生物化学技术原理与应用全套课件443pppt.ppt

病原体侵入机体，消弱机体防御机能，破坏机体内环境的相对稳定性，且在一定部位生长繁殖，引起不同程度的病理生理过程病原体侵入机体，消弱机体防御机能，破坏机体内环境的相对稳定性，且在一定部位生长繁殖，引起不同程度的病理生理过程生物化学技术原理及应用生物化学技术原理及应用1病原体侵入机体，消弱机体防御机能，破坏机体内环境的相对稳定性，且在一定部位生长繁殖，引起不同程度的病理生理过程病原体侵入机体，消弱机体防御机能，破坏机体内环境的相对稳定性，且在一定部位生长繁殖，引起不同程度的病理生理过程第一章第一章 生命大分子物质的制备生命大分子物质的制备第一节第一节 材料的选择与处理材料的选择与处理第二节第二节 确定测定方法确定测定方法第三节第三节 细胞的破碎细胞的破碎第四节第四节 抽提抽提第五节第五节 浓缩浓缩第六节第六节 纯化方案的设计与评价纯化方案的设计与评价第七节第七节 有效成分纯度和性质的分析有效成分纯度和性质的分析第八节第八节 应用实例应用实例2病原体侵入机体，消弱机体防御机能，破坏机体内环境的相对稳定性，且在一定部位生长繁殖，引起不同程度的病理生理过程病原体侵入机体，消弱机体防御机能，破坏机体内环境的相对稳定性，且在一定部位生长繁殖，引起不同程度的病理生理过程一、材料的选择一、材料的选择有效成分：指欲纯化的某种单一的生命有效成分：指欲纯化的某种单一的生命大分子物质。

有效成分具有含量少和稳定大分子物质有效成分具有含量少和稳定性差的特性性差的特性材料选择原则材料选择原则(1)含量多、稳定性好；含量多、稳定性好；(2)来源丰富、保持新鲜；来源丰富、保持新鲜；(3)工艺简单、有利用价值工艺简单、有利用价值3病原体侵入机体，消弱机体防御机能，破坏机体内环境的相对稳定性，且在一定部位生长繁殖，引起不同程度的病理生理过程病原体侵入机体，消弱机体防御机能，破坏机体内环境的相对稳定性，且在一定部位生长繁殖，引起不同程度的病理生理过程二、材料的处理二、材料的处理1 1、动物脏器：、动物脏器： (1) (1)冰冻：短时间零下冰冻：短时间零下1010冰库或零下冰库或零下70 70 低温冰箱（数月）贮存；低温冰箱（数月）贮存； (2)(2)脱脱脂脂：人人工工剥剥离离；有有机机溶溶剂剂；快快冷冷快快热热；脂肪分离器；脂肪分离器； (3) (3)干燥：丙酮中脱水；沸水中蒸煮烘干干燥：丙酮中脱水；沸水中蒸煮烘干4病原体侵入机体，消弱机体防御机能，破坏机体内环境的相对稳定性，且在一定部位生长繁殖，引起不同程度的病理生理过程病原体侵入机体，消弱机体防御机能，破坏机体内环境的相对稳定性，且在一定部位生长繁殖，引起不同程度的病理生理过程2 2、植物组织：、植物组织：(1)(1)叶片：水洗净或在叶片：水洗净或在1010小时内置零下小时内置零下4 4 到零下到零下30 30 冰箱贮藏备用冰箱贮藏备用; ;(2)(2)种子：泡胀或粉碎。

种子：泡胀或粉碎5病原体侵入机体，消弱机体防御机能，破坏机体内环境的相对稳定性，且在一定部位生长繁殖，引起不同程度的病理生理过程病原体侵入机体，消弱机体防御机能，破坏机体内环境的相对稳定性，且在一定部位生长繁殖，引起不同程度的病理生理过程3 3、微生物：、微生物： (1)(1)胞内活性分子：离心法收集上清液，低温胞内活性分子：离心法收集上清液，低温下短时间贮存下短时间贮存; ;(2)(2)胞外活性分子：经破细胞膜处理后提取，胞外活性分子：经破细胞膜处理后提取，制成冻干粉制成冻干粉6病原体侵入机体，消弱机体防御机能，破坏机体内环境的相对稳定性，且在一定部位生长繁殖，引起不同程度的病理生理过程病原体侵入机体，消弱机体防御机能，破坏机体内环境的相对稳定性，且在一定部位生长繁殖，引起不同程度的病理生理过程第二节第二节 确定测定方法确定测定方法一、一、目的和要求目的和要求二、二、常用的测定方法常用的测定方法7病原体侵入机体，消弱机体防御机能，破坏机体内环境的相对稳定性，且在一定部位生长繁殖，引起不同程度的病理生理过程病原体侵入机体，消弱机体防御机能，破坏机体内环境的相对稳定性，且在一定部位生长繁殖，引起不同程度的病理生理过程一、目的和要求一、目的和要求确定的方法简单、灵敏、需时少、专一性确定的方法简单、灵敏、需时少、专一性8病原体侵入机体，消弱机体防御机能，破坏机体内环境的相对稳定性，且在一定部位生长繁殖，引起不同程度的病理生理过程病原体侵入机体，消弱机体防御机能，破坏机体内环境的相对稳定性，且在一定部位生长繁殖，引起不同程度的病理生理过程二、常用的测定方法二、常用的测定方法 1. 1.光谱法光谱法(1)(1)吸收光谱法吸收光谱法（absorption spectrophotometry)absorption spectrophotometry) 直接测定法：将待测物配制成一定浓度的溶液直接测定法：将待测物配制成一定浓度的溶液 移至分光光度计，读取吸光度。

移至分光光度计，读取吸光度吸光度与待测物吸光度与待测物 浓度成正比浓度成正比例如：总蛋白含量的测定例如：总蛋白含量的测定 比色法（间接法）：将待测物与相关试剂或酶的比色法（间接法）：将待测物与相关试剂或酶的 底物作用后，移至分光光度计，读取吸光度例如：底物作用后，移至分光光度计，读取吸光度例如： 酶活性的测定酶活性的测定9病原体侵入机体，消弱机体防御机能，破坏机体内环境的相对稳定性，且在一定部位生长繁殖，引起不同程度的病理生理过程病原体侵入机体，消弱机体防御机能，破坏机体内环境的相对稳定性，且在一定部位生长繁殖，引起不同程度的病理生理过程(2)(2)荧光光谱法荧光光谱法( (fluo-spectrophotometry)fluo-spectrophotometry) 激发光激发待测物质发射发射光，读取激发光激发待测物质发射发射光，读取 荧光强度荧光强度荧光强度与待测物质浓度成正荧光强度与待测物质浓度成正 比比荧光光谱法的精确性、重复性和灵敏荧光光谱法的精确性、重复性和灵敏 度比吸收光谱法好度比吸收光谱法好例如：乙醇中蒽的测定例如：乙醇中蒽的测定10病原体侵入机体，消弱机体防御机能，破坏机体内环境的相对稳定性，且在一定部位生长繁殖，引起不同程度的病理生理过程病原体侵入机体，消弱机体防御机能，破坏机体内环境的相对稳定性，且在一定部位生长繁殖，引起不同程度的病理生理过程(3)(3)浊度法浊度法 极稀的悬浮液采用此法，测定悬浮液在极稀的悬浮液采用此法，测定悬浮液在不被吸收的波长不被吸收的波长下表现的消光值。

下表现的消光值11病原体侵入机体，消弱机体防御机能，破坏机体内环境的相对稳定性，且在一定部位生长繁殖，引起不同程度的病理生理过程病原体侵入机体，消弱机体防御机能，破坏机体内环境的相对稳定性，且在一定部位生长繁殖，引起不同程度的病理生理过程2.2.电化学法电化学法 有些反应可放出质子氢，可用有些反应可放出质子氢，可用PHPH计或计或NaOHNaOH滴定等方法追踪变化计算出待测物的滴定等方法追踪变化计算出待测物的含量12病原体侵入机体，消弱机体防御机能，破坏机体内环境的相对稳定性，且在一定部位生长繁殖，引起不同程度的病理生理过程病原体侵入机体，消弱机体防御机能，破坏机体内环境的相对稳定性，且在一定部位生长繁殖，引起不同程度的病理生理过程3.3.生物活性检测法生物活性检测法 细胞或动物摄入待测物质后，待测物质细胞或动物摄入待测物质后，待测物质摄入量与细胞或动物的生理指标变化有相摄入量与细胞或动物的生理指标变化有相关性，以此检测待测物质含量关性，以此检测待测物质含量 13病原体侵入机体，消弱机体防御机能，破坏机体内环境的相对稳定性，且在一定部位生长繁殖，引起不同程度的病理生理过程病原体侵入机体，消弱机体防御机能，破坏机体内环境的相对稳定性，且在一定部位生长繁殖，引起不同程度的病理生理过程4.4.免疫分析法免疫分析法 利用抗原与抗体的特异性反应，并结合利用抗原与抗体的特异性反应，并结合生物标记，可对待测物质进行定量定性分生物标记，可对待测物质进行定量定性分析。

析14病原体侵入机体，消弱机体防御机能，破坏机体内环境的相对稳定性，且在一定部位生长繁殖，引起不同程度的病理生理过程病原体侵入机体，消弱机体防御机能，破坏机体内环境的相对稳定性，且在一定部位生长繁殖，引起不同程度的病理生理过程5.5.生物传感器生物传感器 用生物传感器中的敏感膜与待测物质反用生物传感器中的敏感膜与待测物质反应，可通过显示器反映有效成分的含量应，可通过显示器反映有效成分的含量15病原体侵入机体，消弱机体防御机能，破坏机体内环境的相对稳定性，且在一定部位生长繁殖，引起不同程度的病理生理过程病原体侵入机体，消弱机体防御机能，破坏机体内环境的相对稳定性，且在一定部位生长繁殖，引起不同程度的病理生理过程16病原体侵入机体，消弱机体防御机能，破坏机体内环境的相对稳定性，且在一定部位生长繁殖，引起不同程度的病理生理过程病原体侵入机体，消弱机体防御机能，破坏机体内环境的相对稳定性，且在一定部位生长繁殖，引起不同程度的病理生理过程17病原体侵入机体，消弱机体防御机能，破坏机体内环境的相对稳定性，且在一定部位生长繁殖，引起不同程度的病理生理过程病原体侵入机体，消弱机体防御机能，破坏机体内环境的相对稳定性，且在一定部位生长繁殖，引起不同程度的病理生理过程第三节第三节 细胞的破碎细胞的破碎1.1.物理方法物理方法 2.2.化学处理化学处理 3.3.生物方法生物方法 18病原体侵入机体，消弱机体防御机能，破坏机体内环境的相对稳定性，且在一定部位生长繁殖，引起不同程度的病理生理过程病原体侵入机体，消弱机体防御机能，破坏机体内环境的相对稳定性，且在一定部位生长繁殖，引起不同程度的病理生理过程1.1.物理方法物理方法（1 1）研磨法：研钵，匀浆器）研磨法：研钵，匀浆器（2 2）捣碎法：捣碎器）捣碎法：捣碎器（3 3）超声波法：）超声波法：超声仪超声仪（4 4）压榨法）压榨法: :挤压挤压（5 5）冻融法：低温冷冻迅速取出）冻融法：低温冷冻迅速取出19病原体侵入机体，消弱机体防御机能，破坏机体内环境的相对稳定性，且在一定部位生长繁殖，引起不同程度的病理生理过程病原体侵入机体，消弱机体防御机能，破坏机体内环境的相对稳定性，且在一定部位生长繁殖，引起不同程度的病理生理过程2.2.化学处理化学处理（1 1）脂溶性溶剂：丙酮；氯仿；甲苯）脂溶性溶剂：丙酮；氯仿；甲苯（2 2）表面活性剂：十二烷甲基黄酸钠；十）表面活性剂：十二烷甲基黄酸钠；十 二烷基硫酸钠二烷基硫酸钠20病原体侵入机体，消弱机体防御机能，破坏机体内环境的相对稳定性，且在一定部位生长繁殖，引起不同程度的病理生理过程病原体侵入机体，消弱机体防御机能，破坏机体内环境的相对稳定性，且在一定部位生长繁殖，引起不同程度的病理生理过程3.3.生物方法生物方法 （1 1）溶胀）溶胀（2 2）自溶）自溶（3 3）生物酶降解：溶菌酶；蛋白水解酶）生物酶降解：溶菌酶；蛋白水解酶K K21病原体侵入机体，消弱机体防御机能，破坏机体内环境的相对稳定性，且在一定部位生长繁殖，引起不同程度的病理生理过程病原体侵入机体，消弱机体防御机能，破坏机体内环境的相对稳定性，且在一定部位生长繁殖，引起不同程度的病理生理过程第四节第四节 抽提抽提一一. .抽提的含义抽提的含义二二. .抽提有效成分的影响因子抽提有效成分的影响因子 22病原体侵入机体，消弱机体防御机能，破坏机体内环境的相对稳定性，且在一定部位生长繁殖，引起不同程度的病理生理过程病原体侵入机体，消弱机体防御机能，破坏机体内环境的相对稳定性，且在一定部位生长繁殖，引起不同程度的病理生理过程一、抽提的含义一、抽提的含义 用适当的溶剂和方法，从原料中把用适当的溶剂和方法，从原料中把有效成分分离出来的过程。

有效成分分离出来的过程用缓冲液，用缓冲液，稀酸，稀碱或有机溶剂（丙酮，乙醇）稀酸，稀碱或有机溶剂（丙酮，乙醇）等抽提，有时还。