果蝇双因子杂交张玉杰实验报告.docx

果蝇双因子杂交、伴性遗传杂交和三点测交姓名：张玉杰 系年级：2013级生物科学班 同组者：巩昊洲科目：遗传学实验 题目：果蝇杂交实验 学号201300140138一. 实验目的1、 学习果蝇杂交方法2、 通过实验验证自由组合规律、伴性遗传规律3、 通过三点测交学习基因定位(遗传做图)方法4、 学习遗传学数据统计处理方法二. 实验原理1•实验室果蝇品系：18野生型14檀黑体残翅(eevgvg)6 白眼小翅卷刚毛w m snw 白眼B (bar)棒眼Cy翻翅Not ch 缺刻翅b (bb)黑体y 黄体nub2 匙形翅2•双因子杂交本实验使用18号野生型果蝇和14号纯合黑檀体、残翅果蝇进行杂交，其中黑檀体对灰 体为隐性，残翅对长翅为隐性，两对基因位于非同源染色体上反交正交18?X14 8P灰长黑残F1 灰长014? X 18台 P黑残 灰长F] 灰长0灰残：黑长：黑残=9: 3: 3: 1双因F:灰长：灰残：黑长：黑残=9: 3: 3: 1 F:灰长: 子杂交遗传图解3•伴性遗传杂交本实验使用18号野生型果蝇与纯合白眼果蝇杂交，其中白眼相对于红眼是隐性性状，白 眼基因位于X染色体上反交 正交18? X w台P x+x+ XwY?红眼 台白眼w? X 18 8P XWXW X+Y8白眼 ？红眼F : X+ X+2X+XwX+ YXw YF : X+Xw2Xw XwX+ YXw Y皐红眼皐红眼台红眼台白眼皐红眼皐白眼台红眼台白眼1 :1 :1 :111 :1 :100伴性遗传图解3. 三点测交本实验使用6号纯合白眼、卷刚毛、小翅果蝇与18号野生型果蝇杂交，获得F1代后再自 由交配即可获得具有8种表型的测交F2代。

白眼、卷刚毛、小翅均为X染色体上的隐 性性状18号P 6 号皐（wsnm/wsnm） 台（+++/Y）白卷小］ 红直F［： £（+++/ws nm） b（ws nm/丫）v 0 （测交）红直长（+++） 白直长（w++） 红直小（++m） 红卷长（+sn+）白卷小（wsnm） 红卷小（+snm）白卷长（wsn+）白直小（w+m）F28种表型三. 实验材料：18号野生型果蝇，14号纯合黑檀体、残翅果蝇，白眼果蝇，6号纯合白眼、卷刚毛、小 翅果蝇；麻醉瓶、酒精灯、玻璃板、毛笔、培养管、酒精棉球、乙醚、解剖镜四. 实验步骤：【实验步骤】1、 培养上表所示4个品系的果蝇，从子代中分别挑选出处女蝇和雄果蝇2、 对麻醉瓶进行消毒，将各品系果蝇分别麻醉按照表2所示分别放入有玉米培养基 的指管中，保证每管至少2只雌蝇和2只雄蝇23°C培养做好标记3、 7天后移去亲本，待F1成蝇出来后观察记录F1的性状正反交产生的F1不必挑 处女蝇4、 将F1雌雄果蝇进行自交，把雌雄果蝇分别转移到新的指管中，每管3-4对，23C 培养全程中注意检查有无霉菌污染，受到霉菌污染的生物材料要及时处理、不再使用 果蝇不足时，可引入其他组对应品系的果蝇，或对应的子代果蝇进行补充。

5、 7天后移去F1，待F2化为成蝇后观察性状，并记录统计数量（观察的性状为：眼 色、翅形、刚毛、体色）表2杂交实验亲本杂交类型父本母本双因子正交14号18号双因子反交18号14号伴性正交w号18号伴性反交18号w号三点测交18号6号五. 实验结果及数据处理: 伴性遗传：反交：18早X W£雄性白眼：16雄性红眼：10雌性白眼：1雌性红眼：24伴性遗传反交X2检月佥自由度df=3-1=2,查表知，p〉0.05, 0与E在5%显著水平上差异不显著，遗传学上可以 认为观察频数与理论频数间的差异属于随机误差，伴性遗传正交符合理论预测规律正交：W早X 18 £ 雄性白眼：18 雄性红眼：11 雌性白眼：11 雌性红眼：30伴性遗传正交X2检验f2表型皐红眼皐白眼台红眼台白眼总计O3011111870E17.517.517.517.570(O-E)156.2542.25156.250.25(O-E；2/E8.932.418.930.01420.284自由度df=4-l=3，查表知，p〈0.01，结果与理论值差异显著，实得数非常不符合实 验所得数据与按孟德尔第二定律所预期的数据偏差较大，不可能完全由随机误差导致，所 以双因子反交可能不符合孟德尔自由组合定律或是孟德尔自由组合定律出现的明显例外。

双因子杂交：正交：18早X 14£黑体长翅：6黑体残翅：2灰体长翅：34灰体残翅：8双因子正交X2检验f2表型黑体长翅黑体残翅灰体长翅灰体残翅总计O6234850E9.3753.12528.1259.37550(O-E；211.391.26634.5161.89(O-E；2/E1.2150.4051.2270.2023.049自由度df=4-1=3，查表知，p〉0.05,所以结果与理论数无显著差异，实得数符合理论值双因子杂交：反交：14早X 18 £ 黑体长翅：12黑体残翅：3灰体长翅：21灰体残翅：11双因子反交X2检验f2表型黑体长翅黑体残翅灰体长翅灰体残翅总计O123211147E& 81252.937526.4375& 812547(O-E；210.1600.003929.56644.7852(O-E；2/E1.1530.00131.11840.54302.816自由度df=4-1=3，查表知，p〉0.05,所以结果与理论数无显著差异，实得数符合理论值三点测交：6早X 18 £表7三点测交F2结果组别/性状12 3456789101112总数+++13+711+87+1110+821+713+611+913+716+1021+716+1311+12268wmsn4+413+70+62+05+56+413+108+120+310+27+17+4142++sn0+01+06+00+00+00+00+01+11+11+00+00+012wm+0+01+11+01+00+11+03+20+10+00+00+00+012+msn1+11+21+01+02+02+01+22+00+00+00+00+019W++3+12+12+31+53+12+24+33+12+02+00+12+649+m+1+23+11+07+01+65+37+31+01+11+00+04+052w+sn0+16+01+52+20+01+11 + 13+27+07+02+00+040表8重组值计算发牛重组伎冒重组值图距（单位：cM）w-sn15.5%15.5w-m26.9%26.9sn-m19.5%19.5双交换值=[（15.5+19.5）-26.9]/2=4.05%基因连锁图：六•讨论与分析我组双因子杂交可以看出，正反交符合理论值，而且残翅基因并不影响实验室果蝇的生 存。

但是伴性遗传出现了较大问题，首先是伴性遗传正交中出现了理论预测之外的结果（1 只早白眼）如果排除实验操作中的问题，那么异常表型的产生可能是由F1代雌果蝇产生 配子时减数分裂发生异常，减数分裂II期Xw Xw未分离，产生Xw XwX+基因型（初级例外） 导致的另外，在正交中出现实验数偏离理论值较大的情况，从正交F2代各表型和相应的 数量来看，无论哪一对性状都偏离了孟德尔基因分离定律观察也发现，在果蝇性别上雄蝇 与雌蝇数也并非1： 1.这么大的误差很有可能是实验操作有误，计数时也可能出现了问题 至于三点测交，可能是由于样品较小，造成了实验数据的偏差，所计算得出的重组值不是很 理想对于实验过程而言，操作上应该注意倒果蝇不要用力将果蝇磕到培养基底，因为培养基 会粘住果蝇，不仅对长残翅的判断有影响，而且由于果蝇难以取出，增大了实验结果的误差, 在今后的果蝇相关实验中应该注意。