迈瑞BriCyte E6 流式细胞仪介绍.ppt

BriCyte E6BriCyte E6流式细胞仪流式细胞仪流式细胞仪基础知识流式细胞仪基础知识目录目录竞争争产品介品介绍流式细胞术应用流式细胞术应用迈瑞流式瑞流式细胞胞仪BriCyte E6BriCyte E6介介绍流式细胞仪基础知识流式细胞仪基础知识流式细胞仪的定义流式细胞仪的定义流式流式细胞胞仪( (flow cytometer) )：是一种集激光技术、电子物理技术、光电测量技术、计算机技术以及细胞荧光化学技术、单克隆抗体技术为一体的高科技仪器可对单个生物颗粒在流动状态进行分子功能水平上的定量定性分析 研究对象：生物颗粒；检测信号：光信号（散射光，荧光）；分析特点：快速，特异，准确，客观，多参数； 流式细胞仪基本构造流式细胞仪基本构造Ø液流系统Ø光学系统Ø电子系统Ø数据分析系统③①流式细胞仪分析流程流式细胞仪分析流程流式流式细细胞胞仪检测仪检测单单个个细细胞胞悬悬液制液制备备样样本本细细胞胞荧荧光光标记标记数据分析数据分析处处理理1 12 23 34 4FL4FL6FL5(PE-cy7)FL3(PerCP)FL2(PE)FL1(FITC)SS488/10530/30FS488/10585/40785/60670LP491/LP550LP645LP660/20785/60740LP488/10反光镜tvFL6(APC-cy7)FL4(APC)反光镜tvtvtvtvtvtvtvFSCSSCFL1FL2FL3FL5流式细胞仪工作原理常用的激光器和常用的激光器和标记单克隆抗体的荧光素标记单克隆抗体的荧光素488nm激光激发：•FITC（异硫氰酸荧光素）： 荧光强度可受pH的影响，当pH降低时其荧光强度也随之减弱•PE（藻红蛋白）•PerCP（多甲藻叶绿素蛋白）：光量子产量并不太高，最好应用在检测表达较高的抗原上•PerCP-Cy5.5（叶绿素蛋白偶联物）•PE-Cy7（藻红蛋白偶联物）•PE-Cy5（藻红蛋白偶联物）•PE-Texas Red（藻红蛋白-德州红偶联物）638nm激光激发：•APC（别藻青蛋白）•APC-Cy7（别藻青蛋白偶联物）荧光素的选择荧光素的选择FITC530/30PE585/40荧光补偿++FITC通道信号=PE通道信号=实测实测真实真实 由于每一种荧光素分子都发射某一特定波长范围内的光，然而这些荧光的发射光谱会发生部分重叠，有时这种重叠现象非常显著。

为了能够在存在荧光泄露的情况下，得到真实的多色荧光发射信号，在流式细胞仪中采用了称之为颜色补偿的方法，通过测得信号经修正得到真实信号加以使用© 2010 Mindray Confidentialn 11n 2024/9/21n9、 人的价值，在招收诱惑的一瞬间被决定2024/9/21 2024/9/21 Saturday, September 21, 2024n10、低头要有勇气，抬头要有低气2024/9/21 2024/9/21 2024/9/21 9/21/2024 1:06:46 AMn11、人总是珍惜为得到2024/9/21 2024/9/21 2024/9/21 Sep-24 21-Sep-24n12、人乱于心，不宽余请2024/9/21 2024/9/21 2024/9/21 Saturday, September 21, 2024n13、生气是拿别人做错的事来惩罚自己2024/9/21 2024/9/21 2024/9/21 2024/9/21 9/21/2024n14、抱最大的希望，作最大的努力21 九月 20242024/9/21 2024/9/21 2024/9/21n15、一个人炫耀什么，说明他内心缺少什么。

九月 242024/9/21 2024/9/21 2024/9/21 9/21/2024n16、业余生活要有意义，不要越轨2024/9/21 2024/9/21 21 September 2024n17、一个人即使已登上顶峰，也仍要自强不息2024/9/21 2024/9/21 2024/9/21 2024/9/21数据分析-图形类型直方直方图数据数据显示示散点散点图等高等高线图密度密度图三三维图散射光双参数散点图荧光双参数散点图荧光双参数散点图流式细胞仪与几种检验仪器的比较流式细胞仪与几种检验仪器的比较项目流式细胞仪血球仪生化分析仪免疫分析仪测试对象细胞细胞(测量设置全部固定化）血清血清测试目标物理或化学性质（如细胞大小、内部复杂程度、DNA含量）；小分子物质（如抗原，抗体）物理或化学性质（如细胞大小、内部复杂程度、DNA含量）化学成分和一些小分子物质（如钾、钠、钙、酶）小分子物质（如抗原、抗体、激素）测试原理流式细胞术+抗原抗体反应流式细胞术化学比色法抗原抗体反应计量百分比或绝对计数（如 %、**个/uL）；物质的量或定性判定（L、UI/L、 阴性、阳pmol/m性）百分比和绝对计数（如 %、**个/L）物质的量（mol/L）物质的量或定性判定（L、UI/L、 阴性、阳pmol/m性）宏观和微观测量宏观对象（细胞）上的微观物质（抗原、看不见、摸不到）测定宏观对象（细胞）上的宏观物质（物理、复杂度、含量，看得见、摸得到）测量微观物质（可溶性成分和一些小分子物质，看不见、摸不到）测量微观物质（小分子物质，看不见、摸不到）输出流式细胞术应用流式细胞术应用临床研究临床研究血液，肿瘤，血液，肿瘤，药理，免疫药理，免疫……生物学研究生物学研究遗传，生殖，遗传，生殖，微生物，细胞微生物，细胞生物，毒理，生物，毒理，分子生物分子生物……农业畜牧业选种，育种…环境研究环境研究湖泊，海洋湖泊，海洋生态研究生态研究……食品制药工业食品制药工业食品检测、药物筛食品检测、药物筛选，疫苗研究选，疫苗研究……流式细胞仪的应用•主要科室主要科室： 检验科、中心实验室、血液科、肿瘤科、病理科、肾病研究、免疫中心、…国内三甲医院中流式细胞仪分布图（2012年）流式细胞仪的临床应用•主要主要项目：目：∞淋巴细胞亚群分析∞HLA-B27检测∞白血病免疫分型 急性白血病、慢性淋巴增生性疾病（CLD)/淋巴瘤∞造血干细胞分析 造血干细胞相对计数； 造血干细胞绝对计数；∞阵发性睡眠性血红蛋白尿症（PNH）诊断 CD55/CD59检测∞血小板相关分析 血小板计数、血小板免疫表型分析∞细胞周期与DNA倍体分析流式细胞仪的临床应用淋巴淋巴细胞根据功能分胞根据功能分类淋巴细胞种类特异性分子标记T淋巴淋巴细胞胞CD3+B淋巴淋巴细胞胞CD3-CD19+NK淋巴淋巴细胞胞CD3-CD16+CD56+T淋巴淋巴细胞根据表面分子分胞根据表面分子分类淋巴细胞种类特异性分子标记T辅助助/诱导淋巴淋巴细胞胞CD3 + CD4 + T抑制抑制/细胞毒淋巴胞毒淋巴细胞胞CD3 + CD8 + 淋巴细胞亚群分析淋巴细胞亚群分析的临床应用淋巴细胞亚群分析可以了解机体在不同条件下的淋巴细胞亚群分析可以了解机体在不同条件下的免疫免疫功能状态功能状态，主要包括细胞免疫功能和体液免疫功能。

在临床上，，主要包括细胞免疫功能和体液免疫功能在临床上，主要用于对免疫系统造成明显干扰的相关疾病的辅助诊断，分主要用于对免疫系统造成明显干扰的相关疾病的辅助诊断，分析疾病的发病机理，析疾病的发病机理，监控监控疾病的疾病的病程病程进展，进展，观测疗效观测疗效及及监测预监测预后后等等淋巴细胞亚群分析在肿瘤内科中的应用临床意义CD3+CD3+ CD4+CD3+ CD8+ CD4+ / CD8+B细胞NK细胞肿瘤进展↓↓↑↓↑↓预后不良↓↓↑↓复发转移↓↓↑↓有效手术↑↑↓↑↓↑有效化疗↑↑↓↑↓↑临床意义CD3+CD3+ CD4+CD3+ CD8+ CD4+ / CD8+B细胞NK细胞SLE↓↑↑↓类风湿性关节炎↑↓↑自身免疫性溶血性贫血↓↑↓重症肌无力↓↑↓免疫缺陷病↓↓↓↓↓↑淋巴细胞亚群分析在风湿免疫科中的应用•急性排斥反急性排斥反应是器官移植的第一大障碍；是器官移植的第一大障碍；•动态观测受者淋巴细胞亚群变化特点，对判断急性排斥反应和估计移植后感染等预后具有重要意义；•当CD4+ / CD8+比值持续升高且大于1.2时应当考虑排斥发生；当CD4+ / CD8+比值持续降低表明移植后出现感染；若CD4+ / CD8+比值小于0.2时，应立即停用免疫抑制剂； 淋巴细胞亚群分析在器官移植中的应用常见疾病的淋巴细胞亚群变化细胞亚群细胞亚群变化变化常见疾病常见疾病CD3+T细胞增高T系淋巴细胞白血病、SLE、重症肌无力、慢性活动性肝炎；降低恶性肿瘤晚期、B系细胞白血病、多发性骨髓瘤，传染性单核细胞增多症、免疫缺陷病；CD3+ CD4+T细胞增高类风湿（活动期）、自身溶血性贫血；降低AIDS、肿瘤晚期、巨细胞病毒感染、麻风、血小板减少；CD3+ CD8+ T细胞增高病毒感染（HBV、EB）、肿瘤、传染性单核细胞增多症；降低类风湿、重症肌无力、免疫缺陷病、肿瘤放射治疗；（CD3+ CD4+ ） / （ CD3+ CD8+ ）比值增高类风湿、重症肌无力、SLE、自身溶血性贫血；降低AIDS、传染性单核细胞增多症、病毒感染、肿瘤；B细胞增高MM、巨球蛋白血症、淋巴瘤、AIDS；降低先天性免疫缺陷病、恶性肿瘤；NK细胞增高病毒感染早期、骨髓移植术后、习惯性流产；降低恶性肿瘤、部分病毒\细菌和真菌感染；HLA-B27检测与强直性脊柱炎诊断•强直性脊柱炎（直性脊柱炎（AS）定）定义：：一种慢性、一种慢性、进行性和炎性疾病，主要累行性和炎性疾病，主要累计骶骶髂关关节、脊柱、脊柱、脊柱、脊柱软组织及四肢关及四肢关节，表，表现为椎椎间盘纤维环和和纤维环结缔组织的骨化，椎的骨化，椎间动关关节和四肢关和四肢关节滑膜的炎症和增生，滑膜的炎症和增生，严重者可失去重者可失去劳动能力。

能力•淋巴淋巴细胞胞HLA-B27检测在在AS中的中的诊断价断价值：：∞许多研究多研究证据表明人群中据表明人群中HLA-B27的表达的表达频率与率与AS的的发病率高度相关；病率高度相关；∞AS患者中患者中HLA-B27的阳性率的阳性率显著高于普通人群，高达著高于普通人群，高达90%以上，而普通人以上，而普通人群群HLA-B27的阳性率低于的阳性率低于10%，，HLA-B27阴性的普通人群未患阴性的普通人群未患AS的几率的几率为99.9%；；∞HLA-B27检测阳性可阳性可显著增加正确著增加正确诊断断AS的几率，的几率，阴性阴性则为排除排除AS的的诊断提供了有力的断提供了有力的证据据；；TBNK四色试剂盒•简单准确的淋巴准确的淋巴细胞胞亚群的分型方群的分型方案案————双管四色双管四色; ;•无需无需仪器器设置，信号采集、分析与置，信号采集、分析与报告一告一键式解决方案式解决方案————全自全自动TBNKTBNK四色四色试剂盒配套分析盒配套分析软件件; ;•检测结果准确可靠，阳性果准确可靠，阳性细胞峰胞峰荧光光强度高，阴阳性度高，阴阳性细胞群分离度好胞群分离度好————试剂分析性能分析性能优于同于同类主流主流产品；品；HLA-B27检测双色试剂•有效排除有效排除HLA-B7HLA-B7和非特异性吸和非特异性吸附附带来的假阳性并且准确来的假阳性并且准确识别HLA-B27/HLA-B7HLA-B27/HLA-B7双阳性双阳性样本本———HLA-B27/HLA-B7—HLA-B27/HLA-B7双抗原与同双抗原与同型型对照双管分析照双管分析设计; ;•无需无需仪器器设置，信号采集、分置，信号采集、分析与析与报告一告一键式解决方案式解决方案————全自全自动HLA-B27HLA-B27检测双色双色试剂配套分析配套分析软件件; ;迈瑞流式细胞仪迈瑞流式细胞仪Bricyte E6Bricyte E6介绍介绍BriCyte E6 BriCyte E6 产品特点产品特点LISLISLaboratory Information System条条条条码扫码扫描描描描仪仪条条码扫描描仪通通过扫描含描含lis编码的条的条码，可直，可直接从接从lis库中中调取取样本信息，如本信息，如“姓名姓名”、、“年年龄”等，并等，并录入入软件相件相应界面。

界面MRFLOWMRFLOWMRFLOW软件将件将测试完成的完成的样本通本通过“审核核”按按钮，直接，直接传入入“LIS”系系统BriCyte E6 BriCyte E6 产品特点产品特点机型机型支持上样容器种类支持上样容器种类图片图片自动进样机型自动进样机型12×75 mm试管管（每（每盘容容纳40管）管）手动上样机型手动上样机型12×75 mm试管管1.5mL、、2mL微量离心管微量离心管BriCyte E6 BriCyte E6 产品特点产品特点自自自自动动TBNKTBNK软软件件件件自自自自动动HLA-B27HLA-B27软软件件件件自自自自动设动设置置置置自自自自动测试动测试BriCyte E6 BriCyte E6 产品特点产品特点自自自自动电压动电压自自自自动荧动荧光光光光补偿补偿手手手手动测试动测试自自自自动电压动电压BriCyte E6 BriCyte E6 产品特点产品特点8.00自自自自动荧动荧光光光光补偿补偿BriCyte E6 BriCyte E6 产品特点产品特点自自自自动测试软动测试软件件件件BriCyte E6 BriCyte E6 产品特点产品特点全封全封闭光路，光路，恶劣劣环境有效境有效防防尘，光路不受影响，光路不受影响插拔式插拔式滤光片，支持更多光片，支持更多荧光素搭配光素搭配BriCyte E6 BriCyte E6 产品特点产品特点低生物低生物风险低携低携带污染率的染率的拭子式拭子式进样针自自动清洗模清洗模块可使鞘液充分消耗的高精可使鞘液充分消耗的高精度度检测装置。

装置报警时鞘液液位<1/2BriCyte E6 BriCyte E6 产品特点产品特点部件部件BriCyte E6BriCyte E6BDBD FACSCanto II FACSCanto IIBCI FC500BCI FC500 仪器仪器尺寸尺寸* *(mm(mm，宽，宽××高高××深深) )500×500×550500×500×550910×630×610910×630×610610×978×889610×978×889重量重量* *(Kg)(Kg)≤6060≤8585≤146146液流车液流车小型试剂组件小型试剂组件大大内置鞘液桶、清洗内置鞘液桶、清洗液桶、外置废液桶液桶、外置废液桶气源气源无无有有有有BriCyte E6 BriCyte E6 产品特点产品特点项目项目BriCyte E6BriCyte E6BDBD FACSCanto II FACSCanto IIBCI FC500BCI FC500采集速度采集速度12,00012,000个粒子个粒子/s/s10,00010,000个粒子个粒子/s/s3,3003,300个粒子个粒子/s/s检测速度检测速度90 90 管管/h/h42 42 管管/h/h88 88 管管/h/h携带污染率携带污染率≤ 0.1%≤ 0.1%≤ 0.1%≤ 0.1%≤ 1%≤ 1%BriCyte E6 BriCyte E6 产品特点产品特点 BriCyte E6BriCyte E6易易智智捷捷简BriCyte E6 BriCyte E6 特点总结特点总结中文界面多样进样自动设置双向LIS竞争比较型号BD:CaliburBCI：FC500BD：Canto IIMindray：BriCyte E6上市时间1994200220062014配置双光4色，市场装机基本为开放进样机型标配单激光5色自动进样；双激光5色自动进样（基本没有出货量）；没有开放进样机型双激光6色；三激光8色；上述配置分别有开放进样机型和自动进样机型双激光4色；双激光5色；双激光6色上述配置分别有开放进样机型和自动进样机型优劣比较已经上市20年，接近退市；产品陈旧，使用老苹果系统年内；产品不能升级；BCI临床主力机型；软件复杂；英文界面；无自动算法软件；不能直接连接LIS；BD临床中高端主力机型；英文界面；不能直接连接LIS；全中文界面（国际英文版本）；双向LIS直连； 自动电压、补偿设置；自动算法软件；性能 精密度：CV<3%精密度：CV<2% 精密度：CV<2%精密度：CV<2% 灵敏度：< 750 MESF 灵敏度：FITC < 600 MESF； PE < 300 MESF；APC < 600 MESF灵敏度：FITC<100 灵敏度：FITC<200速度：10000个/秒 速度:3300个/秒 速度:10000个/秒 速度:12000个/秒 竞争比较竞争比较产品产品Bricyte E6Bricyte E6BD CaliburBD CaliburBD Canto IIBD Canto IIBCI FC500BCI FC500BCI NaviosBCI Navios　　　　上市时间20141994200620022009Physical Dimensions尺寸和重量Cytometer细胞仪500*500*550914*673*615910*640*610900*610*889960*610*70060kg109.1kg145kg84.8kg104kgSupply Cart液流车N/AN/A790457724640584298610711495515930System Configuration仪器配置配置双激光4色开放进样及自动进样；双激光5色开放进样及自动进样；双激光6色开放进样及自动进样双激光4色开放和自动进样双激光6色自动进样和开放进样；三激光8色自动进样和开放进样单激光5色自动进样；双激光6色开放进样双激光6色自动进样和开放进样；双激光8色自动进样和开放进样；双激光10色自动进样和开放进样竞争比较产品产品Bricyte E6Bricyte E6BD CaliburBD CaliburBD Canto IIBD Canto IIBCI FC500BCI FC500BCI NaviosBCI Navios　　　　Laser Specification 激光器配置Blue Laser蓝蓝色激光器色激光器Blue solid state diode, 488nm, 43mWAir-cooled argon-ion laser, 15 mW,488 nmBlue 488-nm solid state, 20-mWuniphase argon ion, 488nm, 20mWBlue solid state diode, 488nm, 22mWRed Lasr红色激光红色激光器器Red solid state diode, 638nm, 55mWOptional second laser: 635 nm.633-nm HeNe, 17-mW coherent red solid diode, 635nm, 25mWRed solid state diode, 638nm, 25mWViolet Laser紫色激光器N/AN/A405-nm solid state diode, 30-mWN/AViolet solid state diode, 405nm, 40mW是否温控 是是否否否是Fluorescent Dyes 荧光素Blue laser蓝色激光FITC, PE, PerCP or PerCP-Cy™5.5,PE-Cy™7FITC, PE/PI, PerCPFITC, PE, PerCP or PerCP-Cy™5.5,PE-Cy™7　FITC, PE, ECD, PC5 or PEC5.5, PECy7FITC, PE, ECD, PC5 or PEC5.5, PECy7Red laser红色激光APC, APC-Cy7APCAPC, APC-Cy7　APC ,APCCy7, APC or Alexa Fluor 647, APCAlexa Fluor 700, APCCy7, APCAlexa Fluor 750Violet laser紫色激光N/AN/APacific Blue™, AmCyanN/AN/A竞争比较产品产品Bricyte E6Bricyte E6BD CaliburBD CaliburBD Canto IIBD Canto IIBCI FC500BCI FC500BCI NaviosBCI Navios　　　　Data Management数据管理Workstation外置工作站　BD FACStation™ Mac Pro computer　　　Software流式软件全中文软件全中文软件英文软件英文软件英文软件英文软件自动化软件系统集成自动淋巴亚群及集成自动淋巴亚群及HLA-B27有自动软件，但非集成有自动软件，但非集成NANA自动设置自动设置电压、荧光自动设置电压、荧光补偿补偿N/AN/AN/AN/Abi-LIS双向双向LIS直连直连需中间件需中间件需中间件需中间件Signal Processing信号处理Dynamic Range动态范围20bitFour Decade18-bitFour Decade20-bit data acquisition竞争比较产品产品Bricyte E6BD CaliburBD Canto IIBCI FC500BCI Navios　　　　手动进样 支持试管12×75-mm试管，试管，1.5mL或或2mL离心管离心管12×75mm test tube 试管12×75mm test tube 试管N/AN/A自动进样Carousel Loader圆盘进样器40管40 (12 x 75-mm) tubes per rack.40-tube carousel32管32管 Max Acquisition Rate 最大采集速度12,000 events/sec N/A10,000 events/sec3,300 events/sec25,000 events/secFluorescence荧光信号Fluorescence Sensitivity荧光灵敏度FITC≤200 MESF; PE≤100 MESF< 750 MESFFITC <100 MESF; PE <50 MESF FITC < 600 MESF ; PE < 300 MESF;APC < 600 MESF FITC < 112 MESF ; PE < 78 MESF;PECy5 < 15 MESF;APC < 75 MESF Fluorescence resolution荧光分辨率FITC、PE≤2.0%；PerCP、PE-Cy7、APC和APC-Cy7≤4.0%CV in FL2-Area <3%N/AN/AN/A竞争比较产品产品Bricyte E6BD CaliburBD Canto IIBCI FC500BCI Navios　　　　散射光信号前向和侧散散射光灵敏度FSC≤1.0 μm；SSC≤0.5 μm.能够将固定的血小板与背景噪音区分开。

最大检测颗粒直径 50 μm能够将0.5-μm beads与背景噪音区分开，最大检测颗粒大小40μm能够将0.404-μm beads与背景噪音区分开，最大检测颗粒大小40μm前向和侧向散射光分辨率可以将外周血红细胞和血小板分开；可以将外周血白细胞三群（淋巴细胞、单核细胞和粒细胞）分开；FSC≤2.0%可以将外周血白细胞三群（淋巴细胞、单核细胞和粒细胞）分开FSC Resolution 1.0 μm；SSC Resolution 0.5 μmN/AN/ACarryover携带污染率≤ 0.1%N/A≤0.1%Scatter and fluorescence carryover < 1% when the number of gated events is between 100 and 10,000.< 0.1%Throughput检测通量Carousel Loader圆盘进样器90管管/hourN/A56 min/carousel with BD™ Multi-check high controls,66 min/carousel with BD Multi-check low controls using BD Multitest™ 6-color TBNK application. 最大检测通量42管/hour。

N/AThroughput of 10k normal lymphocytes is 80 tubes/hour Up to 88 tubes an hour at 10,000 events per second.最大检测通量88管/hour，谢 谢 ！2021/4/2648•9、 人的价值，在招收诱惑的一瞬间被决定2024/9/212024/9/21Saturday, September 21, 2024•10、低头要有勇气，抬头要有低气2024/9/212024/9/212024/9/219/21/2024 1:07:15 AM•11、人总是珍惜为得到2024/9/212024/9/212024/9/21Sep-2421-Sep-24•12、人乱于心，不宽余请2024/9/212024/9/212024/9/21Saturday, September 21, 2024•13、生气是拿别人做错的事来惩罚自己2024/9/212024/9/212024/9/212024/9/219/21/2024•14、抱最大的希望，作最大的努力21 九月 20242024/9/212024/9/212024/9/21•15、一个人炫耀什么，说明他内心缺少什么。

九月 242024/9/212024/9/212024/9/219/21/2024•16、业余生活要有意义，不要越轨2024/9/212024/9/2121 September 2024•17、一个人即使已登上顶峰，也仍要自强不息2024/9/212024/9/212024/9/212024/9/21谢谢大家谢谢大家2021/4/2649•9、 人的价值，在招收诱惑的一瞬间被决定2024/9/212024/9/21Saturday, September 21, 2024•10、低头要有勇气，抬头要有低气2024/9/212024/9/212024/9/219/21/2024 1:07:16 AM•11、人总是珍惜为得到2024/9/212024/9/212024/9/21Sep-2421-Sep-24•12、人乱于心，不宽余请2024/9/212024/9/212024/9/21Saturday, September 21, 2024•13、生气是拿别人做错的事来惩罚自己2024/9/212024/9/212024/9/212024/9/219/21/2024•14、抱最大的希望，作最大的努力。

21 九月 20242024/9/212024/9/212024/9/21•15、一个人炫耀什么，说明他内心缺少什么九月 242024/9/212024/9/212024/9/219/21/2024•16、业余生活要有意义，不要越轨2024/9/212024/9/2121 September 2024•17、一个人即使已登上顶峰，也仍要自强不息2024/9/212024/9/212024/9/212024/9/21谢谢大家谢谢大家2021/4/2650。