糖和苷类药物的分析.ppt

糖类和苷类药物的分析糖类和苷类药物的分析第九节第九节一、药物结构与性质一、药物结构与性质葡萄糖葡萄糖 单糖单糖 蔗糖蔗糖乳糖乳糖 双糖双糖淀粉淀粉多糖多糖赋形剂和矫味剂赋形剂和矫味剂糖糖医学上的糖类医学上的糖类 葡萄糖葡萄糖属单糖，是人体能量的主要来源之一属单糖，是人体能量的主要来源之一 乳糖（半乳糖乳糖（半乳糖- -葡萄糖）葡萄糖） 蔗糖（葡萄糖蔗糖（葡萄糖- -果糖）果糖）    乳糖、蔗糖属双糖，淀粉属多糖，它们常乳糖、蔗糖属双糖，淀粉属多糖，它们常被用作药物制剂的赋形剂或矫味剂被用作药物制剂的赋形剂或矫味剂 分类分类 糖糖类类就就其其化化学学结结构构来来看看，，属属于于多多羟羟基基醚醚或或羟羟基基酮酮以以及及它它们们的的多多缩缩聚聚体体. . 依依其其是是否否能能水水解解及及水水解解产生简单糖分子多少，可分为：产生简单糖分子多少，可分为：（（1 1）单糖类：）单糖类： a a、、戊糖：戊糖：5 5个个C C原子原子 b b、、己糖：己糖：6 6个个C C原子原子 c c、、醛糖醛糖 d d、、酮糖酮糖（（2 2）双糖类：乳糖，蔗糖）双糖类：乳糖，蔗糖（（3 3）多糖类：淀粉，纤维素）多糖类：淀粉，纤维素葡萄糖葡萄糖 •葡萄糖为醛糖，具有还原葡萄糖为醛糖，具有还原性；葡萄糖还有多个不对性；葡萄糖还有多个不对称碳原子，具有旋光性，称碳原子，具有旋光性，为右旋体。

为右旋体葡萄糖（葡萄糖（glucose））无色结晶或白色结晶无色结晶或白色结晶性性或颗粒性粉末；无臭，或颗粒性粉末；无臭，味甜味甜 •有机化合物的结构中含有手性碳原子，具有旋光现象利用测定药物的旋光度进行定性、杂质检查和定量的分析方法，称为旋光度测定法•手性碳原子，是指和四个不同的原子或基团连接的碳原子，常用“＊”号予以标注蔗糖（蔗糖（sucrose））无无色色结结晶晶或或白白色色结结晶晶性性的的松松散散粉末；无臭，味甜粉末；无臭，味甜 乳糖（乳糖（sucrose））白白色色的的结结晶晶性性颗颗粒粒或或粉粉末；无臭，味微甜末；无臭，味微甜  性质性质1. 1. 溶解性：单糖、双糖均易溶于水，微溶于溶解性：单糖、双糖均易溶于水，微溶于乙醇，不溶于氯仿或乙醚等有机溶剂；多糖在乙醇，不溶于氯仿或乙醚等有机溶剂；多糖在冷水或乙醇中均不溶解冷水或乙醇中均不溶解2. 2. 旋光性：单糖和双分子中有不对称碳原子，旋光性：单糖和双分子中有不对称碳原子，均具有一定的比旋度，可用于鉴别、纯度检查均具有一定的比旋度，可用于鉴别、纯度检查及含量测定及含量测定3. 3. 还原性：单糖或含有半缩醛基的双糖分子还原性：单糖或含有半缩醛基的双糖分子结构中，均有醛基或酮基，都具有还原性。

单结构中，均有醛基或酮基，都具有还原性单糖于水溶液中主要呈半缩醛的环状结构糖于水溶液中主要呈半缩醛的环状结构二二、鉴别试验、鉴别试验（（1）灼烧试验）灼烧试验糖类糖类→直火燃烧并产生焦糖臭味直火燃烧并产生焦糖臭味（一般用于蔗糖的鉴别）（一般用于蔗糖的鉴别）蔗糖的灼烧鉴别：取本品，用直火加热，先熔融膨蔗糖的灼烧鉴别：取本品，用直火加热，先熔融膨胀，后燃烧并发生焦糖臭，遗留多量的炭胀，后燃烧并发生焦糖臭，遗留多量的炭2））Fehling反应反应Fehling反应是在反应是在Fehling试剂试剂（碱性酒石酸铜试液）（碱性酒石酸铜试液）中，具还原性的糖与铜离子发生氧化中，具还原性的糖与铜离子发生氧化-还原反应，生还原反应，生成成红色红色红色红色的氧化亚铜沉淀的氧化亚铜沉淀3）红外光谱法）红外光谱法  (4)  比旋度比旋度蔗糖：不得少于蔗糖：不得少于+66°（（10%水溶液）水溶液）乳糖：乳糖：+52.0°～～ + 52.6°（（10%水溶液，并水溶液，并100ml中加氨试液中加氨试液0.2ml））葡萄糖：葡萄糖：+52.5°～～ + 53°（（10%水溶液，并水溶液，并100ml中加氨试液中加氨试液0.2ml））三、杂质检查三、杂质检查 （一）葡萄糖的检查（一）葡萄糖的检查可能引入的杂质可能引入的杂质△△△△△△葡萄糖的制备工艺葡萄糖的制备工艺液化岗位液化岗位预涂式真空转鼓过滤机预涂式真空转鼓过滤机59烛式过滤机岗位烛式过滤机岗位76离子交换岗位离子交换岗位结晶岗位结晶岗位106 离心机岗位离心机岗位成品包装岗位成品包装岗位121包装机包装机1、溶液的澄清度与颜色、溶液的澄清度与颜色      检查水中不溶性杂质或有色杂质检查水中不溶性杂质或有色杂质2、蛋白质（灵敏度法）、蛋白质（灵敏度法）      原料植物引入原料植物引入（不得发生沉淀）（不得发生沉淀）检查原理检查原理        3、乙醇溶液的澄清度、乙醇溶液的澄清度         检查乙醇中不溶性杂质，如糊检查乙醇中不溶性杂质，如糊 精、蛋白质、脂肪等精、蛋白质、脂肪等              葡萄糖在葡萄糖在90%沸乙醇中能完全溶解沸乙醇中能完全溶解4、亚硫酸盐与可溶性淀粉、亚硫酸盐与可溶性淀粉检查原理检查原理方法方法（二）葡萄糖注射液中（二）葡萄糖注射液中5-羟甲基糠醛羟甲基糠醛            的检查的检查            引入途径引入途径    高温灭菌时分解产生高温灭菌时分解产生检查原理检查原理    杂质有杂质有UV吸收特征吸收特征•葡萄糖易分解产生葡萄糖易分解产生5-羟甲基糠醛羟甲基糠醛，其本身是，其本身是无色的，无色的， 它可再分解为它可再分解为乙酰丙酸乙酰丙酸与与甲酸甲酸或或聚合，其聚合，其聚合物聚合物为一种为一种有色物质有色物质。

葡萄糖葡萄糖遇强热使溶液变黄，至少有一部分颜色是遇强热使溶液变黄，至少有一部分颜色是由于葡萄糖的分解产物由于葡萄糖的分解产物5-羟甲基糠醛的聚合羟甲基糠醛的聚合物作用所致；而且葡萄糖注射液的色泽深物作用所致；而且葡萄糖注射液的色泽深浅与浅与5-羟甲基糠醛产生的量成正比羟甲基糠醛产生的量成正比第九章 糖、苷类药物分析 三、杂质检查 （二）葡萄糖注射液的检查项 1．pH值：应为3.2～5.5 2．5-羟甲基糠醛： 5-HMF5-HMF的聚合物有色葡萄糖的特殊检查项目葡萄糖的特殊检查项目（三）乳糖中蛋白质的检查（三）乳糖中蛋白质的检查            原料乳汁引入原料乳汁引入            检查方法检查方法    灵敏度法灵敏度法规定规定             5′内不得有内不得有↓ 检查原理检查原理（四）蔗糖的检查（四）蔗糖的检查           1.  还原糖还原糖    原料甘蔗或甜菜引入原料甘蔗或甜菜引入            检查原理检查原理规定规定    硫代硫酸钠的消耗量硫代硫酸钠的消耗量2.  钙盐的检查钙盐的检查             生产中引入生产中引入            检查原理检查原理氨试液氨试液四、含量测定四、含量测定( (一一) )  葡萄糖原料：旋光法葡萄糖原料：旋光法 旋旋光光度度：：直直线线偏偏振振光光通通过过光光学学活活性性化化合合物物液液体体或或溶溶液液时时，，能能引引起起旋旋光光现现象象，，使使偏偏振振光光平平面向左或右旋转，旋转的度数称旋光度。

面向左或右旋转，旋转的度数称旋光度 比比旋旋度度：：偏偏振振光光透透过过1 1dmdm且且1 1mlml中中含含旋旋光光物物质质1 1g g的的溶溶液液，，在在一一定定波波长长一一定定温温度度下下测测得得的的旋旋光度称比旋度光度称比旋度葡萄糖葡萄糖 手性碳原子，具旋光性手性碳原子，具旋光性鉴别鉴别含量测定含量测定纯度纯度 药用葡萄糖有药用葡萄糖有αα、、ββ两种互变异构体，在水溶液中平两种互变异构体，在水溶液中平衡状态：衡状态： （二）葡萄糖注射液的含量测定（二）葡萄糖注射液的含量测定样品浓度与旋光度的关系样品浓度与旋光度的关系 式中［式中［αα］］为比旋度；为比旋度；l l为测定管长度，为测定管长度，dmdm；；α α 为测得的旋光度；为测得的旋光度； C C1 1为每为每100100mlml溶液中含有葡萄糖的溶液中含有葡萄糖的重量，重量，g g（（按干燥品或无水物计算）按干燥品或无水物计算） C C为每为每100100mlml溶液中含溶液中含有无水葡萄糖的重量，有无水葡萄糖的重量，g g（（按干燥品或无水物按干燥品或无水物计算）计算） 198.17为含水葡萄糖的分子量，为含水葡萄糖的分子量，180.16为无水葡萄糖的分子量。

为无水葡萄糖的分子量 由上式可计算出由上式可计算出100100mlml供试供试品溶液中含一分子结晶水葡品溶液中含一分子结晶水葡萄萄( (C C6 6H H1212O O6 6·H H2 2O)O)的质量的质量( (g)g) 【实例分析】【实例分析】 精密量取本品适量（约相当于葡萄糖精密量取本品适量（约相当于葡萄糖20g20g），），置置100100mlml量瓶中，加氨试液量瓶中，加氨试液0.20.2mlml（（10%10%或或10%10%以下规格的本品可直接取以下规格的本品可直接取样测定），用水稀释至刻度，摇匀，静置样测定），用水稀释至刻度，摇匀，静置1010分钟依法测定旋光度，与分钟依法测定旋光度，与2.08522.0852相乘，相乘，即得供试品中含有即得供试品中含有C C6 6H H12120 06 6·H H2 20 0的重量的重量( (g)g)         由于例中葡萄糖注射液的浓度为由于例中葡萄糖注射液的浓度为20%，，测定时需稀释，新配置的葡萄糖溶液由于测定时需稀释，新配置的葡萄糖溶液由于变旋未达平衡，所测旋光度不稳定，所以变旋未达平衡，所测旋光度不稳定，所以要加入少量的氨试液，可使变旋加速而达要加入少量的氨试液，可使变旋加速而达到平衡。

到平衡（三）葡萄糖氯化钠注射液含量测定（三）葡萄糖氯化钠注射液含量测定             1、葡萄糖、葡萄糖    旋光度法旋光度法             2、氯化钠、氯化钠    银量法银量法                               （吸附指示剂法）（吸附指示剂法）糊精溶液糊精溶液硼砂溶液硼砂溶液 葡葡萄萄糖糖 取取本本品品，，照照葡葡萄萄糖糖注注射射液液项项下下的的方方法法测测定，即得定，即得 氯化钠氯化钠 精密量取本品精密量取本品2020mlml，，加水加水3030mlml，，加加2 2 ％％糊精溶液糊精溶液5 5ml ml 、、2.5 2.5 ％％硼砂溶液硼砂溶液 2 2mlml与与荧光黄荧光黄指示液指示液5 5～～8 8滴，用硝酸银滴定液滴，用硝酸银滴定液(0.1(0.1mol/L)mol/L)滴滴定每1 1mlml的硝酸银滴定液的硝酸银滴定液(0.1(0.1mol/L)mol/L)相当于相当于5.8445.844mg mg 的的NaClNaCl   1、含义：、含义：           糖糖类类和和有有羟羟基基的的非非糖糖有有机机化化合合物物缩缩合合成成环环状状缩缩醛醛结结构构的的化化合合物物，，其其水水解解产产生生糖糖+非非糖糖类类化化合合物物（（苷苷元元或称配基）或称配基）二、苷类二、苷类 2、分类：按苷元的结构分为：、分类：按苷元的结构分为：   （（1）） 氰苷类（如苦杏仁苷）氰苷类（如苦杏仁苷）   （（2）） 蒽苷类（如大黄酚）蒽苷类（如大黄酚）   （（3）） 黄酮苷类（如芦丁）黄酮苷类（如芦丁）   （（4））甾甾体体强强心心苷苷类类（（如如洋洋地地黄黄毒毒苷）苷）   （（5）皂苷类（如甘草皂苷））皂苷类（如甘草皂苷） 3、构成天然苷类的糖、构成天然苷类的糖   (1) 葡萄糖；葡萄糖；   (2) 其他的五碳糖、六碳糖；其他的五碳糖、六碳糖；   (3) 特殊的去氧糖类（洋地黄毒苷）特殊的去氧糖类（洋地黄毒苷） 洋地黄毒苷洋地黄毒苷(Digitoxin) 毛花苷毛花苷C(Lanatoside C) 毒毛花苷毒毛花苷K(β-Strophanthin-K) 铃兰毒苷铃兰毒苷(Convallatoxin)  4、性质、性质    （（1）） 味味苦苦，，中中性性（（有有的的呈呈酸酸性性，，也有呈碱性，称生物碱苷）也有呈碱性，称生物碱苷）   （（2）） 多多为为白白色色结结晶晶，，易易溶溶于于水水，，不不溶溶于于甲甲醇醇、、乙乙醇醇，，难难溶溶于于非非极极性性溶溶剂剂中中。

强强心心苷苷类类难难溶溶于于水水，，可可溶溶于乙醇及氯仿于乙醇及氯仿 5、、  鉴别鉴别（（1 1））  天天然然产产的的苷苷类类: :均均呈呈左左旋旋性性，，无无还还原原性性但但当当苷苷在在碱碱性性或或酸酸性性下下水水解解后后, ,生生成成苷苷元元和和糖糖类类, ,后后者者多多为为右右旋旋且且具具有有还原性还原性   鉴别方法：鉴别方法：    天然苷：左旋性，无还原性天然苷：左旋性，无还原性 已水解苷：右旋，有还原性已水解苷：右旋，有还原性（（2））Keller-Kiliani反应反应             -去氧糖的反应去氧糖的反应            如如    洋地黄毒苷洋地黄毒苷        地高辛地高辛两液层界面显两液层界面显 棕色棕色FeCl3靛蓝色靛蓝色（（3））Kedde反应反应    不饱和内酯的反应不饱和内酯的反应            如如   去乙酰毛花苷去乙酰毛花苷 醇制醇制KOH红紫色红紫色（（4）纸色谱）纸色谱    地高辛地高辛6.6.特殊杂质检查特殊杂质检查 1、洋地黄毒苷、洋地黄毒苷      洋地黄皂苷洋地黄皂苷                              （灵敏度法）（灵敏度法）2、地高辛、地高辛              洋地黄毒苷洋地黄毒苷                                7、、  含量测定含量测定    ChP2010对对洋洋地地黄黄毒毒苷苷采采用用比比色色法法、、荧光法或色谱法测定。

荧光法或色谱法测定 （（1）比色法：）比色法：   洋洋地地黄黄毒毒苷苷原原料料、、洋洋地地黄黄毒毒苷苷注注射射液液采采用用碱碱性性三三硝硝基基苯苯酚酚显显色色后后，，于于485nm处比色测定处比色测定 （（2））荧光法：荧光法：   洋洋地地黄黄毒毒苷苷片片剂剂含含量量测测定定、、含含量量均均匀匀度度检检查查、、溶溶出出度度采采用用荧荧光光法法测测定定是是利利用用洋洋地地黄黄毒毒苷苷+VC+H2O2+HCl→产产生生荧荧光光（（激激发发波波长长360nm，，发发射射波波长长485nm）1.葡萄糖中加入碘试液可检查的杂质是葡萄糖中加入碘试液可检查的杂质是A.A.重金属重金属B.B.亚硫酸盐亚硫酸盐C.C.可溶性淀粉可溶性淀粉D.D.铁盐铁盐E.E.砷盐砷盐 (BC)2:旋光法测定葡萄糖注射液时，旋光法测定葡萄糖注射液时，加入适量氨试液的目的是加入适量氨试液的目的是 A.A.促进变旋平衡促进变旋平衡 B.B.促使葡萄糖溶解促使葡萄糖溶解 C.C.调节调节pH pH D.D.防止葡萄糖水解防止葡萄糖水解 E.E.防止葡萄糖氧化防止葡萄糖氧化 (A) 3.葡葡萄萄糖糖酸酸钙钙中中蔗蔗糖糖或或还还原原糖糖类类检检查查用用的试剂是的试剂是          A、、碱性焦性没食子酸试液碱性焦性没食子酸试液          B、、碱性亚硝基铁氰化钠试液碱性亚硝基铁氰化钠试液          C、、碱性碱性 -萘酚试液萘酚试液          D、、碱性碘化汞钾试液碱性碘化汞钾试液          E、、碱性酒石酸铜试液碱性酒石酸铜试液 4.蔗蔗糖糖加加硫硫酸酸煮煮沸沸后后，，用用氢氢氧氧化化钠钠试试液液中中和和，，再加何种试液，再加何种试液， 产生红色沉淀产生红色沉淀          A、、过氧化氢试液过氧化氢试液          B、、硝酸银试液硝酸银试液          C、、碱性酒石酸铜试液碱性酒石酸铜试液          D、、亚硫酸钠试液亚硫酸钠试液          E、、硫代乙酰胺试液硫代乙酰胺试液 5.葡萄糖中存在的特殊杂质为葡萄糖中存在的特殊杂质为          A、、糊精糊精          B、、氯化物氯化物          C、、砷盐砷盐          D、、酒精酒精          E、、盐酸盐酸 6.取取乳乳糖糖5.0g，，加加热热水水25ml溶溶解解，，放放冷冷，，加加硝硝酸酸汞汞试试液液5ml，，5分分钟钟内内不不得得产产生生白白色色絮絮状沉淀，这是检查状沉淀，这是检查          A.  氯化物氯化物          B.  溶液澄清度溶液澄清度          C.  淀粉淀粉          D.  蛋白质类杂质蛋白质类杂质          E.  溶液颜色溶液颜色 7.葡萄糖注射液的含量测定方法为葡萄糖注射液的含量测定方法为          A.  酸碱滴定法酸碱滴定法          B.  旋光度法旋光度法          C.  银量法银量法          D.  紫外分光光度法紫外分光光度法          E.  可见分光光度法可见分光光度法 8.用用旋旋光光度度测测定定法法测测定定葡葡萄萄糖糖氯氯化化钠钠液液时时，，加入氨试液的作用加入氨试液的作用            A、、分离氯化钠分离氯化钠            B、、提高灵敏度提高灵敏度            C、、产生旋光性产生旋光性            D、、加速加速D—葡萄糖葡萄糖 和和 两种互变两种互变                   异构体互变平衡的到达异构体互变平衡的到达            E、、加速加速 异构体变为异构体变为 异构体异构体 9.葡葡 萄萄 糖糖 的的 Fehling反反 应应 所所 需需 要要 的的              试剂是试剂是     A、、硝酸银硝酸银     B、、碱性酒石酸铜碱性酒石酸铜     C、、硫酸铜硫酸铜     D、、三氯化铁三氯化铁     E、、四氮唑盐四氮唑盐        10.于于碱碱性性溶溶液液中中能能和和芳芳香香硝硝基基化化合合物物（如二硝基苯甲酸）进行反应，生成红紫（如二硝基苯甲酸）进行反应，生成红紫    色产物（色产物（Kedde反应）的药物应是反应）的药物应是   A、、对氨基水杨酸对氨基水杨酸   B、、异烟肼异烟肼   C、、盐酸吗啡盐酸吗啡   D、、去乙酰毛花苷去乙酰毛花苷   E、、磺胺噻唑磺胺噻唑 配伍题配伍题[1～～4]       A、、Keller-Kiliani反应反应     B、、Kedde反应反应             C、、Fehling反应反应        D、、TLC1、、葡萄糖注射液的鉴别反应是葡萄糖注射液的鉴别反应是2、洋地黄毒苷的鉴别是、洋地黄毒苷的鉴别是3、去乙酰毛花苷的鉴别反应是、去乙酰毛花苷的鉴别反应是4、用于去乙酰毛花苷有关物质检查的方法、用于去乙酰毛花苷有关物质检查的方法CABD。