AKTA蛋白纯化仪实用教案.ppt

仪器(yíqì)组成P-920 pump UPC-900 detector FRAC-920 fraction collector 第1页/共8页第一页，共9页主要(zhǔyào)技术指标 泵系统 全自动双泵系统，流速精度高，梯度重复性高，可完成自动缓冲液配置宽广的流速范围(fànwéi)同时满足实验室研究及中试制备应用 ①流速范围(fànwéi)：（梯度） ②压力范围(fànwéi)：0-5 MPa，50 bar, 725 psi③压力传感器： 0-5Mpa, Offset error: < 0.05 Mpa, Scale error: < ±2% ④压力监控：由UNICORN 软件监控 ⑤梯度生成：高压梯度混合提高了分辨率，准确性和重复性，带压力 传感器和过压报警功能 ⑥梯度精度：reproducibility: < 1%B at 300 ±50 nl/min ⑦延迟体积：< 600 µl/module第2页/共8页第二页，共9页UVUV检测器 ①UV①UV检测波长：254nm254nm，280nm280nm②②线性：254nm254nm时高至2AU2AU为小于3 3％，280nm280nm时高至1AU1AU为小于5 5％ ③③基线调整(tiáozhěng)(tiáozhěng)：全范围0-100%0-100%可调 ④④噪音：40 × 10-6 AU  40 × 10-6 AU  ⑤⑤漂移：<100 × 10-4 AU<100 × 10-4 AU电导检测 ①①流动池死体积：200nL200nL， ②②电导范围：1 mS/cm 1 mS/cm toto 999.9 mS/cm 999.9 mS/cm， ③③精确性：0.1 mS/cm0.1 mS/cm， ④④重复性：Max. ±3% or ±15 mS/cmMax. ±3% or ±15 mS/cm， 第3页/共8页第三页，共9页。

功能(gōngnéng)/应用范围￿ 可以快速的检测、分离、纯化多种生物样品(yàngpǐn)（蛋白质、多糖、生物酸、生物碱以及天然小分子等），能够有效地针对各种样品(yàngpǐn)：植物、动物、人类生物体，纯化、分离特异性生物小分子适合实验室摸索等小规模生产 第4页/共8页第四页，共9页基本原理 溶于流动相中的各组分经过(jīngguò)固定相时，由于与固定相发生作用的大小、强弱不同，在固定相中滞留时间不同，从而先后从固定相中流出，进而达到分离的效果 第5页/共8页第五页，共9页凝胶过滤：根据(gēnjù)分子大小和形状进行分离分子量较大的先出峰，小的后出峰离子交换色谱：由于静电相互作用而使样品结合到凝胶上，再采用盐浓度梯度或者更换缓冲液的PH值进行洗脱对于等电点小于的酸性蛋白质，推荐使用阴离子交换，对于等电点大于的碱性蛋白质，推荐使用阳离子交换疏水作用色谱：利用蛋白质、多肽在高盐存在下，可以结合疏水凝胶，而在盐浓度降低时又可以解脱的原理实现分离亲和层析色谱：利用蛋白质、多肽与某些配基的特异性相互作用而进行分离例如：酶-底物，酶-抑制剂，糖蛋白-凝集素，抗原-抗体等。

常用(chánɡ yònɡ)层析方法第6页/共8页第六页，共9页Thank you第7页/共8页第七页，共9页感谢您的观看(guānkàn)！第8页/共8页第八页，共9页内容(nèiróng)总结仪器组成FRAC-920 fraction collector可以快速的检测、分离、纯化多种生物(shēngwù)样品（蛋白质、多糖、生物(shēngwù)酸、生物(shēngwù)碱以及天然小分子等），能够有效地针对各种样品：植物、动物、人类生物(shēngwù)体，纯化、分离特异性生物(shēngwù)小分子分子量较大的先出峰，小的后出峰疏水作用色谱：利用蛋白质、多肽在高盐存在下，可以结合疏水凝胶，而在盐浓度降低时又可以解脱的原理实现分离第7页/共8页感谢您的观看第九页，共9页。