-高三生物选修3二轮复习练习题.doc

1．（上海卷.九）回答下列有关遗传信息传递与体现的问题在图27所示的质粒PZHZ11（总长为3.6kb，1kb=1000对碱基因）中，lacZ基因编码β-半乳糖苷酶，后者催化生成的化合物能将白色的大肠杆菌染成蓝色1）若先用限制酶BamHI切开pZHZ11，然后灭活BamHI酶，再加DNA连接酶进行连接，最后将连接物导入足够数量的大肠杆菌细胞中，则含3.1kb质粒的细胞颜色为；含3.6kb质粒的细胞颜色为2）若将两端分别用限制酶BamHI和BglHI切开的单个目的基因片段置换pZHZ11中0.5kb的BamHI酶切片段，形成4.9kb的重组质粒，则目的基因长度为kb3）述4.9kb的重组质粒有两种形式，若用BamHI和EcoRI联合酶切其中一种，只能获得1.7kb和3.2kb两种DNA片段；那么联合酶切同等长度的另一种重组质粒，则可获得kb和kb两种DNA片段4）若将人的染色体DNA片段先导入大肠杆菌细胞中克隆并鉴定目的基因，然后再将获得的目的基因转入植物细胞中体现，最后将产物的药物蛋白注入小鼠体内观测其生物功能与否发挥，那么上述过程属于A.人类基因工程 B.动物基因工程 C.植物基因工程 D.微生物基因工程【来源】专项16 现代生物科技【答案】（1）白色 白色和蓝色/白色或蓝色（2）1.8（3）1.4 3.5（4）C【解析】（1）3.1kb质粒lacZ基因被破坏，含3.1kb质粒的细胞颜色为白色；加DNA连接酶进行连接，被切下的片段也许反向连接，所含3.6kb质粒的细胞也许具有正常质粒和异常质粒，也也许只具有正常质粒或异常质粒，颜色为白色和蓝色（白色或蓝色）。

2）pZHZ11中0.5kb的BamHI酶切片段被切除后，剩余3.1kb，将两端分别用限制酶BamHI和BglHI切开的单个目的基因插入，形成4.9kb的重组质粒，则目的基因大小为4.9-3.1=1.8kb3）限制酶BamHI和BglHI切割产生的黏性末端可以进行连接，但连接后不能被两者中的任何一种辨认并切割，用BamHI切割4.9kb的重组质粒，只有一种切割位点用BamHI和EcoRI联合酶切其中一种，只能获得1.7kb和3.2kb两种DNA片段；联合酶切同等长度的另一种重组质粒，可获得1.7+1.8=3.5kb和3.2-18=1.4kb两种DNA片段4）题干所述目的是让人的基因在植物细胞中体现，属于植物基因工程考点定位】本题重要考察基因工程名师点睛】本题考察限制酶和DNA连接酶的使用，属于较难题解答本题的核心是明确DNA连接酶在进行连接时，插入的片段也许有正反两种插入方式本题68题第二空、70题容易发生错误，错因在于未能考虑到上述状况2．（江苏卷.33）（9分）下表是几种限制酶辨认序列及其切割位点，图1、图2中标注了有关限制酶的酶切位点，其中切割位点相似的酶不反复标注请回答问题：（1）用图中质粒和目的基因构建重组质粒，应选用______两种限制酶切割，酶切后的载体和目的基因片段，通过__________酶作用后获得重组质粒。

为了扩增重组质粒，需将其转入处在__________________态的大肠杆菌2）为了筛选出转入了重组质粒的大肠杆菌，应在筛选平板培养基中添加__________，平板上长出的菌落，常用PCR鉴定，所用的引物构成为图2中_____________3）若BamH I酶切的DNA末端与Bcl I酶切的DNA末端连接，连接部位的6个碱基对序列为 ，对于该部位，这两种酶 （填“都能”、“都不能”或“只有一种能”）切开4）若用Sau3A I切图1质粒最多也许获得 种大小不同的DNA片段来源】专项16 现代生物科技【答案】（1）BclI和HindⅢ 连接 感受 （2）四环素 引物甲和引物丙（3） 都不能 （4）7【解析】（1）选择的限制酶应在目的基因两端存在辨认位点，但BamH I也许使质粒中启动子丢失，因此只能选BclI和HindⅢ酶切后的载体和目的基因片段，通过DNA连接酶酶作用后获得重组质粒为了扩增重组质粒，需将其转入处在感受态的大肠杆菌2）为了筛选出转入了重组质粒的大肠杆菌，根据质粒上的抗性基因，应在筛选平板培养基中添加四环素PCR技术规定两种引物分别和目的基因的两条单链结合，沿相反的方向合成子链。

3）根据BamH I和Bcl I的酶切位点，BamH I酶切的DNA末端与Bcl I酶切的DNA末端连接，连接部位的6个碱基对序列为，与两种酶的酶切位点均不同4）根据BamH 、Bcl I和Sau3A I的酶切位点，Sau3A I在质粒上有三个酶切位点，完全酶切可得到记为A、B、C三种片段，若部分位点被切开，可得到AB、AC、BC、ABC四种片段，因此用Sau3A I切图1质粒最多也许获得7种大小不同的DNA片段考点定位】基因工程，限制酶，连接酶，重组质粒【名师点睛】此题是对基因工程的考察，解答本题的核心在于理解重组质粒中标记基因的作用，在插入目的基因时不能破坏标记基因，故选择限制酶须注意；PCR扩增基因时，两种引物结合的部位相反，延伸的方向相反；限制酶具有特异性，不同的限制酶辨认不同的序列，判断某种限制酶能否切割某片段，应根据该片段中与否具有限制酶的辨认序列3．（课标1卷.40）某一质粒载体如图所示，外源DNA插入到Ampr或Tetr中会导致相应的基因失活（Ampr表达氨苄青霉素抗性基因，Tetr表达四环素抗性基因）有人将此质粒载体用BamHI酶切后，与用BamHI酶切获得的目的基因混合，加入DNA连接酶进行连接反映，用得到的混合物直接转化大肠杆菌，成果大肠杆菌有的未被转化，有的被转化。

被转化的大肠杆菌有三种，分别是具有环状目的基因、具有质粒载体、具有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌回答问题：（1）质粒载体作为基因工程的工具，应具有的基本条件有______________（答出两点即可）而作为基因体现载体，除满足上述基本条件外，还需具有启动子和终结子2）如果用品有氨苄青霉素的培养基进行筛选，在上述四种大肠杆菌细胞中，未被转化的和仅具有环状目的基因的细胞是不能辨别的，其因素是______________；并且______________和______________的细胞也是不能辨别的，其因素是_____________在上述筛选的基本上，若要筛选具有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌的单菌落，还需使用品有是_____________的固体培养基3）基因工程中，某些噬菌体经改造后可以作为载体，其DNA复制所需的原料来自于_____________【来源】专项16 现代生物科技【答案】（1）可以自我复制、具有标记基因、具有一种至多种限制酶切割位点（答出两点即可）（2）两者均不含氨苄青霉素抗性基因，在该培养基上都不能生长 具有质粒载体 具有插入了目的基因的重组质粒（或答具有重组质粒） 两者都含氨苄青霉素抗性基因，在该培养基上均能生长 四环素 （3）受体细胞【解析】（1质粒载体作为基因工程的工具，应具有的基本条件有：可以自我复制、具有标记基因、具有一种至多种限制酶切割位点等。

2）依题意可知，目的基因插入后，导致四环素抗性基因（Tetr ）失活，而氨苄青霉素抗性基因（Ampr）仍能行使正常功能如果用品有氨苄青霉素的培养基进行筛选，在上述四种大肠杆菌细胞中，未被转化的和仅具有环状目的基因的细胞，因两者均不含氨苄青霉素抗性基因，在该培养基上都不能生长，因此是不能辨别的；具有质粒载体和具有插入了目的基因的重组质粒的细胞，因两者都含氨苄青霉素抗性基因，在该培养基上都能生长，因此也是不能辨别的在上述筛选的基本上，若要筛选具有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌的单菌落，还需使用品有四环素的固体培养基；因目的基因插入后，导致四环素抗性基因（Tetr ）失活，具有插入了目的基因的重组质粒的大肠杆菌在该培养基中不能生长，而具有质粒载体的则能正常生长3）噬菌体是专门寄生在细菌细胞中的病毒，在侵染细菌时，噬菌体的DNA进入到细菌细胞中，而蛋白质外壳仍留在细胞外；在噬菌体的DNA的指引下，运用细菌细胞中的物质来合成噬菌体的构成成分，据此可推知：基因工程中，某些噬菌体经改造后可以作为载体，其DNA复制所需的原料来自于受体细胞考点定位】基因工程【名师点睛】本题以图文结合的形式，综合考察学生对基因工程技术的熟记和理解能力。

解决此类问题的核心是，熟记并理解有关的基本知识、形成知识网络，从题图中挖掘出隐含的信息，据此结合每个问题情境进行图文转换、实现对知识的整合和迁移4．（新课标Ⅲ卷.40）图（a）中的三个DNA片段上依次表达出了EcoR I、BamH I和Sau3A I三种限制性内切酶的辨认序列与切割位点，图（b）为某种体现载体示意图（载体上的EcoR I、Sau3A I的切点是唯一的）根据基因工程的有关知识，回答问题：（1）经BamH I酶切割得到的目的基因可以与上述体现载体被____________酶切后的产物连接，理由是____________2）若某人运用图（b）所示的体现载体获得了甲、乙、丙三种具有目的基因的重组子，如图（c）所示这三种重组子中，不能在宿主细胞中体现目的基因产物的有____________，不能体现的因素是____________3）DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来的酶，常用的有____________和____________，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是____________来源】专项16 现代生物科技【答案】（1）Sau3AⅠ 两种梅切割后产生的片段具有相似的黏性末端（2）甲和丙 甲中目的基因插入在启动子的上游， 丙中目的基因插入在终结子的下游，两者目的基因均不能转录（3）E·coliDNA连接酶 T4DNA连接酶 T4DNA连接酶【解析】（1）由于限制酶Sau3AⅠ与BamHⅠ切割后产生的片段具有相似的黏性末端，因此经BamH I酶切割得到的目的基因可以与上述体现载体被Sau3AⅠ酶切后的产物连接。

2）启动子是一段有特殊序列的DNA片段，它是RNA聚合酶辨认和结合的部位，有了它才干驱动基因转录出mRNA，最后获得所需要的蛋白质终结子也是一段有特殊构造的DNA短片段，相称于一盏红色信号灯，使转录在所需要的地方停止下来在基因体现载体中，启动子应位于目的基因的首端，终结子应位于目的基因的尾端，这样目的基因才干体现而图甲中目的基因插入在启动子的上游，丙中目的基因插入在终结子的下游，两者目的基因均不能转录，因此都不能体现目的基因的产物3）常用DNA连接酶的有E·coliDNA连接酶和T4DNA连接酶，其中既能连接黏性末端又能连接平末端的是T4DNA连接酶考点定位】基因工程的原理及技术【名师点睛】1．拟定限制酶的种类(1)根据目的基因两端的限制酶切点拟定限制酶的种类①应选择切点位于目的基因两端的限制酶，如图甲可选择PstⅠ②不能选择切点位于目的基因内部的限制酶，如图甲不能选择SmaⅠ③为避免目的基因和质粒的自身环化和随意连接，也可使用不同的限制酶切割目的基因和质粒，如图甲也可选择用PstⅠ和EcoRⅠ两种限制酶(但要保证质粒上也有这两种酶的切点)2)根据质粒的特点拟定限制酶的种类①所选限制酶要与切割目的基因的限制酶相一致，以保证具有相似的黏性末端。

②质粒作为载体必须具有标记基因等，因此所选择的限制酶尽量不要破坏这些构造，如图乙中限制酶SmaⅠ会破坏。