低分子肝素之大不同课件.ppt

20122012年年低分子肝素之大不同低分子肝素之大不同血栓产品科室会血栓产品科室会 速碧林速碧林低分子肝素与普低分子肝素与普通肝素的区别通肝素的区别不同的低分子肝素之间也存在各种差异普通肝素普通肝素(UFH)是一个复杂的混合物是一个复杂的混合物肝素是一类糖胺聚糖, 由糖醛酸和葡萄糖胺以14 键连接起来的重复二糖单位组成的多糖链的混合物含1030 个二糖单位不等,分子量300030000, 平均分子量15000肝素中包含10 种不同的单糖(4 种糖醛酸和6 种葡萄糖胺) , 从而使得肝素的整个结构变得异常复杂, 到目前为止, 肝素的精确结构还不清楚.成品肝素中, 只有三分之一的肝素分子能与A T(抗凝血酶) 结合.肝素结构与功能的研究进展.高宁国等,生物工程进展1999,Vo l. 19,No. 5Chest 2001; 119;64S-94S普通肝素抗凝机制普通肝素抗凝机制肝素加速抗凝血酶反应依赖于一个独特的戊糖序列, 约占自然肝素链的三分之一含戊糖序列的肝素链与AT具有高度亲和性, 并且诱导构象变化从而激活AT缺乏该序列的肝素对AT 的亲和性低1000 倍, 并且激活能力也很弱AT 对Xa 的抑制只需要构象的变化, 因而只需戊糖序列, 而对II a 的抑制不仅需要戊糖序列, 至少还需要戊糖序列附近的13 个糖残基, 这样长度的肝素链才能作为桥梁, 使AT 与II a 都结合上形成一个三元复合体, 加速对II a 的抑制。

肝素结构与功能的研究进展.高宁国等,生物工程进展1999,Vo l. 19,No. 5IIaXaATIII低分子肝素（低分子肝素（LMWH）由普通肝素制成）由普通肝素制成LMWH都是以未分级肝素为原料，用物理、化学等方法将其分解或降解所得都是以未分级肝素为原料，用物理、化学等方法将其分解或降解所得LMWH的平均分子量约为普通肝素的三分之一的平均分子量约为普通肝素的三分之一普通肝素和普通肝素和LMWH间药代动力学间药代动力学,抗凝活性及其他生物活性不同抗凝活性及其他生物活性不同,主要源自两者和循主要源自两者和循环及细胞上蛋白的结合属性不同环及细胞上蛋白的结合属性不同物理：过滤物理：过滤化学：解聚化学：解聚酶学：肝素酶酶学：肝素酶高亲和力戊糖结构高亲和力戊糖结构普通肝素分子量15000LMWH分子量5000Hirsh J, etc. Low Molecular Weight Heparins, 4th EditionLMWH血浆蛋白结合更少血浆蛋白结合更少LMWH（平均分子量（平均分子量5000）普通肝素普通肝素（平均分子量（平均分子量15000）AT血浆蛋白血浆蛋白LMWH与UFH相比：与AT以外的蛋白结合少于UFH剂量的量效关系更可预测药代动力学更容易掌控剂量Hirsh J, etc. Low Molecular Weight Heparins, 4th EditionLMWH与血小板和与血小板和PF4结合更少结合更少研究显示，肝素与血小板和研究显示，肝素与血小板和PF4的结合与糖链的长度相关。

的结合与糖链的长度相关糖链越长，结合越多糖链越长，结合越多LMWH较普通肝素大大降低了与血小板和较普通肝素大大降低了与血小板和PF4的结合从而使肝素诱导的血小板减少症（从而使肝素诱导的血小板减少症（HIT）的发生率大大降低的发生率大大降低使用使用UFH的患者发生率为的患者发生率为13（牛源性比猪源性肝素更常见）牛源性比猪源性肝素更常见）使用使用LMWH的患者发生率为的患者发生率为00.8Hirsh J, etc. Low Molecular Weight Heparins, 4th EditionCHEST 2009; 135:16511664LMWH与骨细胞结合更少与骨细胞结合更少LMWH更少的跟骨细胞结合，对成骨细胞和破骨细胞激活影响小，从而减少更少的跟骨细胞结合，对成骨细胞和破骨细胞激活影响小，从而减少骨质流失骨质流失1研究显示，研究显示，LMWH显著改善显著改善UFH引起的骨代谢异常引起的骨代谢异常21.Hirsh J, etc. Low Molecular Weight Heparins, 4th Edition2.Lai KN, HoK, Cheung RC, et al. Int J Artif Organs, 2001;24(7);447-455Duranti E, Lipid Changes in Hemodialysis in the Course of Anticoagulation with Fraxiparine. Dialysis and Transplantation 2003;32:490-8LMWH显著改善血透患者血脂显著改善血透患者血脂从普通肝素到从普通肝素到LMWH肝素的分子量显著降低肝素的分子量显著降低使用使用方便性和安全性大大提高方便性和安全性大大提高低分子肝素是不同的低分子肝素是不同的权威共识权威共识美国药品与食品管理局（美国药品与食品管理局（FDA）1 “FDA提醒医生和其他卫生专业人员关于LMWH应用的要点，某一特定LMWH不能与其他LMWH互换”美国胸科医师学会（美国胸科医师学会（ACCP）2 “LMWH是通过不同的方法解聚而成，因此，在一定程度上他们的药代动力学特性和抗凝活性存在差异，并且在临床应用时不可相互替代国际血管医学联盟国际血管医学联盟2006专家共识（专家共识（ICS）3 “目前欧洲和北美的管理机构认为：不同的LMWH是不同的药物制剂。

LMWH各自特定的适应证需要通过临床的确认对这些药物进行治疗互换是不合适的”世界卫生组织（世界卫生组织（WHO）4 “本机构认为所有的LMWHs在许多方面的确是不同的，包括：分子量、生化特性、抗Xa:IIa比等 ”1.The UAS Food and Drug Administration(FDA) alert. JAMA, 1993;270:1672.2.Hirsh J, et al.Chest 2004,126:188S-203S.3.Nicolaides AN, et al. Int Angiol, 2006, 25: 101-61.4.WHO Working Group on Biological Standardization of Unfractionated Heparin,WHO Headquarters, Geneva, Switzerland, 7-8 Sep, 1999.首先，不同的首先，不同的LMWH，制备工艺不同制备工艺不同欧洲和中国药典针对欧洲和中国药典针对LMWH标准不同标准不同2008欧洲药典中国生化药物杂志 2004年第25卷第1期欧洲药典对各个品种的欧洲药典对各个品种的LMWH有明确的细分标准，中国药有明确的细分标准，中国药典尚未细分典尚未细分LMWH，只有一个标准。

只有一个标准欧洲药典中对产品的质量标准项目较多，尤其对杂质控制欧洲药典中对产品的质量标准项目较多，尤其对杂质控制有严格的标准中国药典的规定比较简略有严格的标准中国药典的规定比较简略欧洲和中国药典对欧洲和中国药典对LMWH标准不同标准不同欧洲药典中国药典分子量标准平均MW在8000以下，小于8000的级分不少于60达肝素56006400依诺肝素38005000那屈肝素36005000平均MW在8000以下，小于8000的级分不少于60抗凝活性标准抗Xa因子与抗IIa因子活性不小于1.5抗Xa因子与抗IIa因子活性不小于1.5杂质标准涵盖产品性状，亚硝酸盐含量，亚硝胺含量等标准无明确规定2008欧洲药典中国生化药物杂志 2004年第25卷第1期不同不同LMWH的制备方法不同的制备方法不同LMWH都是以未裂解肝素为原料，用物理、化学等方法将都是以未裂解肝素为原料，用物理、化学等方法将其分解或降解，得到的具有较低相对分子质量（其分解或降解，得到的具有较低相对分子质量（Mr）的组）的组分或片段分或片段目前目前FDA批准的三种批准的三种LMWH的制备方法分别有：的制备方法分别有：亚硝酸裂亚硝酸裂解法（那屈肝素、达肝素），解法（那屈肝素、达肝素），消除化学解聚法（依诺肝消除化学解聚法（依诺肝素），素）， 肝素酶消化法（亭扎肝素）肝素酶消化法（亭扎肝素）目前国内的目前国内的LMWH基本以亚硝酸裂解法为主。

基本以亚硝酸裂解法为主Hirsh J, et al.Chest 2004,126:188S-203S.中国生化药物杂志 2004年第25卷第1期亚硝酸盐亚硝酸盐LMWH制品的一种常见杂质制品的一种常见杂质亚硝酸盐是亚硝酸盐是LMWH制品的一种常见杂质制品的一种常见杂质亚硝酸降解法是一种常见的亚硝酸降解法是一种常见的LMWH制备方法制备方法亚硝酸盐广泛应用与食品、工业生产中亚硝酸盐广泛应用与食品、工业生产中亚硝酸盐过量会亚硝酸盐过量会导致带遗传毒性副产物的产生导致带遗传毒性副产物的产生亚硝酸盐是亚硝胺类化合物的前体物质亚硝胺亚硝酸盐是亚硝胺类化合物的前体物质亚硝胺是是强致癌物强致癌物Kilfoy, BA, 2010，Int J Cancer.Coss, A. Am J Epidemiol 2004;159(7): 693-701Huang, Y. G，Mutat Res1996; 358(1): 7-14Rogers, M. A., Cancer Epidemiol Biomarkers Prev 1995; 4(1): 29-36.研究显示研究显示那屈肝素亚硝酸盐含量低于达肝素那屈肝素亚硝酸盐含量低于达肝素G. Beretta et al./Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis 49 (2009) 1179-1184NO2- 亚硝酸盐NNO 亚硝胺20122012年年年年2 2月，月，月，月，FDAFDA对对对对2222个个个个中国肝素原料供应商发出警告中国肝素原料供应商发出警告中国肝素原料供应商发出警告中国肝素原料供应商发出警告FDA警告原因：肝素原料存在质量问题警告原因：肝素原料存在质量问题美国每年有美国每年有12001200万人使用肝素类药物进行抗凝治疗。

万人使用肝素类药物进行抗凝治疗20082008年，年，在美国因使用在美国因使用被污染或掺入次级品的肝素导致了诸多死亡案被污染或掺入次级品的肝素导致了诸多死亡案例例劣质肝素引起的不良反应包括过敏及超敏反应劣质肝素引起的不良反应包括过敏及超敏反应被警告的肝素类产品中被警告的肝素类产品中掺入了过硫酸化的硫酸软骨素掺入了过硫酸化的硫酸软骨素（OSCO）这种物质在肝素的生产过程中不会出现，在产这种物质在肝素的生产过程中不会出现，在产品中出现的原因只能是人为加入从而降低生产成本品中出现的原因只能是人为加入从而降低生产成本FDAFDA警告原因：过硫酸化的硫酸软骨素（警告原因：过硫酸化的硫酸软骨素（警告原因：过硫酸化的硫酸软骨素（警告原因：过硫酸化的硫酸软骨素（OSCOOSCO）OSCO,糖胺聚糖的一种，由糖胺聚糖的一种，由D-葡糖醛酸和葡糖醛酸和N-乙酰氨基半乳糖以乙酰氨基半乳糖以-1,4-糖苷键连接而成的重复二糖单位组成的多糖，并在糖苷键连接而成的重复二糖单位组成的多糖，并在N-乙酰氨基半乳糖乙酰氨基半乳糖的的C-4位或位或C-6位羟基上发生硫酸酯化大量存在于动物软骨中位羟基上发生硫酸酯化大量存在于动物软骨中。

OSCO是动物软骨组织提取的廉价化学替代品是动物软骨组织提取的廉价化学替代品经过硫化后的硫酸软骨素在化学结构上与肝素更相似，并以相似的方经过硫化后的硫酸软骨素在化学结构上与肝素更相似，并以相似的方式凝聚在一起，用一般的检验方法无法辨别出来式凝聚在一起，用一般的检验方法无法辨别出来为了降低成本，肝素原料供应商向肝素里添加了过硫酸软骨素为了降低成本，肝素原料供应商向肝素里添加了过硫酸软骨素（o。