徒手切片的制作.ppt

徒手切片的制作徒手切片的制作 w徒手切片法是指手拿刀片把植物新鲜材料切成薄片，所作的切片通常不经染色或经简单染色后，制成临时的水装片用于观察，亦可以通过脱水与染色制成永久制片w优点：简单、方便；不需要复杂设备；不经化学药物处理，基本上保留了植物活体的状态w用光学显微镜观察的样品必须是透明的薄片，因此待观察的植物材料只有被切成很薄的切片后，才能在显微镜下观察显微镜的制片分永久制片和临时制片，永久制片的制作方法和步骤．比较复杂，有兴趣者可查阅有关植物制片技术的书籍，在植物学实验教学过程中，指导教师已预先准备了所需用的永久制片在教学过程中，要求同学做的主要是临时制片w临时制片种类很多，包括涂片、压片等等 w作徒手切片不需要复杂的设备，只需要一把锋利的剃刀或双面刀片就可以进行，方法简单，而且易于保持细胞的生活状态徒手切片法所作的切片通常不经染色或经简易染色后，封藏于水中即可观察用剃刀切片，材料不能太大，一般以表面不超过3-5mm为宜切片最要紧的是平而薄，无需很完整，比如茎的横切面，无需切片整圆形，只需一角就够了所有切片前的准备工作，如截取材料、削平切面，都应使用解剖刀或用过的刀片，不可用剃刀，以保持剃刀的锋利。

 操作过程w为了成功切片，应掌握正确的用刀方法w一般用左手的大拇指、食指和中指3个手指拿住材料，使材料略突出在指尖之上，避免切片时割伤手指；用右手平稳地拿住刀片，把刀口放在经解剖刀削平的材料平面中间，轻轻地压住它，以均匀的动作，从刀片刀口下方起，斜着向后拉切切时用臂力而不是腕力，且不必太用力，否则就不易切薄在切的过程中，决不能以刀片直接挤压材料，或以刀片来回拉割材料，并且要始终保持材料与刀片在水平状态，否则会由于切面偏斜而影响观察w切下的切片应该薄而透明，形状则不要求非常完整，可以用刀不同的部位一次作几个切片，然后用蘸水的毛笔取下切片，置于盛水的培养皿中         w有些较柔嫩的器官，例如幼叶，难以直接拿住进行切片，因而需借助一些维持物，一般用胡萝卜根或土豆块茎作为维持物，把要切的材料夹于其中，进行切片，以利于把握操作         w将切下的薄片放在载玻片上时，要先在玻片中央加一滴水，把材料放到水滴中，然后用镊子夹住盖玻片，将盖片的一侧先接触到载玻片中央的水滴，然后用镊子顶住盖片的另一侧，慢慢放下，使盖玻片与载玻片之间充满水，如有气泡，要掀起盖片，重新放置w徒手制作的切片可以直接在光镜下观察，也可以经过简易的组织化学染色，以使结构看得更清楚，同时可观察到细胞各部分的化学成分。

w常用的染料有：0.1％亚甲基蓝、0.5％～1％中性红或1％番红水溶液等w染色的方法是将切片放在载玻片上后，用吸水纸吸去多余的水分，滴上一滴染料，经过1～2min后，用水冲洗一下，盖上盖玻片，在显微镜下观察。