血液学一般检查实验课.ppt

血液学一般检查,,,【目的】 掌握显微镜红细胞(red blood cell count, RBC)计数的原理及操作方法 【原理】 用等渗稀释液将血液以一定倍数(200倍)稀释并充入计数池，在显微镜下计数一定区域内的红细胞数量，经换算求出每升血液中的红细胞数量器材】 试管、试管架 2 ml吸管、吸耳球 微量吸管、胶吸头、干脱脂棉 玻璃棒 改良Neubauer计数板、盖玻片、绸布 显微镜Micropipettes,,,,,,,,Markers: 10ul 20ul Warning line,,【试剂】 红细胞稀释液：枸椽酸钠1.0 g ，36%甲醛液1.0ml，氯化钠0. 6 g，加蒸馏水至100 ml，混匀，过滤两次后备用 【标本】 EDTA-K2抗凝静脉血或末梢血操作】 1．加稀释液 红细胞稀释液2 ml 于小试管 2．采血及加血 颠倒混匀样本，用微量吸管吸取全血10μl，擦去管尖外部余血将吸管插入小试管中红细胞稀释液的底部，轻轻放出血液，并吸取上层红细胞稀释液清洗吸管2～3次 3．充池 充入计数池，放置2～3 min 4．计数 将光圈调到最小，光线调暗，用低倍镜找到计数区和格子线，用高倍镜计数中央大方格内4角和正中，共5个中方格内的红细胞数。

5．计算,,,,,,红,红,红,红,红,,,,,,,,,,,,,红细胞数/L=N/5*25*201*10*10E6 =(N/100)*1012 【参考值】 ①成年人：男性（4.09～5.74）×1012/L，女 性 (3.68～5.13) ×1012/L ②新生儿：(5.2～6.4) × 1012/L ③婴儿：(4.0～4.3) ×1012/L ④儿童：(4.0～4.5) ×1012/L五个中方格计数和求均值乘以中方格数量乘以稀释倍数,将0.1微升体积内的细胞数换算成升,【注意事项】,1．器材 2．试剂 3．标本 4．稀释液及稀释倍数 5．采血 6．充池 7．计数,白细胞计数,【目的】 掌握显微镜法白细胞计数（white blood cell count）的方法 【原理】 采用白细胞稀释液将血液稀释一定的倍数，同时破坏溶解红细胞将稀释的血液注入血细胞计数板，在显微镜下计数一定体积内的白细胞数，经换算即可求出每升血液中的白细胞数量器材】 同红细胞计数,0.5ml吸管 【试剂】 白细胞稀释液：2％冰乙酸溶液 【标本】 EDTA-K2抗凝静脉血或末梢血操作】,1．加稀释液 吸取白细胞稀释液0.38ml小试管中。

2．采血及加血 颠倒混匀样本，用微量吸管吸取全血20μl，擦去管尖外部余血将吸管插入小试管中白细胞稀释液的底部，轻轻放出血液，并吸取上层白细胞稀释液清洗吸管2～3次 3．混匀 待细胞悬液完全变为棕褐色 4．充池 再次将小试管中的细胞悬液混匀吸取细胞悬液1滴，注入计数板的计数池中，室温下静置2～3min，待白细胞完全下沉后再做白细胞计数 5．计数 将光圈调到最小，光线调暗，用低倍镜找到计数区和格子线，用低倍镜（或高倍镜）下计数四角4个大方格内的白细胞总数6．计算 白细胞数/L=（N/4）*20*10*10E6=(N/20)*109 【参考值】 ①成人：（4～10）×109/L ②儿童：（15～20）×109/L；6个月～2岁：（11～12）×109/L ③新生儿：（15～20）×109/L,四个大方格计数和求均值后乘以稀释倍数,将0.1微升体积内的细胞数换算成升,【注意事项】,类似于红细胞计数 应注意白细胞较红细胞少，因此充池更加注重均匀 稀释倍数，因细胞多少而异试验结束后,将用过的标本、盖玻片、微量吸管和纸屑等丢到大垃圾桶 将玻璃试管用水冲洗干净倒插入试管架中 将牛鲍计数板冲洗干净放入盒中 将显微镜按照背后的号码还原至盒中 关闭电灯，拔下插线板,。