细胞分化和基因表达调控.ppt

细胞分化和基因表达调控l(三三) 细胞衰老的分子机制细胞衰老的分子机制l1. 端粒与衰老端粒与衰老l2. 胁迫诱导的早熟性衰老胁迫诱导的早熟性衰老, 即氧化性损伤即氧化性损伤学说学说.l3. 单细胞生物的衰老单细胞生物的衰老, 即即rDNA与衰老与衰老.第十四章第十四章 细胞分化与基因表达调空细胞分化与基因表达调空细胞分化（细胞分化（cell differentiation）：在个体发育中由一种相同细胞类型经细胞分）：在个体发育中由一种相同细胞类型经细胞分裂后逐渐在形态、结构和功能上形成稳定性差异，产生不同细胞类群的过程裂后逐渐在形态、结构和功能上形成稳定性差异，产生不同细胞类群的过程 从本质上讲，细胞分化是从化学分化到形态、功能分化的过程，其特点：从本质上讲，细胞分化是从化学分化到形态、功能分化的过程，其特点：（（1）个体中所有不同种类的细胞都是来自共同的母细胞）个体中所有不同种类的细胞都是来自共同的母细胞——受精卵，他们的受精卵，他们的遗传物质完全相同，也就是说它们的遗传背景完全一样基因组保持相同）遗传物质完全相同，也就是说它们的遗传背景完全一样基因组保持相同）（（2）分化细胞彼此之间在形态、结构、功能方面的不同是由于其拥有不同的）分化细胞彼此之间在形态、结构、功能方面的不同是由于其拥有不同的蛋白质所致，即分化的关键在于特异性蛋白质的合成，而特异性蛋白质合成的蛋白质所致，即分化的关键在于特异性蛋白质的合成，而特异性蛋白质合成的实质在于基因选择性表达。

如平滑肌细胞呈菱形，功能是收缩，其原因是肌细实质在于基因选择性表达如平滑肌细胞呈菱形，功能是收缩，其原因是肌细胞合成了肌动蛋白、肌球蛋白红细胞，合成了血红蛋白，运输氧和胞合成了肌动蛋白、肌球蛋白红细胞，合成了血红蛋白，运输氧和CO2））（表达基因有所不同）表达基因有所不同）3）稳定性分化细胞最显著的特点是分化状态的稳定性特别是高等真核）稳定性分化细胞最显著的特点是分化状态的稳定性特别是高等真核细胞生物中，分化状态一旦建立，其分化状态是十分稳定的细胞分化不同于细胞生物中，分化状态一旦建立，其分化状态是十分稳定的细胞分化不同于一般的细胞生理活动引起的变化，如激素所引起的变化，当激素作用消失后，一般的细胞生理活动引起的变化，如激素所引起的变化，当激素作用消失后，细胞又恢复到原来状态，细胞分化不同，它不会自动逆转细胞又恢复到原来状态，细胞分化不同，它不会自动逆转4）可逆性虽然细胞分化是一种相对稳定和持久的过程，但在一定的条件）可逆性虽然细胞分化是一种相对稳定和持久的过程，但在一定的条件下，细胞分化又是可逆的，这是因为分化细胞保持有全部的基因，在适当的条下，细胞分化又是可逆的，这是因为分化细胞保持有全部的基因，在适当的条件下去分化，如植物的全能性。

去分化的条件：件下去分化，如植物的全能性去分化的条件：1）细胞核处在有利于分化细胞）细胞核处在有利于分化细胞逆转的特定环境逆转的特定环境2）只发生在具有增殖能力的组织中只发生在具有增殖能力的组织中3）具备相应的遗传基）具备相应的遗传基础P469表14-1第一节第一节 细胞分化细胞分化一一.细胞分化的基本概念细胞分化的基本概念(一一)细胞分化是基因选择性表达的结果细胞分化是基因选择性表达的结果 细胞分化是由于基因选择性的表达各自特有的专一性蛋白质而导致细胞形态，细胞分化是由于基因选择性的表达各自特有的专一性蛋白质而导致细胞形态，结构与功能的差异结构与功能的差异Blotting(印迹印迹)：泛指通过毛细作用或电场作用，将蛋白、：泛指通过毛细作用或电场作用，将蛋白、RNA、、DNA分子从一分子从一个相对厚的丙烯酰胺或琼脂糖凝胶转移到一个纸状膜（通常为尼龙或硝化纤维）个相对厚的丙烯酰胺或琼脂糖凝胶转移到一个纸状膜（通常为尼龙或硝化纤维）而保持分子原有构型的过程一旦转移到膜上，分子便不能再移动（最典型的是而保持分子原有构型的过程一旦转移到膜上，分子便不能再移动（最典型的是通过烘烤或紫外线照射），随后通过高敏感性杂交（对于通过烘烤或紫外线照射），随后通过高敏感性杂交（对于RNA和和DNA）或抗体）或抗体标记（对于蛋白质），可对这些分子进行检验。

标记（对于蛋白质），可对这些分子进行检验1））RNA印迹称为印迹称为Northern印印迹；（迹；（2））DNA印迹称为印迹称为Southern印迹；（印迹；（3）蛋白质印迹称为）蛋白质印迹称为Western印迹(二二)组织特异性基因与管家基因组织特异性基因与管家基因 细胞分化是通过严格而精密调控的基因表达实现的分化细胞基因组中所细胞分化是通过严格而精密调控的基因表达实现的分化细胞基因组中所表达的基因大致可分为两种基本类型：表达的基因大致可分为两种基本类型：（（1）管家基因）管家基因(house-keeping genes)：管家基因是指所有细胞中均要表达的一类：管家基因是指所有细胞中均要表达的一类基因，其产物是对维持细胞基本生命活动所必需的如微管蛋白基因、糖酵解酶基因，其产物是对维持细胞基本生命活动所必需的如微管蛋白基因、糖酵解酶系基因与核糖体蛋白基因等系基因与核糖体蛋白基因等2）组织特异性基因）组织特异性基因(tissue-specific genes)，或称奢侈基因，或称奢侈基因(1uxury genes)：组织：组织特异性基因是指不同的细胞类型进行特异性表达的基因，其产物赋予各种类型细特异性基因是指不同的细胞类型进行特异性表达的基因，其产物赋予各种类型细胞特异的形态结构特征与特异的生理功能。

如卵清蛋白基因、上皮细胞的角质蛋胞特异的形态结构特征与特异的生理功能如卵清蛋白基因、上皮细胞的角质蛋白基因和胰岛素基因等白基因和胰岛素基因等 有人还进一步分出一类调节基因有人还进一步分出一类调节基因(regulatory gene)3）调节基因：其产物用于调节组织特异性基因的表达，或者起激活作用，或）调节基因：其产物用于调节组织特异性基因的表达，或者起激活作用，或者起阻抑作用者起阻抑作用 细胞分化的实质是组织特异性基因在时间与空间上的差异表达这种差异表细胞分化的实质是组织特异性基因在时间与空间上的差异表达这种差异表达不仅涉及：达不仅涉及：1）基因转录水平）基因转录水平 ；；2）转录后加工水平；）转录后加工水平； 3）染色体和）染色体和DNA水平；水平； 4）翻译水平；）翻译水平； 5）翻译后加工与修饰水平在不同水平上的复杂而严格的调控过）翻译后加工与修饰水平在不同水平上的复杂而严格的调控过程 应用生物芯片技术可在不同程度上分析分化细胞中的组织特异性基因及其相应用生物芯片技术可在不同程度上分析分化细胞中的组织特异性基因及其相关蛋白这也是功能基因组学研究的主要手段与内容之一。

关蛋白这也是功能基因组学研究的主要手段与内容之一l(三三)组合调控引发组织特异性基因的表达组合调控引发组织特异性基因的表达l 人体至少有人体至少有200种不同类型种不同类型(有的学者认为有有的学者认为有500种以上种以上)的细的细胞如果每种类型的细胞分化都需要一种调控蛋白胞如果每种类型的细胞分化都需要一种调控蛋白(调节基因的产调节基因的产物物)的话，那么至少需要的话，那么至少需要200种的调控蛋白，然而实际上启动为数种的调控蛋白，然而实际上启动为数众多的特异细胞类型分化程序的是有限的少量调控蛋白，其机制众多的特异细胞类型分化程序的是有限的少量调控蛋白，其机制就是组合调控就是组合调控(combinational control)，即每种类型的细胞分化是，即每种类型的细胞分化是由多种调控蛋白共同调控完成的这样，如果调控蛋白的数目是由多种调控蛋白共同调控完成的这样，如果调控蛋白的数目是n，则其调控的组合在理论上可以启动分化的细胞类型为，则其调控的组合在理论上可以启动分化的细胞类型为2n(P471图图14-1)l当有当有3种调控蛋白存在时，则不同的组合就可能启动种调控蛋白存在时，则不同的组合就可能启动8种不同细胞种不同细胞类型的分化。

类型的分化l在启动细胞分化的各类调节蛋白中，往往存在一两种起决定作用在启动细胞分化的各类调节蛋白中，往往存在一两种起决定作用的调控蛋白，编码这种蛋白的基因称为主导基因的调控蛋白，编码这种蛋白的基因称为主导基因(master gene)因此，有时单一调控蛋白表达就有可能启动整个细胞分化过程因此，有时单一调控蛋白表达就有可能启动整个细胞分化过程例如例如MyoD是一种在成肌细胞分化为骨骼肌细胞过程中的关键性是一种在成肌细胞分化为骨骼肌细胞过程中的关键性调控蛋白如将其转人体外培养的成纤维细胞中表达，结果使来调控蛋白如将其转人体外培养的成纤维细胞中表达，结果使来自皮肤结缔组织的成纤维细胞表现出骨骼肌细胞的特征，例如表自皮肤结缔组织的成纤维细胞表现出骨骼肌细胞的特征，例如表达大量的肌球蛋白并形成收缩装置，在质膜上产生对神经刺激敏达大量的肌球蛋白并形成收缩装置，在质膜上产生对神经刺激敏感的受体蛋白和离子通道蛋白，并融合成肌细胞样的多核细胞等感的受体蛋白和离子通道蛋白，并融合成肌细胞样的多核细胞等显然，在成纤维细胞中已经具备了肌细胞特异性基因表达所需要显然，在成纤维细胞中已经具备了肌细胞特异性基因表达所需要的其他必要调控蛋白，一旦加入的其他必要调控蛋白，一旦加入MyoD后，即形成了启动肌细胞后，即形成了启动肌细胞分化的特异调控蛋白组合。

分化的特异调控蛋白组合l l l 在眼器官的发育中，有一种关键性调控在眼器官的发育中，有一种关键性调控蛋白称蛋白称Ey(Ey(果蝇果蝇) )或或Pax—6(Pax—6(脊椎动物脊椎动物) )如把果蝇蝇eyey基因转入到将成腿的早期发育细胞中表达，基因转入到将成腿的早期发育细胞中表达，结果结果eyey基因的异位表达，诱导产生构成眼的不基因的异位表达，诱导产生构成眼的不同类型细胞的有序三维组合，最终在腿的中部同类型细胞的有序三维组合，最终在腿的中部形成眼显然形成眼显然EyEy蛋白除了能启动细胞某些特异蛋白除了能启动细胞某些特异基因的表达，诱导某种类型细胞分化外，其启基因的表达，诱导某种类型细胞分化外，其启动的某些基因本身的表达产物可能又是另一些动的某些基因本身的表达产物可能又是另一些基因的调节蛋白，它们进一步启动其他特异基基因的调节蛋白，它们进一步启动其他特异基因表达，诱导分化更多的细胞类型，形成由多因表达，诱导分化更多的细胞类型，形成由多种不同类型细胞组成的有序三维群体，即导致种不同类型细胞组成的有序三维群体，即导致器官形成器官形成l 这类通过一种关键性调节蛋白对其他调节这类通过一种关键性调节蛋白对其他调节蛋白的级联启动，是一种令人惊奇的高效而经蛋白的级联启动，是一种令人惊奇的高效而经济的细胞分化启动机制。

复杂的有机体正是通济的细胞分化启动机制复杂的有机体正是通过这一机制的重复运行逐渐完成形态建成的过这一机制的重复运行逐渐完成形态建成的 ◇◇1995年年，，瑞瑞士士科科学学家家Walter Gehring及及其其同同事事建建立立了了异异位位表表达达（（ectopic expression））果果蝇蝇的的eyeless基因或小鼠的基因或小鼠的Pax6基因的转基因果蝇基因的转基因果蝇 ◇◇上上述述基基因因异异位位表表达达的的结结果果导导致致在在转转基基因因果果蝇蝇眼眼睛睛以以外外的的组组织织中中（（如如触触角角、、腿腿上上））诱诱导导长长出出了了完完整整的的果蝇复眼果蝇复眼 ◇◇上上述述结结果果证证明明了了无无脊脊椎椎和和脊脊椎椎动动物物的的眼眼形形成成基基因因在分子水平上是同源的在分子水平上是同源的发育调控基因在功能上的保发育调控基因在功能上的保守性守性－－－－eyeless and Pax-6Ectopic expression of eyeless or Pax6 l(四四)单细胞有机体的细胞分化单细胞有机体的细胞分化l 单细胞生物分化多为适应不同的生活环境，单细胞生物分化多为适应不同的生活环境，而多细胞有机体细胞是通过细胞分化构建执行而多细胞有机体细胞是通过细胞分化构建执行不同功能的组织与器官。

不同功能的组织与器官l(1)如枯草杆菌芽孢的形成；如枯草杆菌芽孢的形成；l(2)啤酒酵母单倍体孢子的形成及萌发形成的啤酒酵母单倍体孢子的形成及萌发形成的α和和a两种交配型两种交配型l(3)黏菌黏菌(如盘形网柱黏菌如盘形网柱黏菌Dictyostelium discoideum)在孢子形成过程中，由单细胞变形在孢子形成过程中，由单细胞变形体形成的蛞蝓形假原质团体形成的蛞蝓形假原质团(pseudoplasmodium)，并进一步分化成为柄和孢子的过程，均涉及，并进一步分化成为柄和孢子的过程，均涉及一系列特异基因的表达这也是研究低等生物一系列特异基因的表达这也是研究低等生物体细胞分化很好的材料体细胞分化很好的材料•去分化（去分化（dedifferentiation）：）：或脱分化，细胞改变原来的分化状态，失去原来的结构和功能，成为一个具有未分化细胞特性的细胞的过程如植物的愈伤组织•转分化（转分化（transdifferentiation）：）：一种类型的分化细胞转化成另一种类型的分化细胞的现象转分化往往经历去分化和再分化（redifferentiation）•再生再生(regeneration):指生物体缺失部分后的重建部分。

l二、影响细胞分化的因素二、影响细胞分化的因素l 通过组合调控的方式启动组织特异性基因的表达是细胞分化通过组合调控的方式启动组织特异性基因的表达是细胞分化的基本机制的基本机制一一)细胞的全能性细胞的全能性l细胞全能性细胞全能性(totipotency)：是指细胞经分裂和分化后仍具有产生完：是指细胞经分裂和分化后仍具有产生完整有机体的潜能或特性，称为细胞的全能性如受精卵及早期的整有机体的潜能或特性，称为细胞的全能性如受精卵及早期的胚胎细胞都是具有全能性的细胞植物的体细胞在适宜的条件下胚胎细胞都是具有全能性的细胞植物的体细胞在适宜的条件下可培育成正常的植株，这不仅是细胞全能性的有力证据，而且也可培育成正常的植株，这不仅是细胞全能性的有力证据，而且也广泛地应用在植物基因工程的实践中广泛地应用在植物基因工程的实践中l多潜能性多潜能性(pluripotency)：细胞随着胚胎的发育，细胞逐渐丧失了：细胞随着胚胎的发育，细胞逐渐丧失了发育成个体的能力，仅具有分化成有限细胞类型及构建组织的潜发育成个体的能力，仅具有分化成有限细胞类型及构建组织的潜能，这种潜能称为多潜能性能，这种潜能称为多潜能性(pluripotency)。

具有多潜能性的细胞具有多潜能性的细胞称为干细胞称为干细胞(stem cell)，如小鼠胚胎发育的囊胚期的原始内层细胞，如小鼠胚胎发育的囊胚期的原始内层细胞称为胚胎干细胞称为胚胎干细胞(embryostemcell)；成体中具有分化成多种血细胞；成体中具有分化成多种血细胞能力的细胞称多能造血干细胞能力的细胞称多能造血干细胞(图图)，它在造血器官骨髓中仅占细胞，它在造血器官骨髓中仅占细胞数的万分之一；数的万分之一；l单能性：仅具有分化形成某一种类型能力的细胞，称为单能干细单能性：仅具有分化形成某一种类型能力的细胞，称为单能干细胞胞(monopotential cell)或称定向干细胞或称定向干细胞(directionalstem cell)由定向干细胞最终形成特化细胞类型的过程称为终末分化向干细胞最终形成特化细胞类型的过程称为终末分化(terminaldifferentiation)l 一般情况下，在整个发育过程中，细胞分化潜能逐渐受到限一般情况下，在整个发育过程中，细胞分化潜能逐渐受到限制而变窄，即有全能性制而变窄，即有全能性→多能性多能性→单能干细胞单能干细胞→终末分化终末分化。

l 但对细胞核而言，始终保持分化的全能性但对细胞核而言，始终保持分化的全能性 克隆羊的诞生￿￿￿￿￿￿￿￿1997年2月27日，Nature 385期发表了英国爱丁堡Roslin研 究 所Wilmut和Cambell小 组 的论文，称他们利用羊的乳腺细胞，成功克隆了一只名叫Dolly的羊人ES细胞系的建立1998年年Thomson 建立人胚胎干细胞系（建立人胚胎干细胞系（hES细胞）开启了干细胞研究新的细胞）开启了干细胞研究新的一页一页 组织工程与修复医学组织工程与修复医学2001年年Haseltine提出了再生医学提出了再生医学(regenerative medicine)的概念，这一旨在的概念，这一旨在利用体外构建的自身组织与器官来使患者得以康复的新的治疗理利用体外构建的自身组织与器官来使患者得以康复的新的治疗理念，将会进一步促进细胞分化及其相关领域的研究念，将会进一步促进细胞分化及其相关领域的研究l 高等动物体细胞，根据其分化高等动物体细胞，根据其分化程度和增殖潜能，大体上可分为两程度和增殖潜能，大体上可分为两类：类：l (1)干细胞干细胞(stem cells)：处于相对：处于相对未分化状态，一直保持着分裂能力未分化状态，一直保持着分裂能力的细胞，它通过分裂不断补充消耗的细胞，它通过分裂不断补充消耗的细胞。

如造血干细胞、小肠隐窝的细胞如造血干细胞、小肠隐窝干细胞l (2)功能细胞：高度特化不再分裂功能细胞：高度特化不再分裂的细胞，执行一定时间的功能之后的细胞，执行一定时间的功能之后即被清除，如成熟的红细胞、肠绒即被清除，如成熟的红细胞、肠绒毛上皮细胞毛上皮细胞l干干细细胞胞(stem (stem cell)cell)：：成成体体的的许许多多组组织织中中都都保保留留一一些些未未分分化化的的细细胞胞，，当当机机体体需需要要时时这这些些细细胞胞便便可可按按发发育育的的途途径径分分裂裂分分化化产产生生特特定定的的细细胞，机体组织中这种未分化细胞称为干细胞胞，机体组织中这种未分化细胞称为干细胞l干细胞有两种分类方法：干细胞有两种分类方法：l第第一一种种分分类类方方法法是是根根据据干干细细胞胞所所处处的的发发育育阶阶段段分分为为胚胚胎胎干干细细胞胞和和成成体体干干细细胞胞胚胚胎胎干干细细胞胞包包括括ESES细细胞胞（（Embryonic Embryonic Stem Stem CellCell））、、EG EG 细细胞胞（（Embryonic Embryonic Germ Germ CellCell））；；成成体体干干细细胞胞包包括括神神经经干干细细胞胞（（Neural Neural Stem Stem Ce11Ce11，， NSCNSC））、、血血液液干干细细胞胞（（Hematopoietic Hematopoietic Stem Stem CellCell，，HSCHSC））、、骨骨髓髓间间充充质质干干细细胞胞（（Mesen Mesen chymal chymal Stem Stem CellCell，，MSCMSC），表皮干细胞（），表皮干细胞（EPidexmis Stem CellEPidexmis Stem Cell）等。

等l第第二二种种分分类类方方法法是是根根据据干干细细胞胞的的发发育育潜潜能能分分为为三三类类：：全全能能干干细细胞胞 、多能干细胞和单能干细胞多能干细胞和单能干细胞l干细胞具有几个显著的特点：干细胞具有几个显著的特点：l(1)(1)干干细细胞胞本本身身不不是是终终末末分分化化细细胞胞( (即即干干细细胞胞不不是是处处于于分分化化途途径径的的终端终端) )；；l(2)(2)干细胞能无限地分裂；干细胞能无限地分裂；l(3)(3)干干细细胞胞分分裂裂产产生生的的子子细细胞胞只只能能在在两两种种途途径径中中选选择择其其一一，，或或保保持持亲亲代代特特征征，，仍仍作作为为干干细细胞胞，，或或不不可可逆逆地地向向终终末末分分化化从从功功能能上上来来讲讲，，干干细细胞胞不不是是执执行行已已分分化化细细胞胞的的功功能能，，而而是是产产生生具具有有分分化化功功能能的细胞 l影响细胞分化的因素：影响细胞分化的因素：l 1.1.细胞外信号分子对细胞分化的影响细胞外信号分子对细胞分化的影响l胚胎诱导（胚胎诱导（embryonic inductionembryonic induction））: :在胚胎发育过程中，一部分在胚胎发育过程中，一部分细胞会影响周围细胞使其向一定方向分化，这种作用称近端组织细胞会影响周围细胞使其向一定方向分化，这种作用称近端组织的相互作用的相互作用(promixate tissue interaction)(promixate tissue interaction)，也称为胚胎诱导，也称为胚胎诱导(embryonic induction)(embryonic induction)。

l 近端组织的相互作用主要通过细胞（近端组织的相互作用主要通过细胞（1 1））旁分泌产生的信号分旁分泌产生的信号分子子旁泌素旁泌素( (又称细胞生长分化因子又称细胞生长分化因子) )来实现的已知的这类因子包来实现的已知的这类因子包括成纤维细胞生长因子括成纤维细胞生长因子(fibroblast growthfactor(fibroblast growthfactor，，FGF)FGF)、转化、转化生长因子生长因子(transforming growth factor(transforming growth factor，，TGF)TGF)以及以及hedgehoghedgehog家族、家族、WntWnt家族和家族和JuxtacrineJuxtacrine等五大家族因子与激素一样，它们都是影等五大家族因子与激素一样，它们都是影响细胞分化的重要的信号分子响细胞分化的重要的信号分子l 另一种远距离细胞间相互作用对细胞分化的影响主要是通过另一种远距离细胞间相互作用对细胞分化的影响主要是通过（（2 2））激素激素来调节的如无尾两栖类的蝌蚪变态过程中，尾部退化来调节的如无尾两栖类的蝌蚪变态过程中，尾部退化及前后肢形成等变化是由甲状腺分泌的甲状腺素和三碘甲状腺原及前后肢形成等变化是由甲状腺分泌的甲状腺素和三碘甲状腺原氨酸增加所致，昆虫变态过程主要是由氨酸增加所致，昆虫变态过程主要是由20—20—羟蜕皮素和保幼素共羟蜕皮素和保幼素共同调控的。

人体血细胞定向分化也受到多种细胞因子的调控同调控的人体血细胞定向分化也受到多种细胞因子的调控l2. 细胞的记忆与决定细胞的记忆与决定l细胞决定细胞决定(cell determination):细胞分化具有严格的方向性，细胞细胞分化具有严格的方向性，细胞在未出现分化在未出现分化 l 细胞的特征之前，分化的方向就已由细胞内部的变化及细胞的特征之前，分化的方向就已由细胞内部的变化及受周围环境受周围环境l 的影响而决定，这一现象称为细胞决定的影响而决定，这一现象称为细胞决定 l 细胞决定在发生可识别的形态变化之前，就已受到约束细胞决定在发生可识别的形态变化之前，就已受到约束而向特定方而向特定方l 向分化这时细胞内部已发生变化，确定了未来的发育向分化这时细胞内部已发生变化，确定了未来的发育命运，这就命运，这就l 是决定细胞在这种决定状态下，沿特定类型分化的能是决定细胞在这种决定状态下，沿特定类型分化的能力已经稳定力已经稳定l 下来，一般不会中途改变。

下来，一般不会中途改变·l 细胞的决定与细胞的记忆有关，而细胞记忆可能通过两种方细胞的决定与细胞的记忆有关，而细胞记忆可能通过两种方式实现：一是正反馈途径式实现：一是正反馈途径(positivefeedback loop)，即细胞接受信，即细胞接受信号刺激后，活化转录调节因子，该因子不仅诱导自身基因的表达，号刺激后，活化转录调节因子，该因子不仅诱导自身基因的表达，还诱导其他组织特异性基因的表达；二是染色质结构变化还诱导其他组织特异性基因的表达；二是染色质结构变化(DNA与与蛋白相互作用及其修饰蛋白相互作用及其修饰)的信息传到子代细胞，如同两条的信息传到子代细胞，如同两条X染色体染色体中，其中一条始终保持凝集失活状态并可在细胞世代间稳定遗传中，其中一条始终保持凝集失活状态并可在细胞世代间稳定遗传一样上述细胞记忆的机制也可以用来解释某些能够继续增殖的一样上述细胞记忆的机制也可以用来解释某些能够继续增殖的终末分化细胞，如平滑肌细胞和肝细胞，分裂后只能产生与亲代终末分化细胞，如平滑肌细胞和肝细胞，分裂后只能产生与亲代相同的细胞类型相同的细胞类型l3．受精卵细胞质的不均一性对细胞分化的影响．受精卵细胞质的不均一性对细胞分化的影响l 由于细胞具有记忆能力，随着分化信息不断地积累使之成为由于细胞具有记忆能力，随着分化信息不断地积累使之成为已已“决定决定”的细胞，这种与细胞分化相关的信息在很多动物中可的细胞，这种与细胞分化相关的信息在很多动物中可以上溯至受精卵。

在卵母细胞的细胞质中除了储存有营养物质和以上溯至受精卵在卵母细胞的细胞质中除了储存有营养物质和多种蛋白外，还含有多种多种蛋白外，还含有多种mRNA，其中多数，其中多数mRNA与蛋白质结合与蛋白质结合处于非活性状态，成为隐蔽处于非活性状态，成为隐蔽mRNA，不能被核糖体识别然而它，不能被核糖体识别然而它们在卵细胞质中呈不均匀分布，特别是某些动物如柄海鞘、两栖们在卵细胞质中呈不均匀分布，特别是某些动物如柄海鞘、两栖动物等动物等·，在受精后卵细胞质重新定位，少数母体，在受精后卵细胞质重新定位，少数母体mRNA被激活，被激活，合成早期胚胎发育所需要的蛋白质随着受精卵早期细胞分裂，合成早期胚胎发育所需要的蛋白质随着受精卵早期细胞分裂，隐蔽隐蔽mRNA不均一地分配到子细胞中通过对角贝和海胆受精卵不均一地分配到子细胞中通过对角贝和海胆受精卵发育的研究证明，在卵裂过程中不同的细胞质分配到不同的子细发育的研究证明，在卵裂过程中不同的细胞质分配到不同的子细胞中，从而决定未来细胞分化的命运，产生分化方向的差异根胞中，从而决定未来细胞分化的命运，产生分化方向的差异根据这一现象，人们提出了决定子据这一现象，人们提出了决定子(determinant)的概念，即指影响的概念，即指影响卵裂细胞向不同方向分化的细胞质成分。

通过对果蝇生殖细胞和卵裂细胞向不同方向分化的细胞质成分通过对果蝇生殖细胞和体细胞分化过程的比较研究，证明了果蝇卵细胞后端存在决定生体细胞分化过程的比较研究，证明了果蝇卵细胞后端存在决定生殖细胞分化的细胞质成分即生殖质殖细胞分化的细胞质成分即生殖质(germ plasm)，它是种质细胞的，它是种质细胞的决定子，这一现象普遍存在于动物界决定子，这一现象普遍存在于动物界l 显然决定细胞向某一方向分化的初始信息储存于卵细胞中，显然决定细胞向某一方向分化的初始信息储存于卵细胞中，在很多物种中，卵裂后的细胞所携带的信息已开始有所不同，这在很多物种中，卵裂后的细胞所携带的信息已开始有所不同，这种区别又通过信号分子影响其他细胞产生级联效应这样最初储种区别又通过信号分子影响其他细胞产生级联效应这样最初储存的信息不断被修饰并逐渐形成更为精细更为复杂的指令，最终存的信息不断被修饰并逐渐形成更为精细更为复杂的指令，最终产生分化各异的细胞类型产生分化各异的细胞类型l4. 细胞间的相互作用与位置效应细胞间的相互作用与位置效应l 在胚胎学研究中，人们已注意到细胞间的相互作用对细胞分化在胚胎学研究中，人们已注意到细胞间的相互作用对细胞分化与器官构建的影响，并称这种作用为胚胎诱导。

胚胎诱导作用不与器官构建的影响，并称这种作用为胚胎诱导胚胎诱导作用不断强化并可分成不同的层次虽然人们对胚胎诱导作用的机制还断强化并可分成不同的层次虽然人们对胚胎诱导作用的机制还不清楚，但包括旁泌素等信号分子的作用显然是其重要原因之一不清楚，但包括旁泌素等信号分子的作用显然是其重要原因之一l 细胞所处的位置不同对细胞分化的命运有明显的影响实验证细胞所处的位置不同对细胞分化的命运有明显的影响实验证明，改变细胞所处的位置可导致细胞分化方向的改变，这种现象明，改变细胞所处的位置可导致细胞分化方向的改变，这种现象称位置效应称位置效应(position effect)位置信息位置信息”是产生效应的主要原是产生效应的主要原因如在鸡胚发育的原肠胚期，在由脊索细胞分泌的由因如在鸡胚发育的原肠胚期，在由脊索细胞分泌的由Sonic　　hedgehog　　(Shh)的基因编码的信号蛋白的作用下，靠近脊索的的基因编码的信号蛋白的作用下，靠近脊索的细胞分化形成底板细胞分化形成底板(floorplate)，而远离脊索的细胞分化成运动神，而远离脊索的细胞分化成运动神经元，如将另一个脊索植入鸡胚中线一侧，则会以同样方式诱导经元，如将另一个脊索植入鸡胚中线一侧，则会以同样方式诱导底板和运动神经元的发育。

底板和运动神经元的发育l 如果如果Sonic hedgehog的基因发生突变，则会导致中枢神经系统的基因发生突变，则会导致中枢神经系统发育异常，甚至可出现面部仅有一眼和一个鼻孔的畸胎同样，发育异常，甚至可出现面部仅有一眼和一个鼻孔的畸胎同样，Sonic　　hedgehog蛋白也通过位置效应调节肢体的发育趾的长蛋白也通过位置效应调节肢体的发育趾的长度、形态和内部结构，均受控于细胞与这一蛋白信号分子源的距度、形态和内部结构，均受控于细胞与这一蛋白信号分子源的距离lSonic hedgehog蛋白的浓度或某些由它调控的其他因子的浓度，蛋白的浓度或某些由它调控的其他因子的浓度，赋予肢芽分化的位置信息，最终发育形成由骨、软骨和皮肤等构赋予肢芽分化的位置信息，最终发育形成由骨、软骨和皮肤等构成的不同的趾成的不同的趾 ·l5．环境对性别决定的影响．环境对性别决定的影响l　　性别决定是细胞分化和生物个体发育研究领域的重要课题之　　性别决定是细胞分化和生物个体发育研究领域的重要课题之一环境对性别决定的影响早已被人们发现和研究，其中典型的一环境对性别决定的影响早已被人们发现和研究，其中典型的例子是许多爬行动物，如蜥蜴类的例子是许多爬行动物，如蜥蜴类的Ａ．Ａ．agama和和E．．macularius，，它们在较低温度条件下它们在较低温度条件下(24℃)全部发育为雌性，而温度提高全部发育为雌性，而温度提高(32 ℃)则全部发育为雄性。

龟类的则全部发育为雄性龟类的T. graetta, C. caretta又出现相反的又出现相反的情况，即在较低温度条件下全部发育为雄性，而温度提高则全部情况，即在较低温度条件下全部发育为雄性，而温度提高则全部发育为雌性另外，有一种蜗牛类的软体动物发育为雌性另外，有一种蜗牛类的软体动物Crepidula，它们的，它们的性别决定取决于个体间的相互位置关系，在它们形成的上下相互性别决定取决于个体间的相互位置关系，在它们形成的上下相互叠压的群体中，位于下方的个体发育为雌性，而位于上方的个体叠压的群体中，位于下方的个体发育为雌性，而位于上方的个体发育为雄性人们对于环境影响性别的机制还不清楚，但是它无发育为雄性人们对于环境影响性别的机制还不清楚，但是它无疑表明，环境因素对细胞分化可产生影响，并进而影响到生物的疑表明，环境因素对细胞分化可产生影响，并进而影响到生物的个体发育但是，这些影响因素又都是通过细胞自身的遗传机构个体发育但是，这些影响因素又都是通过细胞自身的遗传机构发挥作用的因此总的来说，个体发育中细胞分化的基础是建立发挥作用的因此总的来说，个体发育中细胞分化的基础是建立在细胞的内部，而环境因素只是条件。

在细胞的内部，而环境因素只是条件l6．染色质变化与基因重排对细胞分化的影响．染色质变化与基因重排对细胞分化的影响l 100多年前人们就发现马蛔虫在卵裂过程中，染色体出现消减多年前人们就发现马蛔虫在卵裂过程中，染色体出现消减现象，追踪至现象，追踪至32个细胞的分裂球阶段，发现除一个细胞保留正常个细胞的分裂球阶段，发现除一个细胞保留正常的染色体外的染色体外(将分化成生殖细胞将分化成生殖细胞)，其余将分化成体细胞的细胞中，，其余将分化成体细胞的细胞中，全部出现染色体丢失，显然这是细胞分化的一个特例但在当时全部出现染色体丢失，显然这是细胞分化的一个特例但在当时成为种质学说的重要依据成为种质学说的重要依据l 人们还发现原生动物纤毛虫营养核中染色体人们还发现原生动物纤毛虫营养核中染色体DNA大量缺失的大量缺失的现象纤毛虫类现象纤毛虫类(如草履虫、四膜虫如草履虫、四膜虫)的细胞内存在两个细胞核，的细胞内存在两个细胞核，小核称为生殖核，包含完整的基因组；大核称为营养核，丢失小核称为生殖核，包含完整的基因组；大核称为营养核，丢失10％～％～90％的％的DNA，剩余的，剩余的DNA经重排与扩增后形成多倍体，其基经重排与扩增后形成多倍体，其基因活跃地转录并决定一切表型特征。

大核是在有性生殖过程中，因活跃地转录并决定一切表型特征大核是在有性生殖过程中，由小核发育而来，细胞虽未分化但细胞核由小核发育而来，细胞虽未分化但细胞核“分化分化”成两种不同的成两种不同的类型l 基因重排是细胞分化的另一种特殊方式抗体是由浆细胞分泌基因重排是细胞分化的另一种特殊方式抗体是由浆细胞分泌的，而浆细胞是由的，而浆细胞是由B淋巴细胞分化而来在这一过程中，淋巴细胞分化而来在这一过程中，B淋巴细淋巴细胞中的胞中的DNA经过断裂丢失与重排的复杂变化，从而利用有限的免经过断裂丢失与重排的复杂变化，从而利用有限的免疫球蛋白基因，在理论上可表达出数十亿种抗体疫球蛋白基因，在理论上可表达出数十亿种抗体T淋巴细胞在淋巴细胞在分化过程中也存在类似的基因重排现象分化过程中也存在类似的基因重排现象种质学说种质学说 germ plasm theory(1892)的提出者德国动物学家魏斯曼Weismann，Augustl第二节第二节 癌癌 细细 胞胞l 细胞分化的过程往往伴随细胞的分裂，即使细胞分化的过程往往伴随细胞的分裂，即使DNA精确地复制精确地复制与修复，其基因的碱基突变率也仅能达到与修复，其基因的碱基突变率也仅能达到10-6，从进化的角度看突，从进化的角度看突变是选择的源泉，具有积极的意义。

但如果在人的一生中，体细胞变是选择的源泉，具有积极的意义但如果在人的一生中，体细胞要分裂要分裂1016次，那么推断在基因组中每个基因都可能发生突变基次，那么推断在基因组中每个基因都可能发生突变基因突变的结果有可能招致某些分化细胞的生长与分裂失控，脱离了因突变的结果有可能招致某些分化细胞的生长与分裂失控，脱离了衰老和死亡的正常途径而成为癌细胞衰老和死亡的正常途径而成为癌细胞(cancer cell)细胞通过分裂细胞通过分裂与分化过程，形成不同的细胞类型并由此构建有机体的组织和器官与分化过程，形成不同的细胞类型并由此构建有机体的组织和器官而癌细胞的细胞类型趋于一致，破坏有机体的组织器官癌细胞与而癌细胞的细胞类型趋于一致，破坏有机体的组织器官癌细胞与正常分化细胞不同的一点是，不同类型的分化细胞都具有相同的基正常分化细胞不同的一点是，不同类型的分化细胞都具有相同的基因组；而癌细胞的细胞类型与特征相近，但基因组却发生不同形式因组；而癌细胞的细胞类型与特征相近，但基因组却发生不同形式的突变随着环境因素的影响，基因突变率提高，细胞癌变的几率的突变随着环境因素的影响，基因突变率提高，细胞癌变的几率也随之增加。

因此，对癌细胞形成与特征的了解不仅有助于了解细也随之增加因此，对癌细胞形成与特征的了解不仅有助于了解细胞增殖、分化与死亡的调节机制的细节，而且也为彻底治疗癌症胞增殖、分化与死亡的调节机制的细节，而且也为彻底治疗癌症——这一维护人类健康所面临的十分严峻的问题提供线索和希望这一维护人类健康所面临的十分严峻的问题提供线索和希望l癌细胞：某些分化细胞的生长与分裂失控，脱离了衰老和死亡的癌细胞：某些分化细胞的生长与分裂失控，脱离了衰老和死亡的正常途径，成为转化细胞，或无限增殖细胞，而非接触抑制正常途径，成为转化细胞，或无限增殖细胞，而非接触抑制l肿瘤细胞（肿瘤细胞（tumor cell）：动物体内细胞分裂调节失控而无限增殖）：动物体内细胞分裂调节失控而无限增殖的细胞l恶性肿瘤（恶性肿瘤（malignancy）：具有转移能力的肿瘤称为恶性肿瘤，）：具有转移能力的肿瘤称为恶性肿瘤，上皮组织的恶性肿瘤称为癌目前癌细胞已作为恶性肿瘤细胞的通上皮组织的恶性肿瘤称为癌目前癌细胞已作为恶性肿瘤细胞的通用名称P481l一、癌细胞的基本特征一、癌细胞的基本特征l 1．细胞生长与分裂失去控制，无限增殖．细胞生长与分裂失去控制，无限增殖l 在正常机体中细胞或处于生长与分裂状态，或处于静止状态，在正常机体中细胞或处于生长与分裂状态，或处于静止状态，执行其特定的生理功能执行其特定的生理功能(如肝细胞和神经细胞如肝细胞和神经细胞)。

在成体的一些组织在成体的一些组织中，会有新生细胞的增殖，衰老细胞的死亡，在动态平衡中维持中，会有新生细胞的增殖，衰老细胞的死亡，在动态平衡中维持组织与器官的稳定，这是一种严格受控的过程而癌细胞失去控组织与器官的稳定，这是一种严格受控的过程而癌细胞失去控制，成为制，成为“不死不死”的永生细胞，核质比例增大的永生细胞，核质比例增大,分裂速度加快，结分裂速度加快，结果破坏了正常组织的结构与功能果破坏了正常组织的结构与功能l 2．具有侵润性和扩散性．具有侵润性和扩散性l 动物体内特别是衰老的动物体内常常出现肿瘤，这些肿瘤细动物体内特别是衰老的动物体内常常出现肿瘤，这些肿瘤细胞仅位于某些组织特定部位，称之为良性肿瘤，如疣和息肉如胞仅位于某些组织特定部位，称之为良性肿瘤，如疣和息肉如果肿瘤细胞具有浸润性和扩散性，则称之为恶性肿瘤，即癌症发果肿瘤细胞具有浸润性和扩散性，则称之为恶性肿瘤，即癌症发生l 良性肿瘤与恶性肿瘤细胞的最主要区别是：良性肿瘤与恶性肿瘤细胞的最主要区别是：l（（1）恶性肿瘤细胞）恶性肿瘤细胞(癌细胞癌细胞)的细胞间粘着性下降，具有浸润性和的细胞间粘着性下降，具有浸润性和扩散性，易于浸润周围健康组织，或通过血液循环或通过淋巴途扩散性，易于浸润周围健康组织，或通过血液循环或通过淋巴途径转移并在其他部位粘着和增殖。

经转移并在身体其他部位增殖径转移并在其他部位粘着和增殖经转移并在身体其他部位增殖产生的次级肿瘤称为转移灶产生的次级肿瘤称为转移灶(metastasis)这是癌细胞的基本特征这是癌细胞的基本特征l（（2）在分化程度上癌细胞低于良性肿瘤细胞，且失去了许多原组）在分化程度上癌细胞低于良性肿瘤细胞，且失去了许多原组织细胞的结构和功能织细胞的结构和功能l l3．细胞间相互作用改变．细胞间相互作用改变l 正常细胞之间的识别主要是通过细胞表面特异性蛋白的相互正常细胞之间的识别主要是通过细胞表面特异性蛋白的相互作用实现的，进而形成特定的组织与器官癌细胞冲破了细胞识别作用实现的，进而形成特定的组织与器官癌细胞冲破了细胞识别作用的束缚，在转移过程中，除了要产生水解酶类作用的束缚，在转移过程中，除了要产生水解酶类(如用于水解基如用于水解基底膜成分的酶类底膜成分的酶类)，而且要异常表达某些膜受体蛋白，以便与别处，而且要异常表达某些膜受体蛋白，以便与别处的细胞粘着并生长同时借此逃避免疫监视作用，防止天然杀伤细的细胞粘着并生长同时借此逃避免疫监视作用，防止天然杀伤细胞等的识别和攻击胞等的识别和攻击。

l 4．．mRNA蛋白表达谱系或蛋白活性改变蛋白表达谱系或蛋白活性改变l 癌细胞的蛋白表达谱系中，往往出现一些在胚胎细胞中所表癌细胞的蛋白表达谱系中，往往出现一些在胚胎细胞中所表达的蛋白，如在肝癌细胞中表达胚肝细胞中的多种蛋白多数癌细达的蛋白，如在肝癌细胞中表达胚肝细胞中的多种蛋白多数癌细胞中具有较高的端粒酶活性此外癌细胞还异常表达与其恶性增殖、胞中具有较高的端粒酶活性此外癌细胞还异常表达与其恶性增殖、扩散等过程相关的蛋白成分，如纤连蛋白减少，某些癌蛋白过度表扩散等过程相关的蛋白成分，如纤连蛋白减少，某些癌蛋白过度表达l 5．．mRNA转录谱系的改变转录谱系的改变l 癌细胞的种种生物学特征主要归结于其基因表达及调控方向癌细胞的种种生物学特征主要归结于其基因表达及调控方向的改变人们曾用基因表达谱分析技术的改变人们曾用基因表达谱分析技术(serial analysis of gene expression，，SAGE)对乳腺癌和直肠癌细胞与正常细胞中基因表达对乳腺癌和直肠癌细胞与正常细胞中基因表达谱进行了比较在检测的谱进行了比较在检测的30万个转录片段万个转录片段l(transeripts)，至少相当于，至少相当于4．．5万个所表达的基因中约有万个所表达的基因中约有500个转个转录片段录片段(相当于相当于75个基因个基因)有明显不同，仅占整个基因表达谱中的很有明显不同，仅占整个基因表达谱中的很少一部分。

少一部分l 此外，由于癌细胞突变位点不同，同一种癌甚至同一癌灶中此外，由于癌细胞突变位点不同，同一种癌甚至同一癌灶中的不同癌细胞之间也可能具有不同的表型，而且其表型不稳定，特的不同癌细胞之间也可能具有不同的表型，而且其表型不稳定，特别是具有高转移潜能的癌细胞其表型更不稳定，这就决定了癌细胞别是具有高转移潜能的癌细胞其表型更不稳定，这就决定了癌细胞异质性的特征异质性的特征l6．体外培养的恶性转化细胞的特征．体外培养的恶性转化细胞的特征l（（1）恶性转化细胞同癌细胞一样具有无）恶性转化细胞同癌细胞一样具有无限增殖的潜能限增殖的潜能l（（2）在体外培养时贴壁性下降，可不依）在体外培养时贴壁性下降，可不依附在培养器皿壁上生长，有些还可进行附在培养器皿壁上生长，有些还可进行悬浮式培养；悬浮式培养；l（（3）正常细胞生长到彼此相互接触时，）正常细胞生长到彼此相互接触时，其运动和分裂活动将会停止，即所谓接其运动和分裂活动将会停止，即所谓接触抑制触抑制(contact inhibition)癌细胞失去癌细胞失去运动和分裂的接触抑制，在琼脂培养基运动和分裂的接触抑制，在琼脂培养基中可形成细胞克隆，这也是细胞恶性程中可形成细胞克隆，这也是细胞恶性程度的标志之一。

度的标志之一l二、癌基因与抑癌基因二、癌基因与抑癌基因l 癌症是由携带遗传信息的癌症是由携带遗传信息的DNA的病理变化而引起的疾病与的病理变化而引起的疾病与遗传病不同，癌症主要是体细胞遗传病不同，癌症主要是体细胞DNA突变，而不是生殖细胞突变，而不是生殖细胞DNA突变l癌基因癌基因(oncogenes)：是控制细胞生长和分裂的正常基因（又称原：是控制细胞生长和分裂的正常基因（又称原癌基因或细胞癌基因）的一种突变形式，能引起正常细胞癌变癌基因或细胞癌基因）的一种突变形式，能引起正常细胞癌变l 对多种致癌的逆转录病毒中存在的癌基因对多种致癌的逆转录病毒中存在的癌基因(v—oncogene)的研究，的研究，均导致正常细胞中原癌基因的发现，其中很多原癌基因的产物都均导致正常细胞中原癌基因的发现，其中很多原癌基因的产物都是细胞生长分裂的调控因子反过来，在人的多种癌细胞中证实是细胞生长分裂的调控因子反过来，在人的多种癌细胞中证实了这些基因发生了突变了这些基因发生了突变l l癌基因编码的蛋白主要包括：癌基因编码的蛋白主要包括：l（（1）生长因子）生长因子(growth factor)l（（2）生长因子受体）生长因子受体l（（3）细胞内信号转导通路中的分子）细胞内信号转导通路中的分子l（（4）基因转录调节因子）基因转录调节因子l（（5）细胞周期调控蛋白）细胞周期调控蛋白P483l抑癌基因抑癌基因(tumor suppressor gene)：抑癌：抑癌基因实际上是正常细胞增殖过程中的负基因实际上是正常细胞增殖过程中的负调控因子，它编码的蛋白往往在细胞周调控因子，它编码的蛋白往往在细胞周期的检验点上起阻止周期进程的作用。

期的检验点上起阻止周期进程的作用如果抑癌基因突变，丧失其细胞增殖的如果抑癌基因突变，丧失其细胞增殖的负调控作用，则导致细胞周期失控而过负调控作用，则导致细胞周期失控而过度增殖l 如视网膜母细胞瘤如视网膜母细胞瘤(retinoblastoma)的细胞中，是由于一种称为的细胞中，是由于一种称为Rb的基因突的基因突变失活，而导致肿瘤发生随后又发现变失活，而导致肿瘤发生随后又发现p53等基因均有类似的现象等基因均有类似的现象P484l肿瘤干细胞（cancer stem cell）l 1．在恶性肿瘤组织中，并非将每一个癌细胞移植到免疫缺陷的裸鼠体内都能形成肿瘤，肿瘤的形成往往需要l 05～l 06个癌组织的细胞l 2．化学药物是治疗恶性肿瘤的有效方法，但总有少量癌细胞依然存活，因而常常引起肿瘤的复发l近年来随着干细胞研究的进展，人们自然会联想到是否肿瘤组织中也存在着类似成体干细胞的肿瘤干细胞(cancer stem cell)这也是涉及肿瘤发生机制及肿瘤治疗策略的重要问题自l 997年首次报道分离出白血病肿瘤干细胞后，陆续报道分离与鉴定了乳腺癌干细胞、脑瘤干细胞和黑色素瘤干细胞，并建立了脑瘤干细胞和乳腺癌干细胞的体外培养。

从而加速了对肿瘤干细胞的研究l 干细胞具有自我更新和几乎无限增殖的能力，具有迁移至某些特定组织和排除有毒化学因子的能力而肿瘤干细胞也具有无限增殖、转移和抗化学毒物损伤的能力而且，二者使用一些共同的信号转导通路，如wnt、Notch和Shh信号通路及相关的信号分子然而肿瘤干细胞和正常干细胞在细胞增殖、分化潜能和细胞迁移等行为上有明显差异正常干细胞的增殖又称为自我更新，是严格受控的过程，具有迁移到特定组织分化成多种功能细胞的潜能，以构建正常的组织器官而肿瘤干细胞增殖失控，失去正常分化的能力，转移到多种组织后形成异质性的肿瘤，破坏正常组织与器官的功能l 通过上面的比较人们很容易想到肿瘤干细胞起源于成体干细胞的可能性，而且与终末分化的细胞比较，成体干细胞的寿命要长得多(图l 4—11)，细胞基因组发生多个位点突变的可能性更大当然这也并不排除肿瘤干细胞来源于已分化细胞的可能性l第三节第三节 真核细胞基因表达的调控真核细胞基因表达的调控l 真核细胞基真核细胞基l因表达的调控是因表达的调控是l多级调控体系，多级调控体系，l主要发生的三个主要发生的三个l彼此相对独立的彼此相对独立的l水平上：水平上：lＰ４８９Ｐ４８９l图１４－１２图１４－１２l一一. 转录水平的调控转录水平的调控l 一般认为转录水平的调控是关键，是真核细胞基因表达一般认为转录水平的调控是关键，是真核细胞基因表达调控的主要环节。

调控的主要环节l真核细胞基因表达的调控一方面受到基因调控的顺式作用元真核细胞基因表达的调控一方面受到基因调控的顺式作用元件（调控元件）影件（调控元件）影l响，另一方面也受控于反式作用因子（调控蛋白）的调节响，另一方面也受控于反式作用因子（调控蛋白）的调节在绝大多数情况下，在绝大多数情况下，l基因表达转录调控是通过顺式作用元件与反式作用因子的相基因表达转录调控是通过顺式作用元件与反式作用因子的相互作用而实现的互作用而实现的1.顺式作用元件（顺式作用元件（cis-acting elements））l即即启动子启动子，包括一个起始位点和位于起始位点上游的一段，包括一个起始位点和位于起始位点上游的一段50bp左右的序列，一左右的序列，一l般还有一段般还有一段10－－1000bp的决定是否发生转录及转录的强度的的决定是否发生转录及转录的强度的增强子增强子和和沉默子沉默子l顺式作用元件：顺式作用元件：DNA上的一种序列（位于启动子内部的上的一种序列（位于启动子内部的DNA调控序列），本调控序列），本l身不编码蛋白质，仅仅提供一个作用位点，参与基因表达的身不编码蛋白质，仅仅提供一个作用位点，参与基因表达的调控，常与特殊的调控，常与特殊的l蛋白质编码区连接在一起，通过与反式作用因子相互作用而蛋白质编码区连接在一起，通过与反式作用因子相互作用而调节基因的表达。

调节基因的表达l顺式作用元件由启动子（顺式作用元件由启动子（promoter）和）和DNA调节序列组成，调节序列组成，后者含有增强子后者含有增强子(enhancer)l沉默子（沉默子（silencer）：是顺式作用元件的另一类，与增强子）：是顺式作用元件的另一类，与增强子作用相反的作用相反的DNA序序l列，参与基因表达调控的阻抑作用列，参与基因表达调控的阻抑作用l（（1）启动子）启动子l作用于真核细胞基因转录起始，能被作用于真核细胞基因转录起始，能被RNA聚合酶识别并于之聚合酶识别并于之结合的特异性结合的特异性lDNA序列，是基因准确和有效地进行转录所必须的结构序列，是基因准确和有效地进行转录所必须的结构l（（2）增强子）增强子l 广泛存在于生物体基因中的一个调节序列，增强子是通过与广泛存在于生物体基因中的一个调节序列，增强子是通过与特定转录因子结合，作用于启动子特定转录因子结合，作用于启动子DNA序列，增强与之相连锁的序列，增强与之相连锁的基因转录活性的一种远端遗传性控制元件，它能结合特定转录因基因转录活性的一种远端遗传性控制元件，它能结合特定转录因子或影响子或影响DNA构象，从而增强与之连锁的基因转录活性。

构象，从而增强与之连锁的基因转录活性l2. 反式作用因子（反式作用因子（trans-acting factor）即转录因子即转录因子l反式作用因子：与调控序列结合的转录因子是一种蛋白或激素反式作用因子：与调控序列结合的转录因子是一种蛋白或激素复合物，既能与合成自身复合物，既能与合成自身DNA上的调控序列结合起调控作用，也上的调控序列结合起调控作用，也能与不同能与不同DNA上的调控序列结合，调控不同基因的表达上的调控序列结合，调控不同基因的表达l 基因调控反式作用因子即转录因子，主要有通用转录因子基因调控反式作用因子即转录因子，主要有通用转录因子（（general transcription factor）和与）和与DNA调节序列结合的基因调调节序列结合的基因调节蛋白，即特定转录因子节蛋白，即特定转录因子l 转录因子包括两个结构域，（转录因子包括两个结构域，（1））DNA结合结构域（结合结构域（DNA-binding domain），它结合），它结合DNA的特异碱基对序列；（的特异碱基对序列；（2）转录激）转录激活结构域（活结构域（activation domain））,它通过与其他蛋白质相互作用激它通过与其他蛋白质相互作用激活转录。

活转录l DNA结合结构域有（结合结构域有（1）） α螺旋螺旋-转角转角- α螺旋结构域（螺旋结构域（2）锌）锌指结构域（指结构域（3）亮氨酸拉链结构域（）亮氨酸拉链结构域（4）螺旋）螺旋-环环-螺旋结构域螺旋结构域（（5））HMG框结构域框结构域l 转录激活结构域有（转录激活结构域有（1）带负电荷的）带负电荷的α螺旋结构域（螺旋结构域（2）富含）富含谷氨酰胺活性机构域（谷氨酰胺活性机构域（3）富含脯氨酸结构域等，是转录因子与其）富含脯氨酸结构域等，是转录因子与其他蛋白接触与作用区域他蛋白接触与作用区域l(二) DNA的甲基化对真核生物基因转录的调控l 现有研究发现，DNA甲基化(DNA methylation)与基因表达的阻遏有关对哺乳动物及其他脊椎动物的DNA研究表明，每1 00个核苷酸就有一个含有甲基基团，并通常是结合在胞嘧啶的5′-C位上这种简单的化学修饰被认为是一种“标记”，使特定的DNA区域与其他区域区别开来几乎所有的甲基化胞嘧啶残基都出现在对称序列(symmetrical sequence)的5′-GC-3′二核苷酸上这种序列在DNA上并不是随机分布，而是集中于富含GC的区域，这种区域称为GC富含“岛”(GC—rich island)。

GC岛常常位于转录调控区或其附近，它的甲基化程度直接影响了转录的活性l一般而言，非活跃转录基因的DNA甲基化程度普遍高于活跃转录的基因；因此，有人把活性基因的状态称为甲基化不足(under methylation)在发育过程中，正处于活化状态的基因，其调节区的甲基化水平会显著下降l甲基化作用通过两种方式抑制转录：l(1)干扰转录因子对DNA结合位点的识别;l(2)将转录激活因子识别的DNA序列转换为转录抑制因子的结合位点l动物种属之间DNA甲基化的程度有很大差别，脊椎动物尤其是哺乳动物比无脊椎动物甲基化程度也要高得多有些无脊椎动物，如果蝇和其他双翅目昆虫，至今未发现DNA甲基化这说明DNA甲基化是一种进化事件，并随进化程度的提高而逐步增强，因此甲基化和去甲基化在基因表达活性调控中的意义依生物不同而有差异l二、加工水平的调控二、加工水平的调控l 决定初始决定初始mRNA转录物（转录物（hnRNA）被加工为能翻译成多肽）被加工为能翻译成多肽的信使的信使mRNA的途径l 大多数真核细胞的基因为不连续基因，除编码的外显子大多数真核细胞的基因为不连续基因，除编码的外显子(exon)之外，还有较长的不编码的内含子；而且在转录时整个基之外，还有较长的不编码的内含子；而且在转录时整个基因因(包括外显子和内含子包括外显子和内含子)都被忠实地转录，形成细胞内都被忠实地转录，形成细胞内mRNA的的前体。

在细胞内前体在细胞内mRNA的前体有两种基本剪接方式的前体有两种基本剪接方式：：l（（1））组成型剪接组成型剪接(constitutive splicing) ：编码蛋白质的不连续基：编码蛋白质的不连续基因，通过因，通过RNA剪接将内含子从剪接将内含子从mRNA前体中去除，然后规范地将前体中去除，然后规范地将外显子剪接成成熟的外显子剪接成成熟的mRNA，这种剪接方式称为组成型剪接通，这种剪接方式称为组成型剪接通过组成型剪接，一个基因只产生一种成熟的过组成型剪接，一个基因只产生一种成熟的mRNA，一般也只产，一般也只产生一种蛋白质产物；生一种蛋白质产物；l（（2）选择性剪接（）选择性剪接（alternate splicing）：是一种广泛存在的）：是一种广泛存在的RNA的加工机制，通过这种方式，一个基因能编码两个或多个相的加工机制，通过这种方式，一个基因能编码两个或多个相关蛋白质，产生蛋白质多样性，这是在关蛋白质，产生蛋白质多样性，这是在RNA加工水平上调节基因加工水平上调节基因表达的重要方式表达的重要方式l 一般情况下通过选择性剪接所导致的外显子改变并不产生根一般情况下通过选择性剪接所导致的外显子改变并不产生根本不同的蛋白质，而是产生一套结构相关、功能相似的蛋白质异本不同的蛋白质，而是产生一套结构相关、功能相似的蛋白质异形体形体(protein isoforms)。