高f值寡肽的研究.doc

高高 F F 值值寡寡肽肽的的研研究究与与开开发发 摘摘要要 : : 利用玉米黄粉通过蛋白酶水解，制取高F 值寡肽，通过高压液相色谱和氨基酸成份分析， 所得寡肽的分子质量主要分布区域为200-1000 道尔顿，游离氨基酸含量4.8%，不含高分 子量的肽，F 值为 21.4，提取率为85%以上 关关键键词词 : : 高Ｆ值寡肽；玉米黄粉；蛋白酶高Ｆ值寡肽是一类生理功能活性肽，是由3-7 个氨基酸残基组成的混合小肽体系在氨基 酸混合物或寡肽中支链氨基酸（BCAA）即缬氨酸、异亮氨酸、亮氨酸与芳香族氨基酸 （ AAA）即酪氨酸、苯丙氨酸含量的摩尔数之比称为F 值高Ｆ值寡肽是指氨基酸混合物中支 链氨基酸与芳香族氨基酸比值远高于人体中这两类氨基酸比值模式的寡肽高 F 值寡肽具有消除或减轻肝性脑病症状、改善肝功能和改善多种病人蛋白质营养失常状态及抗 疲劳等功能，除可制作治疗肝类疾病药品外，还可广泛用作保肝、护肝功能食品，烧伤、外科手术、 脓毒血症等高付出病人及消化酶缺乏患者的蛋白营养食品和肠道营养剂，高强度劳动者和运动员食品 营养强化剂等玉米黄粉是玉米淀粉厂湿法制取玉米淀粉后的一种下脚料，其蛋白质含量为 35～ 65%。

由于它具有特殊的气味和色泽，加之其蛋白质以醇溶蛋白为主，水溶性差，而且其蛋白质 氨基酸组成中赖氨酸、色氨酸等较缺乏，限制了它的利用长期以来玉米黄粉主要作为饲料，附加值 低，浪费了大量的蛋白质资源我国现在年产玉米淀粉600 万吨，每年就将产生60 万吨 的玉米黄粉，如何更好的利用玉米黄粉，已成为当今淀粉加工副产物综合利用的关键课题，引起各方 面的极大关注玉米黄粉蛋白质具有独特的氨基酸组成，其支链氨基酸如亮氨酸、异亮氨酸等含量十分高，而芳 香族氨基酸如苯丙氨酸、酪氨酸含量很低，这表明玉米黄粉是一种生产高Ｆ值寡肽的优良天然资源 这是当前对玉米深加工的研究热点之一高 F 值寡肽因独特的氨基酸组成和生理功能而受到食品和医药界的高度关注，具有广阔的开发前 景目前，国内外已开始对玉米蛋白粉生产多肽进行大量研究，但市场上尚未见到此类产品销售我们对玉米黄粉生产多肽进行了大量的研究，研究出生产高F 值寡肽的生产工艺，对玉 米黄粉的深加工提供了一条可行之路，提高了玉米黄粉的附加值，付诸生产将产生巨大的经济效益 1 1 材材料料与与仪仪器器 1 1. .1 1 材料玉米黄粉 (山东西王集团有限公司)；蛋白酶Alcalase FG［诺维信（中国）投资公司］； 木瓜蛋白酶，菠萝蛋白酶(广西南宁庞博生物工程公司 )。

1 1. .2 2 主要仪器设备凯氏定氮仪；电子天平；分析天平；氨基酸自动分析仪；高压液相色谱仪；恒温水浴锅；真空浓 缩装置；酸度计；721 分光光度计；凝胶色谱装置；离子交换树脂装置；离心机；喷雾干燥机 2 2 方方法法 2 2. .1 1 蛋白质含量测定： 采用凯氏定氮法 2 2. .2 2 氨基酸测定： 采用氨基酸自动分析仪进行测定 2 2. .3 3 多肽含量测定： 利用凝胶色谱方法，采用G-15 葡聚糖凝胶，分离得到的样品用高压液相色 谱测定含量和相对分子质量 2 2. .4 4 寡肽F 值的测定 ： 采用氨基酸自动分析仪测定所得寡肽氨基酸含量，根据所得的数据进行计算2 2. .5 5 氨基氮测定方法： 采用甲醛滴定法 2 2. .6 6 总糖含量测定： 采用DNS 定糖法测定 3 3 高高 F F 值值寡寡肽肽的的制制备备 3 3. .1 1 高 F 值寡肽的生产工艺： 由玉米黄粉制取高F 值寡肽的流程如下：玉米黄粉 →粉碎 →预处理 →酶解 →灭酶 →分离纯化 →浓缩 →干燥 →成品 3 3. .2 2 预处理玉米黄粉加95%乙醇搅拌浸泡，静置后进行过滤，得到玉米蛋白，烘干即为玉米蛋白粉。

玉米 蛋白粉以8%-10%的比例悬浮于水中，调节pH，保温，加入0.1%的亚硫酸钠搅拌2h通过 对玉米黄粉进行预处理，主要目的是使蛋白质结构变得松散，有利于酶的作用 3 3. .3 3 酶水解加入定量蛋白酶Alcalase，利用pH-state 法进行水解4h，调节溶液pH,加入定量木瓜 蛋白酶和菠萝蛋白酶,进行水解4h然后煮沸10min 灭酶， 5000rpm 离心分离，收集上清液， 准备进一步精制 3 3. .4 4 精制将上清液用活性炭进行脱色，再进行真空浓缩，得到多肽溶液，经阴阳离子交换柱进行除盐，最 后进行喷雾干燥，即可得到多肽产品 4 4 结结果果与与讨讨论论 4 4. .1 1 玉米黄粉各成份含量： 蛋白质含量48.6%，总糖含量18.4%,水分含量8.5% 4 4. .2 2 多肽含量对所得样品，通过高压液相色谱和氨基酸成份分析，其分子质量主要分布区域为200- 1000 道尔顿，游离氨基酸含量4.8%，平均肽链约为5-7 个，不含高分子量的肽，经计算多肽 F 值为21.4，提取率为85%以上实验对比单酶水解与多酶水解制取多肽，发现用多酶水解玉米蛋白的水解度高，采用不同pH 条件 和不同比例的酶组合进行水解，所得寡肽的F 值是不一样的，合适的条件可以将玉米蛋白水解 为高F 值的寡肽。

控制好水解时间也相当重要实验所得寡肽基本没有苦味，多酶水解效果良好。