采收期对红景天活性成分的影响.docx

    采收期对红景天活性成分的影响    强巴卓嘎 白玛玉珍 欧珠 李淑萍 夏陈 林长彬 陈建 李娟摘 要：为明确不同采收时期红景天中活性成分的变化规律，针对4种采收时期的西藏红景天，对其不同部位中红景天苷、酪醇、络赛维进行分析结果表明：红景天苷、酪醇与络赛维主要存在于红景天根部，其次是根皮和茎，叶中仅存在少量的红景天苷随着采收期的延长，根与茎中红景天苷和络塞维含量均先增加后降低，酪醇并未表现出明显的规律，3种活性成分均在9月中下旬时含量达到最大，因此，9月中下旬是采收西藏红景天的最佳时期Key：红景天;活性成分;采收期红景天属为景天科植物，是我国传统珍贵药材，据《本草纲目》记载，其主要以根茎或全草入药，具有清热止痛、活血化瘀、补气安神等功效[1]红景天在四川、云南、东北、西藏等地广泛种植，由于西藏各地区海拔不同，并且拥有较多的石缝、灌丛以及乱石滩，更加适合红景天的栽植，因此，红景天资源较为丰富，并且大量研究发现，西藏红景天药用价值更高[2-3]崔秀梅等[4]研究认为，云南、青海等不同产地的红景天中红景天苷含量差异较大，但西藏地区的最优黎代余等[5]通过对四川、云南、西藏大花红景天中红景天苷含量的测定发现，西藏红景天品质最优并且最适宜大花红景天生长。

红景天广泛的种植栽培源于其具有较高的药用价值和保健功能，这与其活性成分密切相关红景天中活性成分有红景天苷、酪醇、多糖、络塞维、多糖、槲皮素等，其中红景天苷和酪醇是评价红景天质量的重要指标[6-7]，具有抗疲劳、保护心脑血管、抗肿瘤、抗辐射等20多种功效[8]，而络塞维是红景天中特有的成分[9]，基于红景天中丰富的活性成分，其已成为医学和卫生保健的重要药材不同生长因素对红景天中活性成分存在显著影响杜军等[10]研究发现，红景天苷与海拔、光照、经纬度等外界环境因素显著相关，而目前鲜少有文献研究采收时期对西藏红景天不同部位中活性成分含量的影响基于此本研究通过对不同采收期的红景天根、根皮、茎以及叶中红景天苷、酪醇、络赛维含量测定，深入研究采收期对其活性成分的影响，为提高采后红景天药用价值提供科学依据1 材料与方法1.1 材料与试剂红景天为西藏山南桑日基地同一品种4个采收期分别为2018年7月22日、2018年8月17日、2018年9月17日以及2018年10月15日（表1）对不同采收期红景天的根、根皮、茎、叶分离后，清洗、阴干、除杂、粉碎后过50目筛，分别放入干燥箱中备用保存红景天苷标对照品（批号：17070601，HPLC≥98%）、酪醇对照品（批号：17082503，HPLC≥98%），均购自成都普菲德生物技术有限公司;络塞维对照品（HPLC≥98%），中科院西北特色植物资源化学重点实验室自制;甲醇为色谱纯。

1.2 儀器与设备L600台式低速离心机，湖南湘仪实验室仪器公司;1260 Infinity II高效液相色谱仪，美国Agilent科技有限公司;FW13型粉碎机，天津市泰斯特仪器公司;KQ-250DB型数控超声波清洗器，昆山市超声仪器有限公司1.3 方法1.3.1 红景天、酪醇和络塞维提取 参照李永盛等[11]的方法稍作修改分别准确称取100 mg 红景天根部、根皮、茎以及叶粉末于10 mL容量瓶中，加入8 mL甲醇于30℃、400 W条件下超声提取60 min，冷却至室温后用甲醇定容，摇匀，4 000 r/min离心10 min，取上清液待测分析1.3.2 红景天苷和酪醇含量测定 红景天苷、酪醇和络赛维含量的测定采用高效液相色谱法，参照李永盛等[11]的方法，将1.3.1提取的上清液经0.22 μm滤膜过滤后进样分析色谱条件：色谱柱 SinoChrom ODS-BP（250mm×4.6mm，5μm）;流动相：甲醇-水;程序：梯度洗脱，0～40min内，甲醇：20%～60%;检测波长：250nm;进样量：10μL;柱温：30℃;流速：1.0 mL/min以峰面积为纵坐标（y），相应红景天苷、酪醇和络赛维含量为横坐标（x），作回归曲线，绘制标准曲线。

红景天苷回归曲线方程及相关系数：y=16.791x-4.384 7，R2=0.999 9;酪醇回归曲线方程及相关系数：y =33.501x+1.917 2，R2 =1;络赛维回归曲线方程及相关系数：y=28.304x -0.021 6，R2=12 结果与分析2.1 红景天不同部位的活性成分分析红景天苷作为红景天中重要的活性成分之一，其含量的高低被认为是评价红景天品质优劣的标准而红景天作为草本植物，其不同部位的活性成分含量可能存在一定差异由表2可知，根部红景天苷含量最高，达到20.38 mg/g，其含量低于王强等[12]测定天山地区红景天属植物根中红景天苷的含量（40.38 mg/g），这可能与品种差异有关，但根部红景天苷含量显著高于其他部位，含量高低顺序依次为根、根皮、叶、茎（表2），这说明红景天苷主要存在于根部，与张雪莲[13]研究结论相一致而酪醇作为红景天另一种主要的活性成分，其含量明显低于红景天苷，主要存在于根与根皮中，并且根皮中含量（2.18 mg/g）略高于根部（1.37 mg/g），茎中少量存在，但未在叶中检出络塞维作为红景天中特有成分，微量存在于根（0.12 mg/g）、根皮（0.08 mg/g）以及茎（0.13 mg/g）中，同样未在叶中检出。

因此，红景天中活性成分主要存在于根部，并且以红景天苷为其主要活性成分，解释了传统中医将以其根部入药的现象2.2 不同采收时期的红景天活性成分分析为了更加深入研究采收期对红景天活性成分的影响，分别对红景天不同部位（根、根皮、茎以及叶）的活性成分进行了测定分析由表3可知，随着采收期的延长，根部红景天苷含量呈现先显著上升，并在9月中下旬时含量达到最大，随后显著下降;酪醇含量随采收期变化并未表现出明显的规律，在10月中下旬时含量达到最大;而络赛维含量与红景天苷表现出相同的趋势，即9月中下旬其含量达到最大，随后显著降低赵彩云[14]发现，9月初采收的红景天中红景天苷与酪醇含量最高，利用综合评价法得到栽培大花红景天的最佳采收期为10月初采收期的长短直接影响红景天苷和酪醇等活性成分的积累尚辛亥[15]发现，生长年限是影响红景天中红景天苷的重要因素之一陈彬等[16]发现，春季采掘的红景天中红景天苷和酪醇含量比秋季采掘的样品均有所下降，因此，季节对红景天活性成分含量具有一定的影响基于根部是红景天活性成分的主要储存部位，表3反映出红景天根部活性成分含量与其采收期有着明显的相关性，因此认为9月中下旬是西藏红景天采收的最佳时期。

由表3可知，红景天苷是根皮中的主要活性成分，并且随着采收期的延长，在8月中下旬时其含量已达到最大，随后无显著变化研究发现，红景天苷含量与其土壤环境、肥料使用情况、光照等外部环境因素密切相关[17-18]因此，推测可能是由于根皮表面较厚的外部组织使得外界环境条件变化对红景天苷含量影响较小此外，红景天根系对水分吸收速率不同，生理代谢速率也有所不同，这都会影响红景天中红景天苷的含量[19]而酪醇随着采收期并未表现出明显的规律，在10月中下旬含量达到最大（3.25 mg/g），高于同时期根部、叶以及茎中酪醇含量络塞维随着采收期的延长呈现出显著降低的趋势，并且在8月中下旬的样品中未检出，这可能是由于样品差异所造成的采收期对红景天茎中活性成分含量有着显著影响其中，红景天苷在9月中下旬时含量达到最大（4.73 mg/g），随后显著降低;酪醇随着采收期的延长而增大，在10月中下旬时含量达到最大（2.09 g/mg），但9月采收的红景天中并未检出;而络塞维含量随着采收期的延长而升高随后立即降低，在8月中下旬时含量达到最大，为0.26 mg/g，高于同时期的根部、叶与根皮叶中活性成分较少，只检测出红景天苷而未检出酪醇和络塞维，这说明叶中仅存在红景天苷，并且红景天苷含量随着采收期的延长急剧降低，在10月中下旬时其含量仅为0.13 mg/g。

这可能是由于随着采收期的延长，红景天叶开始凋亡，从而使得其中的活性成分含量急剧减少3 结论西藏红景天不同部位的活性成分含量和组成各不相同，根部是红景天苷、酪醇和络塞维的主要储存部位，其含量显著高于根皮、茎和叶，而叶中活性成分少并且仅存在红景天苷红景天不同部位的活性成分含量和组成在采收过程中发生显著变化随着采收期的延长，根部、茎以及叶中红景天含量大体上呈现出先升高后降低的趋势，在9月中下旬时含量达到最大，根、根皮以及茎中酪醇含量均在10月中下旬含量达到最大值，而根部以及茎中络塞维含量在8月、9月中下旬含量最大根据中医以其根部入药的理论，因此，9月中下旬是西藏红景天采收的最佳时期Reference[1]崔艳梅，娄安如，赵长琦.红景天属植物化学成分及药理作用研究进展[J].北京师范大学学报（自然科学版），2004，44（3）：17.[2]张萍，申家恒.高山红景天胚胎学研究[J].植物研究，1998，18（1）：38-45.[3]吴委林.不同性别高山红景天生物学特性研究[D].延吉：延边大学，2005.[4]崔秀梅，商国懋，吴建民.不同产地大花红景天中红景天苷含量比较[J].中国现代中药，2010，12（9）：26-27、57.[5]黎代余，黄丽凤，陈鸿平，等.不同产地大花红景天有效成分的含量测定研究[J].食品工业科技，2011，32（2）：347-351.[6]Cai Z，Li W，Wang H，et al.Antitumor effects of a purified polysaccharide from Rhodiola rosea and its action mechanism[J].Carbohydrate Polymers，2012，90（1）：296-300.[7]國家药典委员会.中华人民共和国药典：2015 年版[M].北京：中国医药科技出版社，2015：154.[8]曹晓钢，于刚，王立军.红景天苷研究进展[J].食品与药品，2007，9（7）：48-51.[9]Marchev A S，Aneva I Y，Koycheva I K，et al.Phytochemical variations of Rhodiola rosea，L.wild-grown in Bulgaria[J].Phytochemistry Letters，2016，20：386-390.[10]杜军，刘依兰，袁雷.不同因素对青藏高原大花红景天苷含量的影响[J].贵州农业科学，2013，41（4）：55-58.[11]李永盛，白玛玉珍，费秀兰，等.西藏红景天中红景天苷、酪醇和络塞维含量的影响因素分析[J].食品科学，2019.[12]王强，阮晓.天山地区红景天属植物根中红景天苷、苷元酪醇和百脉根苷的定量分析[J].药物分析杂志，2005（9）：1026-1029.[13]张雪莲.高山红景天药用成分含量分析[D].延吉：延边大学，2007.[14]赵彩云.不同施肥量、采收期和加工方式对藏药大花红景天化学成分的影响[D].成都：成都中医药大学，2018.[15]尚辛亥.影响高山红景天中红景天甙含量的若干因素分析[D].哈尔滨：东北林业大学，2000.[16]陈彬，徐爱国，刘岚，等.西藏红景天根中红景天苷及酪醇定量分析[J].中药材，2013，36（11）：1803-1805.[17]杨柳，何正军，赵文吉，等.红景天属植物生长及生理生化特征对遮阴的响应[J].江苏农业科学，2018，46（3）：106-111.[18]郭娜，接伟光，张颖智，等.红景天属植物生长和红景天苷含量影响因素研究进展[J].国土与自然资源研究，2018，175（4）：95-96.[19]杨柳，何正军，赵。