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高效液相色谱仪使用与操作规程(学生用).ppt

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    • 江西中医学院现代中药制剂教育部重点实验室江西中医学院现代中药制剂教育部重点实验室高效液相色谱仪高效液相色谱仪使用与操作规程使用与操作规程Agilent 1100 HPLC 江西中医学院现代中药制剂教育部重点实验室江西中医学院现代中药制剂教育部重点实验室第一步第一步第二步第二步第三步第三步第四步第四步准准备备开开机机 注意注意事项事项 清洁清洁 关机关机 步步 骤 江西中医学院现代中药制剂教育部重点实验室江西中医学院现代中药制剂教育部重点实验室Agilent1100系系统组成成¡本系本系统由溶由溶剂输送送泵(四元(四元泵,,标配真空脱气机)配真空脱气机)¡Rheodyne 7725i手手动进样阀¡柱温箱柱温箱¡VWD紫外紫外-可可见检测器器¡Agilent1100色色谱数据数据工作站工作站和和电脑等等组成,另外成,另外还包括打印机、包括打印机、不不间断断电源等源等辅助助设备 江西中医学院现代中药制剂教育部重点实验室江西中医学院现代中药制剂教育部重点实验室第一步、第一步、准准 备1 、、准准备所需的流所需的流动相,用合适的相,用合适的0.45μm滤膜膜过滤,超声脱气,超声脱气20min。

      2 、、根据待根据待检样品的需要更品的需要更换合适的洗脱柱(注意方向)和定合适的洗脱柱(注意方向)和定量量环3、、 配制配制样品和品和标准溶液(也可在平衡系准溶液(也可在平衡系统时配制),用合适配制),用合适的的0.45μm滤膜膜过滤注意腐蚀性与有机系的的溶剂)(注意腐蚀性与有机系的的溶剂)4 、、检查仪器各部件的器各部件的电源源线、数据、数据线和和输液管道是否液管道是否连接正接正常 江西中医学院现代中药制剂教育部重点实验室江西中医学院现代中药制剂教育部重点实验室 接通接通电源,依次开启不源,依次开启不间断断电源源、、真真空脱气机空脱气机、、四元四元泵、、检测器器,待,待泵和和检测器自器自检结束后,打开束后,打开电脑显示器、主机,示器、主机,最后打开色最后打开色谱工作站工作站第二步、第二步、开开 机机 江西中医学院现代中药制剂教育部重点实验室江西中医学院现代中药制剂教育部重点实验室一)一)参数参数设定定1、、 波波长设定定::2 、、流速流速设定:定:3 、、流流动相比例相比例设定:定:4、、 梯度梯度设定定:: 江西中医学院现代中药制剂教育部重点实验室江西中医学院现代中药制剂教育部重点实验室二)二)更更换流流动相并排气泡相并排气泡1:: 将吸将吸滤器放入装有准器放入装有准备好的流好的流动相的相的储液瓶液瓶中;中;2 ::顺时针转动泵的排液的排液阀180°,打开排液,打开排液阀;;3 ::运行运行泵,,泵以以3ml/min的流速冲洗的流速冲洗5min(可(可设定)后定)后泵流速流速设为0ml/min;;4 ::将排液将排液阀逆逆时针旋旋转适度适度拧紧,关,关闭排液排液阀。

      5 ::如管路中仍有气泡,如管路中仍有气泡,则重复以上操作直至重复以上操作直至气泡排尽气泡排尽 江西中医学院现代中药制剂教育部重点实验室江西中医学院现代中药制剂教育部重点实验室三)平衡系三)平衡系统¡用用检验方法方法规定的定的流流动相冲洗系相冲洗系统,一般最少需,一般最少需6倍柱体倍柱体积的流的流动相¡检查各管路各管路连接接处是否漏液是否漏液,如漏液,如漏液应予以排除予以排除¡观察察泵控制屏幕上的控制屏幕上的压力力值,,压力波力波动应不超不超过1MPa如超超过则可初步判断可初步判断为柱前管路仍有气泡,按柱前管路仍有气泡,按检查管路后再检查管路后再操操作¡观察察基基线变化化如果冲洗至基如果冲洗至基线漂移漂移<0.01mV/min,噪声,噪声为<0.001mV时,可,可认为系系统已达到平衡状已达到平衡状态,可以,可以进样 江西中医学院现代中药制剂教育部重点实验室江西中医学院现代中药制剂教育部重点实验室四)四)进 样1 、、进样前按前按检测器器[balance]键调零,按零,按软件中件中 [零点校正零点校正] 按按钮校正基校正基线零点,再按一下零点,再按一下 [查看基看基线] 按按钮使其使其弹起。

      起2 、、用用试样溶液清洗注射器,并排除气泡后抽取适量溶液清洗注射器,并排除气泡后抽取适量即可以进即可以进样了样了3、含量测定的对照溶液和样品供试溶液每份至少注样、含量测定的对照溶液和样品供试溶液每份至少注样2次次 江西中医学院现代中药制剂教育部重点实验室江西中医学院现代中药制剂教育部重点实验室五)谱图的判断及结果计算五)谱图的判断及结果计算1、系统适用性实验:、系统适用性实验: ①①分离度分离度:一般应:一般应≥1.5 ②②重复性:重复性:两次谱图的峰面积应相差不的过两次谱图的峰面积应相差不的过1% ③③理论塔板数理论塔板数:应:应≥规定的理论塔板数目规定的理论塔板数目 ④④拖尾因子:拖尾因子:0.95<<T<<1.05 ⑤⑤保留时间:保留时间:对照与样品的主成分保留时间应大致一致对照与样品的主成分保留时间应大致一致 ⑥⑥RSD:: 精密度<精密度<3% 2、结果计算、结果计算 ①①外标法外标法:: ②②内标法:内标法: 江西中医学院现代中药制剂教育部重点实验室江西中医学院现代中药制剂教育部重点实验室 第三步、清洗管路及关机第三步、清洗管路及关机1、分析完毕后,先关检测器,再用经滤过和脱气的适当溶剂清、分析完毕后,先关检测器,再用经滤过和脱气的适当溶剂清洗色谱系统,正相柱一般用正已烷,反相柱如使用过含盐流洗色谱系统,正相柱一般用正已烷,反相柱如使用过含盐流动相,则先用水(动相,则先用水(5%甲醇),然后用甲醇甲醇),然后用甲醇-水冲洗,各种冲水冲洗,各种冲洗剂一般冲洗洗剂一般冲洗15~~30分钟,最后用甲醇保留色谱柱,特殊情分钟,最后用甲醇保留色谱柱,特殊情况应延长冲洗时间。

      况应延长冲洗时间2、、 冲冲洗洗完完毕毕后后,,逐逐步步降降低低流流速速至至0,,关关泵泵,,进进样样器器也也应应用用相相应应溶剂冲洗,可使用进样阀所附专用冲洗接头溶剂冲洗,可使用进样阀所附专用冲洗接头3 、、关关断断电电源源,,作作好好使使用用登登记记,,内内容容包包括括日日期期、、检检品品、、色色谱谱柱柱、、流动相、柱压,使用小时数,仪器完好状态等流动相、柱压,使用小时数,仪器完好状态等 江西中医学院现代中药制剂教育部重点实验室江西中医学院现代中药制剂教育部重点实验室第四步、第四步、注意事注意事项¡二、样品二、样品1、采用过滤或离心方法处理样品,确保样品中不含固体颗粒; 2、用流动相或比流动相弱(若为反相柱,则极性比流动相大;若为正相柱,则极性比流动相小)的溶剂制备样品溶液,尽量用流动相制备样品液; 3、手动进样时,进样量尽量小,使用定量管定量时,进样体积应为定量管的3~5倍;¡一、流动相一、流动相1、流动相应选用色谱纯试剂、高纯水或双蒸水,酸碱液及缓冲液需经过滤后使用,过滤时注意区分水系膜和油系膜的使用范围; 2、水相流动相需经常更换(一般不超过2天),防止长菌变质; 3、使用双泵时,A、B、C、D四相中,若所用流动相中有含盐流动相,则A、D(进液口位于混合器下方)放置含盐流动相,B、C(进液口位于混合器上方)放置不含盐流动相; A、B、C、D四个储液器中其中一个为棕色瓶,用于存放水相流动相。

      江西中医学院现代中药制剂教育部重点实验室江西中医学院现代中药制剂教育部重点实验室第四步、第四步、注意事注意事项¡三、色谱柱三、色谱柱1、、使使用用前前仔仔细细阅阅读读色色谱谱柱柱附附带带的的说说明明书书,,注注意意适适用用范范围围,,如如pH值值范范围围、、流流动相类型等;动相类型等; 2、使用符合要求的流动相;、使用符合要求的流动相; 3、使用保护柱;、使用保护柱; 4、、如如所所用用流流动动相相为为含含盐盐流流动动相相,,反反相相色色谱谱柱柱使使用用后后,,先先用用水水或或低低浓浓度度甲甲醇醇水(如水(如5%甲醇水溶液),再用甲醇冲洗%甲醇水溶液),再用甲醇冲洗 5、、 色谱柱在不使用时,应用甲醇冲洗,取下后紧密封闭两端保存;色谱柱在不使用时,应用甲醇冲洗,取下后紧密封闭两端保存; 6、、 不要高压不要高压冲洗柱子;冲洗柱子; 7、、 不要在不要在高温下长时间高温下长时间使用硅胶键合相色谱柱;使用硅胶键合相色谱柱; 使用过程中注意使用过程中注意轻拿轻放轻拿轻放 江西中医学院现代中药制剂教育部重点实验室江西中医学院现代中药制剂教育部重点实验室第四步、第四步、注意事注意事项¡四、操作过程四、操作过程1、、 开机操作:开机操作:((1))、、打打开开电电源源,,用用Harb相相连连接接时时,,注注意意Harb电电源源,,打打开开计计算算机机,,打打开开Bootp Server(一般启动时已打开);(一般启动时已打开); (( 2 ))、、自自上上而而下下打打开开个个组组件件电电源源,,Bootp Server里里显显示示有有信信号号时时((有有六六行字符),打开工作站(先打开行字符),打开工作站(先打开On line);); ((3))、、打打开开冲冲洗洗泵泵头头的的10%%异异丙丙醇醇溶溶液液的的开开关关((需需用用针针捅捅抽抽)),,控控制制流流量大小,以能流出的最小流量为准;量大小,以能流出的最小流量为准; (( 4 ))、、注注意意各各流流动动相相所所剩剩溶溶液液的的容容积积设设定定,,若若设设定定的的容容积积低低于于最最低低限限会会自动停泵,注意洗泵溶液的体积,及时加液;自动停泵,注意洗泵溶液的体积,及时加液; (( 5 ))、、使使用用过过程程中中要要经经常常观观察察仪仪器器工工作作状状态态,,及及时时正正确确处处理理各各种种突突发发事事件。

      件 江西中医学院现代中药制剂教育部重点实验室江西中医学院现代中药制剂教育部重点实验室第四步、第四步、注意事注意事项2、、先先以以所所用用流流动动相相冲冲洗洗系系统统一一定定时时间间((如如所所用用流流动动相相为为含含盐盐流流动动相相,,必必须须先先用用水水冲冲洗洗20分分钟钟以以上上再再换换上上含含盐盐流流动动相相)),,正正式式进进样样分分析析前前30min 左左右开启右开启D灯或灯或W灯,以延长灯的使用寿命;灯,以延长灯的使用寿命; 3、、建建立立色色谱谱操操作作方方法法,,注注意意保保存存为为自自己己命命名名的的Method,,勿勿覆覆盖盖或或删删除除他他人的方法及实验结果;人的方法及实验结果; 4、、使使用用手手动动进进样样器器进进样样时时,,在在进进样样前前和和进进样样后后都都需需用用洗洗针针液液洗洗净净进进样样针针筒筒,,洗洗针针液液一一般般选选择择与与样样品品液液一一致致的的溶溶剂剂,,进进样样前前必必须须用用样样品品液液清清洗洗进进样样针针筒筒3遍以上,并排除针筒中的气泡;遍以上,并排除针筒中的气泡; 5、、溶溶剂剂瓶瓶中中的的沙沙芯芯过过滤滤头头容容易易破破碎碎,,在在更更换换流流动动相相时时注注意意保保护护,,当当发发现现过过滤头变脏或长菌时,不可用超声洗涤,可用滤头变脏或长菌时,不可用超声洗涤,可用5%稀硝酸溶液浸泡后再洗涤;稀硝酸溶液浸泡后再洗涤; 江西中医学院现代中药制剂教育部重点实验室江西中医学院现代中药制剂教育部重点实验室第四步、第四步、注意事注意事项6、、 实实验验结结束束后后,,一一般般先先用用水水或或低低浓浓度度甲甲醇醇水水溶溶液液冲冲洗洗整整个个管管路路30分钟以上,再用甲醇冲洗。

      冲洗过程中关闭分钟以上,再用甲醇冲洗冲洗过程中关闭D灯、灯、W灯;灯; 7、、 关关机机时时,,先先关关闭闭泵泵、、检检测测器器等等,,再再关关闭闭工工作作站站,,然然后后关关机机,,最后自下而上关闭色谱仪各组件,关闭洗泵溶液的开关;最后自下而上关闭色谱仪各组件,关闭洗泵溶液的开关; 8、、 使用者须认真履行仪器使用登记制度,出现问题及时向老使用者须认真履行仪器使用登记制度,出现问题及时向老师报告,不要擅自拆卸仪器未经操作培训,不得擅自使用师报告,不要擅自拆卸仪器未经操作培训,不得擅自使用仪器 江西中医学院现代中药制剂教育部重点实验室江西中医学院现代中药制剂教育部重点实验室第四步、第四步、注意事注意事项¡四、使用经验交流(四、使用经验交流(1))1、、流流动相必相必须用用HPLC级的的试剂,使用前,使用前过滤除去其中的除去其中的颗粒性粒性杂质和其和其他物他物质(使用使用0.45um或更或更细的膜的膜过滤)2、、流流动相相过滤后要用超声波后要用超声波脱气脱气,脱气后,脱气后应该恢复到室温后使用恢复到室温后使用3、、不不能能用用纯乙乙腈作作为流流动相相,,这样会会使使单向向阀粘粘住住而而导致致泵不不进液。

      液 4、、使用使用缓冲溶液冲溶液时,做完,做完样品后品后应立即用去立即用去离子水离子水冲洗管路冲洗管路及柱子一小及柱子一小时,然,然 后用甲醇后用甲醇(或或甲醇水溶液甲醇水溶液)冲洗冲洗40分分钟以上,以上,以充分洗去离子以充分洗去离子对于柱塞杆于柱塞杆 外部,做完外部,做完样品后也必品后也必须用去用去离子水冲洗离子水冲洗20ml以上 江西中医学院现代中药制剂教育部重点实验室江西中医学院现代中药制剂教育部重点实验室第四步、第四步、注意事注意事项¡四、使用经验交流(四、使用经验交流(2))5.长时间不用仪器,应该将柱子取下用长时间不用仪器,应该将柱子取下用堵头堵头封好保存,注意不能用纯水保存封好保存,注意不能用纯水保存柱子,而应该用柱子,而应该用有机相有机相(如甲醇等如甲醇等),因为纯水易长霉因为纯水易长霉 6.每次做完样品后应该用溶解样品的溶剂每次做完样品后应该用溶解样品的溶剂(如甲醇如甲醇)等清洗进样器等清洗进样器7.C18柱绝对不能进柱绝对不能进蛋白样品,血样、生物样品蛋白样品,血样、生物样品 8.堵塞导致压力太大,按预柱堵塞导致压力太大,按预柱→混合器中的过滤器混合器中的过滤器→管路过滤器管路过滤器→单向阀检单向阀检查查 并清洗。

      清洗方法:并清洗清洗方法:①①以异丙醇作溶剂冲洗;以异丙醇作溶剂冲洗; ②②放在异丙醇中间用超声波清洗;放在异丙醇中间用超声波清洗; ③③用用10%稀硝酸清洗%稀硝酸清洗 江西中医学院现代中药制剂教育部重点实验室江西中医学院现代中药制剂教育部重点实验室第四步、第四步、注意事注意事项¡四、使用经验交流(四、使用经验交流(3))9.气泡会致使气泡会致使压力不力不稳,重,重现性差,所以在使用性差,所以在使用过程中要尽量程中要尽量避免避免产生气泡生气泡 10.如果如果进液管内不液管内不进液体液体时,要使用注射器吸液:通常在,要使用注射器吸液:通常在输液液前要前要进行流行流动相相 的清洗11.要注意柱子的要注意柱子的PH值范范围,不得注射,不得注射强酸酸强碱的碱的样品,特品,特别是碱性是碱性样品12.更更换流流动相相时应该先将吸先将吸滤头部分放入部分放入烧杯中杯中边振振动边清洗,清洗,然后插入新的然后插入新的 流流动相中。

      更相中更换无互溶性的流无互溶性的流动相相时要用异丙要用异丙醇醇过渡一下 江西中医学院现代中药制剂教育部重点实验室江西中医学院现代中药制剂教育部重点实验室高效液相色谱仪高效液相色谱仪中常遇见的问题及处理方法中常遇见的问题及处理方法 江西中医学院现代中药制剂教育部重点实验室江西中医学院现代中药制剂教育部重点实验室一、￿保留时间变化保留时间变化1.柱温变化柱温变化2.等度与梯度间未能充分平衡等度与梯度间未能充分平衡3.缓冲液容量不够缓冲液容量不够4.柱污染柱污染5.柱内条件变化柱内条件变化6.柱快达到寿命柱快达到寿命1.柱恒温柱恒温2.至至少少用用10倍倍柱柱体体积积的的流流动动相相平平衡衡柱柱3.用用>25mmol/L的缓冲液的缓冲液4.每天冲洗柱每天冲洗柱5.稳定进样条件稳定进样条件,调节流动相调节流动相6.采用保护柱采用保护柱 江西中医学院现代中药制剂教育部重点实验室江西中医学院现代中药制剂教育部重点实验室二、￿保留时间缩短保留时间缩短 1.流速增加流速增加2.样品超载样品超载3.键合相流失键合相流失4.流动相组成变化流动相组成变化5.温度增加温度增加1.检查泵检查泵,重新设定流速重新设定流速2.降低样品量降低样品量3.流流动动相相PH值值保保持持在在3~7.5检检查柱的方向查柱的方向4.防止流动相蒸发或沉淀防止流动相蒸发或沉淀5.柱恒温柱恒温 江西中医学院现代中药制剂教育部重点实验室江西中医学院现代中药制剂教育部重点实验室三、￿保留时间延长保留时间延长 1.流速下降流速下降2.硅胶柱上活性点变化硅胶柱上活性点变化3.键合相流失键合相流失4.流动相组成变化流动相组成变化5.温度降低温度降低1.1.管路泄漏, ,更换泵密封圈, ,排排除除泵泵内内气泡气泡2.2.用用流流动动相相改改性性剂剂, ,如如加加三三乙乙胺胺, ,或或采采用碱至钝化柱用碱至钝化柱3.3.流流动动相相PHPH值值保保持持在在3 3~~7.57.5检检查查柱柱的的方向方向4.4.防止流动相蒸发或沉淀防止流动相蒸发或沉淀5.5.柱恒温柱恒温 江西中医学院现代中药制剂教育部重点实验室江西中医学院现代中药制剂教育部重点实验室四、出现肩峰或分叉四、出现肩峰或分叉 1.1.样品体积过大2.2.样品溶剂过强样品溶剂过强3.3.柱塌陷或形成短路通道柱塌陷或形成短路通道4.4.柱内烧结不锈钢失效柱内烧结不锈钢失效5.5.进样器损坏进样器损坏1.1.用流动相配样, ,总的样品体积小于第一峰的15%15%2.2.采用较弱的样品溶剂采用较弱的样品溶剂3.3.更换色谱柱更换色谱柱, ,采用较弱腐蚀性条件采用较弱腐蚀性条件4.4.更更换换烧烧结结不不锈锈钢钢, ,加加在线过过滤滤器器, ,过过滤滤样样品品5.5.更换进样器转子更换进样器转子 江西中医学院现代中药制剂教育部重点实验室江西中医学院现代中药制剂教育部重点实验室五、鬼峰鬼峰 1.进样阀残余峰进样阀残余峰2.样品中未知物样品中未知物3.柱未平衡柱未平衡4.三氟乙酸三氟乙酸(TFA)氧化氧化(肽谱肽谱)5.水污染水污染(反相反相)1.每每次次用用后后用用强强溶溶剂剂清清洗洗阀阀,改改进进阀阀和和样样品品的清洗的清洗2.处理样品处理样品3.重重新新平平衡衡柱柱,用用流流动动相相作作样样品品溶溶剂剂￿(尤尤其其是是离子对色谱离子对色谱)4.每天新配每天新配,用抗氧化剂用抗氧化剂5.通通过过变变化化平平衡衡时时间间检检查查水水质质量量,,用用HPLC级的水级的水 江西中医学院现代中药制剂教育部重点实验室江西中医学院现代中药制剂教育部重点实验室六、六、 基线噪声基线噪声 1.气泡气泡(尖锐峰尖锐峰)2.污染污染(随机噪声随机噪声)3.检测器灯连续噪声检测器灯连续噪声4.电干扰电干扰(偶然噪声偶然噪声)5.检测器中有气泡检测器中有气泡1.1.流动相脱气, ,加柱后背压2.2.清洗柱清洗柱, ,净化样品净化样品, ,用用HPLCHPLC级试剂级试剂3.3.更换氘灯更换氘灯4.4.采用稳压电源采用稳压电源, ,检查干扰的来源检查干扰的来源( (如水浴等如水浴等) )5.5.流动相脱气流动相脱气, ,加柱后背压加柱后背压 江西中医学院现代中药制剂教育部重点实验室江西中医学院现代中药制剂教育部重点实验室七、峰拖尾峰拖尾 1.柱超载柱超载2.峰干扰峰干扰3.硅羟基作用硅羟基作用4.柱内烧结不锈钢失效柱内烧结不锈钢失效5.柱塌陷或形成短路通道柱塌陷或形成短路通道6.死体积或柱外体积过大死体积或柱外体积过大7.柱效下降柱效下降1.降低样品量降低样品量,增加柱直径采用较高容量的固定相增加柱直径采用较高容量的固定相2.清洁样品清洁样品,调整流动相调整流动相3.加加三三乙乙胺胺,用用碱碱致致钝钝化化柱柱增增加加缓缓冲冲液液或或盐盐的的浓浓度度降低流动相降低流动相PH值值,钝化样品钝化样品4.更换烧结不锈钢更换烧结不锈钢,加过滤器加过滤器,过滤样品过滤样品5.更换色谱柱更换色谱柱,采用较弱腐蚀性条件采用较弱腐蚀性条件6.连连接接点点降降至至最最低低,对对所所有有连连接接点点作作合合适适调调整整,尽尽可可能采用细内径的连接管能采用细内径的连接管7.用较低腐蚀条件用较低腐蚀条件,更换柱更换柱,采用保护柱采用保护柱 江西中医学院现代中药制剂教育部重点实验室江西中医学院现代中药制剂教育部重点实验室八、峰展宽峰展宽 1.进样体积过大进样体积过大2.在进样阀中造成峰扩展在进样阀中造成峰扩展3.数据系统采样速率太慢数据系统采样速率太慢4.检测器时间常数过大检测器时间常数过大1. 1. 用流动相配样, ,总总的的样样品品体体积积小小于第一峰的于第一峰的15%15%2.2.进样前后排出气泡以降低扩散进样前后排出气泡以降低扩散3.3.设定速率应是每峰大于设定速率应是每峰大于1010点点4.4.设设定定时时间间常常数数为为感感兴兴趣趣第第一一峰峰半半宽的宽的10%10% 江西中医学院现代中药制剂教育部重点实验室江西中医学院现代中药制剂教育部重点实验室八、峰展宽峰展宽5.流动相粘度过高流动相粘度过高6.检测池体积过大检测池体积过大7.保留时间过长保留时间过长8.柱外体积过大柱外体积过大9.样品过载样品过载5.5.增加柱温, ,采用低粘度流动相采用低粘度流动相6.6.用小体积池用小体积池, ,卸下热交换器卸下热交换器7.7.等等度度洗洗脱脱时时增增加加溶溶剂剂含含量量也也可可用用梯梯度度洗脱洗脱8.8.将连接管径和连接管长度降至最小将连接管径和连接管长度降至最小9.9.进小浓度小体积样品进小浓度小体积样品 注:文本框可根据需求改变颜色、移动位置;文字可编辑POWERPOINT模板适用于简约清新及相关类别演示 1234目录点击添加标题点击添加标题点击添加标题点击添加标题 添加文本点击添加文本点击添加文本点击添加文本点击添加文本点击添加文本点击添加文本 添加文本点击添加文本点击添加文本点击添加文本点击添加文本 添加文本点击添加文本点击添加文本点击添加文本 添加文本点击添加文本点击添加文本点击添加文本点击添加文本点击添加文本点击添加文本 添加文本点击添加文本点击添加文本点击添加文本点击添加文本点击添加文本 添加文本点击添加文本点击添加文本点击添加文本 添加文本点击添加文本点击添加文本点击添加文本点击添加文本点击添加文本点击添加文本点击添加文本 添加标题添加文本点击添加文本点击添加文本点击添加文本点击添加文本 会议基调年会视频:http:/ 会议主题1、携手超越,驭领未来、携手超越,驭领未来2、你在我心里面、你在我心里面 ---用心创造新未来用心创造新未来 会议主体环节—年度总结:由公司各职能部门、高层做年度总结:由公司各职能部门、高层做09年总年总结报告,传递结报告,传递10年度公司战略发展规划以及嘉年度公司战略发展规划以及嘉许许09年度优秀员工年度优秀员工—感谢晚宴:让员工在享受晚宴的同时,感受公感谢晚宴:让员工在享受晚宴的同时,感受公司对他们一年来付出的感谢;让嘉宾感受耀光司对他们一年来付出的感谢;让嘉宾感受耀光纺织的关注和企业文化纺织的关注和企业文化—员工才艺秀:加强员工互动,展现员工风采员工才艺秀:加强员工互动,展现员工风采 。

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