］陈修，陈维洲，曾贵云.心血管药理学（第二版）［M］.北京：人民卫生出版社，1997：197211.。