选修三现代生物技术详尽复习.ppt
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高二生物 先问问自己，这些都掌握了没有？先问问自己，这些都掌握了没有？•1、什么是基因工程？、什么是基因工程？•2、世界上第一个转基因小鼠是用什么方法导入目、世界上第一个转基因小鼠是用什么方法导入目的基因的？的基因的？•3、世界上第一例转基因烟草是用什么方法导入目、世界上第一例转基因烟草是用什么方法导入目的基因的？的基因的？•4、、DNA重组技术需用哪些基本工具？重组技术需用哪些基本工具？•5、简述基因工程的基本操作程序简述基因工程的基本操作程序•6、什么是目的基因？、什么是目的基因？•7、标记基因的作用是什么？、标记基因的作用是什么？•8、什么是、什么是PCR技术？技术？•9、分子杂交技术在基因工程上有哪些应用？、分子杂交技术在基因工程上有哪些应用？•10、什么是、什么是“工程菌工程菌”？它在基因工程中有何作用？它在基因工程中有何作用？？ •11、限制性核酸内切酶的来源？、限制性核酸内切酶的来源？•12、限制性核酸内切酶的功能是什么？、限制性核酸内切酶的功能是什么？•13、限制性核酸内切酶切割产生的、限制性核酸内切酶切割产生的DNA片断片断末端有哪两种形式？末端有哪两种形式？•14、、DNA连接酶的作用是什么？连接酶的作用是什么？•15、、E.coliDNA连接酶和连接酶和T4DNA连接酶的功连接酶的功能有什么不同？能有什么不同？•16、、DNA连接酶和连接酶和DNA聚合酶有什么区别？聚合酶有什么区别？•17、具备什么条件才能充当、具备什么条件才能充当“分子运输车分子运输车”？？•18、基因工程中使用的载体有哪几种？、基因工程中使用的载体有哪几种？•19、获取目的基因有哪几种方法？、获取目的基因有哪几种方法？•20、、PCR技术的原理是什么？技术的原理是什么？ •21、、PCR技术中基因增加的方式是什么？技术中基因增加的方式是什么？•22、、PCR技术的步骤包括哪几步？技术的步骤包括哪几步？•23、基因表达载体包括哪些必需部分？、基因表达载体包括哪些必需部分？•24、启动子的作用是什么？通常启动子来自哪、启动子的作用是什么？通常启动子来自哪里？里？•25、终止子的作用是什么？、终止子的作用是什么？•26、将目的基因导入植物细胞有哪几种方法？、将目的基因导入植物细胞有哪几种方法？•27、将目的基因导入动物细胞的常用方法是？、将目的基因导入动物细胞的常用方法是？•28、动物基因工程的受体细胞通常是？、动物基因工程的受体细胞通常是？•29、原核生物具有什么特点？、原核生物具有什么特点？•30、大肠杆菌最常用的转化方法是什么？、大肠杆菌最常用的转化方法是什么？ 概念：概念：原理：原理：工具工具步骤步骤应用应用基基因因工工程程小小结结限制性核酸内切酶：限制性核酸内切酶：DNA连接酶：连接酶：载体：载体：来源；作用及特点；结果来源；作用及特点；结果种类；作用种类；作用作用；必备条件；常用载体作用；必备条件；常用载体目的基因的目的基因的获取获取基因表达载体的基因表达载体的构建构建将目的基因将目的基因导入导入受体细胞受体细胞(称为称为转化转化））目的基因的目的基因的检测检测与与鉴定鉴定从自然界已有从自然界已有物种中分离物种中分离从基因文库中获取从基因文库中获取人工合成人工合成利用利用PCR技术技术扩增扩增：构建目的、组成：构建目的、组成导入植物细胞方法导入植物细胞方法导入动物细胞方法导入动物细胞方法导入微生物细胞方法导入微生物细胞方法分子水平分子水平检测插入染色体检测插入染色体检测转录检测转录mRNA检测翻译蛋白质检测翻译蛋白质个体水平鉴定个体水平鉴定 基因工程概念基因工程概念 基因工程是指按照人们的意愿，进行基因工程是指按照人们的意愿，进行严格的设计，并通过严格的设计，并通过体外体外DNADNA重组重组和和转转基因基因等技术，赋予生物以等技术，赋予生物以新的遗传特性新的遗传特性，，从而创造出更符合人们需要的新的生物从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。
类型和生物产品 由于基因工程是在由于基因工程是在DNADNA分子水平分子水平上进上进行设计和施工的，因此又叫做行设计和施工的，因此又叫做DNADNA重组重组技术技术 定向改造生物啦！定向改造生物啦！ 1 1、基因工程又叫做、基因工程又叫做________ ______或或__________ __________ 基因工程相关要点基因工程相关要点基因拼接技术基因拼接技术DNA重组技术重组技术2、基本工具：、基本工具： “分子手术刀分子手术刀”: “分子缝合针分子缝合针”: 基因进入受体细胞的载体基因进入受体细胞的载体:3、、基本操作步骤：基本操作步骤：运载体运载体运载体运载体 DNADNA连接酶连接酶连接酶连接酶限制性核酸内切酶限制性核酸内切酶限制性核酸内切酶限制性核酸内切酶 1 1、目的基因的、目的基因的获取获取 2 2、基因表达载体的、基因表达载体的构建构建（核心）（核心）3 3、将目的基因、将目的基因导入导入受体细胞受体细胞 4 4、目的基因的、目的基因的检测检测与鉴定与鉴定 基因工程的别名基因工程的别名操作环境操作环境操作对象操作对象操作水平操作水平基本过程基本过程实质实质结果结果基因拼接技术或基因拼接技术或DNADNA重组技术重组技术生物体外生物体外基因基因DNADNA分子分子水平水平新生物类型、生物产品新生物类型、生物产品剪切剪切 → → 拼接拼接 → → 导入导入 → → 表达表达基因重组基因重组基因工程相关要点基因工程相关要点 黏性末端黏性末端黏性末端黏性末端 1.1.限制性核酸内切酶限制性核酸内切酶EcoRI基因工程的基本工具基因工程的基本工具 •来源：来源：原核生物原核生物•作用特点：作用特点：特异性，即识别特异性，即识别特定核苷酸序列（反向对特定核苷酸序列（反向对称重复排列）称重复排列），切割，切割特定切点（磷酸二酯键）。
特定切点（磷酸二酯键）•结果：结果：产生黏性未端产生黏性未端（（EcoRI）（碱基互补配对）或平（碱基互补配对）或平末端末端（（SmaI））基因工程的基本工具基因工程的基本工具1 1、限制性核酸内切酶、限制性核酸内切酶--------““分子手术刀分子手术刀”” 基因工程的基本工具基因工程的基本工具 2.DNA2.DNA连接酶连接酶——“——“分子缝合针分子缝合针””1)、种类：、种类：2)、作用部位：、作用部位：E·coli DNA连接酶连接酶（黏性末端）（黏性末端）T4 DNA连接酶连接酶 （黏性末端和平末端）（黏性末端和平末端）磷酸二酯键磷酸二酯键 DNA连接酶连接酶可把平未端或黏性末端之间的缝隙可把平未端或黏性末端之间的缝隙“缝合缝合”起来，即相当于把梯子两边的扶手的断口起来，即相当于把梯子两边的扶手的断口连接起来，这样一个连接起来，这样一个重组重组DNA分子分子就形成了就形成了对比DNA聚合酶 ①①具有具有1至多个至多个限制酶切点限制酶切点，供，供外源外源DNADNA片段插入片段插入②②在受体细胞中在受体细胞中能复制并稳定保能复制并稳定保存存③③具有具有标记基因标记基因，供重组，供重组DNADNA的的鉴定和选择鉴定和选择•作用：作用：将外源基因送入受体细胞。
将外源基因送入受体细胞•常用载体：常用载体：拟核外环状拟核外环状DNA （质粒）（质粒）•其他种类：其他种类：λλ噬菌体衍生物和动植物病毒噬菌体衍生物和动植物病毒•条件：条件： 3. 3.分子运载车分子运载车——运载体运载体质粒质粒————细菌拟核细菌拟核DNADNA之外结构简单、能之外结构简单、能自主复自主复制制的很小的的很小的环状环状DNADNA分子分子 小结小结基因工程基因工程的工具的工具限制酶限制酶主要存在于原核生物中主要存在于原核生物中具有专一性具有专一性(识别序列识别序列)切开切开DNA分子的磷酸二酯键分子的磷酸二酯键DNA连连接酶接酶连接磷酸二酯键连接磷酸二酯键种类种类E.coliDNA连接酶连接酶T4 DNADNA连接酶连接酶运载运载工具工具具备的具备的条件条件结构简单结构简单,大小适中大小适中能在宿主细胞中自能在宿主细胞中自我复制并稳定存在我复制并稳定存在具一个或多个限制酶切位点具一个或多个限制酶切位点具标记基因具标记基因质粒、质粒、λλ噬菌体衍生物、动植物病毒噬菌体衍生物、动植物病毒 基因工程基本操作的四个步骤：基因工程基本操作的四个步骤：1 1、目的基因的获取、目的基因的获取2 2、基因表达载体的构建、基因表达载体的构建3 3、将目的基因导入受体细胞、将目的基因导入受体细胞4 4、目的基因的检测与鉴定、目的基因的检测与鉴定 （一）目的基因的提取（一）目的基因的提取目的基因：主要是指目的基因：主要是指___________________ 。
获取方法：获取方法：1、、____________中中获取目的基因获取目的基因2、人工合成法：化学方法合成、人工合成法：化学方法合成DNA片段（反转录片段（反转录法、直接合成法）法、直接合成法）3、、 PCR反应扩增反应扩增DNA三、基本操作步骤三、基本操作步骤从基因文库从基因文库编码蛋白质的结构基因编码蛋白质的结构基因 原理：原理：DNADNA复制复制 过程：加热过程：加热DNADNA解链解链 冷却引物结合到互补冷却引物结合到互补DNADNA链链 互补链合成互补链合成 条件条件 ：：耐高温耐高温DNADNA聚合酶聚合酶 聚合酶链式反应（聚合酶链式反应（PCRPCR））模板模板DNA DNA 4 4种脱氧核苷酸种脱氧核苷酸一对引物一对引物热稳定热稳定DNADNA聚合酶聚合酶(Taq(Taq酶）温度控制酶）温度控制Ø原理：原理：DNADNA半保留复制半保留复制Ø前提：前提：一段已知目一段已知目的基因的核苷酸序列的基因的核苷酸序列Ø条件：条件：延伸延伸(70℃(70℃ -75℃-75℃ )变性变性(90℃-95℃(90℃-95℃ ) 退火退火(55℃(55℃ -60℃-60℃ ) Ø过程：过程： 利用利用PCRPCR技术技术扩增目的基因扩增目的基因PCRPCR的全称：的全称： 聚合酶链式反应聚合酶链式反应PCRPCR的原理：的原理： DNA DNA复制复制 PCRPCR技术扩增目的基因技术扩增目的基因的前提条件：的前提条件：要有一段已知的目的基因的核苷酸序列。
要有一段已知的目的基因的核苷酸序列选修选修1P58 模板模板原料原料引物引物 酶 酶控制温度控制温度利用利用PCRPCR技术技术扩增目的基因扩增目的基因——目的基因目的基因DNADNA——四种脱氧核苷酸四种脱氧核苷酸——如单链如单链DNADNA分子片段分子片段——耐热的耐热的DNADNA聚合酶聚合酶——PCRPCR仪自动调控仪自动调控PCRPCR的条件：的条件： 用化学方法直接用化学方法直接人工合成人工合成条件：条件：基因基因较小较小，核苷酸序列，核苷酸序列已知已知 文库类型文库类型cDNAcDNA文库文库基因组文库基因组文库文库大小文库大小基因中启动子基因中启动子基因中内含子基因中内含子基因多少基因多少种间基因交流种间基因交流小小大大无无有有无无有有某生物的部分某生物的部分基因基因某生物的全部基某生物的全部基因因可以可以部分可以部分可以⑴⑴. .基因组文库与基因组文库与cDNAcDNA文库的构建文库的构建⑵⑵. .利用利用PCRPCR技术扩增目的基因技术扩增目的基因总结：获取目的基因总结：获取目的基因 （二）基因表达载体构建二）基因表达载体构建1、基因表达载体由、基因表达载体由 ________、、______ ______、、_______、、_______ 四（五）部四（五）部分组成。
分组成目的基因目的基因启动子启动子标记基因标记基因 终止子终止子2、启动子作用：、启动子作用：3、标记基因的作用：、标记基因的作用： RNA聚合酶识别和结合的位点，聚合酶识别和结合的位点，启动转录的启动转录的“开关开关” 鉴别受体细胞中是否含有鉴别受体细胞中是否含有目的基因目的基因 ，从普通细胞，从普通细胞中筛选出含目的基因的受中筛选出含目的基因的受体细胞体细胞（复制原点）（复制原点） （（1 1）用一定的）用一定的__________________切割质粒，使其出现一个切割质粒，使其出现一个切口，露出切口，露出________________________2 2）用）用______________________________切断目的基因，使其产生切断目的基因，使其产生 ________________________3 3）将切下的目的基因片段插入质粒的）将切下的目的基因片段插入质粒的____________处，处，再加入适量再加入适量______________________，形成了一个重组，形成了一个重组DNADNA分子分子（重组质粒）（重组质粒）限制酶限制酶黏性末端黏性末端（平末端）（平末端）同一种限制酶同一种限制酶相同相同的黏性末端的黏性末端切口切口DNADNA连接酶连接酶重组质粒形成过程重组质粒形成过程: : 转化转化: :目的基因目的基因进入受体细胞内进入受体细胞内，并且在受体细胞，并且在受体细胞内维持内维持稳定和表达稳定和表达的过程。
的过程将目的基因导入受体细胞将目的基因导入受体细胞受体细胞种类受体细胞种类方法方法植物细胞植物细胞动物细胞动物细胞微生物细胞微生物细胞ü农杆菌转化法（双子叶植物、裸子植物）农杆菌转化法（双子叶植物、裸子植物）ü基因枪法（单子叶植物）基因枪法（单子叶植物）ü花粉管通道法花粉管通道法显微注射技术：显微注射技术：目的基因表达载体提纯目的基因表达载体提纯→ 取卵取卵（（受精卵受精卵））→显微注射显微注射→受精卵发育受精卵发育→新性状动物新性状动物用用CaCa2+2+处理处理细胞细胞→→感受态细胞感受态细胞→→表达载体与感表达载体与感受态细胞混合受态细胞混合→→感受态细胞吸收感受态细胞吸收DNADNA分子分子 将目的基因导入微生物细胞将目的基因导入微生物细胞 原核生物原核生物繁殖快、多为单细胞、遗繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少，故早期常作为受体传物质相对较少，故早期常作为受体细胞大肠杆菌细胞大肠杆菌细胞用用Ca2+处理处理感受态细胞感受态细胞重组表达载体重组表达载体DNA溶于缓冲液溶于缓冲液混合混合导入导入 ⑴⑴分子水平检测：分子水平检测： ①①检测转基因生物染色体的检测转基因生物染色体的DNADNA上是否插入了目上是否插入了目的基因：的基因：方法方法————DNADNA分子杂交分子杂交( (探针与基因组探针与基因组DNA)DNA)•②②检测目的基因是否转录出了检测目的基因是否转录出了mRNAmRNA：：方法方法————分子杂交（探针与生物体分子杂交（探针与生物体mRNAmRNA））•③③检测目的基因是否翻译成蛋白质：检测目的基因是否翻译成蛋白质：方法方法————抗原抗原——抗体杂交抗体杂交( (生物中蛋白质与抗体生物中蛋白质与抗体) )⑵⑵个体水平鉴定个体水平鉴定（性状）（性状）抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等目的基因的检测与鉴定目的基因的检测与鉴定分子探针：分子探针：同位同位素标记的素标记的目的基目的基因因的的单链单链 转基因生物转基因生物 转基因生物是指利用转基因生物是指利用 技术导技术导入入 培育出的能够将新性状培育出的能够将新性状稳定地稳定地 给后代的给后代的 生物。
生物基因工程基因工程外源基因外源基因遗传遗传基因工程基因工程优点：优点： 打破了常规育种难以突破的打破了常规育种难以突破的 ，， 的的改变了生物的遗传性状改变了生物的遗传性状. .物种之间的界限物种之间的界限( (生殖隔离生殖隔离) )定向定向 四、 基因工程的应用1、植物基因工程成果、植物基因工程成果2、动物基因工程成果、动物基因工程成果抗虫转基因植物抗虫转基因植物（抗虫棉）（抗虫棉）抗病转基因植物抗病转基因植物（病毒外壳蛋白基因）（病毒外壳蛋白基因）抗逆转基因植物抗逆转基因植物（抗性基因）（抗性基因）改良植物品质改良植物品质（营养、实用、观赏价值）（营养、实用、观赏价值）提高动物生长速度提高动物生长速度（外源生长激素基因）（外源生长激素基因）改善畜产品质量改善畜产品质量生产药物生产药物（乳腺生物反应器）（乳腺生物反应器）做器官移植供体做器官移植供体（导入调节因子，避免（导入调节因子，避免排异反应）排异反应）基因工程药物基因工程药物（转基因工程菌生产抗体、（转基因工程菌生产抗体、细胞因子等）细胞因子等）方法方法: 3 3、基因诊断、基因诊断: :用放射性同位素用放射性同位素( (如如3232P)P)、荧光分子等、荧光分子等标记的标记的DNADNA分子做探针，利用分子做探针，利用DNADNA分子杂交原理分子杂交原理，鉴，鉴定被检测标本上的遗传信息，达到检测疾病的目的。
定被检测标本上的遗传信息，达到检测疾病的目的基因工程的应用4 4、基因治疗、基因治疗: :把把健康的外源基因健康的外源基因导入有基因缺陷导入有基因缺陷的细胞中，达到的细胞中，达到治疗疾病的目的治疗疾病的目的 蛋白质工程©概念：概念：以蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系作为以蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有的基础，通过基因修饰或基因合成，对现有的蛋白质蛋白质进行进行改造改造，，或制造一种或制造一种新的蛋白质新的蛋白质，以满足人类生产生活的需要以满足人类生产生活的需要©原理：原理：©步骤：步骤：DNADNAmRNAmRNA翻译翻译转录转录肽链肽链复制复制折叠折叠具有空间结具有空间结构的蛋白质构的蛋白质表达生物表达生物特有的功特有的功能或性状能或性状预期功能预期功能生物功能生物功能mRNAmRNA转录转录翻译翻译折叠折叠DNADNA合成合成分子设计分子设计 比较：基因工程和蛋白质工程比较：基因工程和蛋白质工程基因工程基因工程蛋白质工程蛋白质工程相同点相同点都要改造基因，都属于分子水平都要改造基因，都属于分子水平产生新的产生新的基因型，无新基因基因型，无新基因基因（型）基因（型）产生的蛋白质产生的蛋白质原有的原有的可以是新的可以是新的联系联系蛋白质工程是以基因工程为基础，蛋白质工程是以基因工程为基础，是基因工程的应用和延伸；前者可是基因工程的应用和延伸；前者可为后者修饰、改造酶为后者修饰、改造酶 基因工程步骤基因工程步骤1342 (2009福建卷福建卷) 转基因抗病香蕉的培育过程如图所示。
质粒上有转基因抗病香蕉的培育过程如图所示质粒上有PstⅠⅠ、、SmaⅠⅠ、、EcoRⅠⅠ、、ApaⅠⅠ等四种限制酶切割位点请回答：等四种限制酶切割位点请回答： 1）构建含抗病基因的表达载体）构建含抗病基因的表达载体A时，应选用限制酶时，应选用限制酶 ，，对对 进行切割进行切割 （（2）培养基中的卡那霉素会抑制香蕉愈伤组织细胞的生长，欲利用该培养基筛选已导入）培养基中的卡那霉素会抑制香蕉愈伤组织细胞的生长，欲利用该培养基筛选已导入抗病基因的香蕉细胞，应使基因表达载体抗病基因的香蕉细胞，应使基因表达载体A中含有中含有 ，作为标记基因作为标记基因 （（3）香蕉组织细胞具有）香蕉组织细胞具有 ，因此，可以利用组织培养技术将导入抗病基，因此，可以利用组织培养技术将导入抗病基因的香蕉组织细胞培育成植株图中因的香蕉组织细胞培育成植株图中①①、、②②依次表示组织培养过程中香蕉组织细胞依次表示组织培养过程中香蕉组织细胞的的 2）抗卡那霉素基因）抗卡那霉素基因PstⅠ、EcoRⅠ含抗病基因的DNA、质粒全能性全能性脱分化、再分化脱分化、再分化 •（（10福建卷）福建卷）32．[生物—现代生物科技专题](10分)红细胞生成素(EPO)是体内促进红细胞生成的一种糖蛋白，可用于治疗肾衰性贫血等疾病由于天然EP0来源极为有限，目前临床使用的红细胞生成素主要来自于基因工程技术生产的重组人红细胞生成素(rhEPO）期间要生产流程如右图 •（（1）图中）图中①①所指的是所指的是 技技术。
术•（（2）图中）图中②②所指的物质是所指的物质是 ，，③③所指的物质是所指的物质是 •（（3）培养重组）培养重组CHO 细胞时，细胞时，为便于清除代谢产物，防止细为便于清除代谢产物，防止细胞严物积累对细胞自身造成危胞严物积累对细胞自身造成危害，应定期更换害，应定期更换 •（（4）检测）检测 rhEPO外活性需用外活性需用抗抗rhEPO单克隆抗体分泌单单克隆抗体分泌单克隆抗体的克隆抗体的 细胞，细胞，可由可由rhEPO免疫过的小鼠免疫过的小鼠B淋淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合而成而成PCR mRNA rhEPO 培养液培养液 杂交瘤杂交瘤 •（（10天津卷）天津卷）Ⅰ.（14分）下图是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的技术路线图中tetR表示四环素抗性基因，ampR表示氨苄青霉素抗性金银，BamHI、HindIII、SmaI直线所示为三种限制酶的酶切位点据图回答：（1）图中将人乳铁蛋白基因插入载体，需用 限制酶同时酶切载体和人乳铁蛋白基因。
筛选含有重组载体的大肠杆菌首先需要在含 的培养基上进行HindⅢⅢ和和BamHⅠⅠ；氨苄青霉素；氨苄青霉素 （（2）能使人乳铁蛋白基因在乳腺细胞中特异性表达的调控）能使人乳铁蛋白基因在乳腺细胞中特异性表达的调控序列是序列是 （填字母代号）填字母代号）A.启动子启动子 B. tetR C.复制原点复制原点 D. ampR（（3）过程）过程①①可采用的操作方法是可采用的操作方法是 （填字母代号）填字母代号）A.农杆菌转化农杆菌转化 B. 大肠杆菌转化大肠杆菌转化 C.显微注射显微注射 D. 细胞细胞融合融合（（4）过程）过程②②可采用的生物技术是可采用的生物技术是 胚胎移植技术胚胎移植技术AC •（（5）对早期胚胎进行切割，经过程）对早期胚胎进行切割，经过程②②可获得多个可获得多个新个体这利用了细胞的新个体这利用了细胞的 性•（（6）为检测人乳铁蛋白是否成功表达，可采用）为检测人乳铁蛋白是否成功表达，可采用 （填字母代号）技术填字母代号）技术 A.核酸分子杂交核酸分子杂交 B. 基因序列分析基因序列分析 C.抗原抗原—抗体杂交抗体杂交 D. PCR全能全能C 3、以重组、以重组DNA技术为核心的基因工程正在改变人类的生活，请回答有关问题：技术为核心的基因工程正在改变人类的生活，请回答有关问题：（（1）基因工程的基本操作程序主要包括四个步骤：第一步是目的基因的获取，）基因工程的基本操作程序主要包括四个步骤：第一步是目的基因的获取，获得目的基因的方法通常包括获得目的基因的方法通常包括 和和 ；第二步是基因表达；第二步是基因表达载体的构建，第三步是将目的基因导入受体细胞，第四步是载体的构建，第三步是将目的基因导入受体细胞，第四步是 。
①①通常在第一步和第二步的操作中需要相同的工具酶是通常在第一步和第二步的操作中需要相同的工具酶是 ②②利用利用PCR技术扩增目的基因的过程中，目的基因受热形成单链并与引物结合，技术扩增目的基因的过程中，目的基因受热形成单链并与引物结合，在在 酶的作用下延伸形成酶的作用下延伸形成DNA③③基因表达载体的组成包括基因表达载体的组成包括 四个部四个部分，分， ④④将目的基因导入植物细胞一般采用将目的基因导入植物细胞一般采用 ，培养该细胞再生，培养该细胞再生成植株的过程中，往往需要使用植物激素，人为地控制细胞的成植株的过程中，往往需要使用植物激素，人为地控制细胞的 和和 ④④（多选）如果转基因植物的花粉中含有毒蛋白，将引起的安全性问题包括 （多选）如果转基因植物的花粉中含有毒蛋白，将引起的安全性问题包括 （ ）。
）A．生物安全．生物安全 B．环境安全．环境安全 C．食品安全．食品安全 D．伦理道德问题．伦理道德问题⑤⑤蛋白质工程的基本原理是：预期蛋白质功能蛋白质工程的基本原理是：预期蛋白质功能→设计预期的蛋白质结构设计预期的蛋白质结构→推测推测应有的应有的 序列序列→找到相对应的找到相对应的 序列人工合成人工合成基因文库获得基因文库获得目的基因的检测与表达目的基因的检测与表达限制性核酸内切酶限制性核酸内切酶DNA聚合聚合启动子、目的基因、终止子、标记基因启动子、目的基因、终止子、标记基因农杆菌转化法农杆菌转化法氨基酸氨基酸脱氧核苷酸脱氧核苷酸脱分化脱分化再分化再分化ABC •1、什么是细胞的全能性？、什么是细胞的全能性？•2、请简述植物组织培养的过程？哪些步骤需要激、请简述植物组织培养的过程？哪些步骤需要激素的诱导？素的诱导？•3、什么是脱分化？需要哪些条件？、什么是脱分化？需要哪些条件？•4、请简述植物体细胞杂交的过程？、请简述植物体细胞杂交的过程？•5、杂种细胞形成的标志是什么？、杂种细胞形成的标志是什么？•6、人工诱导的方法有哪些？具体方法如何？、人工诱导的方法有哪些？具体方法如何？•7、植物体细胞杂交培育新品种的优点是什么？、植物体细胞杂交培育新品种的优点是什么？•8、快繁的优点有哪些？、快繁的优点有哪些？•9、作物脱毒的常用方法是怎样的？、作物脱毒的常用方法是怎样的？•10、人工种子由哪几部分组成？、人工种子由哪几部分组成？•11、单倍体育种的优点是什么？、单倍体育种的优点是什么？•12、请简述细胞产物工厂化生产的过程。
请简述细胞产物工厂化生产的过程先问问自己，这些都掌握了没有？先问问自己，这些都掌握了没有？ •13、动物细胞工程包括哪些技术？这些技术中作为、动物细胞工程包括哪些技术？这些技术中作为基础的是哪项技术？基础的是哪项技术？•14、简述动物细胞培养的概念？过程？、简述动物细胞培养的概念？过程？•15、动物细胞培养在取材上有什么讲究？、动物细胞培养在取材上有什么讲究？•16、胰蛋白酶在动物细胞培养中起的作用是什么？、胰蛋白酶在动物细胞培养中起的作用是什么？什么是接触抑制？什么是接触抑制？•17、什么是原代培养？什么是传代培养？、什么是原代培养？什么是传代培养？•18、细胞株指多少代的细胞？细胞系指多少代的细、细胞株指多少代的细胞？细胞系指多少代的细胞？胞？•19、动物细胞培养需要哪些条件？为何要定期更换、动物细胞培养需要哪些条件？为何要定期更换培养液？培养液？•20、什么是合成培养基？什么是选择培养基？、什么是合成培养基？什么是选择培养基？•21、为何对动物细胞培养时常要加动物血清？、为何对动物细胞培养时常要加动物血清？•22、动物细胞培养的气体环境有什么具体要求？、动物细胞培养的气体环境有什么具体要求？ •23、什么是动物核移植？使用什么时期的卵、什么是动物核移植？使用什么时期的卵母细胞？母细胞？•24、动物核移植技术在畜牧业应用中有什么、动物核移植技术在畜牧业应用中有什么优点？优点？•25、什么是动物细胞融合？杂交细胞有何特、什么是动物细胞融合？杂交细胞有何特点？点？•26、动物细胞融合的过程是怎样的？诱导方、动物细胞融合的过程是怎样的？诱导方法有哪些？法有哪些？•27、单克隆抗体有什么优点？、单克隆抗体有什么优点？•28、请简述单克隆抗体的过程？要经过几次、请简述单克隆抗体的过程？要经过几次筛选？每次筛选的作用是什么？筛选？每次筛选的作用是什么？•29、什么是生物导弹？其原理是什么？、什么是生物导弹？其原理是什么？ 细细胞胞工工程程应用的原理和方法应用的原理和方法研究的水平研究的水平研究的目的研究的目的细胞生物学和细胞生物学和分子生物学分子生物学细胞水平细胞水平按照人们的意愿按照人们的意愿来改变细胞内的来改变细胞内的遗传物质或获得遗传物质或获得细胞产品细胞产品概念概念分类分类植物细胞工程植物细胞工程动物细胞工程动物细胞工程 主主要要技技术术植物组织培养植物组织培养植物体细胞杂交植物体细胞杂交动物细胞培养动物细胞培养动物细胞融合动物细胞融合单克隆抗体技术单克隆抗体技术胚胎移植胚胎移植核移植核移植植物植物细胞细胞工程工程技术技术动物动物细胞细胞工程工程技术技术 1 1、概念、概念: :应用的原理和方法应用的原理和方法研究的水平研究的水平研究的目的研究的目的细胞生物学和分子生物学细胞生物学和分子生物学细胞整体水平或细胞器水平细胞整体水平或细胞器水平按照人们的意愿来按照人们的意愿来改变细胞内改变细胞内的遗传物质的遗传物质或或获得细胞产品获得细胞产品2 2、分类、分类植物细胞工程植物细胞工程动物细胞工程动物细胞工程微生物工程（略）微生物工程（略）细胞工程细胞工程 细胞分化原因？细胞分化原因？n所有细胞含全套基因所有细胞含全套基因n但表达的基因不同但表达的基因不同------------分化的根本原因分化的根本原因n使转录的使转录的mRNAmRNA不同不同n翻译成的蛋白质不同翻译成的蛋白质不同------------分化的直接原因分化的直接原因n导致细胞的形态、结构、功能不同导致细胞的形态、结构、功能不同 细胞的全能性n定义：生物体的细胞，具有使后代细胞发定义：生物体的细胞，具有使后代细胞发 育成完整个体的潜能。
育成完整个体的潜能n原因：生物的每一个细胞都含有该物种所原因：生物的每一个细胞都含有该物种所 特有的全套遗传物质特有的全套遗传物质全能性大小：受精卵＞生殖细胞＞体细胞全能性大小：受精卵＞生殖细胞＞体细胞 具有全能性一定能表现出全能性吗？具有全能性一定能表现出全能性吗？ 概念：概念：分类分类细细胞胞工工程程小小结结植物细植物细胞工程胞工程动物细动物细胞工程胞工程植物植物体细胞杂交体细胞杂交 植物植物组织培养组织培养 （基础）（基础）动物动物细胞核移植细胞核移植 动物动物细胞培养细胞培养生产生产单克隆抗体单克隆抗体 动物动物细胞融合细胞融合（基础）（基础）—原理、过程、应用（原理、过程、应用（3项）项）—原理、过程、优势及缺陷、应用（原理、过程、优势及缺陷、应用（1项）项）—原理、过程、培养条件、应用（原理、过程、培养条件、应用（4项）项）—原理、过程、类型、应用（原理、过程、类型、应用（5项）、问题项）、问题—原理、过程、应用（原理、过程、应用（1项）项）—原理、过程、单抗特点、应用（原理、过程、单抗特点、应用（2项）项）例题例题 所采用技术所采用技术的理论基础的理论基础 植植物物细细胞胞工工程程通通常常采采用用的的技技 术术 手手 段段 植物植物组织培养组织培养 植物植物体细胞杂交体细胞杂交植物细胞的植物细胞的全能性全能性一、植物细胞工程一、植物细胞工程 ( (离体的植物离体的植物器官、组织或细胞器官、组织或细胞) )脱分化脱分化再分化再分化愈伤组织愈伤组织根、芽根、芽（胚状体）（胚状体）植物体植物体 培养条件：培养条件：离体、含有离体、含有全部营养成分全部营养成分的培养基、的培养基、一定的温度、空气、一定的温度、空气、无菌环境无菌环境、适合、适合的的PHPH、适合的光照等、适合的光照等外植体外植体举例：举例：花药离体培养；基因工程培育的抗棉铃虫花药离体培养；基因工程培育的抗棉铃虫的棉花植株；细胞工程中培育的的棉花植株；细胞工程中培育的““番茄番茄- -马马铃薯铃薯””杂种植株等。
杂种植株等1 1、植物组织培养、植物组织培养 扩大扩大培养培养 过程过程离体的植物器官、离体的植物器官、组织或细胞组织或细胞愈伤组织愈伤组织根、芽根、芽植物体植物体外植体外植体脱分化脱分化植物激素：细胞植物激素：细胞分裂素、生长素分裂素、生长素再分化再分化组培条件：组培条件： 含有含有全部全部营养成分营养成分的培的培养基、一定的养基、一定的温度、空气、温度、空气、无菌环境无菌环境、适、适合的合的pHpH、适时、适时光照等1.1.植物组织培养植物组织培养 原理：原理：过程：过程：细胞膜流动性和细胞的全能性细胞膜流动性和细胞的全能性优势：优势：应用：应用：（具（具体方体方法？）法？）克服了远缘杂交不亲和的障碍克服了远缘杂交不亲和的障碍未能让杂种植物按照人们的需要表现出双亲的优未能让杂种植物按照人们的需要表现出双亲的优良性状培育作物新品种培育作物新品种缺陷：缺陷：？？？？？？2 2、植物体细胞杂交的过程、植物体细胞杂交的过程 植物植物A A细胞细胞植物植物B B细胞细胞加酶去加酶去壁壁原生质体原生质体A A原生质体原生质体B B原生质原生质体融合体融合融合细胞融合细胞再再生生壁壁杂种细胞杂种细胞脱分化脱分化去壁的常用方法：去壁的常用方法：酶解法酶解法（纤维素酶、果胶酶等）（纤维素酶、果胶酶等）诱导原生质诱导原生质体融合方法：体融合方法：物理方法：物理方法：离心、振动、电刺激等离心、振动、电刺激等 化学方法：化学方法：聚乙二醇（聚乙二醇（PEGPEG）） 融合成功的标志融合成功的标志人工诱导人工诱导筛选筛选愈伤组织愈伤组织杂种植株杂种植株再分化再分化2 2、植物体细胞杂交的过程、植物体细胞杂交的过程 植物植物A A细胞细胞植物植物B B细胞细胞去去壁壁原生质体原生质体A A原生质体原生质体B B原生质体原生质体融合融合融合体融合体再生壁再生壁杂种细胞杂种细胞细胞分裂细胞分裂愈伤组织愈伤组织杂种植株杂种植株Ø去壁的常用方法：去壁的常用方法：Ä酶解法（纤维素酶、果胶酶等）酶解法（纤维素酶、果胶酶等）Ø原生质体融合方法：原生质体融合方法：Ä物理法：离心、振动、电刺激等物理法：离心、振动、电刺激等 Ä化学法：聚乙二醇（化学法：聚乙二醇（PEGPEG）） 2.2.植物体细胞杂交植物体细胞杂交过程示意图 （（1 1）植物繁殖的新途径（）植物繁殖的新途径（见资料见资料））1 1）微型繁殖（快速繁殖））微型繁殖（快速繁殖）2 2）作物脱毒）作物脱毒3 3）神奇的人工种子）神奇的人工种子（（2 2）作物新品种的培育）作物新品种的培育1 1）单倍体育种）单倍体育种2 2）突变体的利用）突变体的利用3 3）转基因植物的培育）转基因植物的培育 （（3 3）细胞产物的工厂化生产）细胞产物的工厂化生产3 3、植物细胞工程的实际应用、植物细胞工程的实际应用 •（宁夏卷）38．[生物——选修模块3：现代生物科技专题](15分) 请回答：• （1）植物微型繁殖技术属于植物组织培养的范畴。
该技术可以保持品种的 ，繁殖种苗的速度 离体的叶肉细胞在适宜的条件下培养，最终能够形成完整的植株，说明该叶肉细胞具有该植物的全部 • (2)把试管苗转接到新的培养基上时，需要在超净工作台上进行，其原因是避免• 的污染•（3）微型繁殖过程中，适宜浓度的生长素单独使用可诱导试管苗 ，而与• 配比适宜时可促进芽的增殖若要抑制试管苗的生长，促使愈伤组织产生和生长，需要使用的生长调节剂是 (脱落酸、2，4-D)•（4）将某植物试管苗培养在含不同浓度蔗糖的培养基上一段时间后，单株鲜重和光合作用强度的变化如图据图分析，随着培养基中蔗糖浓度的增加，光合作用强度的变化趋势是 ，单株鲜重的变化趋势是 据图判断，培养基中不含蔗糖时，试管苗光合作用产生的有机物的量 (能、不能)满足自身最佳生长的需要• (5)据图推测，若要在诱导试管苗生根的过程中提高其光合作用能力，应 (降低，增加)培养基中蔗糖浓度，以便提高试管苗的自养能力。
1）遗传特性）遗传特性 快快 遗传信息遗传信息 （（2）微生物）微生物 （（3）生根）生根 细细胞分裂素胞分裂素 2，，4-D （（4）逐渐减小）逐渐减小 先增加后下降先增加后下降 不能不能 （（5）降低）降低 二、二、动物细胞工程动物细胞工程植物细胞工程常用的技术手段：植物细胞工程常用的技术手段：植物组织培养、植物组织培养、 植物体细胞杂交植物体细胞杂交等等强调：强调： 是其他动是其他动物细胞工程技术的物细胞工程技术的基础基础动物细胞培养动物细胞培养 动物细胞核移植动物细胞核移植 动物细胞融合动物细胞融合 单克隆抗体制备单克隆抗体制备等等 动物细胞培养技术动物细胞培养技术 回顾：回顾：常用的技术手段：常用的技术手段： 动物动物胚胎胚胎或或幼龄幼龄动动物的组织、器官物的组织、器官胰蛋白酶胰蛋白酶剪碎剪碎单个细胞单个细胞加培养液加培养液制成制成细胞悬细胞悬浮液浮液去掉组织去掉组织间蛋白间蛋白1010代代细胞细胞5050代代细胞细胞无限无限传代传代原代培养原代培养传代培养传代培养部分细胞遗部分细胞遗传物质改变传物质改变动物细胞培养不能动物细胞培养不能最终培养成动物体最终培养成动物体随细胞增多，细胞随细胞增多，细胞就会停止分裂增殖就会停止分裂增殖1. 1.动物细胞培养动物细胞培养: : 动物细胞培养动物细胞培养原理：原理：过程：过程：细胞增殖细胞增殖培养条件：培养条件：应用：应用：细胞生长特点？细胞生长特点？工具酶及作用？工具酶及作用？培养类型？培养类型？①①无菌、无毒环境无菌、无毒环境②②营养营养③③适宜的温度和适宜的温度和PH④④气体环境（气体环境（95%空气和空气和5%CO2））①①生产生物制品生产生物制品②②为基因工程培养细胞为基因工程培养细胞③③检测有毒物质检测有毒物质④④生理学、医药学研究生理学、医药学研究从组织切片中取下小片样品从组织切片中取下小片样品转入特殊培养液中转入特殊培养液中进行进行原代培养原代培养胰蛋白酶胰蛋白酶分装到多个扁形培养瓶中分装到多个扁形培养瓶中进行进行传代培养传代培养单个细胞悬浮液单个细胞悬浮液 细胞悬细胞悬浮液浮液1010代代细胞细胞5050代代细胞细胞无限无限传代传代原代培养原代培养传代培养传代培养细胞株细胞株细胞系细胞系原代培养与传代培养、细胞株与细胞系原代培养与传代培养、细胞株与细胞系多数组织细胞固定在表面生长和分裂。
多数组织细胞固定在表面生长和分裂随细胞增多，细胞就会停止分裂增殖随细胞增多，细胞就会停止分裂增殖遗传物质改变遗传物质改变动物细胞培养液：动物细胞培养液： ⑴⑴液体液体培养基培养基; ; ⑵⑵成分中有成分中有动物血清动物血清等等1 1、动物细胞培养、动物细胞培养 植物组织培养和动物细胞培养的比较植物组织培养和动物细胞培养的比较项目项目培养基培养基结果结果应用应用植物组植物组织培养织培养动物细动物细胞培养胞培养均需适宜的外界条件：均需适宜的外界条件：PH,PH,温度温度, ,营养及营养及““无菌、无菌、无毒环境无毒环境””等（等（见资料见资料）固体固体、营养、营养物质、物质、蔗糖、蔗糖、植物激素植物激素培养成培养成植株植株液体液体、营养物、营养物质、质、葡萄糖、葡萄糖、动物血清动物血清培育成细培育成细胞系或细胞系或细胞株胞株1.生产蛋白质制品生产蛋白质制品（如病毒疫苗、干扰素、（如病毒疫苗、干扰素、 单克隆抗体单克隆抗体、动物激素）、动物激素）2.用于某些器官移植用于某些器官移植1.1.试管苗的快速繁殖试管苗的快速繁殖2.2.无病毒植物的培育无病毒植物的培育3.3.生产药物等生产药物等4.4.人工种子（见资料）人工种子（见资料）5.5.转基因植物的培育转基因植物的培育 细胞细胞A细胞细胞B杂种细胞杂种细胞物理法、物理法、化学法化学法灭活灭活的仙台病毒的仙台病毒 2 2、动物细胞融合、动物细胞融合过程过程诱导动物细胞融合与植物原生质体融合诱导动物细胞融合与植物原生质体融合的的原理原理和和方法方法是否基本相同？是否基本相同？ 制备单制备单克隆抗克隆抗体：体：不具有繁殖性不具有繁殖性但具有抗原性但具有抗原性 获得获得杂种植株杂种植株用途用途物理、化学方物理、化学方法法（同左）（同左）生物：灭活的病毒生物：灭活的病毒物理（离心、物理（离心、振荡、电刺激）振荡、电刺激）化学（化学（PEGPEG））诱导方法诱导方法使细胞使细胞分散后分散后诱诱导细胞融合导细胞融合去除细胞壁后诱去除细胞壁后诱导导原生质体融合原生质体融合细胞融合细胞融合的方法的方法细胞膜的细胞膜的流动性流动性细胞膜的细胞膜的流动性流动性、、植物细胞植物细胞全能性全能性原理原理动物细胞融合动物细胞融合植物体细胞杂交植物体细胞杂交比较项目比较项目植物体细胞杂交、动物细胞融合的比较植物体细胞杂交、动物细胞融合的比较主要用于制备主要用于制备单克隆抗体单克隆抗体 卵细胞卵细胞Ａ母绵羊Ａ母绵羊Ｂ母绵羊Ｂ母绵羊乳腺细胞乳腺细胞细胞质细胞质细胞核细胞核细胞核移植细胞核移植早期胚胎早期胚胎卵裂卵裂C母绵羊子宫母绵羊子宫胚胎移植胚胎移植多莉羊多莉羊分娩分娩 妊娠妊娠 多多莉莉羊羊的的培培育育过过程程融合后的卵细胞融合后的卵细胞3.核移核移植与克植与克隆动物：隆动物：动物细胞核有动物细胞核有全能性全能性 动物细胞核移植动物细胞核移植原理：原理：过程：过程：应用：应用：动物细胞核的全能性动物细胞核的全能性动物动物A细胞核细胞核动物动物B去去核的核的MⅡⅡ卵母细胞卵母细胞重组重组细胞细胞核移植核移植胚胎胚胎移植移植克隆克隆动物动物分娩分娩重组重组胚胎胚胎哺乳动物代哺乳动物代孕母体子宫孕母体子宫①①繁育优良畜群繁育优良畜群②②保护濒危动物保护濒危动物③③转基因克隆动物生产医用蛋白转基因克隆动物生产医用蛋白④④器官移植的供体器官移植的供体⑤⑤生理、病理学研究生理、病理学研究问题：问题：①①成功率低成功率低②②克隆动物存在健康问题克隆动物存在健康问题③③克隆动物食品的安全性问题克隆动物食品的安全性问题 3 3、细、细胞核移胞核移植植供体供体采集卵母细胞采集卵母细胞减减ⅡⅡ中期中期卵母细胞卵母细胞去核去核去核去核卵母细胞卵母细胞供体细胞供体细胞培养培养激活激活分裂、分裂、分化分化胚胎移植胚胎移植克隆奶牛克隆奶牛重重复复获获得得更更多多克克隆隆牛牛 抗原抗原 动物体内动物体内刺激刺激 效应效应B 抗体抗体 特点：产量低、特异性差、纯度低、反应不够灵敏特点：产量低、特异性差、纯度低、反应不够灵敏4 4、单克隆抗体、单克隆抗体1 1、常规抗体制备、常规抗体制备：：一个一个B B淋巴细胞淋巴细胞：只分泌一种：只分泌一种特异性抗体特异性抗体2、单克隆抗体制备：、单克隆抗体制备：杂交瘤细胞杂交瘤细胞 小鼠小鼠骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞：能：能无限增殖无限增殖融合融合 单克隆抗体单克隆抗体 培养培养 抗原注入小鼠体内抗原注入小鼠体内已免疫的已免疫的B B淋巴细胞淋巴细胞骨髓瘤细胞骨髓瘤细胞筛选筛选出出杂交瘤细胞杂交瘤细胞筛选筛选出能产生特异性抗体的细胞群出能产生特异性抗体的细胞群体外培养体外培养体内培养体内培养从培养液中提取从培养液中提取从小鼠腹水中提取从小鼠腹水中提取单克隆抗体单克隆抗体细胞融合细胞融合动物细胞培养动物细胞培养单单克克隆隆抗抗体体的的制制备备( (特定的特定的选择培养基选择培养基) ) ⑴⑴、诱导动物细胞融合的方法、诱导动物细胞融合的方法Ø物理法：物理法：仙台病毒紫外线紫外线丧失感染活性丧失感染活性（不感染细胞）（不感染细胞）保留融合活性保留融合活性（诱导细胞融合）（诱导细胞融合）聚乙二醇（PEG）电刺激……灭活病毒Ø化学法：化学法：Ø生物法生物法:4.4.单克隆抗体的概念单克隆抗体的概念 ⑵⑵. .单克隆抗体概念单克隆抗体概念单个细胞单个细胞化学性质单一、特异性强化学性质单一、特异性强无性繁殖无性繁殖 B B淋巴细胞：淋巴细胞：寿命短寿命短, ,分泌特异性抗体分泌特异性抗体骨髓瘤细胞：骨髓瘤细胞：寿命长寿命长杂交瘤细胞：杂交瘤细胞：寿命长，单克隆抗体寿命长，单克隆抗体⑶⑶. .单克隆抗体特性单克隆抗体特性Ä均一均一性：性：纯度很高的均一性抗体纯度很高的均一性抗体Ä专一专一性：性：只对抗原某一抗原决定簇起反应只对抗原某一抗原决定簇起反应Ä大量大量产生及产生及稳定稳定性：性：杂交瘤细胞能无限繁殖杂交瘤细胞能无限繁殖……由单个由单个B B淋巴细胞经无性繁殖淋巴细胞经无性繁殖（克隆），形成基因型相同（克隆），形成基因型相同的细胞群，所产生的化学性的细胞群，所产生的化学性质单一、特异性强的抗体。
质单一、特异性强的抗体单单：：抗体抗体：：克隆克隆：：特异性强、灵敏度高、产量大特异性强、灵敏度高、产量大 •主要用于疾病的诊断、治疗和预防主要用于疾病的诊断、治疗和预防•若在单抗上带上抗癌药物制成若在单抗上带上抗癌药物制成““生物导弹生物导弹””，，将药物将药物定向定向带到癌细胞所在部位，既消灭了癌带到癌细胞所在部位，既消灭了癌细胞又不会伤害健康细胞细胞又不会伤害健康细胞•特点：与常规抗体相比，具有特点：与常规抗体相比，具有特异性强、灵敏特异性强、灵敏度高、化学性质单一度高、化学性质单一的优点单克隆抗体的应用：单克隆抗体的应用：单克隆抗体是指：单克隆抗体是指：杂交瘤细胞产生的单一抗体杂交瘤细胞产生的单一抗体 •例题．(2009年江年江苏苏卷卷)动动物器官的体外培物器官的体外培养技养技术对术对于研究器官的生理、病理于研究器官的生理、病理过过程及程及其机制意其机制意义义重大下图图是一个新生小鼠的是一个新生小鼠的肝肝脏脏小小块块培养装置示意培养装置示意图图，，请请回答下列回答下列问问题题 •(1)肝肝脏脏切成小薄片，切成小薄片，这这有利于肝有利于肝脏细脏细胞胞________________________________________________________________________。
•(2)气室中充入气室中充入5%CO2气体的主要作用是气体的主要作用是________________________________________________________________________•(3)培养液中添加抗生素是培养液中添加抗生素是为为了抑制了抑制细细菌生菌生长长，但要注意，但要注意选择选择抗生素的抗生素的______________，以保，以保证证抗生素抗生素对对肝肝脏脏无无害 •(4)有机物有机物X有毒性，可有毒性，可诱发诱发染色体断裂利用染色体断裂利用上上图图所示装置和提供的下列材料用具，探究肝所示装置和提供的下列材料用具，探究肝脏脏小小块对块对有机物有机物X是否具有解毒作用是否具有解毒作用•材料用具：材料用具：•肝肝脏脏小小块块，外周血淋巴，外周血淋巴细细胞，淋巴胞，淋巴细细胞培养液，胞培养液，植物凝集素植物凝集素(刺激淋巴刺激淋巴细细胞分裂胞分裂)；；显显微微镜镜，，载载玻玻片，盖玻片，玻璃皿，滴管；吉姆片，盖玻片，玻璃皿，滴管；吉姆萨萨染液染液(使染使染色体着色色体着色)，有机物，有机物X溶液等实验过实验过程：程：•①①在淋巴在淋巴细细胞培养液中加入植物凝集素培养淋胞培养液中加入植物凝集素培养淋巴巴细细胞，取胞，取4等份，等份，备备用。
用 •②利用甲、乙、丙、丁4组上图所示装置，按下表步骤操作(“√”表示已完成的步骤)•上表中还需进行的操作是________________________________________________________________________甲甲乙乙丙丙丁丁步步骤骤一：加入肝一：加入肝脏脏培培养液养液√√√√√√√√步步骤骤二：加入有机物二：加入有机物X溶液溶液√√√√步步骤骤三：放置肝三：放置肝脏脏小小块块√√ •③③培养一段培养一段时间时间后，取后，取4组组装置中的等量装置中的等量培养液，分培养液，分别别添加到添加到4份份备备用的淋巴用的淋巴细细胞胞培养液中培养液中继续继续培养•④④一段一段时间时间后取淋巴后取淋巴细细胞分胞分别别染色、制片染色、制片在在显显微微镜镜下下观观察察____________________，，并并对对比分析若丙比分析若丙组组淋巴淋巴细细胞出胞出现现异常，异常，而甲而甲组组的淋巴的淋巴细细胞正常，胞正常，则说则说明明________________________________________________________________________。
•【解析】 在动物细胞培养过程中，细胞会表现出接触在动物细胞培养过程中，细胞会表现出接触抑制现象，此时是单层细胞用胰蛋白酶可以使贴壁细抑制现象，此时是单层细胞用胰蛋白酶可以使贴壁细胞从瓶壁上分离开来随着细胞传代培养代数的增多，胞从瓶壁上分离开来随着细胞传代培养代数的增多，绝大部分细胞分裂停止，进而出现衰老甚至死亡的现象，绝大部分细胞分裂停止，进而出现衰老甚至死亡的现象，但极少数细胞可以连续增殖，有些细胞会因遗传物质改但极少数细胞可以连续增殖，有些细胞会因遗传物质改变而变成不死性细胞由于活细胞的膜具选择透过性，变而变成不死性细胞由于活细胞的膜具选择透过性，大分子染料不能进入活细胞内，而死细胞的细胞膜丧失大分子染料不能进入活细胞内，而死细胞的细胞膜丧失选择透过性，大分子染料能够进入死细胞内而着色由选择透过性，大分子染料能够进入死细胞内而着色由于中期染色体形态固定、数目清晰，因此最好选用细胞于中期染色体形态固定、数目清晰，因此最好选用细胞分裂到中期的细胞用显微镜观察染色体数目由于在冷分裂到中期的细胞用显微镜观察染色体数目由于在冷冻超低温液氮下，细胞中酶的活性降低，细胞新陈代谢冻超低温液氮下，细胞中酶的活性降低，细胞新陈代谢的速率降低，通常在此条件下保存细胞。
机体把移植的的速率降低，通常在此条件下保存细胞机体把移植的皮肤组织当作抗原攻击，会发生排斥现象皮肤组织当作抗原攻击，会发生排斥现象 •【答案】 (1)相互接触 接触抑制 单层(或一层) 胰蛋白酶 (2)衰老甚至死亡 不死性 降低 减少•(3)由于活细胞的膜具有选择透过性，大分子染料不能进入活细胞内，故活细胞不能着色(或由于死细胞的膜丧失了选择透过性，大分子染料能够进入死细胞内而着色)•(4)中 (5)冷冻(或超低温、液氮) 酶 新陈代谢•(6)抗原 •(2008年上海生物年上海生物)制制备单备单克隆抗体所采用克隆抗体所采用的的细细胞工程技胞工程技术术包括包括( )• ①①细细胞培养 胞培养 ②②细细胞融合 胞融合 ③③胚胎移植 胚胎移植 ④④细细胞核移植胞核移植•A．．①②①② B．．①③①③•C．．②③②③ D．．③④③④ •【解析】 制备单克隆抗体时，首先采用细胞制备单克隆抗体时，首先采用细胞融合技术得到杂交瘤细胞，再采用动物细胞培融合技术得到杂交瘤细胞，再采用动物细胞培养技术获得能产生所需抗体的细胞群养技术获得能产生所需抗体的细胞群•【【答案答案】】 A 例．例．(06(06江苏江苏) )下图是单克隆抗体制备流程阶段示意图。
下图是单克隆抗体制备流程阶段示意图1 1））______________________________技术是单克隆抗体技术的基础技术是单克隆抗体技术的基础2 2）根据培养基的用途分类，图中）根据培养基的用途分类，图中HATHAT培养基属于培养基属于________________培养基3 3）单克隆抗体与常规的血清抗体相比，最大的优越性是）单克隆抗体与常规的血清抗体相比，最大的优越性是________________________________4 4）动物细胞融合除了采用植物细胞原生质体融合常用的诱导剂外，还可以采）动物细胞融合除了采用植物细胞原生质体融合常用的诱导剂外，还可以采用用________________________________5 5）选出的杂交瘤细胞既具备骨髓瘤细胞的）选出的杂交瘤细胞既具备骨髓瘤细胞的______________________________特点，又具备淋巴特点，又具备淋巴细胞的细胞的______________________________特点6 6）淋巴细胞是由动物体）淋巴细胞是由动物体__________________中的中的____________________________细胞分化、发育而来。
细胞分化、发育而来7 7）杂交瘤细胞从培养基中吸收葡萄糖、氨基酸的主要方式是）杂交瘤细胞从培养基中吸收葡萄糖、氨基酸的主要方式是________________________动物细胞培养动物细胞培养选择选择特异性强特异性强,灵敏度高灵敏度高灭活的病毒灭活的病毒在体外大量增殖在体外大量增殖分泌特异性抗体分泌特异性抗体骨髓骨髓造血干细胞造血干细胞主动运输主动运输 6、、基基因因型型为为AaBb的的水水稻稻(具具有有24条条染染色色体体)的的花花粉粉通通过过无无菌菌操操作作，，接入试管后，在一定条件下形成试管苗的育种过程接入试管后，在一定条件下形成试管苗的育种过程1)愈愈伤伤组组织织是是花花粉粉细细胞胞不不断断分分裂裂后后的的形形成成的的不不规规则则细细胞胞团团，，愈愈伤伤组组织形成中，必须从培养基中获得织形成中，必须从培养基中获得__________2)要要促促进进花花粉粉细细胞胞分分裂裂生生长长，，培培养养基基中中应应有有________和和_______两类激素两类激素3)愈愈伤伤组组织织分分化化是是指指愈愈伤伤组组织织形形成成芽芽和和根根，，再再由由芽芽发发育育成成叶叶和和茎茎这这一一过过程程必必须须给给予予光光照照，，其其原原因因是是_____________利利用用光光照照制制造造有有机物，供试管苗生长。
机物，供试管苗生长4)试管苗的细胞核中含有试管苗的细胞核中含有___________条脱氧核苷酸链条脱氧核苷酸链5)培养出的试管基因型有培养出的试管基因型有 如果要获得育种如果要获得育种需要的植株，并能繁殖新品种，后面的育种步骤是需要的植株，并能繁殖新品种，后面的育种步骤是_________________ 各种营养各种营养(水、无机盐、蔗糖等能量物质水、无机盐、蔗糖等能量物质)和小分子有机物和小分子有机物生长素、生长素、 细胞分裂细胞分裂素素叶绿体叶绿体 24AB、、Ab、、ab、、aＢＢ用一定浓度的秋水仙素处理组织培养获得的幼苗用一定浓度的秋水仙素处理组织培养获得的幼苗 •1.精子的发生场所是？发生的时期？精子的发生场所是？发生的时期？•2、简述精子的变形过程中细胞结构的变化特点简述精子的变形过程中细胞结构的变化特点•3、卵泡的形成时期是？卵子和精子的发生有什么、卵泡的形成时期是？卵子和精子的发生有什么主要区别？主要区别？•4、什么是排卵？卵子形成的两次减数分裂分别在、什么是排卵？卵子形成的两次减数分裂分别在何时完成？何时完成？•5、受精完成的标志是什么？、受精完成的标志是什么？•6、受精部位是？、受精部位是？•7、什么是精子获能？什么时期的卵子具有受精能、什么是精子获能？什么时期的卵子具有受精能力？力？•8、受精的过程有哪些？、受精的过程有哪些？先问问自己，这些都掌握了没有？先问问自己，这些都掌握了没有？ •9、防止多精入卵的屏障是什么？、防止多精入卵的屏障是什么？•10、什么是雄原核？什么是雌原核？、什么是雄原核？什么是雌原核？•11、胚胎发育过程有哪几个重要阶段？每、胚胎发育过程有哪几个重要阶段？每一阶段的主要特点分别是什么？一阶段的主要特点分别是什么？•12、什么是试管动物技术？、什么是试管动物技术？•13、体外受精的主要步骤有哪些？、体外受精的主要步骤有哪些？•14、卵母细胞的采集方法有哪些？、卵母细胞的采集方法有哪些？•15、什么是超数排卵？、什么是超数排卵？•16、精子的收集方法有哪些？、精子的收集方法有哪些？•17、体外受精的媒介是？、体外受精的媒介是？•18、胚胎体外培养需要哪些条件？、胚胎体外培养需要哪些条件？ 教学目标：教学目标：1、胚胎工程的概念、胚胎工程的概念2、精子和卵子的发生、精子和卵子的发生3、受精作用、受精作用4、胚胎发育、胚胎发育 1、胚胎工程的概念、胚胎工程的概念•操作的对象操作的对象早期胚胎或配子早期胚胎或配子•技术手段技术手段胚胎干细胞培养、胚胎分割、胚胎移胚胎干细胞培养、胚胎分割、胚胎移植、体外受精等植、体外受精等•最后结果最后结果产生动物个体，满足人类需求产生动物个体，满足人类需求 一、精子的发生一、精子的发生1、场所：、场所：2、时期：、时期：3、过程：、过程： 精子的发生精子的发生是在是在睾丸睾丸的的曲细精管曲细精管内完成的内完成的 从从初情期初情期开开始直到始直到生殖功能衰退生殖功能衰退 发生的过程发生的过程大体可分为大体可分为三个阶三个阶段段曲细精管曲细精管 精原细胞精原细胞经过数次经过数次有丝分裂有丝分裂,产生大产生大量的量的精原细胞精原细胞,其中一部分经过染色体复其中一部分经过染色体复制等活动制等活动,进一步形成进一步形成初级精母细胞初级精母细胞。
每一个每一个初级精母细胞初级精母细胞经经减数分裂减数分裂形成形成四个含有四个含有单倍染色体单倍染色体的的精子细胞精子细胞第一阶段：初级精母细胞的形成第一阶段：初级精母细胞的形成第二阶段：精子细胞的形成第二阶段：精子细胞的形成 第第三三阶阶段段 精精子子变变形形 ______变为精子变为精子头部头部的主要部分；的主要部分；_______发育为头部的发育为头部的顶体顶体；；_______演变为精子的演变为精子的尾尾；；_______形成形成线粒体鞘膜线粒体鞘膜；；其它物质浓缩成其它物质浓缩成_______（（球形球形））第三阶段：精子变形第三阶段：精子变形细胞核细胞核高尔基体高尔基体中心体中心体线粒体线粒体原生质滴原生质滴 4、精子的形态：、精子的形态：（（1）外形似蝌蚪，）外形似蝌蚪，分分__、、__、、__、、三三大部分2）不同种动物精子的形态）不同种动物精子的形态____，大，大小略有小略有____，与动物的体形大小，与动物的体形大小___头头 颈颈 尾尾相似相似不同不同 无关无关 二、卵子的发生二、卵子的发生1.场所：场所：2.时期：时期： 卵子的发生卵子的发生是在是在卵巢卵巢内完成内完成 的的(卵巢有卵巢有产卵与产卵与排卵、分泌多种排卵、分泌多种激素激素这二大功能）这二大功能）。
性别分化性别分化以后以后（放射冠）（放射冠） 3、过程：、过程： 雌性胎儿卵巢内的雌性胎儿卵巢内的卵原细胞卵原细胞，通过，通过有丝有丝分裂分裂增加其数量，并演变为增加其数量，并演变为初级卵母细胞初级卵母细胞，，被被卵泡细胞卵泡细胞包围包围,形成形成卵泡卵泡初级卵母细胞初级卵母细胞经过经过减数分裂减数分裂变为成熟的变为成熟的卵子卵子 减数第减数第一一次分裂的时间是在雌性动物次分裂的时间是在雌性动物排排卵前后卵前后完成的，结果是产生完成的，结果是产生1个个次级卵母细次级卵母细胞胞和和1个个第一极体第一极体(暂不分离暂不分离),进入输卵管进入输卵管,准准备与精子受精备与精子受精 减数第减数第二二次分裂时间是在次分裂时间是在精子精子和和卵子结卵子结合合的过程中，结果是产生的过程中，结果是产生1个成熟卵子个成熟卵子和和3个第二极体个第二极体 三、精子与卵子的发生比较三、精子与卵子的发生比较场场 所所开始开始时间时间细胞增殖方式细胞增殖方式子细胞数目子细胞数目 是否是否变形变形重要区别重要区别精精子子卵卵子子场场 所所开始开始时间时间细胞增殖方式细胞增殖方式子细胞数目子细胞数目 是否是否变形变形重要区别重要区别精精子子睾丸睾丸初情初情期以期以后后先有丝分裂先有丝分裂后减数分裂后减数分裂(连连续完成续完成) 4个个 精子细胞精子细胞变形变形哺乳动物哺乳动物卵泡的形卵泡的形成和在卵成和在卵巢内的储巢内的储备是在备是在出出生前生前完成完成的；的；而精子是而精子是从初情期从初情期开始的开始的卵卵子子卵巢卵巢输卵管输卵管性别性别分化分化以后以后(较较早早)先有丝分裂先有丝分裂后减数分裂后减数分裂(不不连续完成连续完成) 1个卵细胞个卵细胞 3个极体个极体不变不变形形 四、受精作用四、受精作用1、概念、概念:3、场所、场所:1、概念、概念:指指精子和卵子精子和卵子结合形成结合形成合子合子 (即受精卵即受精卵)的过程。
的过程2、、受精的标志受精的标志:在在卵黄膜和透明带卵黄膜和透明带的的间隙可以观察到间隙可以观察到两个极体两个极体时时; 受精受精完成完成的标志的标志：雌雄原核的融合雌雄原核的融合3、场所、场所:受精是在受精是在输卵管输卵管内完成的内完成的 4、过程、过程受精前的受精前的准备阶段准备阶段受精阶段受精阶段准备阶段准备阶段1：：精子获精子获能能准备阶段准备阶段2：：卵子的卵子的准备准备 准备阶段准备阶段1：：精子获能精子获能 即精子必须在即精子必须在雌性动物生殖道内雌性动物生殖道内发发生相应生理变化后，才能获得受精能力生相应生理变化后，才能获得受精能力的现象准备阶段准备阶段2：：卵子的准备卵子的准备 即卵子在即卵子在输卵管内输卵管内成熟到成熟到减数第二减数第二分裂中期（分裂中期（MⅡⅡ））时，才具备受精能力时，才具备受精能力 受精阶段受精阶段 包括包括精子穿精子穿越放射冠越放射冠和和透明透明带带、进入、进入卵黄膜、卵黄膜、雌雄原核形成雌雄原核形成和和精卵结合精卵结合等内容 精、卵相遇精、卵相遇顶体反应顶体反应顶体酶释放顶体酶释放顶体酶溶顶体酶溶解透明带解透明带接触透明带接触透明带穿越放射冠穿越放射冠溶解卵丘细胞溶解卵丘细胞 （放射冠）（放射冠）穿越透明带穿越透明带接触卵黄膜接触卵黄膜产生透明带反应产生透明带反应形成第一道屏障（形成第一道屏障（作用作用 ））精子被微绒毛抱合精子被微绒毛抱合精子外膜与卵黄膜融合精子外膜与卵黄膜融合精子进入卵精子进入卵 精精子子进进入入卵卵后后变化变化①①变化变化②②变化变化③③产生卵黄膜产生卵黄膜封闭作用封闭作用形成第二道屏障形成第二道屏障 （（作用作用？？））尾部脱离尾部脱离核膜破裂核膜破裂形成雄原核形成雄原核形成雌原核形成雌原核激活卵子完激活卵子完成减数第二成减数第二次分裂，排次分裂，排出第二极体出第二极体发育发育 移移动动 接触接触 合并合并形形成成受受精精卵卵 受精作用的受精作用的特点特点和和实质实质特点特点: : 1 1、只有一个精、只有一个精子与一个卵细胞结合，子与一个卵细胞结合，形成一个受精卵。
形成一个受精卵2 2、进入卵细胞的只是精、进入卵细胞的只是精子的头部（细胞核）子的头部（细胞核）3 3、受精卵的细胞质几乎、受精卵的细胞质几乎都只来自卵细胞都只来自卵细胞实质实质: 雄原核与雌原核雄原核与雌原核 的融合 五、胚胎发育五、胚胎发育1、卵裂期的特点：、卵裂期的特点：细胞分裂方式为细胞分裂方式为_______细胞数目细胞数目____胚胎总体积胚胎总体积_____或略有或略有___每个细胞体积每个细胞体积_____,DNA总量总量_____但但__________________＿＿ 有丝分裂有丝分裂增加增加不增加不增加缩小缩小减小减小增加增加每个细胞每个细胞DNA含量不变含量不变 2、早期胚胎发育的几个阶段、早期胚胎发育的几个阶段囊胚：囊胚：桑椹胚桑椹胚：：细胞均属于全能细胞细胞均属于全能细胞 细胞开始分化细胞开始分化;内细胞团将来发育内细胞团将来发育成各种组织成各种组织, 滋养层将来发育成胎膜、滋养层将来发育成胎膜、胎盘胎盘;出现囊胚腔后，进一步扩大会导出现囊胚腔后，进一步扩大会导致孵化原肠胚原肠胚：内细胞团表皮的细胞形成外：内细胞团表皮的细胞形成外胚层，下方的细胞形成内胚层，出现原胚层，下方的细胞形成内胚层，出现原肠腔。
肠腔 §§§§3.23.23.23.2体外受精和早期胚胎培养体外受精和早期胚胎培养体外受精和早期胚胎培养体外受精和早期胚胎培养专题专题3:3:胚胎工程胚胎工程 §§3.23.2体外受精和早期胚胎培养体外受精和早期胚胎培养一、学习目标：一、学习目标：1.简述简述哺乳动物体外受精技术哺乳动物体外受精技术的的主要操作步骤主要操作步骤2.简述简述哺乳动物胚胎的早期培养哺乳动物胚胎的早期培养方法3.认同体外受精在家畜快速繁殖中的重要认同体外受精在家畜快速繁殖中的重要意义意义二、学习重点：二、学习重点：1.体外受精在家畜快速繁殖中的重要意义体外受精在家畜快速繁殖中的重要意义2.哺乳动物体外受精技术的主要操作步骤哺乳动物体外受精技术的主要操作步骤三、学习难点：三、学习难点：1.卵母细胞的采集和培养卵母细胞的采集和培养 2.精子的采集和获能精子的采集和获能 1.1.1.1.试管动物技术试管动物技术试管动物技术试管动物技术 是指通过人工是指通过人工操作使操作使卵子卵子和和精精子子在在体外条件下体外条件下成熟和受精，并成熟和受精，并通过培养发育成通过培养发育成早期胚胎早期胚胎后，再后，再经经胚胎移植胚胎移植（到（到受体母亲体内）受体母亲体内）产生后代的技术。
产生后代的技术 采集良种母牛的卵母细胞采集良种母牛的卵母细胞卵母细胞的卵母细胞的体外培养体外培养采集良种公牛精子采集良种公牛精子精子精子体外获能体外获能体外受精体外受精良种牛体外受精良种牛体外受精胚胎早期培养胚胎早期培养胚胎移植胚胎移植受体牛受体牛良种犊牛良种犊牛成熟期牛成熟期牛屠宰加工厂屠宰加工厂市场市场采集卵巢中的采集卵巢中的卵母细胞卵母细胞“试试管管牛牛”工工厂厂化化生生产产的的技技术术流流程程图图 ¤体外受精体外受精1.1.卵母细胞的收卵母细胞的收集和培养集和培养对不同动物对不同动物, ,采采取卵母细胞的取卵母细胞的方法不同方法不同 2.2.精子的收集和获能精子的收集和获能 1)1)收集的方法收集的方法: :假阴假阴道法道法, ,手握法手握法和和电电刺激刺激等等 2)2)获能处理获能处理: : 培养法：啮齿动物、培养法：啮齿动物、 家兔和猪家兔和猪化学法：牛、羊化学法：牛、羊 3.3.受精受精 在在获能获能溶液溶液或或专用专用的受精溶液的受精溶液中完成受精中完成受精过程过程 胚胎的早期培养胚胎的早期培养•一般比较复杂一般比较复杂•培养液培养液: : 水、无机盐、有机盐、水、无机盐、有机盐、维维生素生素、、激素激素、氨基酸、核苷酸以及、氨基酸、核苷酸以及动物血清动物血清等等. .● 培养发育到适宜阶段时，可将其取培养发育到适宜阶段时，可将其取出向受体移植或冷冻保存出向受体移植或冷冻保存. 2.2.胚胎移植胚胎移植1).1).概念概念: : 将雌性动物的将雌性动物的早期胚胎早期胚胎, ,或经或经体外受精体外受精及其他方式得到的胚胎及其他方式得到的胚胎, ,移植到移植到同种的、生理状态相同同种的、生理状态相同的的其他雌性动物其他雌性动物的体内的体内, ,使之发育使之发育为新个体的技术。
为新个体的技术 2 2））. .胚胎移植的现状和意义胚胎移植的现状和意义（（1) 1)加速育种工作和品种改良加速育种工作和品种改良；；（（2)2)大量节省购买种畜的费用；大量节省购买种畜的费用；（（3)3)一胎多产；一胎多产；（（4)4)保存品种资源和濒危物种；保存品种资源和濒危物种；（（5)5)可以可以充分发挥雌性优良个体的充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力繁殖潜力, ,缩短繁殖周期缩短繁殖周期, ,增加一生增加一生繁殖的后代数量繁殖的后代数量 3 3））. .胚胎移植的生理学基础胚胎移植的生理学基础（（1).1).供体和受体具供体和受体具相同的生理环境相同的生理环境；；（（2).2).早期胚胎处于早期胚胎处于游离状态游离状态, ,为胚胎为胚胎的收集提供了可能；的收集提供了可能；（（3).3).受体对移入子宫的胚胎受体对移入子宫的胚胎基本上不基本上不发生免疫排斥发生免疫排斥；；（（4).4).胚胎与受体胚胎与受体能建立正常的组织联能建立正常的组织联系系, ,但遗传物质没有改变但遗传物质没有改变 讨论讨论: 胚胎移植的实质胚胎移植的实质是早期胚胎是早期胚胎在相同生理环境条件下在相同生理环境条件下空间位空间位置的转移置的转移。
你认为这样的概括你认为这样的概括正确吗？正确吗？ 正确正确 4)、胚胎移植的基本程序、胚胎移植的基本程序 (阅读课本，思考胚胎移植的基本程阅读课本，思考胚胎移植的基本程序包括哪几个步骤？序包括哪几个步骤？)（（1）供体、受体的选择和）供体、受体的选择和同期发情处理同期发情处理（（2）配种或进行人工受精）配种或进行人工受精（（3）胚胎的收集、）胚胎的收集、检查检查、培养或保存、培养或保存（（4）胚胎移植）胚胎移植（（5）移植后是否妊娠的）移植后是否妊娠的检查检查 （（1））.对供体、受体进行选择对供体、受体进行选择供体：供体： 遗传性能和生产遗传性能和生产性能优秀的个体；性能优秀的个体；受体：受体： 健康和正常繁殖健康和正常繁殖能力的个体能力的个体处理：处理： 同期发情同期发情具体做法：具体做法： 注射促性腺激素注射促性腺激素 （（2））.采集卵母细胞采集卵母细胞方法：方法： 超数排卵超数排卵具体做法：具体做法： 注射促性腺激素注射促性腺激素 （（2））.配种或人工受精配种或人工受精精子来源：精子来源： 同种优良同种优良的雄性动物。
的雄性动物 （（3））.胚胎的收集胚胎的收集 在配种或输在配种或输精后精后第第7天天，用，用特制的冲卵装置，特制的冲卵装置，把供体母牛子宫把供体母牛子宫内的内的胚胎胚胎冲洗出冲洗出来 （（3））.对胚胎进对胚胎进行质量检查行质量检查 （（3））.胚胎的胚胎的保存或移植保存或移植 （（4））.胚胎的移植胚胎的移植方法一：手术法方法一：手术法具体做法：引出受体子具体做法：引出受体子宫和卵巢，将胚胎注入宫和卵巢，将胚胎注入子宫角，缝合创口子宫角，缝合创口方法二：非手术法方法二：非手术法将装有胚胎的移植管送将装有胚胎的移植管送入受体母牛子宫的相应入受体母牛子宫的相应部位，注入胚胎部位，注入胚胎 （（5））.对受体母牛进行是否妊娠对受体母牛进行是否妊娠的检查的检查(第二次检查第二次检查) （（6））.受体母牛产下胚胎移植的受体母牛产下胚胎移植的犊牛犊牛 选择选择供体母牛供体母牛受体母牛受体母牛…………同期发情处理同期发情处理…………超数排卵超数排卵供体公牛供体公牛配种配种冲卵冲卵( (胚胎胚胎) )胚胎质量胚胎质量检查检查、、培养培养胚胎移植胚胎移植妊娠检查妊娠检查分娩（胚胎移植的犊牛）分娩（胚胎移植的犊牛）总结：总结： 3、胚胎分割、胚胎分割 (阅读课本，思考以下问题：阅读课本，思考以下问题：)（（1）胚胎分割的概念）胚胎分割的概念（（2）胚胎分割特点）胚胎分割特点（（3）胚胎分割的理论基础）胚胎分割的理论基础（（4）胚胎分割操作过程）胚胎分割操作过程 1).1).概念概念: : 采用采用显微手术（机械方法）显微手术（机械方法）的的方法将方法将早期胚胎早期胚胎分割成分割成2 2分胚分胚,4,4分胚或分胚或8 8分胚分胚, ,经经体内或体外培养体内或体外培养后后植入受体，以得到植入受体，以得到同卵双胎或同卵双胎或同卵多胎同卵多胎的技术。
的技术 2).特点：特点： 后代具有相同的遗传物质，后代具有相同的遗传物质， 因此胚胎分割可以看做动物因此胚胎分割可以看做动物无性繁殖或克隆无性繁殖或克隆的方法之一的方法之一3)、理论基础、理论基础: 动物胚胎细胞的动物胚胎细胞的全能性全能性所以胚胎分割的时期为：所以胚胎分割的时期为： 囊胚或桑椹胚囊胚或桑椹胚 4)、选择的胚胎：、选择的胚胎： 发育良好的发育良好的,形态正常的桑椹胚形态正常的桑椹胚或囊胚5)、使用的主要仪器：、使用的主要仪器： 实体显微镜实体显微镜和和显微操作仪显微操作仪6)、具体操作、具体操作 用用分割针分割针或或分割刀片分割刀片将胚胎切将胚胎切开，吸出其中的半个胚胎，注入预先开，吸出其中的半个胚胎，注入预先准备好的准备好的空透明带空透明带中，或直接将中，或直接将裸半裸半胚胚移植给受体移植给受体 胚胎分割移植的显微操作胚胎分割移植的显微操作 7)7)、操作注意事项：、操作注意事项： ① ①对囊胚阶段的胚胎进行分割时，要对囊胚阶段的胚胎进行分割时，要将内细胞团均等分割将内细胞团均等分割。
原因：内细胞团一般到囊胚阶段才出原因：内细胞团一般到囊胚阶段才出现，它是发育为胚胎本身的基础细胞，其现，它是发育为胚胎本身的基础细胞，其他细胞为滋养细胞，只为胚胎和胎儿发育他细胞为滋养细胞，只为胚胎和胎儿发育提供营养若分割时不能将内细胞团均等提供营养若分割时不能将内细胞团均等分割，会出现含内细胞团多的部分正常发分割，会出现含内细胞团多的部分正常发育的能力强，育的能力强，少的部分发育受阻或发育不少的部分发育受阻或发育不良，甚至不能发育良，甚至不能发育等问题 7)、操作注意事项：、操作注意事项： ②②胚胎分割的份数越多，操作的难度胚胎分割的份数越多，操作的难度会越大，移植的成功率也越低会越大，移植的成功率也越低 早期胚胎的体积很小，只有在显微镜早期胚胎的体积很小，只有在显微镜下才能看到；再者，细胞数目是有限的下才能看到；再者，细胞数目是有限的分割的份数越多，不但难以做到均等分割，分割的份数越多，不但难以做到均等分割，每一份的细胞数会越少，而且作为囊胚期每一份的细胞数会越少，而且作为囊胚期的胚胎内细胞团细胞所受的影响会更大的胚胎内细胞团细胞所受的影响会更大。
因此，分割的份数越多，技术的难度会越因此，分割的份数越多，技术的难度会越大，移植后的恢复和发育的难度会越大，大，移植后的恢复和发育的难度会越大，移植成功率自然会降低移植成功率自然会降低 8)、胚胎分割技术的缺陷、胚胎分割技术的缺陷 （（1）刚出生动物的）刚出生动物的体重偏低体重偏低，，毛色和斑纹还存在差异；毛色和斑纹还存在差异； （（2）采用胚胎分割技术产生同）采用胚胎分割技术产生同卵多胎的卵多胎的可能性是有限的可能性是有限的 4. 4. 胚胎干细胞胚胎干细胞(阅读课本，思考以下问题阅读课本，思考以下问题（（1）什么是胚胎干细胞？）什么是胚胎干细胞？ 简称是什么？简称是什么？（（2）胚胎干细胞的来源胚胎干细胞的来源3）胚胎干细胞的特性胚胎干细胞的特性4）胚胎干细胞的应用胚胎干细胞的应用 1).1).概念：概念： 简称简称ESES或或EKEK细胞细胞, ,是由是由早期胚胎早期胚胎或或原原始性腺始性腺中分离出来的一类细胞中分离出来的一类细胞 2).2).特点特点: :（（1 1）形态：）形态：体积小体积小, ,细胞核大细胞核大, ,核仁明显核仁明显；；（（2 2）功能：具有发育的）功能：具有发育的全能性全能性, ,可经诱导可经诱导分化为成年动物体内分化为成年动物体内任何一种组织细胞任何一种组织细胞; ; （（3 3）在）在体外体外培养的条件下，培养的条件下，ESES细胞可以细胞可以增殖而不发生分化增殖而不发生分化。
对它可以进行冷冻保对它可以进行冷冻保存，也可以进行遗传改造存，也可以进行遗传改造 3).3).主要用途主要用途 阅读课本相关内容，说说阅读课本相关内容，说说胚胎干细胞有什么具体用途？胚胎干细胞有什么具体用途？ （（1 1））. .治疗人类的某些顽症治疗人类的某些顽症 利用利用ESES细胞可以诱导分化形成新的细胞可以诱导分化形成新的组织组织 细胞的特性，移植细胞的特性，移植ESES细胞可使坏死细胞可使坏死或退化的部位得以修复并恢复正常功能或退化的部位得以修复并恢复正常功能目前，在动物实验方面，用目前，在动物实验方面，用ESES细胞诱导细胞诱导分化出的某些组织细胞已成功地治愈糖分化出的某些组织细胞已成功地治愈糖尿病、肝衰竭、心衰竭和成骨不良等疑尿病、肝衰竭、心衰竭和成骨不良等疑难病症 （（2 2））. .培育出人造组织器官，用于器培育出人造组织器官，用于器官移植 随着组织工程技术的发展，通随着组织工程技术的发展，通过过ESES细胞体外诱导分化，还可以培细胞体外诱导分化，还可以培育出人造组织器官，解决目前临床育出人造组织器官，解决目前临床上存在的上存在的供体器官不足供体器官不足和和器官移植器官移植后免疫排斥后免疫排斥的问题。
的问题 （（3 3））.ES.ES细胞也是理论上研究体外细胞也是理论上研究体外细胞分化的理想材料细胞分化的理想材料 ESES细胞在饲养层细胞上，或在细胞在饲养层细胞上，或在添加抑制因子的培养液中，能够维添加抑制因子的培养液中，能够维持不分化的状态持不分化的状态 在培养液中加入在培养液中加入分化诱导因子分化诱导因子, ,就可以诱导就可以诱导ESES细胞向不同类型的组细胞向不同类型的组织细胞分化织细胞分化. . 4.4.利用胚胎干细胞治疗肝衰竭，实现利用胚胎干细胞治疗肝衰竭，实现此过程的此过程的重要原理重要原理是（是（ ）） A.A.细胞分裂细胞分裂 B.B.细胞特化细胞特化 C.C.细胞分化细胞分化 D.D.细胞增殖细胞增殖C 一一. . 转基因生物安全性转基因生物安全性( (的争论的争论) ) 1 1、转基因生物存在安全性的原因、转基因生物存在安全性的原因 （（1 1）目前，对基因的结构、基因间的相互作用及）目前，对基因的结构、基因间的相互作用及基因的调控机制都了解得相当有限。
基因的调控机制都了解得相当有限2 2）转移来的基因多是异种生物的基因转移来的基因多是异种生物的基因3 3）外源基因插入宿主基因组的部位往往是随机）外源基因插入宿主基因组的部位往往是随机的 2 2、转基因生物与、转基因生物与食物安全食物安全的争论的争论①①反对反对““实质性等同实质性等同””②②担心出现担心出现滞后滞后效应效应③③担心出现担心出现新的过敏源新的过敏源④④担心营养担心营养成分被改变成分被改变一方认为存在食物安全的理由一方认为存在食物安全的理由: : ①①认同认同““实质性等同实质性等同””②②多多环环节节、、严严谨谨的的安安全全性性评评价价可可保保证证转转基基因因食食品品的安全的安全③③科科学学家家的的认认真真负负责责会会及及时时销销毁毁出出现现新新的的过过敏敏源源等不利因素的转基因生物等不利因素的转基因生物④④多多年年来来大大量量人人口口食食用用转转基基因因食食物物并并未未出出现现健健康康问题问题⑤⑤无无足足够够的的证证据据证证明明转转基基因因食食物物存存在在安安全全问问题题，，即即不能举证排除不能举证排除一方认为不存在一方认为不存在食物安全食物安全问题的理由问题的理由: : 一方认为可能存在一方认为可能存在生物安全生物安全问题的理由问题的理由: :①①转基因植物可能会成为杂草；转基因植物可能会成为杂草；②②转基因生物可能成为转基因生物可能成为“入侵的外来物种入侵的外来物种”，威胁其他生物生存；，威胁其他生物生存；③③外源基因有可能与某些细菌或病毒杂交外源基因有可能与某些细菌或病毒杂交，，重组出对人类或其他生物有害的病原体；重组出对人类或其他生物有害的病原体；④④转基因植物的抗除草剂基因，有可能通过转基因植物的抗除草剂基因，有可能通过花粉传播进入杂草，而成为花粉传播进入杂草，而成为“超级杂草超级杂草”。
3 3、转基因生物与、转基因生物与生物安全生物安全问题的争论问题的争论 一方认为不存在一方认为不存在生物安全生物安全问题的理由：问题的理由：①①转转基基因因作作物物生生命命力力不不是是很很强强，，扩扩散散到到种种植植区区外外很很容易死亡；容易死亡；②②转转基基因因作作物物新新性性状状的的表表现现必必需需一一定定的的水水、、肥肥条条件件及配套技术，不易带来威胁；及配套技术，不易带来威胁；③③由由于于生生殖殖隔隔离离，，转转基基因因作作物物很很难难通通过过杂杂交交传传播播转转入基因；入基因；④④花花粉粉传传播播的的距距离离有有限限，，转转入入基基因因很很难难通通过过花花粉粉传传播；播；⑤⑤花粉存活时间有限，很难传播转入基因花粉存活时间有限，很难传播转入基因 4 4、转基因生物与、转基因生物与环境安全环境安全问题的争论问题的争论 一方认为可能带来一方认为可能带来环境安全环境安全问题的理由：问题的理由：（（1 1）可能会打破自然物种原有界限，）可能会打破自然物种原有界限，改变生态改变生态系统中能量流动和物质循环系统中能量流动和物质循环；；（（2 2）重组的微生物在降解某些化合物过程中所）重组的微生物在降解某些化合物过程中所产生的产生的中间产物，可能会对环境造成二次污染中间产物，可能会对环境造成二次污染；；（（3 3））重组的重组的DNADNA可能与微生物杂交可能与微生物杂交产生对动植物产生对动植物或人类有害的病原微生物。
或人类有害的病原微生物转基因植物的花粉中含转基因植物的花粉中含有毒蛋白或过敏蛋白有毒蛋白或过敏蛋白，通，通过蜜蜂采集，再过蜜蜂采集，再经食物链传递到其他动物或人体经食物链传递到其他动物或人体内内 一方认为不会影响一方认为不会影响环境安全环境安全的理由：的理由：（（1 1）转入基因只是自然界中原有的一两种外）转入基因只是自然界中原有的一两种外源基因，源基因，不会改变生物原有的分类地位不会改变生物原有的分类地位，不，不会破坏生态系统的稳定性；会破坏生态系统的稳定性；（（2 2）抗虫作物的种植）抗虫作物的种植可大大减少农药用量可大大减少农药用量，，利于保护环境和人畜安全，有益昆虫的数量利于保护环境和人畜安全，有益昆虫的数量也会大增；也会大增；（（3 3）抗除草剂作物的种植便于田间管理，也）抗除草剂作物的种植便于田间管理，也保护了农田土壤环境；保护了农田土壤环境；（（4 4）公众对转基因作物的恐惧来自于）公众对转基因作物的恐惧来自于某些实某些实验结果的不确切验结果的不确切及及某些新闻报道不真实某些新闻报道不真实 5、理性看待转基因技术、理性看待转基因技术1.转基因生物的优缺点分析：转基因生物的优缺点分析：见资料见资料;2.对待转基因生物的正确态度对待转基因生物的正确态度:要要趋利避害趋利避害,不能因不能因噎废食噎废食;3.建立相应法规，规范转基因行为；建立相应法规，规范转基因行为；4.转基因生物或产品研究中转基因生物或产品研究中,科学家遵守研究道德科学家遵守研究道德:（（1）转基因受体限制在遗传上具有特定缺陷的生物上）转基因受体限制在遗传上具有特定缺陷的生物上（（2）转基因受体的菌株，限定在使用）转基因受体的菌株，限定在使用370C下便会死去下便会死去的菌株的菌株（（3）对外源）对外源DNA认真选择，避免产生对人体有害或过认真选择，避免产生对人体有害或过敏的蛋白质敏的蛋白质（（4）一旦发现安全性问题，要求马上停止实验并销毁重）一旦发现安全性问题，要求马上停止实验并销毁重组生物。
组生物 二二. . 关注生物技术的伦理问题关注生物技术的伦理问题1、克隆人的过程和分类、克隆人的过程和分类: 见资料见资料一）关于克隆人一）关于克隆人 2 2、中国政府的态度、中国政府的态度（（1 1））禁止禁止 性克隆的四不原则：性克隆的四不原则：生殖生殖 （（2 2））不反对不反对 治疗治疗性克隆性克隆不赞成、不赞成、 不允许、不允许、不支持、不支持、不接受任何相关的实验不接受任何相关的实验 1)1)、赞成克隆人的观点、赞成克隆人的观点: :（（1 1）是一种）是一种科学科学研究，既然是科学，就应研究，既然是科学，就应该允许研究克隆人该允许研究克隆人（（2 2）现在的问题可以通过）现在的问题可以通过胚胎分级胚胎分级、、基因基因诊断诊断和和染色体检查染色体检查等方法得到解决等方法得到解决3.对待克隆人的态度对待克隆人的态度 2)2)不赞成克隆人的观点不赞成克隆人的观点: :（（1 1）严重违反了人）严重违反了人类的类的 伦理道德伦理道德 （（2 2）冲击了现有的）冲击了现有的 、、 和和 等传统的伦理道德观念等传统的伦理道德观念; ;婚姻婚姻家庭家庭两性关系两性关系（（3 3）是在）是在人为地制造心理上人为地制造心理上和和社会上社会上都不健全的人都不健全的人; ;（（4 4）克隆技术尚不成熟，可能克隆出）克隆技术尚不成熟，可能克隆出 的孩子的孩子有严重生理缺陷有严重生理缺陷. . 二）二）设计试管婴儿设计试管婴儿引发的伦理性问题引发的伦理性问题 体外受精技术体外受精技术, ,俗称俗称““试管婴儿试管婴儿””，目前是世界上最广，目前是世界上最广为采用的生殖辅助技术。
为采用的生殖辅助技术试管婴儿试管婴儿””并不是真正在试管并不是真正在试管里长大的婴儿，而是从卵巢内取出几个卵子，在实验室里里长大的婴儿，而是从卵巢内取出几个卵子，在实验室里让它们与男方的精子结合，形成胚胎，然后转移胚胎到子让它们与男方的精子结合，形成胚胎，然后转移胚胎到子宫内，使之在妈妈的子宫内着床，妊娠宫内，使之在妈妈的子宫内着床，妊娠正常的受孕需要正常的受孕需要精子和卵子在输卵管相遇，二者结合，形成受精卵，然后精子和卵子在输卵管相遇，二者结合，形成受精卵，然后受精卵再回到子宫腔，继续妊娠所以受精卵再回到子宫腔，继续妊娠所以““试管婴儿试管婴儿””可以可以简单地理解成简单地理解成由实验室的试管代替了输卵管的功能而称为由实验室的试管代替了输卵管的功能而称为““试管婴儿试管婴儿””尽管体外受精原用于治疗由输卵管阻塞引尽管体外受精原用于治疗由输卵管阻塞引起的不孕症，现已发现体外受精对由于宫内膜异位症起的不孕症，现已发现体外受精对由于宫内膜异位症（（endometriosisendometriosis），精子异常（数目异常或形态异常）），精子异常（数目异常或形态异常）引起的不孕症，甚至原因不明性不孕症都有所帮助。
研究引起的不孕症，甚至原因不明性不孕症都有所帮助研究显示一个周期治疗后的妊娠率在显示一个周期治疗后的妊娠率在4040％左右，出生率稍微％左右，出生率稍微低一点 试试管管婴婴儿儿简简图图设计试管婴儿设计试管婴儿：与试管婴儿相比需：与试管婴儿相比需在胚胎转在胚胎转移之前移之前对胚胎进行对胚胎进行遗传学诊断遗传学诊断，以筛选出符合特，以筛选出符合特殊要求的胚胎，进而殊要求的胚胎，进而生出特定类型的婴儿生出特定类型的婴儿 观点观点理由理由1.1.不符合不符合伦理道德伦理道德(1)(1)把试管婴儿当作人体零配件工厂把试管婴儿当作人体零配件工厂, ,是对生命是对生命的不尊敬的不尊敬; ;(2)(2)早期的生命也有活下去的权利早期的生命也有活下去的权利, ,抛弃或杀死抛弃或杀死多余的胚胎多余的胚胎, ,无异于无异于””谋杀谋杀””; ;(3)(3)有人会滥用设计试管婴儿技术有人会滥用设计试管婴儿技术, ,而设计婴儿而设计婴儿性别性别; ;2.2.符合伦符合伦理道德理道德(1)(1)设计试管婴儿是为了救人设计试管婴儿是为了救人, ,是救治患者的最是救治患者的最好好, ,最快捷的办法之一最快捷的办法之一; ;(2)(2)提取骨髓中造血干细胞并不会对试管婴儿造提取骨髓中造血干细胞并不会对试管婴儿造成损伤成损伤;(3);(3)脐带血乃试管婴儿的脐带血乃试管婴儿的””身外之物身外之物””. .3.3.中国政中国政府的观点府的观点中国卫生部在中国卫生部在< <体外受精体外受精--------胚胎移植及其衍生胚胎移植及其衍生技术规范技术规范> >中规定：中规定：实施体外受精实施体外受精--------胚胎移植胚胎移植及其衍生技术必须获得卫生部批准证书及其衍生技术必须获得卫生部批准证书. . 三）基因检测引发的伦理性问题三）基因检测引发的伦理性问题 基因检测基因检测是用血液或其他体液和细胞检测一个人的是用血液或其他体液和细胞检测一个人的DNADNA的技术。
基因检测的技术基因检测可以诊断疾病可以诊断疾病，，也可以用于疾病风险的也可以用于疾病风险的预测预测疾病诊断是用基因检测技术检测引起遗传性疾病的疾病诊断是用基因检测技术检测引起遗传性疾病的突变基因目前应用最广泛的基因检测是突变基因目前应用最广泛的基因检测是新生儿遗传性疾新生儿遗传性疾病的检测病的检测、、遗传疾病的诊断和某些常见病的辅助诊断遗传疾病的诊断和某些常见病的辅助诊断目前有前有一千多种一千多种疾病可以通过基因技术做出诊断疾病可以通过基因技术做出诊断 近年非常令人兴奋的是近年非常令人兴奋的是预测性基因检测预测性基因检测的开展利用的开展利用基因检测技术在疾病发生前发现疾病发生的风险，提早预基因检测技术在疾病发生前发现疾病发生的风险，提早预防目前已经有防目前已经有2020多种多种疾病可以用基因检测的方法预测疾病可以用基因检测的方法预测 检测的时候，先把受检者的基因从血液或其他细胞中提检测的时候，先把受检者的基因从血液或其他细胞中提取出来然后用可以识别可能存在的突变基因的取出来然后用可以识别可能存在的突变基因的引物和引物和PCRPCR技术技术将这部份基因将这部份基因复制许多倍复制许多倍。
复制后，有许多方法复制后，有许多方法可以判断这部分基因是否存在突变可以判断这部分基因是否存在突变: :用有特殊标记物的突用有特殊标记物的突变基因探针方法变基因探针方法、、酶切方法酶切方法和和基因序列检测基因序列检测的方法等的方法等 基因检测的优点：基因检测的优点：通过基因检测可以通过基因检测可以及早采取预防的措施及早采取预防的措施, ,适适时进行治疗时进行治疗, ,达到挽救患者生命的目的达到挽救患者生命的目的. .基因检测引发的问题及解决的办法基因检测引发的问题及解决的办法1 1、问题、问题: :①①①①目前人类对基因结构及基因间相互作用尚缺乏足够的认目前人类对基因结构及基因间相互作用尚缺乏足够的认目前人类对基因结构及基因间相互作用尚缺乏足够的认目前人类对基因结构及基因间相互作用尚缺乏足够的认识识识识, ,要想通过基因检测达到预防疾病的目的是困难的要想通过基因检测达到预防疾病的目的是困难的要想通过基因检测达到预防疾病的目的是困难的要想通过基因检测达到预防疾病的目的是困难的; ;②②②②基因检测结果本身会给受检者带来巨大的心理压力基因检测结果本身会给受检者带来巨大的心理压力基因检测结果本身会给受检者带来巨大的心理压力基因检测结果本身会给受检者带来巨大的心理压力; ;③③个人基因资讯的泄露会造成基因歧视个人基因资讯的泄露会造成基因歧视.2、解决的办法、解决的办法:对于基因歧视现象对于基因歧视现象,可以通过正确的科学知识传授可以通过正确的科学知识传授,伦伦理道德教育理道德教育,立法得以解决立法得以解决. 1.1.生物战剂生物战剂 通常分细菌、立克氏体、衣原体、病毒、通常分细菌、立克氏体、衣原体、病毒、真菌和毒素六大类。
真菌和毒素六大类细菌：鼠疫菌细菌：鼠疫菌, ,霍乱霍乱, ,伤寒伤寒, ,炭疽炭疽病毒：天花病毒病毒：天花病毒, ,动物痘病毒动物痘病毒重组基因全新致病菌：重组基因全新致病菌：神经毒剂：如肉毒杆菌毒素神经毒剂：如肉毒杆菌毒素重组蜡状杆菌、重组流感病毒、新型鼠痘病毒重组蜡状杆菌、重组流感病毒、新型鼠痘病毒 生物战剂生物战剂及及施放它的武器、器材的总施放它的武器、器材的总称称叫叫生物武器生物战剂是指生物武器生物战剂是指在战争中在战争中使人、畜致病，毁伤农作物的微生物及使人、畜致病，毁伤农作物的微生物及其毒素其毒素等等1、生物武器的概念、生物武器的概念 2、生物武器的种类、生物武器的种类通常分为通常分为病菌、立克氏体、衣原体、病毒、病菌、立克氏体、衣原体、病毒、真菌和毒素六大类真菌和毒素六大类（（见资料见资料） 生生物物武武器器的的种种类类病菌病菌: :鼠疫菌鼠疫菌, ,霍乱霍乱, ,伤寒伤寒, ,炭疽炭疽病毒病毒: :天花病毒天花病毒, ,动物痘病动物痘病毒毒重组基因重组基因技术制造全新的技术制造全新的致病菌致病菌: : 重组蜡状杆菌重组蜡状杆菌, ,重组流感病毒重组流感病毒, ,新型鼠痘病毒新型鼠痘病毒生化毒剂生化毒剂: :如肉毒杆菌毒素如肉毒杆菌毒素 3 3、生物武器的杀伤特点、生物武器的杀伤特点: :1 1）致病力强）致病力强, ,多数具有多数具有传染性传染性; ;某些生物战剂只需少数病原体侵入人体，就能引起某些生物战剂只需少数病原体侵入人体，就能引起发病。
发病 2 2））污染面积广污染面积广; ;生物战剂致病力强，气溶胶可随风飘散，在气象、生物战剂致病力强，气溶胶可随风飘散，在气象、地理条件适宜时，可造成大面积污染区地理条件适宜时，可造成大面积污染区 3) 3) 不易被发现，不易被发现，难以防治难以防治; ;生物战剂气溶胶无色无味，加之敌方多在黄昏、夜生物战剂气溶胶无色无味，加之敌方多在黄昏、夜间、拂晓、多雾时秘密施放，不易被人发现间、拂晓、多雾时秘密施放，不易被人发现 4) 4) 有一定的有一定的潜伏期潜伏期 生物战剂致病需经几小时至几天的时间，在生物战剂致病需经几小时至几天的时间，在这个期间人员不会很快减弱工作能力这个期间人员不会很快减弱工作能力 5) 5) 受自然条件影响大受自然条件影响大 风速、气温对气溶胶传播有影响，大雪、低风速、气温对气溶胶传播有影响，大雪、低温、干燥、日晒等，能加速病菌的消亡温、干燥、日晒等，能加速病菌的消亡 4 4、生物武器的伤害作用、生物武器的伤害作用 (1)(1)生物战剂侵入人体的途径生物战剂侵入人体的途径: :吸入吸入( (生物战剂污生物战剂污染空气，可以通过呼吸道吸入，感染致病染空气，可以通过呼吸道吸入，感染致病 ), ),误食误食( (食用被生物战剂污染的水、食物而得病（如霍乱、食用被生物战剂污染的水、食物而得病（如霍乱、痢疾等疾病）。
痢疾等疾病） ), ),皮肤接触皮肤接触( (生物战剂如炭疽杆菌生物战剂如炭疽杆菌等，或带菌物品上的病毒可直接或间接经皮肤、等，或带菌物品上的病毒可直接或间接经皮肤、黏膜、伤口进入人体黏膜、伤口进入人体), ),昆虫叮咬昆虫叮咬( (人被带有生物人被带有生物战剂的昆虫叮咬后，会使血液污染而致病战剂的昆虫叮咬后，会使血液污染而致病 ); ); (2) (2)生物战剂的致病症状生物战剂的致病症状: :发热发热, ,头疼头疼, ,全身无力全身无力, ,上吐下泻上吐下泻, ,咳嗽咳嗽, ,恶心恶心, ,呼吸困难呼吸困难, ,局部或全身疼痛等局部或全身疼痛等各种不同症状各种不同症状. . 5 5、防护措施、防护措施 1 1）、对生物战剂的防护措施与对毒剂的防护基）、对生物战剂的防护措施与对毒剂的防护基本相同人员戴防毒面具、防疫口罩能保护呼吸道本相同人员戴防毒面具、防疫口罩能保护呼吸道不吸入生物战剂气溶胶；穿防毒衣、防疫服或采用不吸入生物战剂气溶胶；穿防毒衣、防疫服或采用扎扎““三口三口””的方法能保护皮肤免受带菌昆虫叮咬的方法能保护皮肤免受带菌昆虫叮咬 2 2）、）、 人员在生物战剂污染区内行动时，根据生人员在生物战剂污染区内行动时，根据生物战剂的类型，提前进行免疫接种和个人防护，遵物战剂的类型，提前进行免疫接种和个人防护，遵守在污染区内的行动规则。
守在污染区内的行动规则 3 3）、）、 发现病人时，要立即报告，及时隔离发现病人时，要立即报告，及时隔离 4 4）、）、 对污染的房屋、器皿要用福尔马林或过氧对污染的房屋、器皿要用福尔马林或过氧乙酸进行熏蒸，也可用通风方法进行消毒灭菌；对乙酸进行熏蒸，也可用通风方法进行消毒灭菌；对服装可用煮沸或用高锰酸钾溶液浸泡等方法灭菌服装可用煮沸或用高锰酸钾溶液浸泡等方法灭菌 5 5）、）、 杀虫、灭鼠杀虫可用打、捕、烧、熏或杀虫、灭鼠杀虫可用打、捕、烧、熏或喷洒杀虫剂（敌敌畏、敌百虫）等方法灭鼠可采喷洒杀虫剂（敌敌畏、敌百虫）等方法灭鼠可采用药杀或打、捕、挖、灌等方法使用药物时，应用药杀或打、捕、挖、灌等方法使用药物时，应注意安全，妥善处理带菌昆虫和动物尸体注意安全，妥善处理带菌昆虫和动物尸体 无论是敌投的还是当地的昆虫、鼠类，都是生无论是敌投的还是当地的昆虫、鼠类，都是生物战剂传播的媒介物，均能传播多种疾病所以，物战剂传播的媒介物，均能传播多种疾病所以，平时对当地的鼠类和有害昆虫也要经常进行灭杀，平时对当地的鼠类和有害昆虫也要经常进行灭杀，以减少战时生物战剂可能利用的传播媒介。
以减少战时生物战剂可能利用的传播媒介 防生物武器和防化学武器不同点是防生物武器和防化学武器不同点是：：1 1、污、污染区内活动时需先免疫接种染区内活动时需先免疫接种 2 2、污染物、服装、污染物、服装要消毒3 3、杀虫、灭鼠，尸体烧掉或深埋杀虫、灭鼠，尸体烧掉或深埋4 4、发、发现传染病要立即报告防疫部门现传染病要立即报告防疫部门 禁止生物武器公约禁止生物武器公约 19721972年年4 4月月1010日日, ,苏联苏联, ,美国美国, ,英国分别签英国分别签署了署了< <禁止生物武器公约禁止生物武器公约>;>; 19981998年年1111月月2525日中国也加入了这一公约日中国也加入了这一公约. . 干裂的土地，赤红的干裂的土地，赤红的荒山，意味着不断恶化的荒山，意味着不断恶化的 ，幼苗的上方是蔚蓝的地，幼苗的上方是蔚蓝的地球，地球似乎化作一滴甘球，地球似乎化作一滴甘露，滋润着大地；幼苗又露，滋润着大地；幼苗又可寓意为可寓意为________工程，虽然工程，虽然柔弱，却顽强地支撑着地柔弱，却顽强地支撑着地球；地球和幼苗组合和谐，球；地球和幼苗组合和谐，象征着希望。
象征着希望生态环境生态环境生态生态 主要通过实行主要通过实行“ ”原则，使一个系统产生的原则，使一个系统产生的污染物，能够成为本系统或者另一个系统的污染物，能够成为本系统或者另一个系统的 ，从而实现废弃物的资源化，而实现循环经济最重要，从而实现废弃物的资源化，而实现循环经济最重要的手段之一是的手段之一是 『网络知识结构』生态工程建设目的：生态工程建设目的：遵循自然界遵循自然界 的规律，充分发挥资源的生产的规律，充分发挥资源的生产潜力，防止潜力，防止 ，达到，达到 和和 的的同步发展少消耗、多效益、同步发展少消耗、多效益、 ））物质循环物质循环环境污染环境污染经济效益经济效益生态效益生态效益可持续可持续循环经济循环经济生产原料生产原料生态经济：生态经济：生态工程生态工程 『网络知识结构』生态工程原理1 1）） 原理：物质能在生态系统中循环往原理：物质能在生态系统中循环往复，复， 。
2 2）） 原理：物种繁多复杂的生态系统具原理：物种繁多复杂的生态系统具有较高的有较高的 3 3）） 原理：生态系统的生物数量不能超原理：生态系统的生物数量不能超过过 （环境容纳量）的限度（环境容纳量）的限度4 4）） 原理：生态系统建设要考虑自然、原理：生态系统建设要考虑自然、 、、 的整体影响的整体影响 5 5）） 原理：原理：物质循环再生物质循环再生分层分级利用分层分级利用物种多样性物种多样性抵抗力稳定性抵抗力稳定性协调与平衡协调与平衡环境承载力环境承载力整体性整体性经济经济社会社会系统学和工程学系统学和工程学功能功能比例关系比例关系之和之和Ø系统的结构决定系统的结构决定 原理：通过改善和优化系统结构原理：通过改善和优化系统结构改善功能改善功能; ;Ø系统整体性原理：系统各组分间要有适当的系统整体性原理：系统各组分间要有适当的 ，，使得能量、物质、信息等的转换和流通顺利完成，并实使得能量、物质、信息等的转换和流通顺利完成，并实现总体功能大于各部分现总体功能大于各部分 的效果，即的效果，即“1+1>21+1>2”. . 类型类型问题问题对策对策案例案例主要原理主要原理 注意问题注意问题农村综合发展农村综合发展型生态系统型生态系统小流域综合治小流域综合治理生态系统理生态系统大区域生态系大区域生态系统恢复工程统恢复工程湿地生态恢复湿地生态恢复工程工程矿区废弃地的矿区废弃地的生态恢复工程生态恢复工程城市环境生态城市环境生态工程工程 生态工程的概念：生态工程的概念： 人类应用人类应用生态学、工程学、系统学、经生态学、工程学、系统学、经济学等学科济学等学科的基本原理和方法，通过的基本原理和方法，通过系统设计、系统设计、调控和技术组装调控和技术组装，对已破坏的生态环境进行修，对已破坏的生态环境进行修复、重建，对造成环境污染和破坏的传统生产复、重建，对造成环境污染和破坏的传统生产方式进行改善，并提高生态系统的生产力，从方式进行改善，并提高生态系统的生产力，从而而促进人类社会和自然环境和谐发展促进人类社会和自然环境和谐发展。
注意：注意：1.1.学科知识：学科知识： ；；2.2.技术手段：技术手段： ；；3.3.最终目的：最终目的： 生态学、工程学、系统学、经济学生态学、工程学、系统学、经济学系统设计、调控和技术组装系统设计、调控和技术组装促进人类社会和自然环境的和谐发展促进人类社会和自然环境的和谐发展 生态工程建设目的：生态工程建设目的： 遵循自然界遵循自然界物质循环物质循环的规律，充分发挥的规律，充分发挥资源的生产潜力，防止资源的生产潜力，防止环境污染环境污染，达到，达到经济经济效益效益和和生态效益生态效益的同步发展的同步发展优点：优点：与传统的工程相比，生态工程是一类与传统的工程相比，生态工程是一类少消耗、多效益、可持续少消耗、多效益、可持续的工程体系。
的工程体系 传统农业生产模式传统农业生产模式 ― 石油农业石油农业 弊端：弊端：不注重生态环境的保护，没有不注重生态环境的保护，没有考虑成本，经济的发展以巨大的生态环考虑成本，经济的发展以巨大的生态环境破坏为代价境破坏为代价模式内容模式内容：：大量使用化肥、农药、机大量使用化肥、农药、机械的农业生产方式械的农业生产方式 生态工程与传统农业的比较生态工程与传统农业的比较生态工程生态工程传统农业传统农业基本原理基本原理生态学、工程学生态学、工程学工程学工程学调节机制调节机制人为辅助下的自人为辅助下的自我调节我调节人为调控人为调控与环境的关与环境的关系系协调协调破坏破坏主要能源主要能源太阳能太阳能化石能化石能生物多样性生物多样性 保护保护减少减少 主要是通过实行主要是通过实行““循环经济循环经济””原则，原则，使一个系统产生出的污染物，能够成为本使一个系统产生出的污染物，能够成为本系统或者另一个系统的系统或者另一个系统的生产原料生产原料，从而实，从而实现废弃物的资源化，而实现循环经济最重现废弃物的资源化，而实现循环经济最重要的手段之一是要的手段之一是生态工程生态工程生态经济生态经济( (循环经济循环经济) )模式模式：：实现原料实现原料→→产品产品→→原料原料→→产品产品的生产体系，实现的生产体系，实现废弃物的资源化废弃物的资源化。
地球以有限的空间和资源，长久维持着众地球以有限的空间和资源，长久维持着众多生物的生存、繁衍和发展，奥秘就在于物质多生物的生存、繁衍和发展，奥秘就在于物质能够在各类生态系统中，进行能够在各类生态系统中，进行区域小循环区域小循环和和全全球地质大循环球地质大循环，循环往复，分层分级利用，从，循环往复，分层分级利用，从而达到取之不尽、用之不竭的效果而没有物而达到取之不尽、用之不竭的效果而没有物质循环的系统，就会产生废弃物，造成环境污质循环的系统，就会产生废弃物，造成环境污染，并最终影响到系统的稳定和发展染，并最终影响到系统的稳定和发展1.物质循环再生原理物质循环再生原理二、生态工程所遵循的基本原理二、生态工程所遵循的基本原理 二、生态工程所遵循的基本原理二、生态工程所遵循的基本原理遇虫害而死的樟子松遇虫害而死的樟子松珊瑚礁珊瑚礁1.1.为什么为什么樟子松林樟子松林的松毛虫会肆虐，几十亿株杨树会毁于一旦？而的松毛虫会肆虐，几十亿株杨树会毁于一旦？而珊瑚珊瑚礁区礁区却能够在养分稀少的深海中，保持着很高的生物多样性？却能够在养分稀少的深海中，保持着很高的生物多样性？讨论讨论: :2.2.从上面正面和反面的实例，你能得出怎样的结论？你认为生物多样性的破坏有人为因从上面正面和反面的实例，你能得出怎样的结论？你认为生物多样性的破坏有人为因素吗？素吗？ 纯樟子松林、杨树林的生物多样性低纯樟子松林、杨树林的生物多样性低，食物链短而单调，，食物链短而单调，缺少松毛虫、天牛的天敌，而成片单一的林木又为松毛虫缺少松毛虫、天牛的天敌，而成片单一的林木又为松毛虫提供了丰富的食物来源，因而会导致了树林的毁坏。
提供了丰富的食物来源，因而会导致了树林的毁坏 珊瑚礁区的生物多样性高珊瑚礁区的生物多样性高，食物链复杂，不同的生物占，食物链复杂，不同的生物占据了不同的据了不同的时间位时间位、、空间位空间位和和资源位资源位，因而充分利用了珊，因而充分利用了珊瑚礁生态系统的环境例如，氮、磷等养分就能够在该区瑚礁生态系统的环境例如，氮、磷等养分就能够在该区生物体间生物体间充分地循环利用而很少流出系统外充分地循环利用而很少流出系统外 只有保持生态系统较高的生物多样性，才能保证生态系只有保持生态系统较高的生物多样性，才能保证生态系统的稳定和平衡生物多样性的破坏有人为因素，而且往统的稳定和平衡生物多样性的破坏有人为因素，而且往往作用巨大往作用巨大2.物种多样性原理物种多样性原理二、生态工程所遵循的基本原理二、生态工程所遵循的基本原理 3 3、协调与平衡原理、协调与平衡原理 处理好生物与环境的协调与平衡，处理好生物与环境的协调与平衡，需要考虑环境承载力需要考虑环境承载力环境承载力环境承载力（又称环境容纳（又称环境容纳 量量 ）是指某种环境所）是指某种环境所能养活的生物种群的数能养活的生物种群的数 量（即量（即K值）值）。
如果生物的数如果生物的数 量超过了环境承载力的量超过了环境承载力的限度，就会引起系统的失衡和破坏限度，就会引起系统的失衡和破坏理论基础理论基础: :生物与环境的协调与平衡生物与环境的协调与平衡 4 4、整体性原理、整体性原理整体整体指指社会社会- -经济经济- -自然自然复合而成的巨大系统复合而成的巨大系统生产生产生产生产 成本成本成本成本消费消费消费消费效益效益效益效益经济系统经济系统经济系统经济系统植物植物植物植物动物动物动物动物微生物微生物微生物微生物非生物的因素非生物的因素非生物的因素非生物的因素自然系统自然系统自然系统自然系统政策政策政策政策管管管管理理理理科科科科学学学学文文文文化化化化社会系统社会系统社会系统社会系统 含义：含义：进行生态工程建设时，不但要进行生态工程建设时，不但要考虑到自然生态系统的规律，更重要的考虑到自然生态系统的规律，更重要的是，是，还要考虑到经济和社会等系统的影还要考虑到经济和社会等系统的影响力响力 实例：实例：在进行林业工程建设时，一方在进行林业工程建设时，一方面要号召农民面要号召农民 种树种树 ，另一方面要考虑，另一方面要考虑贫困地区农民的贫困地区农民的生活问题生活问题，如粮食、，如粮食、烧柴及收入等。
烧柴及收入等 除此之外，社会习惯、法律制度等除此之外，社会习惯、法律制度等也都对生态工程建设有着重要影响也都对生态工程建设有着重要影响建建立在对系统成分的性质及相互关系充分立在对系统成分的性质及相互关系充分了解基础之上的整体理论，是解决生态了解基础之上的整体理论，是解决生态环境问题的必要基础环境问题的必要基础只有应用整体性只有应用整体性原理，才能原理，才能统一协调当前与长远、局部统一协调当前与长远、局部与整体、开发与环境建设之间的关系与整体、开发与环境建设之间的关系，，保障生态系统的平衡和稳定保障生态系统的平衡和稳定 5 5、系统学和工程学原理、系统学和工程学原理 1 1）系统的结构决定功能原理）系统的结构决定功能原理 桑基鱼塘分布桑基鱼塘分布在我国长江三角在我国长江三角洲、珠江三角洲洲、珠江三角洲一带的水乡，是一带的水乡，是一种典型的水陆一种典型的水陆物质和能量交换物质和能量交换型生态工程型生态工程理论基础理论基础: :分分布式优于集布式优于集中式和环式中式和环式 2 2）系统整体性原理）系统整体性原理 系统各组分之间要系统各组分之间要有有适当的比例关系适当的比例关系，，只有这样才能顺利完只有这样才能顺利完成成能量、物质、信息能量、物质、信息等的转换和流通，并等的转换和流通，并且实现总体功能大于且实现总体功能大于各部分之和的效果，各部分之和的效果，即即““1+1>21+1>2””。
珊瑚礁珊瑚礁“白化白化”理论基础理论基础: :整体整体大于部分大于部分 2 2）系统整体性原理）系统整体性原理豆科作物和固氮菌的共生豆科作物和固氮菌的共生就是一例就是一例 固氮菌为豆科作物提供固氮菌为豆科作物提供氮素，而豆科作物为其提氮素，而豆科作物为其提供能量和其他营养，供能量和其他营养，两者两者的共生使豆科作物能够在的共生使豆科作物能够在氮素缺乏的土地上生长氮素缺乏的土地上生长；；当把它们分开时，两者的当把它们分开时，两者的生长都要受到损害生长都要受到损害 l ）系统的结构决定功能原理）系统的结构决定功能原理 ①① 含义：含义：生态工程需要考虑系统内部不同生态工程需要考虑系统内部不同组分之间的结构，通过组分之间的结构，通过改变和优化结构，改变和优化结构，达到改善系统功能的目的达到改善系统功能的目的 ②② 实例：实例：我国南方水网地区的我国南方水网地区的 桑基鱼塘桑基鱼塘模模式式 2 ）系统整体性原理：）系统整体性原理： 系统各组分之间要有适当的比例关系，系统各组分之间要有适当的比例关系，只有这样才能顺利完成能量、物质、信息只有这样才能顺利完成能量、物质、信息等的转换和流通，并且实现总体功能大于等的转换和流通，并且实现总体功能大于各部分之和的效果，即，各部分之和的效果，即， 1 十十 1 > 2 。
物质循环再生原理物质循环再生原理物种多样性原理物种多样性原理协调与平衡原理协调与平衡原理整体性原理整体性原理系统学和工程学原理系统学和工程学原理（（1 1）系统的结构决定功能原理）系统的结构决定功能原理（（2 2）系统整体性原理）系统整体性原理 二、生态工程的实例和发二、生态工程的实例和发展前景展前景 1 ． ．农村村综合合发展型生展型生态工程工程 ( l ） ）问题： ：人多地少人多地少, 资资源有限源有限 ， ，产出不足 ( 2 ） ）对策：策：建立建立农村村综合合发展型生展型生态工程工程 ( 3 ）案例：）案例：北京北京窦店村以沼气工程店村以沼气工程为为中中心的物心的物质多多级利用工程利用工程 小知识小知识青贮青贮 :是指在玉米等作物没有完全成熟是指在玉米等作物没有完全成熟时，将果穗和枯秆一起收获切碎，通过时，将果穗和枯秆一起收获切碎，通过厌氧发酵成为牛羊优质的饲料厌氧发酵成为牛羊优质的饲料氨化：氨化：是指利用氨水或氮素化肥处理稻是指利用氨水或氮素化肥处理稻麦桔杆，使之软化适口提高其作为饲麦桔杆，使之软化适口提高其作为饲料的营养价值料的营养价值蓝绿萍蓝绿萍:一种有固氮作用的藻类。
一种有固氮作用的藻类 案例案例1 1：农村综合发展型生态工程：农村综合发展型生态工程1 1 1 1、在这一案例中，主、在这一案例中，主、在这一案例中，主、在这一案例中，主要运用了哪些生态工要运用了哪些生态工要运用了哪些生态工要运用了哪些生态工程的原理？程的原理？程的原理？程的原理？2 2 2 2、这一生态系统的结、这一生态系统的结、这一生态系统的结、这一生态系统的结构和功能有哪些特点构和功能有哪些特点构和功能有哪些特点构和功能有哪些特点？有哪些值得借鉴的？有哪些值得借鉴的？有哪些值得借鉴的？有哪些值得借鉴的做法？做法？做法？做法？ 1 1、在这一案例中，主要运用了哪些生态工程、在这一案例中，主要运用了哪些生态工程的原理？的原理？物质循环再生原理、整体性原理、物物质循环再生原理、整体性原理、物种多样性原理等种多样性原理等 22．这一生态系统的结构和功能有哪些特．这一生态系统的结构和功能有哪些特点？有哪些值得借鉴的做法？点？有哪些值得借鉴的做法？这个案例以沼气工程为核心，农林牧副这个案例以沼气工程为核心，农林牧副渔各业全面发展，增加了劳动力就业机会，渔各业全面发展，增加了劳动力就业机会，促进了经济发展；同时又降低了环境污染，促进了经济发展；同时又降低了环境污染，促进了农村的可持续发展。
促进了农村的可持续发展 2 ．小流域．小流域综合治理生合治理生态工程工程 ( l ） ）问题： ：河流各河流各级支流的集水区域，水土支流的集水区域，水土流失流失严重 ( 2 ） ）对策：策：应用生用生态工程的工程的整体原理、整体原理、协调与平衡原理，以及工程学等原理与平衡原理，以及工程学等原理，通，通过保土蓄水、耕作措施、林草措施等工程和保土蓄水、耕作措施、林草措施等工程和生物措施，生物措施，层层设防来控制土壤侵防来控制土壤侵蚀等等 ● ●山顶戴帽子：山顶戴帽子：山顶戴帽子：山顶戴帽子：山头实行封禁管理、营造水土保持林，保护和恢复植被；山头实行封禁管理、营造水土保持林，保护和恢复植被；山头实行封禁管理、营造水土保持林，保护和恢复植被；山头实行封禁管理、营造水土保持林，保护和恢复植被；● ●山腰系带子：山腰系带子：山腰系带子：山腰系带子：半山陡坡退耕还林还草，发挥林草拦蓄作用，减少径流；半山陡坡退耕还林还草，发挥林草拦蓄作用，减少径流；半山陡坡退耕还林还草，发挥林草拦蓄作用，减少径流；半山陡坡退耕还林还草，发挥林草拦蓄作用，减少径流；● ●坡地修台子：坡地修台子：坡地修台子：坡地修台子：坡耕地以坡改梯田为突破口，建设基本农田，为调整农业产业坡耕地以坡改梯田为突破口，建设基本农田，为调整农业产业坡耕地以坡改梯田为突破口，建设基本农田，为调整农业产业坡耕地以坡改梯田为突破口，建设基本农田，为调整农业产业结构提供条件；结构提供条件；结构提供条件；结构提供条件；● ●地埂锁边子：地埂锁边子：地埂锁边子：地埂锁边子：充分利用地埂种植经济作物，既获得经济效益，又保护地埂；充分利用地埂种植经济作物，既获得经济效益，又保护地埂；充分利用地埂种植经济作物，既获得经济效益，又保护地埂；充分利用地埂种植经济作物，既获得经济效益，又保护地埂；● ●荒地荒沟栽苗子：荒地荒沟栽苗子：荒地荒沟栽苗子：荒地荒沟栽苗子：在荒山、荒沟、荒坡地建设薪炭林；在荒山、荒沟、荒坡地建设薪炭林；在荒山、荒沟、荒坡地建设薪炭林；在荒山、荒沟、荒坡地建设薪炭林；● ●山脚种果子：山脚种果子：山脚种果子：山脚种果子：山脚发展经济林果园，促进商品经济发展；山脚发展经济林果园，促进商品经济发展；山脚发展经济林果园，促进商品经济发展；山脚发展经济林果园，促进商品经济发展；● ●沟底穿靴子：沟底穿靴子：沟底穿靴子：沟底穿靴子：在干、支、毛沟沟底修建谷坊、拦挡坝，建设沟坝地，拦蓄泥在干、支、毛沟沟底修建谷坊、拦挡坝，建设沟坝地，拦蓄泥在干、支、毛沟沟底修建谷坊、拦挡坝，建设沟坝地，拦蓄泥在干、支、毛沟沟底修建谷坊、拦挡坝，建设沟坝地，拦蓄泥沙，防止沟壑被水冲蚀而导致其不断扩张；沙，防止沟壑被水冲蚀而导致其不断扩张；沙，防止沟壑被水冲蚀而导致其不断扩张；沙，防止沟壑被水冲蚀而导致其不断扩张；● ●见缝插针钉扣子：见缝插针钉扣子：见缝插针钉扣子：见缝插针钉扣子：利用田间地头、房前屋后栽植林果，发挥零星作用，提高利用田间地头、房前屋后栽植林果，发挥零星作用，提高利用田间地头、房前屋后栽植林果，发挥零星作用，提高利用田间地头、房前屋后栽植林果，发挥零星作用，提高治理程度；治理程度；治理程度；治理程度；● ●秋田盖罩子：秋田盖罩子：秋田盖罩子：秋田盖罩子：在缓坡耕地改顺坡种植为横坡等高种植、实行地膜覆盖等保土在缓坡耕地改顺坡种植为横坡等高种植、实行地膜覆盖等保土在缓坡耕地改顺坡种植为横坡等高种植、实行地膜覆盖等保土在缓坡耕地改顺坡种植为横坡等高种植、实行地膜覆盖等保土耕作措施。
耕作措施耕作措施耕作措施九九子子登登科科””模模式式 案例案例2 2：小流域综合治理生态工程：小流域综合治理生态工程1 1 1 1、小流域的综合治理，、小流域的综合治理，、小流域的综合治理，、小流域的综合治理，““““综合综合综合综合””””表表表表现在哪些方面？现在哪些方面？现在哪些方面？现在哪些方面？2 2 2 2、为什么要针对不同的地形采取不、为什么要针对不同的地形采取不、为什么要针对不同的地形采取不、为什么要针对不同的地形采取不同的措施？这体现了生态工程的什么同的措施？这体现了生态工程的什么同的措施？这体现了生态工程的什么同的措施？这体现了生态工程的什么原理？原理？原理？原理？3 3 3 3、这一模式在其他小流域能够照搬、这一模式在其他小流域能够照搬、这一模式在其他小流域能够照搬、这一模式在其他小流域能够照搬吗？吗？吗？吗？ 11．小流域的综合治理，．小流域的综合治理，“ “综合综合” ”表现在哪些方面？表现在哪些方面？“ “综合综合” ”表现在它一改以前的单纯造林和蓄水、减表现在它一改以前的单纯造林和蓄水、减沙等工程模式，同时考虑到了生态效益和经济效益：沙等工程模式，同时考虑到了生态效益和经济效益：不但注重通过还林、还草、筑坝等措施达到蓄水、降不但注重通过还林、还草、筑坝等措施达到蓄水、降低土坡侵蚀的生态效果；还考虑如何提高人们的生活低土坡侵蚀的生态效果；还考虑如何提高人们的生活水平。
例如，不但种植农作物，还同时种植经济作物水平例如，不但种植农作物，还同时种植经济作物来提高人们的收入；考虑到了种植薪柴林解决人们的来提高人们的收入；考虑到了种植薪柴林解决人们的燃料来源问题各种措施的结果是建立一个稳定、持燃料来源问题各种措施的结果是建立一个稳定、持久、高效的生态系统久、高效的生态系统 22．为什么要针对不同的地形采取不同的措施？这．为什么要针对不同的地形采取不同的措施？这体现了生态工程的什么原理？体现了生态工程的什么原理？提示：山顶土壤条件、气候条件恶劣，不宜蓄水，交通不便，改造成本高，适提示：山顶土壤条件、气候条件恶劣，不宜蓄水，交通不便，改造成本高，适宜封山，依靠自然恢复力来恢复植被；山腰、荒地等土壤，虽然水分条件较好，宜封山，依靠自然恢复力来恢复植被；山腰、荒地等土壤，虽然水分条件较好，但是仍不适宜种植农作物，对于这样的地方可以自然恢复，也可以人为种植适但是仍不适宜种植农作物，对于这样的地方可以自然恢复，也可以人为种植适宜的林木、草或果树等，加快植被恢复速度，这样既能降低土壤侵蚀，又能创宜的林木、草或果树等，加快植被恢复速度，这样既能降低土壤侵蚀，又能创造一定的经济效益；对沟底而言，应建设堤坝系统，它可以蓄水和淤积土地，造一定的经济效益；对沟底而言，应建设堤坝系统，它可以蓄水和淤积土地，还能够减少山体的崩塌和滑坡，保证人民的生命财产安全；对坡地和山脚农田还能够减少山体的崩塌和滑坡，保证人民的生命财产安全；对坡地和山脚农田来说，土坡、水分条件良好，交通也较方便，土地生产力高，适宜种植农作物来说，土坡、水分条件良好，交通也较方便，土地生产力高，适宜种植农作物来解决人们的粮食和收入等问题，但是在坡地上要水平梯田种植，以减少水土来解决人们的粮食和收入等问题，但是在坡地上要水平梯田种植，以减少水土流失。
根据不同的地形采取不同的措施，既要考虑到生态效益，又要考虑到人流失根据不同的地形采取不同的措施，既要考虑到生态效益，又要考虑到人们的生活和收入问题，这们的生活和收入问题，这体现了生态工程协调与平衡、因地制宜的原理和思想体现了生态工程协调与平衡、因地制宜的原理和思想 33．从这一案例看，当地是怎么做到经．从这一案例看，当地是怎么做到经济效益与生态效益相统一的？这一模式济效益与生态效益相统一的？这一模式在其他小流域能够照搬吗？在其他小流域能够照搬吗？提示：上题分析中已解答了经济效益与提示：上题分析中已解答了经济效益与生态效益的统一问题这种模式在其他生态效益的统一问题这种模式在其他小流域不能照搬，还是要因地制宜地进小流域不能照搬，还是要因地制宜地进行生态工程建设，不同气候带、不同自行生态工程建设，不同气候带、不同自然条件和不同经济发展水平的地区，其然条件和不同经济发展水平的地区，其生态工程的模式应各具特色生态工程的模式应各具特色 3、大区域生态系统恢复工程、大区域生态系统恢复工程 ( 1 ） ）问题及原因及原因 ①① 问题： ：土地沙漠化土地沙漠化严重 ②② 原因：原因：过度樵采（度樵采（ 32 % ) ， ，过度放牧度放牧（ （ 30% ) ，盲目开，盲目开垦 ( 27 % ) ，不合理，不合理利用水利用水资源（源（ 9 . 6 % ) ，其他，其他 ( 1 . 4 % ）。
( 2 ） ）对策：策：森林或草原森林或草原植被恢复的生态植被恢复的生态工程、水土保持的生态工程等工程、水土保持的生态工程等 ( 3 ）案例：）案例：退耕还林还草生态工程、防沙治沙生态工程、“三北” ( ‘三北”指华北北部、东北大部和西北大部）防护林生态工程；等等 案例案例3 3：大区域生态系统恢复工程：大区域生态系统恢复工程1 1、这一工程主要、这一工程主要原理是什么原理是什么？？？？2 2 2 2、根据协调与平衡原理和生物多样性原理，不同地区在造林设计上应当注意什么问题？、根据协调与平衡原理和生物多样性原理，不同地区在造林设计上应当注意什么问题？、根据协调与平衡原理和生物多样性原理，不同地区在造林设计上应当注意什么问题？、根据协调与平衡原理和生物多样性原理，不同地区在造林设计上应当注意什么问题？ 11．．这一工程主要原理是什么？这一工程主要原理是什么？物种多样性原理、协调与平衡原理、整物种多样性原理、协调与平衡原理、整体性原理体性原理 22．这一工程横跨多个省区，根据协调与平衡．这一工程横跨多个省区，根据协调与平衡原理和生物多样性原理，不同地区在造林设计原理和生物多样性原理，不同地区在造林设计上应当注意什么问题？上应当注意什么问题？提示：首先应考虑树种的生态适应性问题，种提示：首先应考虑树种的生态适应性问题，种植适宜品种，宜林则林，宜灌则灌，宜草则草；植适宜品种，宜林则林，宜灌则灌，宜草则草；其次要考虑树种的多样性，保证防护林体系的其次要考虑树种的多样性，保证防护林体系的稳定性；不同地区应根据当地情况采取不同的稳定性；不同地区应根据当地情况采取不同的策略，如条件恶劣的地区应该结合自然恢复力，策略，如条件恶劣的地区应该结合自然恢复力，而农区的防护林中农田防护林网可能占较大比而农区的防护林中农田防护林网可能占较大比重。
重 4、湿地生态恢复工程、湿地生态恢复工程( 1 ）湿地作用:具有蓄洪防旱，调节区域气候，控制土壤侵蚀，自然净化污水，为迁飞鸟类和多种动植物提供栖息地，为人们提供休闲娱乐的环境等功能 2 ）问题人们对湿地进行排水和围垦，已经破坏了地球上80%的湿地资源 (3)对策对策①①湿地生态恢复工程就是采用工程和生湿地生态恢复工程就是采用工程和生物措施相结合的方法，如废水处理、点物措施相结合的方法，如废水处理、点源和非点源污染控制、土地处理工程，源和非点源污染控制、土地处理工程，以及植物物种的引进种植等，使受到干以及植物物种的引进种植等，使受到干扰的湿地得以恢复扰的湿地得以恢复②②在湿地的周围，还应建立缓冲带，以在湿地的周围，还应建立缓冲带，以尽量减少人类的干扰，使湿地依靠自然尽量减少人类的干扰，使湿地依靠自然演替等机制恢复其生态功能演替等机制恢复其生态功能 ( 4 ）案例：鄱阳湖的生态恢复工程 案例案例4 4：湿地生态恢复工程：湿地生态恢复工程1 1、、这一工程主要这一工程主要原理是什么？原理是什么？2 2 2 2、为什么说、为什么说、为什么说、为什么说““““退耕还湖退耕还湖退耕还湖退耕还湖””””是一是一是一是一项巨大的系统工程？实施这一项巨大的系统工程？实施这一项巨大的系统工程？实施这一项巨大的系统工程？实施这一工程面临的主要困难是什么？工程面临的主要困难是什么？工程面临的主要困难是什么？工程面临的主要困难是什么？3 3 3 3、地处湖区上游的人们对湿地、地处湖区上游的人们对湿地、地处湖区上游的人们对湿地、地处湖区上游的人们对湿地恢复生态工程负有什么责任？恢复生态工程负有什么责任？恢复生态工程负有什么责任？恢复生态工程负有什么责任？ 11．．这一工程主要原理是什么？这一工程主要原理是什么？协调与平衡原理、整体性原理协调与平衡原理、整体性原理22．为什么说．为什么说“ “退耕还湖退耕还湖” ”是一项巨大的系是一项巨大的系统工程？实施这一工程面临的主要困难是什统工程？实施这一工程面临的主要困难是什么？么？提示：退耕还湖不仅包括退耕地为湖区，还提示：退耕还湖不仅包括退耕地为湖区，还包括退耕后湖区上游以及湖区周围的生态环包括退耕后湖区上游以及湖区周围的生态环境保护工作；更重要的是原耕地上居民的迁境保护工作；更重要的是原耕地上居民的迁移，要解决迁出居民的生活和就业等问题，移，要解决迁出居民的生活和就业等问题，这是退耕还湖工程的主要困难。
这是退耕还湖工程的主要困难 33．地处湖区上游的人们对湿地恢复生态．地处湖区上游的人们对湿地恢复生态工程负有什么责任？工程负有什么责任？ 提示：保护环境，减少水土流失和水污提示：保护环境，减少水土流失和水污染例如，减少工厂、生活污水往水体中染例如，减少工厂、生活污水往水体中的排放，农田中减少化肥和农药的施用量的排放，农田中减少化肥和农药的施用量等 5、 、矿区区废弃地的生弃地的生态恢复工程恢复工程 ( 1 ） ）问题： ：矿藏开采后往往会造成土体、矿藏开采后往往会造成土体、土壤和植被，乃至整个地区生态系统的土壤和植被，乃至整个地区生态系统的破坏矿区极端恶劣的土地条件，又会破坏矿区极端恶劣的土地条件，又会阻碍植被的生长尤其是规模巨大的采阻碍植被的生长尤其是规模巨大的采矿业，不仅会对土地景观造成巨大的影矿业，不仅会对土地景观造成巨大的影响，还可能产生很严重的重金属污染响，还可能产生很严重的重金属污染 ( 2 ） ）对策：策：人工制造表土、多层覆盖、人工制造表土、多层覆盖、特殊隔离、土壤侵蚀控制、植被恢复工特殊隔离、土壤侵蚀控制、植被恢复工程等其中，关键在于植被恢复，以及程等其中，关键在于植被恢复，以及为植被恢复所必需的土壤微生物群落的为植被恢复所必需的土壤微生物群落的重建。
重建 ( 3 ）案例：我国赤峰市元宝山矿区生态恢复工程 案例案例5 5：矿区废弃地的生态恢复工程：矿区废弃地的生态恢复工程1 1 1 1、为什么不是种植农作物？、为什么不是种植农作物？、为什么不是种植农作物？、为什么不是种植农作物？2 2 2 2、怎样合理筹划养殖肉牛的数量？、怎样合理筹划养殖肉牛的数量？、怎样合理筹划养殖肉牛的数量？、怎样合理筹划养殖肉牛的数量？3 3 3 3、其他矿区的恢复与煤矿是否有不同之处？、其他矿区的恢复与煤矿是否有不同之处？、其他矿区的恢复与煤矿是否有不同之处？、其他矿区的恢复与煤矿是否有不同之处？4 4．．这一工程主要原理这一工程主要原理是什么？是什么？ 11．在这一案例中，恢复植被的措施是植树和种．在这一案例中，恢复植被的措施是植树和种草，为什么不是种植农作物？草，为什么不是种植农作物？提示：矿区土壤条件恶劣，不适宜农作物的生长，提示：矿区土壤条件恶劣，不适宜农作物的生长，因此代之以适应性强，耐旱的灌木、草和树因此代之以适应性强，耐旱的灌木、草和树 22．怎样合理地筹划养殖肉牛的数量？．怎样合理地筹划养殖肉牛的数量？提示：首先要考虑到牧草的产量，以草定畜；从提示：首先要考虑到牧草的产量，以草定畜；从外地调运饲料要考虑饲养成本；更重要的是要考外地调运饲料要考虑饲养成本；更重要的是要考虑到土地对粪肥的承载力，以及对粪肥的加工或虑到土地对粪肥的承载力，以及对粪肥的加工或利用情况，要保持在承载力范围以内，以免养殖利用情况，要保持在承载力范围以内，以免养殖规模过大，粪肥数量巨大而造成新的污染。
规模过大，粪肥数量巨大而造成新的污染 33．其他矿区的恢复工程与煤矿是否．其他矿区的恢复工程与煤矿是否有不同之处？有不同之处？提示：除煤矿外，还有金矿、铁矿提示：除煤矿外，还有金矿、铁矿等这些生态恢复工程最重要的是改等这些生态恢复工程最重要的是改良表土，恢复植被，但要因地制宜良表土，恢复植被，但要因地制宜44．．这一工程主要原理是什么？这一工程主要原理是什么？系统学和工程学原理 6、城市、城市环境生境生态工程工程 ( l ）问题：）问题：垃圾污染、大气污染、噪音垃圾污染、大气污染、噪音污染等方面污染等方面 ( 2 ）对策：）对策：用生态工程的方法对城市环用生态工程的方法对城市环境进行综合治理境进行综合治理 ①① 在城市规划和布局方面，要进行城市在城市规划和布局方面，要进行城市生态分区，合理分布工业区、居住区、生态分区，合理分布工业区、居住区、生态绿地等；生态绿地等； ②②推广推广“环境友好技术环境友好技术”和低污染清洁生产工艺，以减少污染的和低污染清洁生产工艺，以减少污染的产出；产出； ③③ 采用各种手段治理污染，进采用各种手段治理污染，进行废弃物的资源化利用。
行废弃物的资源化利用 ④④ 加强监管加强监管 ( 3 ）案例：）案例：1 997 年年组织开展开展 创建国家建国家环境保境保护模范城市活模范城市活动， ，张家港、大家港、大连、 、厦厦门、深圳、珠海、威海等城市被批准、深圳、珠海、威海等城市被批准为首批国家首批国家环境保境保护模范城市模范城市 三、三、““生物圈生物圈2 2号号””生态工程的实验及启示生态工程的实验及启示 精、卵相遇精、卵相遇顶体反应顶体反应( (顶体酶释放顶体酶释放) )顶体酶溶顶体酶溶解透明带解透明带溶解卵丘细胞溶解卵丘细胞( (穿越放射冠穿越放射冠) )穿越透明带，接触卵黄膜穿越透明带，接触卵黄膜透明带反应透明带反应( (第一道屏障第一道屏障) )精子外膜与卵黄膜融合精子外膜与卵黄膜融合精子进入卵精子进入卵Ä卵黄膜封闭作用卵黄膜封闭作用( (第二道屏障第二道屏障) )Ä尾部脱离核膜破裂，形成雄原核尾部脱离核膜破裂，形成雄原核Ä激活卵子完成减激活卵子完成减ⅡⅡ，排出第二极，排出第二极体，形成雌原核体，形成雌原核发育移动发育移动 接触合并接触合并形形成成受受精精卵卵1 1. . 受受精精作作用用 受精卵受精卵卵裂期卵裂期桑椹胚桑椹胚囊胚囊胚（内含囊胚腔）（内含囊胚腔）原肠胚原肠胚（内含原肠腔）（内含原肠腔）胎儿形成胎儿形成在在透明带内透明带内进行有丝分裂，细胞数增加，进行有丝分裂，细胞数增加，但胚胎总体积不增加或略有减少。
但胚胎总体积不增加或略有减少由具有全能性细胞构成，细胞数在由具有全能性细胞构成，细胞数在3232个个左右，排列紧密，形似桑椹左右，排列紧密，形似桑椹内细胞团：发育成胎儿各组织内细胞团：发育成胎儿各组织滋养层细胞：发育成胎膜和胎盘滋养层细胞：发育成胎膜和胎盘最初发育在输卵管进行有丝分裂最初发育在输卵管进行有丝分裂滋养层滋养层外胚层外胚层中胚层中胚层内胚层内胚层原肠腔原肠腔2. 2. 胚胎发育胚胎发育 3.3.胚胎移植胚胎移植①①①①两次使用促性腺激素两次使用促性腺激素两次使用促性腺激素两次使用促性腺激素②②②②两次检查：两次检查：两次检查：两次检查：③③③③产下犊牛性状与受体牛无关产下犊牛性状与受体牛无关产下犊牛性状与受体牛无关产下犊牛性状与受体牛无关④④④④冲卵的含义是从子宫中冲出胚胎，而非冲出卵子冲卵的含义是从子宫中冲出胚胎，而非冲出卵子冲卵的含义是从子宫中冲出胚胎，而非冲出卵子冲卵的含义是从子宫中冲出胚胎，而非冲出卵子第一次对受、供体进行同期发情处理；第一次对受、供体进行同期发情处理；第一次对受、供体进行同期发情处理；第一次对受、供体进行同期发情处理；第二次用于供体的超数排卵第二次用于供体的超数排卵。
第二次用于供体的超数排卵第二次用于供体的超数排卵第一次对收集的胚胎进行检查；第一次对收集的胚胎进行检查；第一次对收集的胚胎进行检查；第一次对收集的胚胎进行检查；第二次对受体母牛是否妊娠进行检查第二次对受体母牛是否妊娠进行检查第二次对受体母牛是否妊娠进行检查第二次对受体母牛是否妊娠进行检查 Ø全能干细胞全能干细胞ⅰ.ⅰ.按潜能分：按潜能分：Ø多能干细胞多能干细胞Ø专能干细胞专能干细胞Ä桑椹胚及以前，由内细胞团、原始性腺细胞分离出来，桑椹胚及以前，由内细胞团、原始性腺细胞分离出来，能发育成完整个体能发育成完整个体Ä能分化出动物体内多种组织（造血干细胞）能分化出动物体内多种组织（造血干细胞）Ä能分化出特定组织如成肌细胞、皮肤生发层细胞等能分化出特定组织如成肌细胞、皮肤生发层细胞等ⅱ.ⅱ.按来源分：按来源分：Ø胚胎干细胞胚胎干细胞Ø成体干细胞成体干细胞æ囊胚时，内层细胞团细胞囊胚时，内层细胞团细胞æ已分化特定组织中的未分化细胞，可已分化特定组织中的未分化细胞，可来源于胚胎、胎儿和成人组织来源于胚胎、胎儿和成人组织4.4.干细胞干细胞 主要通过实行主要通过实行“ ”原则，使一个系统产生的原则，使一个系统产生的污染物，能够成为本系统或者另一个系统的污染物，能够成为本系统或者另一个系统的 ，从而实现废弃物的资源化，而实现循环经济最重要，从而实现废弃物的资源化，而实现循环经济最重要的手段之一是的手段之一是 。
『网络知识结构』生态工程建设目的：生态工程建设目的：遵循自然界遵循自然界 的规律，充分发挥资源的生产的规律，充分发挥资源的生产潜力，防止潜力，防止 ，达到，达到 和和 的的同步发展少消耗、多效益、同步发展少消耗、多效益、 ））物质循环物质循环环境污染环境污染经济效益经济效益生态效益生态效益可持续可持续循环经济循环经济生产原料生产原料生态经济：生态经济：生态工程生态工程 『网络知识结构』生态工程原理1 1）） 原理：物质能在生态系统中循环往原理：物质能在生态系统中循环往复，复， 2 2）） 原理：物种繁多复杂的生态系统具原理：物种繁多复杂的生态系统具有较高的有较高的 3 3）） 原理：生态系统的生物数量不能超原理：生态系统的生物数量不能超过过 （环境容纳量）的限度（环境容纳量）的限度。
4 4）） 原理：生态系统建设要考虑自然、原理：生态系统建设要考虑自然、 、、 的整体影响的整体影响 5 5）） 原理：原理：物质循环再生物质循环再生分层分级利用分层分级利用物种多样性物种多样性抵抗力稳定性抵抗力稳定性协调与平衡协调与平衡环境承载力环境承载力整体性整体性经济经济社会社会系统学和工程学系统学和工程学功能功能比例关系比例关系之和之和Ø系统的结构决定系统的结构决定 原理：通过改善和优化系统结构原理：通过改善和优化系统结构改善功能改善功能; ;Ø系统整体性原理：系统各组分间要有适当的系统整体性原理：系统各组分间要有适当的 ，，使得能量、物质、信息等的转换和流通顺利完成，并实使得能量、物质、信息等的转换和流通顺利完成，并实现总体功能大于各部分现总体功能大于各部分 的效果，即的效果，即“1+1>21+1>2”. . 类型类型问题问题对策对策案例案例主要原理主要原理 注意问题注意问题农村综合发展农村综合发展型生态系统型生态系统小流域综合治小流域综合治理生态系统理生态系统大区域生态系大区域生态系统恢复工程统恢复工程湿地生态恢复湿地生态恢复工程工程矿区废弃地的矿区废弃地的生态恢复工程生态恢复工程城市环境生态城市环境生态工程工程 基因文库的构建方法基因文库的构建方法①①鸟枪法：鸟枪法：供体细胞中的供体细胞中的DNADNA许多许多DNADNA片段片段运载体运载体限制酶限制酶与载体连接与载体连接载入载入受体细胞受体细胞产生特定性状产生特定性状导入导入外源外源DNADNA扩增扩增目的基因目的基因分离分离( (直接分离法直接分离法) )从基因文库中获取目的基因从基因文库中获取目的基因 ②②反转录法：反转录法： 目的基因的目的基因的mRNAmRNA单链单链DNADNAC DNADNA反转录酶反转录酶合成合成基因文库的构建方法基因文库的构建方法双链双链DNADNA( (目的基因目的基因) ) 。
