血浆蛋白的测定及临床意义.doc

血浆蛋白的测定及临床意义一、 血浆蛋白质测定方法的进展：（一） 、比色法：例如总蛋白的测定方法：双缩腺反应法；白蛋白的测定方法：浪甲酚绿法二） 、电泳法：是进一步分离蛋口质的方法三） 、免疫测定法：是利用抗原抗体反应检测标本中微量物质的分析方法特点：（1）特异性好：即某一抗原只与其相应的抗体起反应2）敏感性高，可检测出纳克（ng）水平的的量免疫测定法包括：1、 免疫扩散法：敏感度在ug/ml,因此只能用于检测含量较高的蛋白质且操作 繁琐、时间长,需18・48小时2、 免疫电泳法：是区带电泳与免疫扩散相结合的方法一般不能定量，仅用于检 测异常蛋白成分3、 免疫浊度法：基本原理是：当可溶性抗原与相应抗体特界结合，在二者比例合 适，并有一定浓度的电解质存在时，可以形成不溶性的免疫复合物，即沉淀反 应二、 免疫浊度法的原理：免疫浊度法可分为透射免疫比浊法和散射免疫比浊法1、 透射免疫比浊法：当一定波长的光线通过抗原抗体反应混合液时，被形成的免 疫复合物反射、遮挡或吸收而减弱在一定范围内，吸光度（A）与IC量呈正 相关因此当抗体量固定时，根据吸光度可计算出抗原量要求形成的IC达到 一定的数量，而且分子颗粒较大，否则难以精确测定，因此检测灵敏度相对较 低。

2、 散射免疫比浊法：光线通过检测溶液时，被反应形成的抗原抗体复合物折射而 部分偏转，产生散射光，散射光强度（I）与样本的IC量、散射夹角（（））成 正比，而与入射光波长成反比散射免疫比浊法又可分为终点散射比浊法和速率散射免疫比浊法（1）终点散射免疫比浊法：当反应达到平衡时进行检测，通常需10-30min, 且灵敏度较低2）速率散射免疫比浊法：由于抗原耳抗体结合形成免疫复合物的速度在单 位时间内时不同的，当反应开始时，进行动力学测定可以发现在某一时 间反应速度最快，IC形成最多，散射光强度相应最大，即所谓速率峰（最 大反应速率Vmax）, Vmax与待测抗原量呈正相关而获得测定主要优点：快速、灵敏、精密度高、检测范围广三、 免疫比浊分析的影响因素：1. 抗原抗体的比例：抗原抗体的比例是浊度形成的关键因素免疫比浊法的基本条 件是在保持抗体过剩的情况下测定加入的抗原但抗体过剩又必须适量一般原 则是先确定某一被测物的正常值，以50%作为检测范围，抗体在此范围内应保 持过剩2. 抗体的质量：要求抗体有很强的特异性，有较高的效价，以及有高的亲和力一 般采用R型抗体3. 反应溶液：一般采用PH在7.0左右的磷酸盐缓冲液。

4. 增浊剂的作用：一般使用浓度为3%-4%的PEG6000四、 Array特定蛋白分析仪的简介：1. 原理：采用速率散射比浊法2•测定速度:40-80结果/小时,每次可检测40个标本3. 特点：具有抗原过剩识别功能在抗体量一定的情况下，免疫复合物生成量随着抗原量的增加而增多，但抗原量 超过一定域值后，免疫复合物的量却随之减少，影响检测的准确性Array360具 有的抗原过剩识别功能的工作原理是：在检测到抗原抗体反应速率峰之后，在反 应溶液中加入能与过剩抗体反应的微量的Ag,若反应溶液中有过剩抗体存在， 则与加入的Ag反应，形成一个过剩抗体峰；若反应溶液中无过剩抗体存在，不 能检测到过剩抗体峰的存在当一个反应，有速率峰和过剩抗体峰同时存在时， 仪器将确认第一次出现的速率峰有效，并将结果打印出來；而没有过剩抗体峰存 在的反应，仪器将重新对标本进行更高稀释度的稀释，然后再测定结果g]l . Array360的抗原过剩检测五、几种血浆蛋白质的正常值及临床意义：（一） 、防卫蛋白：1、 免疫球蛋白（Ig）：包括IgG、IgA、IgM IgA临床意义：（1）低Ig血症：分先天性和获得性，获得性低Ig血症见于大量蛋白质流失的 疾病，如肾病综合症、淋巴网状系统肿瘤等；（2）高Ig血症：见于感染，自身免疫病、 肝脏疾病及M蛋白血症等、慢性活动性肝炎IgG和IgM升高明显。

SLE以IgG、IgA或 IgM升高较多见，类风湿性关节炎则以IgM增高为主正常参考值：IgG： 6.94-16.18g/LIgA： O.6-2.63g/L IgAIgM： O.68-3.78g/L2、 补体：包括C3、C4补体系统是人体抵抗感染甚至肿瘤的多种天然防御机制之一，定量检测各种补体成分有 助于诊断免疫功能紊乱临床意义：①补体升高：一般见于各种传染病、组织损伤、急性炎症及肿瘤患者；②补 体降低：多见于自身免疫性疾病、SLE、慢性肝病、肾小球肾炎等参考值：C3 0.88-2.01g/LC4 0.16-0.47g/L3、 k和入轻链（KAP和LAM）用于诊断单克隆Y ■球蛋白病，主要见于多发性骨髓瘤，除IgG、IgA升高外，可伴有KAP 和LAM的过度分泌参考值：KAP 5.74-12.8 g/LLAM 2.69-6.38 g/L（二） 、急性时相蛋白：是指一组蛋白，它们的浓度在由外科手术、高温、肿瘤、感染或其它原因引起的炎症过程中明显升高1、 C反应蛋白（CRP）：CRP是最敏感的急性时相蛋白之一，在炎症及组织损伤发生6小时内，即升高，恢复时CRP下降还可用于手术后、继发性感染的监测；鉴别细菌与非细菌感染等。

参考值：CRP 0.08-0.8mg/dl2、 结合珠蛋白（HP）：乂称为触珠蛋白其主要功能是与血浆中游离的Hb形成复合物，转运至肝脏代谢，使得氨基酸和铁被机体再利用临床意义：①对溶血的诊断：血管内溶血时，由于HP与血红蛋白结合，其含量明显下降; ②是反映肝功状态的敏感指标；③是一种急性时相蛋白，炎症时增高参考值：0.5-2.2 g/L4、 铜兰蛋白（CER）其含量占血浆总铜量的50%,抑制炎症时脂氧及自由基形成主要用于肝豆状核变性的 诊断，肝豆状核变性时CER降低对10岁以内儿童是一个良好的炎症指标参考值：21-53mg/dl5、 a 1 ■酸性糖蛋白（AAG）在肝脏合成，也由白细胞合成临床意义：（1）感染、风湿、创伤、恶性肿瘤时AAG升高；（2）慢性肝炎、肝硬化等时 降低参考值：0.47-1.25g/L6、 a 1 ■抗胰蛋白酶（AAT）AAT为口血球吞噬异物时所释放的一种可中和溶酶体弹性蛋口酶的蛋口，是血清中主要 的蛋白酶抑制剂，占血清中抑制腆蛋白酶活力的91%临床意义：①炎症、组织损伤时AAT增高；②慢性阻塞性肿瘤及严重肝病时AAT降低 参考值：0.83-1.99g/L（三）其它1、前白蛋H（PAB）PAB由肝脏合成的糖蛋白，由于PAB在电泳时迁移于白蛋白之前，故称之为前白蛋白。

PAB的半衰期很短，只有2天临床意义：（1）肝病的诊断：PAB在肝脏合成，半衰期很短，因此可作为早期肝功能损伤 的特异性指标2）可用于营养不良的诊断和监测3）急性时相反应诊断：是一种负 急性时相蛋口，炎症等急性时相反应时PAB可迅速降低如果PAB持续保持低水平或进 一步降低，提示预后不良参考值：250-400mg/L2、 转铁蛋白（TRF）：由肝脏合成，半衰期8天其主要功能为结合并转运铁多数急慢性感染时及严重肝病 时血TRF降低，缺铁性贫血时，TRF升高参考值：2.12-3.6g/L3、 抗链球菌溶血素“O” （AS0）用于证实链球菌感染大约80%的急性风湿热及70-75%急性肾小球肾炎患者ASO水平 升高参考值：0—200 IU/ml4、 类风湿因子（RF）：RA患者血中RF大幅升高，而亚急性细菌性心内膜炎、梅毒、结核、肝炎等疾病时，血 中RF也可轻度升高参考值：0-30 IU/ml。