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柱层析法分离甲基橙和亚甲基蓝.docx

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柱层析法分离甲基橙和亚甲基蓝1、装柱（湿法）取一支色谱柱（25ml酸式滴定管），在柱子的收缩部塞一小团脱脂棉花，注意松紧要适度将色谱柱垂直固定在铁架台上，往柱内加适量 95%乙醇溶液，打开活塞，赶走气泡再向柱中倒入适量 95%乙醇溶液，控制滴速为 1 滴/秒，用小锥型瓶承接，同时通过漏斗慢慢装入 15g 中性氧化铝（以 95%乙醇混悬），使其逐渐沉入底部用洗耳球敲打柱子，使氧化铝装实、均匀2、加样当溶剂的液面刚好流至氧化铝表面时关闭旋塞，立即用滴管加入待分离混合液（甲基橙和亚甲基蓝混合液）0.5mL，尽量避免分离混合液粘附在柱的内壁上打开旋塞，当此溶液流至接近表面时，立即用少量溶剂洗下管壁的有色物质，关闭旋塞3 、洗脱向柱内加入 95%乙醇，打开旋塞进行洗脱用锥形瓶收集蓝色的亚甲基蓝溶液当蓝色溶液收集完后，等柱内柱内液面接近滤纸面时，加入水洗脱，用锥形瓶收集橙色的甲基橙溶液注意洗脱时切勿使溶剂流干！实验结束后，应让溶剂尽量流干，然后倒置，用吸耳球从活塞口向管内挤压空气，将吸附剂从柱顶挤压出使用过的吸附剂倒入垃圾桶里。

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