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海参种营养成分测定 生命科学学院 科研训练报告 海参种营养成分测定 the content of nutrients in the Sea Cucumber 专业：食品质量与安全 姓名：马风敏 学号：202255505211 指导老师：许波(副教授) 2022年11 月7 日 完成地点（实验室） 成绩评定 [摘要]海参中各营养成分的含量通过国标法可测得 1海参中的糖类与蒽酮反应生成的有色物质在可见光区的出现吸收峰，通过标准曲线得出海参的浓度，进而得出海参中糖的含量海参中糖的含量为6%~31%，具很高的营养价值 2水分的测定：恒重法测定 3灰分的测定：乳化液灰分测定方法 4蛋白质：凯氏定氮法 关键词：海参糖类蒽酮水分蛋白质凯氏定氮法标准曲线 Abstract: T he content of nutrients in the sea cucumber can be measured in GB. 1.Sea cucumber in the sugars and Anthrone reaction generating a colored substance absorption peaks in the visible region appears. The concentration of the standard curve of sea cucumber, then come to the sea cucumber in sugar content. 2 Determination of moisture constant weight Determination 3 Determination of ash the method of determination of ash content of the emulsion 4 Protein Kjeldahl method Keyword：the sea cucumber, sugars, anthracene ketone, moisture,protein, Kjeldahl nitrogen , determination standard curve 1前言 海参是一种名贵海产品，因补益作用类似人参而得名。

海参在我国渤海、黄海和广东、福建沿海的浅海海底均有生长，因主要靠人工潜入海底捕捞，故数量不多据统计在800多种海参当中仅有40种是可食用的，我国约有20种，以北方刺参营养价值最高，海参在各类山珍海味中位尊“八珍”海参有主补元气、滋益五脏六腑和祛虚损的养生功能有生百脉血、补肾益精、除劳祛症、滋阴利水、补正软坚和通肠润燥等多种药用功能海参是一种价值极高的滋补品，含高比例蛋白、丰富的维生素及微量元素和一些特殊的营养物质，营养成分的种类高达50多种含胆固醇极低，脂肪含量相对少，是一种典型的高蛋白、低脂肪、低胆固醇食物，对高血压、高脂血症和冠心病患者尤为适宜 多糖的提取分离与测定：海参中的糖类与蒽酮反应生成的有色物质在可见光区的吸收峰为630nm,,故在此波长下比色可通过标准曲线得出海参的浓度，进而得出海参中糖的含量水分的测定恒重法测定灰分的测定可通过乳化液灰分测定方法，蛋白质则是凯氏定氮法 2材料与仪器设备 2.1材料与试剂 试剂纯度生产厂家 海参市售 浓硫酸AR 烟台三和化学试剂有限公司 葡萄糖AR 烟台三和化学试剂有限公司 蒽酮AR 天津市北方天医化学试剂厂 2.2主要的仪器设备 HH-6指针式恒温锅龙口市先科仪器分公司 AB104型电子天平上海志荣电子科技有限公司 7312-I型电动搅拌机上海标本模型厂 722型分光光度计 2.3实验步骤 1多糖的提取分离与测定 2.3.1.1 硫酸一蒽酮试剂(2 g/L)的配制 称取蒽酮置量瓶中，加少量浓硫酸，搅拌使其溶解，加浓硫酸至50mL摇匀，得硫酸一蒽酮试剂，当日配制使用。

对照品溶液的制备：精密称取105 ℃干燥至恒重的葡萄糖10.3 mg于100 mL容量瓶中，加蒸馏水溶解稀释至刻度，摇匀即得 2.3.1.2 供试品溶液的制备 精密称取已经干燥的粉碎成颗粒海参样品0.2071 g，加入适量3 mol/L的硫酸（把样品浸没），放在95 ℃恒温箱中2个小时，然后用去离子水定容至50 mL 2.3. 1.3 最大吸收波长的选择 蒽酮-浓硫酸比色法：吸取供试品溶液1 mL于试管中，在冰水浴中加入蒽酮-浓硫酸溶液4.0 mL，置沸水浴中反应10 min，取出置冰水浴中10 min，在波长400~800 nm之间进行扫描，结果对照品和供试品均在波长为625 nm处有最大吸收 2.3. 1.4 标准曲线 精密吸取0.2、0.4、0.6、0.8、1.0 mL对照品溶液，分别加水至1 mL，加入4.0 ml蒽酮-浓硫酸溶液，在625 nm处测定吸光度，以空白溶液校零以吸光度A为纵坐标，葡萄糖浓度C（ug/mL）为横坐标，绘制标准曲线得回归方程 2.3. 1.5 样品的测定 精密吸取0.05、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5 mL对照品溶液，分别加水至1 mL，加入4.0 ml蒽酮-浓硫酸溶液，在625 nm处测定吸光度，以空白溶液校零 其他成分方法介绍 2 凯氏定氮法 2.3.2.1 试样处理 称取充分混匀的固体试样0.2 g～2 g、半固体试样2 g～5 g 或液体试样10 g～25 g（约相当于30 mg～40 mg 氮），精确至0.001 g，移入干燥的100 mL、250 mL 或500 mL 定氮瓶中，加入0.2 g 硫酸铜（4.1）、6 g 硫酸钾（4.2）及20 mL 硫酸（4.3），轻摇后于瓶口放一小漏斗，将瓶以45°角斜支于有小孔的石棉网上。

小心加热，待内容物全部炭化，泡沫完全停止后，加强火力，并保持瓶内液体微沸，至液体呈蓝绿色并澄清透明后，再继续加热0.5h～1h取下放冷，小心加入20mL 水放冷后，移入100 mL 容量瓶中，并用少量水洗定氮瓶，洗液并入容量瓶中，再加水至刻度，混匀备用同时做试剂空白试验 2. 3.2.2测定 按图1装好定氮蒸馏装置，向水蒸气发生器内装水至2/3处，加入数粒玻璃珠，加甲基红乙醇溶液（4.13）数滴及数毫升硫酸（4.3），以保持水呈酸性，加热煮沸水蒸气发生器内的水并保持沸腾向接收瓶内加入10.0 mL 硼酸溶液(4.10)及1滴～2滴混合指示液（4.16），并使冷凝管的下端插入液面下，根据试样中氮含量，准确吸取2.0 mL～10.0 mL 试样处理液由小玻杯注入反应室，以10 mL水洗涤小玻杯并使之流入反应室内，随后塞紧棒状玻塞将10.0 mL 氢氧化钠溶液(4.11)倒入小玻杯，提起玻塞使其缓缓流入反应室，立即将玻塞盖紧，并加水于小玻杯以防漏气夹紧螺旋夹，开始蒸馏蒸馏10 min 后移动蒸馏液接收瓶，液面离开冷凝管下端，再蒸馏1 min然后用少量水冲洗冷凝管下端外部，取下蒸馏液接收瓶。

以硫酸或盐酸标准滴定溶液(4.12)滴定至终点，其中2份甲基红乙醇溶液(4.13)与1份亚甲基蓝乙醇溶液(4.14)指示剂，颜色由紫红色变成灰色，pH 5.4；1份甲基红乙醇溶液(4.13)与5份溴甲酚绿乙醇溶液(4.15)指示剂，颜色由酒红色变成绿色，pH 5.1同时作试剂空白 2. 3.2.3分析结果的表述 试样中蛋白质的含量按式（1）进行计算 式中： X——试样中蛋白质的含量，单位为克每百克（g/100 g）； V1——试液消耗硫酸或盐酸标准滴定液的体积，单位为毫升（mL）； V2——试剂空白消耗硫酸或盐酸标准滴定液的体积，单位为毫升（mL）； V3——吸取消化液的体积，单位为毫升（mL）； c——硫酸或盐酸标准滴定溶液浓度，单位为摩尔每升（mol/L）； 0.0140——1.0 mL 硫酸[c (1/2H2SO4)＝1.000 mol/L]或盐酸[c (HCl) ＝1.000 mol/L]标准滴定溶液相当的氮的质量，单位为克（g）； m——试样的质量，单位为克（g）； F——氮换算为蛋白质的系数。

一般食物为6.25；纯乳与纯乳制品为6.38；面粉为5.70；玉米、高粱为6.24；花生为5.46；大米为5.95；大豆及其粗加工制品为5.71；大豆蛋白制品为6.25；肉与肉制品为6.25；大麦、小米、燕麦、裸麦为5.83；芝麻、 向日葵为5.30；复合配方食品为6.25以重复性条件下获得的两次独立测定结果的算术平均值表示，蛋白质含量≥1 g/100 g 时，结果保留 三位有效数字；蛋白质含量＜1 g/100 g 时，结果保留两位有效数字 3 常量及微量元素 K、Na、Ca、Mg、P、及Cu、Zn、Fe、Mn、Se、Ge、Co、Cr、Mo经干法消化，用VARIAN 公司ICP-OES发射光谱测定； 脂肪酸：经皂化、甲脂化，用惠普HP-5890气相色谱仪测定 3结果与分析吸光度随葡萄糖浓度C变化数据记录 表1 吸光度 萄糖浓度 ug/ml 0 0.000 4 0.0106 8 0.226 120.367 160.430 200.312 制标准曲线 图1 由图得公式一：y = C1x=0.02822x， 吸光度随样品浓度数据记录 海参质量0.2071g 海参样品浓度 4142ug/mL 表2 海参浓度ug /mL 吸光度 0 0.000 0.04142 0.014 0.08284 0.127 0.16568 0.394 0.24852 0.623 0.33136 0.938 0.4142 1.172 吸光度随海参样品浓度变化曲线 图2 得公式二： y =C 2= 0.002710x ， 易得海参中糖的百分含量为 C1C2=0.028216 02710 0.0×100%=9.6% 误差分析 1葡萄糖称量时有损失，致使标准曲线不标准。

2海参溶解转移时有损失，得到的曲线不准确 4使用的分光光度计在推拉时不够迅速，记录的不是准确的数据在使用时，比色皿也可能没有完全润洗好 注意事项 1准备工作硫酸一蒽酮试剂(2g/L)的配制时，要用手套，硫酸不要溅到手上；配好的溶液要放在避光处 2稀释浓硫酸时，要先加水后加硫酸，还要用玻璃棒不停搅拌 3葡萄糖的量很少，称取葡萄糖时要精确，稀释液要全部转移至容量瓶 在研磨样品时，要注意不要丢失样品。