柠檬黄检验标准操作规程1.docx

共 7 页 第1页 名称：柠檬黄检验标准操作规程编 号SOP-GTJY-044版 本 号01替代版本号00制 定 人审 核 人批 准 人制定日期审核日期批准日期制定部门质量部印 数2份执行日期颁发部门质量部存档部门GMP办分发部门质量部变更记载：版本号 批准日期 执行日期 00 2011年4月12日 2011年5月1日变更历史及原因：01版本:依据公司最新组织机构图，修改相应部门名称，使之与公司最新组织机构图相吻合目 的：建立一个规范的柠檬黄的标准检测规程范 围：适用于柠檬黄质量检验责 任 人：QC组全体检验人员对本规程实施负责内 容：1 检验规程依据：1）中华人民共和国医药行业标准药用辅料YY0143—93；2）《中国药典》2010年版二部2 待用试液配制及涉及检测仪器：2.1 待用试液配制：1）标准砷溶液（浓度为0.001mg/ml）精确称取预先在硫酸干燥器中干燥过的或在100℃干燥2小时的三氧化二砷0.1320克，溶于l0毫升lN氢氧化钠溶液中，加1N硫酸溶液10毫升将此溶液仔细地移入1000毫升容量瓶中， 并用水稀释至刻度。

此液每毫升含0.1毫克砷使用时可将此液稀释成每毫升含l或10mg的砷2）溴化汞试纸：将滤纸剪成直径为2cm的圆片，浸泡于溴化汞乙醇溶液中使用前取出，使其自然干燥后备用3) 醋酸铅棉花：将脱脂棉浸泡于10％醋酸铅溶液中，1小时后取出，并使之疏松，在100℃烘箱内干燥，取出置于玻璃瓶中塞紧保存备用 SOP-GTJY-044 柠檬黄检验标准操作规程 共7页 第2页 4）标准铅溶液（0.001mg/ml）称取硝酸铅0.160g,置1000ml量瓶中加硝酸5ml与水50ml溶解后，用水稀释至刻度，摇匀作为储备液临用前，精密量取储备液10ml，置100ml量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，即得每1ml相当于10μg的Pb ）2.2 涉及检测仪器： 1）S.C.202型电热恒温干燥箱；2）SXZ-20-10箱式电阻炉3 检测项目及方法：3.1 性状 本品为橙黄色粉末，溶于水，微溶于乙醇，不溶于油脂3.2 鉴别3.2.1 取本品加1.4g/L乙酸铵溶液制成0.001%的溶液，其最大吸收度波长为482±2nm3.2.2 取本品水溶液（浓度为1g/L）2ul，以正己烷：无水乙醇：氨水溶液为6:2:3作展开剂，温度20～25℃，做纸上层析，展开剂前沿线上升限度为150mm，其主色点得Rf值，应与标准样品相同。

3.3 干燥失重 取供试品，混合均匀（如为较大的结晶，应先迅速捣碎使成2mm以下的小粒），精密称取约2g，置与供试品相同样条件下干燥至恒重的扁形称量瓶中，精密称定得，在105℃干燥至恒重，精密称定得M2由减失的重量和取样量计算供试品的干燥失重减失重量应小于6.0%W=M1-M2m×100% 式中： W为减失重量百分比；M1为干燥恒重前质量g；M2为干燥恒重后质量g；m为试样质量g 供试品干燥时，应平铺在扁形称量瓶中，厚度不可超过5mm，如为疏松物质，厚度不可超过10mm 放入烘箱或干燥器进行干燥时，应将瓶盖取下，置称量瓶旁，或将瓶盖半开进行干燥；取出时，须将称量瓶盖好置烘箱内干燥的供试品，应在干燥后取出置干燥器中放冷至室温，然后称定重量供试品如未达规定的干燥温度即融化时，应先将供试品在低于熔点5～10℃的温度下干燥至大部分水分除去后，再按规定条件干燥 SOP-GTJY-044 柠檬黄检验标准操作规程 共7页 第3页 3.4 水不溶物 称取样品约3g，置于500ml烧杯中，加入50～60℃水250ml，使之溶解，用已在105℃烘至恒重的G4垂熔玻璃坩埚过滤，用热水充分洗涤至淋洗液无色，在105℃恒温烘箱中烘至恒重。

遗留残渣不得过0.2%W=M1-M2m×100%式中： W为炽灼残渣重量百分比；M1为恒重后样品与G4垂熔玻璃坩埚重量g；M2为空G4垂熔玻璃坩埚恒重后重量g；m为试样质量g3.5 异丙醚萃取物称取试样约2g，用水100ml 溶解后移入500ml分液漏斗中，加异丙醚40ml摇动1min，静置分层，分出染料水层，置于另一分液漏斗中，留存的异丙醚每次用水25ml洗涤，洗涤二次，弃去洗液，将醚液通过脱脂棉，直接滤入已知质量的150ml磨口锥形瓶中，第一次分出的染料溶液加入100.0g/L的氢氧化钠溶液2ml，用异丙醚40ml同上法进行第二次萃取，醚液用5.0g/L氢氧化钠溶液25ml 洗涤一次，再每次用水25ml洗涤二次，弃去洗液，将醚液通过脱脂棉滤入同一已锥形瓶中，第二次分出的染料水溶液加入（3+7）盐酸溶液5ml ,用异丙醚40ml进行第三次萃取，醚液用（2+98）盐酸溶液25ml洗涤一次，每次用水25ml在洗涤二次，合并三次醚液，在80～85℃水浴中蒸去异丙醚，然后将锥形瓶置于温度为80～85℃烘箱中，烘至恒重同时以100ml水代替染料溶液，以相同的方法做一空白试验异丙醚萃取物百分含量不得过0.3%。

异丙醚萃取物百分含量按下式计算：W=M1-M2m×100% 式中： W为丙醚萃取物百分含量；M1为干燥恒重前质量g；M2为干燥恒重后质量g；m为试样质量g 3.6 副染料 称取样品1.5g,置于烧杯中，加入适量水溶液后移入100ml量瓶中，稀释到刻度，摇匀，用微量注射器吸取100ul，很均匀地点在离滤纸底边25mm的一条基线上，成一直线，染料溶液在滤纸上的宽度不超过5mm，长度为130mm，用吹风机吹干，将滤纸放入标本缸中展开，滤纸底边浸入展开剂液面下10mm，待展开剂前沿线上升至150mm SOP-GTJY-044 柠檬黄检验标准操作规程 共7页 第4页 或直到副染料分离满意为止，取出，风干同时用空白滤纸在相同条件下展开【该空白液滤纸必须和试样溶液展开用滤纸在同一张（600mm×600mm）滤纸上相邻部位裁取】将各个副染料和空白滤纸上与各副染料相对应的部位的滤纸，按同样大小剪下，并剪成约5mm×15mm细条，分别置于50ml纳氏比色管中，各准确加入1:1丙酮溶液5ml，摇动3～5分钟后，再准确加入碳酸氢钠溶液20ml，充分摇动数分钟，将萃取液分别在G3垂熔漏斗中自然过滤，滤液须澄清，无悬浮物，在各自副染料的最大吸收波长处，用5cm比色皿和紫外-可见分光光度计测定吸收度。

以1:1丙酮溶液5ml和碳酸氢钠溶液（4g/l）20ml混合液作参比液副染料的最大吸收波长为432nm副染料（%）不得过1.0%注：如下图所示）副染料（%）=5.91（A-b） 式中：5.91为副染料折算成百分率的换算因数；A为副染料的吸收度；B为副染料对照空白的吸收度3.7 砷（As） 称取样品1g置于250ml烧杯中，加硝酸1.5ml和硫酸溶液（1+1）5ml，用小火加热赶出二氧化氮气体，待溶液变成棕色，停止加热，放冷后加入硝酸—高氯酸混合液1ml，继续加热至溶液澄清无色或微黄色并产生白烟，停止加热，放冷后加水5ml加热至沸，除去残余的硝酸—高氯酸（必要时可再加水煮沸一次），继续加热至 SOP-GTJY-044 柠檬黄检验标准操作规程 共7页 第5页 发生白烟，保持10分钟，放冷后移入100ml锥形瓶中，用水30ml分次洗涤烧瓶，洗涤一并倒入锥形瓶中，加盐酸4ml、200g/l碘化钾4ml及400g/l氯化亚锡溶液5滴，摇匀，放置10分钟，加无砷金属锌2g，迅速将装有乙酸铅棉花及溴化汞试纸的玻璃管装上，在25～30℃暗处放置1小时，溴化汞试纸所显颜色不得深于标准（不得过0.0001%）。

同时以相同的方法做一空白试验标准制备：将上述空白试验液加标准砷溶液（浓度为0.001mg/ml）后，与样品同时同样操作3.8 铅（Pb） 称取样品2g，置于坩埚中，先在低温下炭化，然后在500～600℃灰化，放冷后，在灰分中加乙酸溶液（1+4）5ml ，搅拌使之溶解，加水10ml，稀释后用定性滤纸直接过滤在50ml纳氏比色管中，并用水15ml分次洗涤残渣，滤液用氨试液调节pH=8（pH试纸检查），加氰化钾溶液（100g/L）2ml及无色硫酸钠溶液(100g/L)4滴，加水稀释至刻度，摇匀，在暗处放置10分钟，与标准管比较，其颜色不得更深（不得过0.001%）标准管制备：取200g/l乙酸溶液5ml及水25ml，用定性滤纸直接过滤在另一个50ml纳氏比色管中，加标准铅溶液（0.001mg/ml）2ml，以下操作与样品管同时同样处理注：如样品溶液加入氨水后产生浑浊，则需重做，如加入氨水后溶液泛黄，标准液就需以调色液（取适量蔗糖，在烧杯中加热焦化后，加水溶解，过滤即得调至颜色与样品相同，再加氰化钾溶液与硫酸钠溶液后放置10分钟比色3.9 氯化物与硫酸盐 称样品2g，溶于100ml蒸馏水中，加活性炭10g，慢慢加热煮沸15分钟，冷却后加入硝酸溶液（1+1）1ml，充分振摇，加水至体积达200ml过滤，备用。

3.9.1 氯化物 吸取以上试液50ml，加硝酸溶液（1+1）2ml和0.1mol/l硝酸银标准滴定液10ml及硝基苯5ml，振摇均匀后，加1ml硫酸铁铵溶液【取硫酸铁铵14g溶于100ml水，加硝酸溶液（1+1）10ml，置棕色瓶中备用以0.1mol/l硫氰酸铵溶液滴定过剩的硝酸银同时以同样的方法做一空白试验不得过9.0%氯化物百分含量按下式计算：氯化物百分含量Ww=0.058V1-V2(200-b)×C25m×100% 式中：V1为滴定样品用去硫氰酸铵标准滴定溶液的体积ml；V2为滴定空白用去硫氰 SOP-GTJY-044 柠檬黄检验标准操作规程 共7页 第6页 酸铵标准滴定溶液的体积ml；C为硫氰酸铵标准滴定溶液的浓度mol/l；m为样品的质量g；b为活性炭的体积（取10g相同的活性炭，置100ml量筒中，加入70ml水测得体积的增加数）ml；0.0585相当于1ml硫氰酸铵【c（NH4CNS）=1.00mol/l】标准滴定液的氯化钠的质量g3.9.2 硫酸盐 取以上试液25ml，置250ml锥形瓶中加酚酞指示剂1滴，滴加0.05mol/lNaOH溶液至呈粉红色为止，然后再加0.002mol/lHCL至红色消失，加25ml无水乙醇，摇匀，再加0.2g四羟基苯鲲二钠、0.2g氯化钾混合试剂，以0.05mol/l氯化钡标准滴定液滴定到溶液呈橙红色为终点，在滴定时要用灯光从侧面观察，同时以相同方法做空白试验。

不得过9.0%硫酸盐百分含量为：Ww=0.071V1-V2(200-b)×C25m×100% 式中：V1为滴定样品用去氯化钡标准滴定溶液的体积ml；V2为滴定空。