2016新编槐花米中芦丁的提取、分离与鉴定.doc

※实验三 槐花米中芦丁的提取、分离与鉴定芦丁（Rutin）广泛存在于植物界中，现已发现含芦丁的植物至少在 70 种以上，如烟叶、槐花、荞麦和蒲公英中均含有尤以槐花米（为植物 Sophora japonica 的未开放的花蕾）和荞麦中含量最高，可作为大量提取芦丁的原料槐花米为豆科植物槐花的未开放花蕾味苦性凉，具清热、凉血、止血之功槐花的主要化学成分为芦丁，又名芸香甙，含量可达 12-16%芦丁是由槲皮素（Quercetin ） 3 位上的羟基与芸香糖（Rutinose） 〔为葡萄糖（Glucose ）与鼠李糖（Rhamnose）组成的双糖〕脱水合成的苷为浅黄色粉末或极细的针状结晶，含有三分子的结晶水，熔点为 174~178℃，无水物 188~190℃溶解度：冷水中为 1:10000；热水中1:200；冷乙醇 1:650；热乙醇 1:60；冷吡啶 1:12微溶于丙酮、乙酸乙酯，不溶于苯、乙醚、氯仿、石油醚，溶于碱而呈黄色芦丁具有维生素 P 样作用可降低毛细管前壁的脆性和调节渗透性，有助于保持及恢复毛细血管的正常弹性，临床上用作毛细管脆性引起的出血症，并常用作防治高血压病的辅助治疗剂现在国处也常用芦丁作食品及饮料的染色剂。

一、实验目的1．通过芦丁的提取与精制掌握碱-酸法提取黄酮类化合物的原理及操作2．掌握芦丁的一种提取、精制方法及提制过程中防止甙水解的方法3. 掌握黄酮甙水解生成甙元的方法及二者之间的分离4．熟悉芦丁、槲皮素的结构性质、检识方法和纸层析鉴定方法二、实验原理本实验主要是利用芸香苷中含有较多的酚羟基，可溶于碱中，加酸酸化后又可析出芸香苷结晶的性质，采用碱溶酸沉法提取，并用芸香苷对冷、热水的溶解度相差悬殊的特性进行精制芦丁可被稀酸水解，生成槲皮素及葡萄糖、李糖，并能通过纸层析鉴定芦丁及槲皮素还可通过化学反应及紫外光谱鉴定三、实验材料槐米、石灰乳、0.4％硼砂水溶液、2％的硫酸溶液、浓盐酸、正丁醇、醋酸、氨水、1％的氢氧化钠溶液、1％的三氯化铝乙醇溶液、1％的葡萄糖溶液、1％的鼠李糖溶液、1％芸香苷乙醇溶液、1％槲皮素乙醇溶液、95％乙醇、碳酸钡、广泛 pH 试纸、中速层析滤纸等四、实验内容（一）提取：称取槐米 30g，在乳钵中研碎后，投入 300ml0.4％硼砂溶液的沸水溶液中煮沸 2-3 分钟，在搅拌下加入石灰乳调 pH9，煮沸 40 分钟（注意添加水，保持原有体积，保持 pH8~9） ，趁热倾出上清液,用棉花过滤。

残渣加 100ml 水，加石灰乳调 pH9，煮沸 30 分钟，趁热用棉花过滤，二次滤液合并滤液保持在 60℃，加浓 HCl，调 pH2-3，放置过夜，则析出芦丁沉淀加 0.4％硼砂水溶液 200ml，在搅拌下加石灰乳调 pH 值至 8~9，加热，煮沸 15min，随时补充失去的水分，保持 pH8~9，倾出上清液，用四层纱布过滤；同样操作再提取一次合并两次滤液，放冷，并用盐酸调 pH 至 2~3，放置过夜，待析出结晶，过滤，滤饼用蒸馏水洗至 pH5-6，抽干，置空气中晾干，得粗制芸香苷，称重，计算得率二）精制：将芸香苷粗品悬浮于蒸馏水中，煮沸至芸香苷全部溶解，加少量活性炭，煮沸 5-10 分钟，趁热抽滤，冷却后即可析出结晶，抽滤至干，置空气中晾干，或 60~70℃干燥，得精制芸香苷，称重，计算得率三）芸香苷的水解：取芸香苷 1g，研碎，加 2％硫酸水溶液 80ml，小火加热，微沸回流 30-60min，并及时补充蒸发掉的水分在加热过程中，开始时溶液呈浑浊状态，约 10min 后，溶液由浑浊转为澄清，逐渐析出黄色小针状结晶，即水解产物槲皮素，继续加热至结晶物不再增加时为止抽滤，保留滤液 20ml，以检查滤液中的单糖。

所滤得的槲皮素粗晶水洗至中性，加 70％乙醇 80ml 加热回流使之溶解，趁热抽滤，放置析晶抽滤，得精制槲皮素减压下 110℃干燥，可得槲皮素无水物四) 芸香苷、槲皮素及糖的检识1．颜色反应① α-萘酚- 浓硫酸（Molisch ）试验：取芸香苷少许置于试管中，加乙醇 1ml 振摇，加 α-萘酚试剂 2~3 滴振摇，倾斜试管，沿管壁徐徐加入 0.5ml 浓硫酸，静置，观察两层溶液界面变化，出现紫红色环者为阳性反应，表示试样的分子中含有糖的结构，糖和甙类均呈阳性反应，比较芸香苷和槲皮素的不同②盐酸-镁粉试验：取芸香苷少许置于试管中，加 5％乙醇 2ml，在水浴中加热溶解，滴加浓盐酸 2 滴，再加镁粉约 50mg，即产生剧烈的反应溶液逐渐由黄色变为红色③ 三氯化铁试验取样品水或乙醇液，加入三氯化铁试剂数滴，观察颜色变化④三氯化铝试验：取芸香苷少许置于试管中，加入甲醇 1~2ml，在水浴中加热溶解，加 1％三氯化铝甲醇试剂2~3 滴，呈鲜黄色以同样方法试验槲皮素⑤醋酸镁试验：取芸香苷少许置于试管中，加入甲醇 1~2ml，在水浴中加热溶解，加 1％醋酸镁甲醇试剂 2~3滴，呈黄色荧光反应。

以同样方法试验槲皮素（反应也可在滤纸上进行，观察荧光） ⑥ 氧氯化锆-枸橼酸试验：取芸香苷少许置于试管中，加甲醇 1~2ml，在水浴上加热溶解，再加 2％氧氯化锆甲醇试剂3~4 滴，呈鲜黄色然后加 2%枸橼酸甲醇试剂 3~4 滴，黄色变浅，加蒸馏水稀释变无色以同样方法试验槲皮素进行对照⑦ 氢氧化钠试验：取芸香苷少许置于试管中，加水 2ml 振摇，观察试管中有无变化滴加 1％氢氧化钠溶液数滴，振摇使溶解，呈黄色澄清溶液再加入 1％盐酸溶液数滴使呈酸性反应，则溶液由澄清转为浑浊状态2．色谱检识(1) 槲皮素和芦丁的薄层鉴定①聚酰胺薄层色谱：固定相：聚酰胺薄层板样品：a 精制芦丁 b 芦丁标准品 c 精制槲皮素展开剂：氯仿—甲醇—丁酮—乙酰丙酮：(16：10：5：1)显色：a 可见光下观察色斑，再于紫外灯下观察荧光斑点b 喷洒 AlCl3 乙醇液后观察②硅胶薄层色谱吸附剂：硅胶 G，105℃下活化 2h展开剂：a.氯仿：甲醇：甲酸（15：5：1）b.氯仿：丁酮：甲酸（5：3：1）显色剂：1%FeCl3 和 1%K3[Fe（CN）6] 水溶液，应用时等体积混合2) 芸香苷和槲皮素的纸色谱检识：支持剂：新华层析滤纸（中速、20cmХ7cm）样 品：自制 1％芸香苷乙醇溶液自制 1％槲皮素乙醇溶液对照品：1％槲皮素标准品与 1％芸香苷标准品乙醇溶液展开剂：a. 正丁醇：冰醋酸：水（4：1：5 上层）b. 15％醋酸水溶液展距：10-15cm显色：a. 在可见光下观察斑点颜色，再在紫外灯下观察斑点颜色b. 喷三氯化铝试剂呈黄色斑点c．经氨气熏后再于可见、紫外下观察。

3) 糖的纸色谱检识：取上述芸香苷水解后的母液 20ml，加入氢氧化钡细粉（约 2.6g）中和至pH7，滤除生成的硫酸钡沉淀（可用滑石粉助滤） 滤液中水浴中浓缩至 1~2ml，供纸色谱点样用支持剂：新华层析滤纸（中速、20cmХ7cm）样 品：水解浓缩液对照品：a. 葡萄糖标准品水溶液b. 鼠李糖标准品水溶液展开剂：正丁醇：冰醋酸：水（4：1：5 上层）显 色：a. 喷苯胺- 邻苯二甲酸试剂，于 105℃加热 10min，显棕色或棕红色斑点b.喷氨性硝酸银试剂，于 100℃左右加热，呈棕褐色斑点五、实验说明及注意事项1．本实验采用碱溶酸沉法从槐米中提取芸香苷，收率稳定，且操作简便在提取前应注意将槐米略捣碎，使芸香苷易于被热水溶出槐花中含有大量粘液质，加入石灰乳使生成钙盐沉淀除支pH 应严格控制在 8-9，不得超过 10因为在强碱条件下煮沸，时间稍长可促使芸香甙水解破坏，使提取率明显下降酸沉一步 pH 为 2-3，不宜过低，否则会使芸香甙形成盐溶于水，降低了收率2．提取过程中加入硼砂水的作用：即能调节碱性水溶液的 pH，又能保护芸香甙分子中的邻二酚羟基不被氧化，亦保护邻二酚羟基不与钙离子络合，使芸香甙不受损失。

3．芸香甙的提取方法除了用碱溶酸沉法外，还可利用芸香甙在冷水及沸水中的溶解度不同，采用沸水提取法又报道将生产工艺改进为 95%乙醇回流提取后回收醇得浸膏，然后将粗浸膏经除去脂溶性杂质后，用水洗净，过滤，干燥即得芸香甙，可提高收率 6．96%，并降低了成本因此可根据不同原料采用各种不同方法提取4．槲皮素以乙醇重结晶时，如所用的乙醇浓度过高（90％以上） ，一般不易析出结晶此时可于乙醇溶液中滴加适量蒸馏水，使呈微浊状态，放置，槲皮素即可析出六、思考题1．本实验提取过程中应注意哪些问题？2．根据芸香苷的性质还可采用何种方法进行提取？简要说明理由七、参考文献1．海药物研究所：中草药有效成分的提取和分离 234—240 页2．中国医学科学院药物研究所：中草药有效成分的研究(第一分册)219 —225 19723．日本药学杂志，72(333) 1952；76(1210) 1956，80(304) 1960；80(698) 19604．Chem， Pharm． Bull， ll (167)， 1963---------------------------------------------------------------范文最新推荐------------------------------------------------------6房产管理处工作总结及工作打算[房产管理处工作总结及工作打算] 　　今年以来，房产管理处在建设局党委和上级业务主管部门的领导下，经兄弟科室的密切配合，严格按照新时期房产管理工作的总体要求和部署，不断更新思想观念，积极拓展工作思路，与时俱进，扎实工作，造就一支“团结奋进，求实创新，廉洁勤政，高效严谨”的房管队伍，圆满完成了局党委年初下达的各项任务目标，促进了**区房产管理事业各项工作的整体发展，为我区的经济建设和社会各项事业的顺利开展作出了贡献，房产管理处工作总结及工作打算。

一、加强内部管理，完善规章制度，深化理论学习，全面提高全处干部职工的政治素质和业务水平 一年来，房产处客观总结和分析了历年来工作的经验和存在的不足，及时地调整房产管理工作的新思路首先以内部管理入手，重新完善修订了一套切实可行的内部管理制度，使全处干部职工的工作质量、办事效率和优质服务水平有了明显的提高，真正做到了“让群众满意，让政府放心” 二是狠抓了全处干部职工的思想政治理论学习和业务知识学习，学习了《房地产管理法》 、 《测绘法》 、《城市房屋拆迁管理条例》等法律、法规，积极开展形式多样的思想教育活动，学以致用，使全处广大干部职工的理论水平、道德修养、业务素质得到全面提高 二、更新观念，拓宽思路，全面规范地做好房地产管理的各项工---------------------------------------------------------------范文最新推荐------------------------------------------------------7作 （一） 、加强房屋产权产籍管理 根据今年房屋确权的实际情况，除了区驻地正常业务开展外，我们也加大了对各乡镇（街道办事处）公私产房屋确权登记的宣传办证力度。

一是完成了天使学校、商业银行、农业银行等区驻地各单位 1000余户 15 万平米集资建房的办证工作；二是完成了********六个乡镇（办事处）20 个村庄 3200 户近 50 万平方米的测量办证工作；三是完成了区驻地********等村居旧村改造还建房 1100 户 13 万平米的测量工作，证待出 （二） 、贯彻落实拆迁管理条例，加大拆迁管理工作力度 1、克服困难，努力开创工作新局面今年以来配合区政府先后起草并出台了《*********开发改造拆迁安置实施细则》 （**政发[XX]33 号） 、<<*******区域企业安置拆迁补偿实施办法》 （** 政发[XX]66 号）两个文件，。