培养基制作注意事项.doc

二、实验原理： 培养基是按照微生物生长繁殖所需要的各种营养物质用人工方法配制而成的基质其 中含有水分、碳水化合物、含氮化合物、无机盐及各种必要的维生素培养基可以为微生 物的生长提供能源、组成菌体细胞的原料以及调节代谢活动由于不同微生物营养类型不 同，对营养物质的要求也各不相同，因此，需要配制不同种类的培养基一般培养一般培养细菌细菌常常 用牛肉膏蛋白胨培养基，培养用牛肉膏蛋白胨培养基，培养放线菌放线菌常用淀粉培养基，培养常用淀粉培养基，培养霉菌霉菌常用马铃薯培养基，培养常用马铃薯培养基，培养 酵母菌酵母菌常用麦芽汁培养基常用麦芽汁培养基 培养基除了要满足微生物生长所要求的各种营养物质外，还应保证微生物所需要的其 他生活条件，如适宜的酸碱度，渗透压等，因此，根据不同种类微生物的要求，应将培养 基调节到一定的pH范围，如，细菌培养基中性偏碱、放线菌培养基偏碱、霉菌、酵母菌培 养基偏酸 根据研究的不同，可以将培养基制成固体、半固体和液体三种形式，固体培养基的成分与 液体相同，仅在液体培养基中加入凝固剂作支持物，通常加入 1.5~2.0%的琼脂，半固体加 入 0.3~0.5 琼脂作支持物，有时也可用明胶或硅胶作为凝固剂。

1．培养基的制作方法．培养基的制作方法 （1） 称量：按照培养基的配方，准确称取各成份于烧杯中 （2） 溶化：向上述烧杯中加入所需要的水量，搅动，然后加热使其溶解用马铃薯、豆 芽等配制的培养基，须先将马铃薯或豆芽按其配方的浓度加热煮沸半小 时，并用纱布过滤，然后加入其它成份继续加热使其溶化，补足水量， 如果配方中含有淀粉，则需先将淀粉加热煮融，再加入其它药品，并补 足水量 （3） 调节 pH 值：初制备好的培养基往往不能符合所要求的 pH 值，故需用酸度计，pH 试纸或用氢离子浓度比色计来矫正 （4） 过滤：用滤纸或双层纱布（中间夹一层脱脂棉花）趁热过滤 （5） 分装：根据不同的需要，可将制好的培养基分装入试管或三角烧瓶内，管口塞上棉 塞，用牛皮纸包扎管口 固体：分装试管，每管装液量为管高的五分之一，灭菌后制成斜面分装三 角烧瓶的量以不超过一半为宜；倒平板的培养基每管装 15~20mL （6） 灭菌：高压蒸汽灭菌2．培养基制作注意事项．培养基制作注意事项 （1） 加热溶化过程中，要不断搅拌，加热过程中所蒸发的水分应补足 （2） pH 值必须按各种不同培养基的要求准确测定 （3） 所用器皿要洁净，勿用铜质和铁质器皿。

（4） 分装培养塞时，注意不得使培养基在瓶口或管壁上端粘染，以免引起杂菌污染 （5） 培养基的灭菌时间和温度，需按照各种培养基的规定进行，以保证杀菌效果和不损 失培养基的必要成份，培养基灭菌后，必须放在 37℃温箱培育 24 小时，无菌生长方可使 用。