从香烟对乳酸菌的影响看吸烟对消化功能的危害.doc

从香烟对乳酸菌的影响看吸烟对消化功能的危害陈正怡孙斐陈子彧 老师：孙艳芬程虹摘要：把不同浓度的香烟浸出液添加到乳酸菌培养基上， 观察乳酸菌的生长繁殖情况经过多次重复地实验，发现香烟对乳酸菌的 生长有明显的抑制作用，浸出液浓度越大，抑制作用越明显 一支香烟在100ml水中的浸出原液与乳酸菌稀释液按1:1的比 例混合，可使90%左右的乳酸菌无法生长由于乳酸菌是能 帮助消化的益生菌，对于维持消化道菌群平衡有着重要作用， 本实验间接反映了吸烟对消化系统也有明显的危害关键词：香烟乳酸菌消化一、问题的提出香烟对于呼吸系统的危害已经人尽皆知， 但除了呼吸系统外，香 烟对身体的其它功能是不是也有明显的毒害作用呢？我想到了我的 一个常年吸烟的亲戚，不仅因为吸烟把牙齿染黄了，而且吃得也不多 他喜欢饭后一支烟，经常说饿的时候抽支烟就觉得不觉得饿了， 感觉 很满足那么，香烟是不是对我们的消化功能有抑制作用呢？如果有 的话有没有方法可以很形象地把危害显示出来让人警醒？在学习测量乳酸菌的活性的时候我突然想到， 乳酸菌是一种存在 于人类体内的益生菌，能够将碳水化合物发酵成乳酸，帮助消化，有 助人体肠脏的健康由于广谱和强力的抗菌素的广泛应用， 使人体肠 道内以乳酸菌为主的益生菌遭受到严重破坏， 就会出现消化不良等一 系列的问题。

那么，我们是不是也可以从香烟对乳酸菌的危害中，间 接了解香烟对于消化系统的影响呢？二、 实验材料（1） 试剂① 改良TJA培养基（按 GB/T4789.35-2003 规定）② 灭菌蒸馏水③ 某种品牌的香烟一包④ 某种品牌100ml装脱脂酸奶一瓶（2） 仪器恒温培养箱；冰箱；架盘天平；灭菌培养皿若干；灭菌镊子；锥 形瓶；试管；试管架；移液枪及枪头；震荡器三、 实验步骤（1）配制改良TJA培养基1000毫升，分装在三个大锥形瓶中配方如下：番茄汁酵母抽提液牛肉膏乳糖葡萄糖磷酸氢二钾吐温-80乙酸钠琼脂50 mL5g10 g20 g2g2 gl g5g15g最后加水定容至1000ml，测量pH6.8 士 0.2左右另制备0.5%的琼脂溶液以备覆盖在TJA培养基表层2）制备不同浓度的烟草浸出液① 将单支烟在水中浸泡三小时，得到烟草浸出原液② 取10ml烟草浸出原液，加蒸馏水稀释至 50ml，得到稀释5 倍的烟草浸出液③ 取5ml烟草浸出原液，加蒸馏水稀释至 50ml，得到稀释10 倍的烟草浸出液3) 将培养基和烟草浸出液分装好后，与培养皿、试管一道在120 C条件下灭菌20 min4) 制备乳酸菌稀释液① 在超净工作台上，用移液枪吸取0.1ml脱脂酸奶，稀释至10ml, 在震荡器上震荡均匀，得到10-2稀释液。

② 取0.1ml 10-2稀释液，稀释至10ml，得到10-4稀释液③ 取0.1ml 10-4稀释液，稀释至10ml，得到10-6稀释液④ 取1ml 10-6稀释液，稀释至10ml，得到10-7稀释液⑤ 取0.1ml 10-6稀释液，稀释至10ml，得到10-8稀释液5) 预接种取酸奶原液和10-2、10-4、10-6、10-7、10-8倍的稀释液各1ml, 分别注入各个培养皿内，做好标记待 TJA培养基冷却至50 C左右 时，倒平板，转动培养皿使菌液与培养基混合均匀待琼脂凝固后， 翻转平板，置36 C左右的恒温箱内培养三天，观察乳酸菌菌落生长 状态和数目，挑出能够计数的平板我们预接种显示，原液一一10-6条件下乳酸菌在平板上生长都过 密，10-8太稀因此下一步实验选用10-7倍的乳酸菌稀释液6) 在每组培养皿上倒入以下几种试剂，转动均匀：① 对照组：TJA培养基+1ml 10-7乳酸菌稀释液；② 烟草原液：TJA培养基+1ml 10-7乳酸菌稀释液+1ml烟草原 液；③ 稀释5倍的烟草浸出液：TJA培养基+1ml 10-7乳酸菌稀释液 +1ml稀释5倍的烟草液；④ 稀释10倍的烟草浸出液：TJA培养基+1ml 10-7乳酸菌稀释液 +1ml稀释10倍烟草液；(7) 待待琼脂凝固后，浇上一层琼脂隔离空气。

翻转平板，置36 C左右的恒温箱内培养三天，观察各组乳酸菌菌落生长状态和数目，进行比较，得出结论8）为了增加结果的科学性，随机抽取平板上的 5个菌落做过 氧化氢酶检测，并用革兰氏染色观察细菌的形态，以确定平板上生长 的是乳酸菌四、实验结果（1）培养皿底为黄色，上面生长的菌落湿润微白色，边缘不是 很整齐，像一团团小棉絮从菌落的特点上可初步确定生长的是乳酸 菌2）菌落中挑出的细菌过氧化氢酶阴性，革兰氏染色的照片如下图所示：从图中可以看出，细菌经染色后呈紫色杆状，革兰氏染色阳性， 符合乳酸菌的特点综合菌落的特点、过氧化氢酶检测结果和染色镜 检，可以确定生长的是乳酸杆菌，没有被杂菌污染，可以通过菌落计 数来计算乳酸杆菌的数目3）不同组乳酸菌生长情况如下表：乳酸菌稀释倍数烟草原液稀释5倍的烟草液稀释10倍烟草液对照菌落数23113无法计数无法计数乳酸菌减少10-7菌落数乳酸菌减少2.3 X10811.3 X10892.3%202X10867.3%62.3%略有减少989.8 X0893.3%无法计数略有减少无法计数从上图中可很清楚地看到，随着烟草浓度的增加，乳酸菌的数目 要急剧下降稀释10-7倍的乳酸菌，在对照组平板中都密集得无法计 数。

在稀释了 10倍的烟草浸出液组，乳酸菌虽然仍然不方便计数， 但是看上去已经明显比对照组要疏松在稀释了 5倍的烟草浸出液里，菌落的数量已经少到可以计数了，与酸奶瓶标注每毫升含有 3X 109数目的乳酸菌相比，计算出来乳酸菌的减少比例在 60%左右而 加烟草原液组里，仅有不到10%的乳酸菌幸存从这些这些图片和数据中不难看出，烟草的确会对乳酸菌的生长 有明显的抑制作用，而且浓度越高，危害越大五、 结果分析人体的消化道中存在大量的益生菌，这些益生菌在消化道内大量 繁衍可促进并提高人体的全身免疫能力，保持肠内 PH值稳定，促进 新陈代谢和维生素B族的合成，帮助消化吸收，提高人体肠道对微 量元素的吸收能力，建起微生态壁垒如果这种平衡被打破，消化功 能就会受到损害我们的实验结果显示，香烟燃烧前的浸泡产物就可以对益生菌群 中的乳酸菌产生明显的毒害作用那么香烟在燃烧后会产生一氧化 碳、二氧化碳、尼古丁、焦油、氮氧化物等更有害物质，如果被吸入 口腔，再被唾沫溶解从而进入消化道，该给消化系统内的益生菌带来 多大的灾难就不难想象了长久以往，消化系统内的菌群平衡被打破， 就可能加重胃溃疡、慢性胃炎的发病概率六、 心得体会（1） 从这个小实验中，我不仅了解了香烟在另一方面的危害， 更学到了设计实验的一种思路。

现实生活中的许多疑问是不一定能够 通过直接实验得到的，比如说究竟对人是否有害，是不可能在人 身上很快得到答案这个小课题也是如是此，我们不可能用人来做这 个实验，用动物做实验也不能很快得出结论，但当我们转换视野，用 跟人健康密切相关的乳酸菌来开展实验，就可以侧面得出结论了设 计实验，有的时候可以曲线救国2） 从这个小实验中我还学会了严谨的科学态度在开始接种 时，由于操作不当，我们的培养基经常被污染在多次重做之后，我 们总算明白了为什么“科学不容半点马虎”当我们把操作规范后，就 很少返工了。