邻二氮菲分光光度法测定铁.docx

邻二氮菲分光光度法测定铁一、实验目的1. 掌握邻二氮菲分光光度法测定铁的原理及方法2. 学习标准曲线的制作方法3. 了解721型分光光度计的构造及使用方法二■实验原理在测定微量铁时,通常以盐酸羟胺还原Fe3+为Fe2+,在pH为2—9 的范围内，Fe2+与邻二氮菲反应生成稳定的橙红色配合物，其 lgKfQ=21.3该配合物的最大吸收波长为510nm本方法不仅灵敏度 高(摩尔吸光系数£=1.1x104),而且选择性好相当于含铁量40倍 的 Sn2+、Al3+、Ca2+、Mg2+、Zn2+、SiOg2-, 20 倍的 Cr3+、Mn2+、V(V)、 PO43-, 5倍的Co2+、Cu2+等均不干扰测定Fe2+与邻二氮菲在pH=2—9范围内均能显色，但酸度高时，反应较慢, 酸度太低时Fe2+易水解，所以一般在pH=5—6的微酸性溶液中显色 较为适宜邻二氮菲与Fe3+能生成3:1的淡蓝色配合物(lgKfQ=14.1),因此 在显色前应先用还原剂盐酸羟胺将Fe3+全部还原为Fe2+ (2Fe3++2NH2OH.HCl=2Fe2++NJ+2H2O+4H++2Cl-)三■仪器与试剂1. 仪器：(1) 721型分光光度计。

2) 50mL容量瓶7只/组3) 10mL、5mL、2mL、ImL 移液管2.试剂：(l)100yg・mL-1的铁标准溶液： 准确称取0.8634gNH4Fe(SO4)2・ 12^0于烧杯中，加入20mL1:1的HCl和少量水溶解后，定量转移至1升 容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀所得溶液含Fe3+100pg^mL-1o(2) 10yg・m 1-1的铁标准溶液：准确移取25.0mL 100yg・mL-1的铁标 准溶液于250mL容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀3) 10%盐酸羟胺溶液(临用时配制)：称取10g盐酸羟胺容于 100mL水中4) 0.15%邻二氮菲溶液(新近配制)：称取0.15g 1、10—邻二氮 菲于100mL水中，若不溶可稍加热5) 1mo1・mL-1醋酸钠溶液6) 2 moLmL-1盐酸溶液7) 待测铁溶液四•实验内容1. 铁标准曲线绘制取1—6号容量瓶，分别加人10yg・mL-1铁标准溶液0.00、2.00、4.00、6.00、8.00、10.00mL，各加入10%的盐酸羟胺1.0mL，摇匀，2分钟后 各加人0.15%邻二氮菲溶液2.0m1,1mo1・L-1NaAc5mL,再分别用水稀释 至刻度，摇匀。

在510nm波长光处以1号容量瓶中的溶液(试剂空 白)为参比溶液，测定其它溶液的吸光度以吸光度为纵坐标，铁含 量为横坐标作图，得到铁标准曲线利用excel数据图表绘制曲线，得出公式)2. 待测溶液中铁含量的测定吸取待测铁溶液5.00mL放入7号容量瓶中，其它试剂加入量同上， 然后测定其吸光度根据所测吸光度在铁标准曲线上找出对应的铁含 量，并计算出原待测溶液中每毫升含铁的微克数将吸光度代入上述 公式，得出所测铁溶液浓度Fe(yg・mL-i)=标准曲线上求得的浓度(yg・mL-i)x试液稀释倍数五■数据处理记录有关数据，计算待测溶液中Fe的含量溶液编号Fe的含量@g・mL-1)吸光度(A)Fe含量测定值@g・mL-1)待测溶液中Fe的含量@g・mL-1)1234567六、思考题1. 用邻二氮菲法测微量铁时，在显色前加入盐酸羟胺的作用是什么?2. 此法所测铁量是试样中总铁量还是Fe2+量？3. 显色时，加人还原剂、显色剂的顺序可否颠倒?为什么4. 何谓标准曲线？何谓吸收曲线？各有何实际意义？附:721型分光光度计的结构及使用方法1. 仪器末接通电源时，电表指针必须位于“0”刻度线上，否则可用电 表上的校正螺丝进行调节.2. 将仪器电源开关接通，打开比色皿暗箱盖。

选择需要的单色光波 长，参照步骤3选择灵敏度，调节“0”透光率调节旋钮使电表指“0”； 然后将暗箱盖合上，拉动液槽架拉杆使参比溶液处于光路中，旋转 T00%”透光率调节旋钮，使电表指针指到满刻度附近，预热15—20 分钟3. 放大器灵敏度有五档，是逐步增加的，T”档最低其选择原则是: 保证能使参比溶液良好地调节到T00%”的情况下，尽可能采用灵敏 度较低档，这样仪器具有较高的稳定性改变灵敏度后需重新校正透 光率“0”和T00%”4. 预热后，按步骤2连续几次校正透光率“0”和T00%”，即可进行 测定5. 如果大幅度改变测定波长时，在校正透光率“0”和T00%”后，应稍 等片刻（因钨丝灯急剧改变亮度，需要一段热平衡时间），当指针稳定 后，重新校正透光率“0”和T00%”，然后进行测定6. 实验完毕，切断电源，将比色皿取出洗净，将仪器罩好三）比色皿使用要点1. 拿比色皿时，用手捏住比色皿的毛面，切勿触及透光面，以免透 光面被玷污或磨损2. 被测液以倒至比色皿的约3/4高度处为宜3. 在测定一系列溶液的吸光度时，通常都是按从稀到浓的顺序进行使用的比色皿必须先用欲测溶液润洗2-3次4. 比色皿外壁的液体用吸水纸吸干。

5. 清洗比色皿时，一般用水冲洗如比色皿被有机物玷污，宜用盐 酸-乙醇混合液（1： 2）浸泡片刻，再用水冲洗不能用碱液或强氧化性 洗涤液清洗，也不能用毛刷刷洗，以免损伤比色皿。