食用菌生产过程中消毒与灭菌方法.pdf

T 食用菌生产~．-／jt中消毒与灭菌方法 ●穆洪丽 张忠伟(抚顺市农业科学研究院辽宁抚顺 113300) 中国是食用菌生产第一大国食用菌产业已 经成为我国农业产业结构的重要部分，成为现阶段 农民致富的一条重要途径食用菌不仅改善了人 们的膳食结构，而且大量出口，为国家创造了大量 外汇收入目前，食用菌的生产规模越来越大，范 围越来越广，展现了喜人的前景食用菌产业具有 两大风险，一是市场风险，二是技术风险市场风 险关键在于消费水平的发展变化随着国内消费 水平的提高，消费市场需求量稳步上升，市场波动 相对稳定而技术风险相对突出在食用菌生产 中始终存在着一个严重的问题，就是污染导致减 产，严重的污染甚至导致绝收，给菇农造成极大的 损失，因而影响菇农的积极性，进而限制了食用菌 生产的更大发展因此在食用菌生产中如何采取 有效措施防污染，是影响经济效益的关键问题 食用菌生产的环节很多，包括菌种制作、播种、 栽培、生产管理、成品采收、产品贮藏等在这诸多 环节中，防污染始终是一个不容忽视的问题防止 污染的关键在于生产环境消毒、培养基灭菌、接种 操作、培养管理等技术环节 1 基本概念 1．1 消毒 消毒是指杀死病原微生物，但不一定能全部彻 底杀死病原微生物的方法。

通常用化学的方法来 达到消毒的作用用于消毒的化学药物叫做消毒 剂，例如医用酒精兑制成75％酒精等 1．2灭菌 灭菌是指把目标物体上所有的微生物(包括细 菌、芽孢在内)全部彻底杀死的方法，通常用物理方 法来达到灭菌的目的无菌即不含活菌的意思，是 灭菌的结果 46特种经济动植物／2014年03期 1．3无菌操作 防止病原微生物进入机体、物体或培养基中的 操作技术称为无菌操作例如一级菌种、二级菌 种、三级菌种和菌袋栽培袋中的接种过程即为无菌 操作 2 消毒剂与灭菌工具设备 2．1常用消毒剂 2．1．1酒精(75％)利用医用消毒酒精或用 95％工业酒精兑制75％酒精，用于器皿、菌种瓶、 菌袋表面、接种工具表面消毒 2．1．2气雾消毒(剂)盒 主要成分二氧化 氯，用于接种箱、接种室、菌种菌袋培养室、菇棚环 境消毒 2．1．3高锰酸钾强氧化剂，用于器皿、菌种 瓶、菌袋表面、接种工具表面消毒 2．1．4硫磺用于接种室、菌种菌袋培养室、 菇棚环境消毒 2．1．5甲醛高锰酸钾烟雾剂 用于接种室、 菌种菌袋培养室、菇棚等环境消毒由于甲醛剧毒 危害人与环境，不提倡使用 2．1．6来苏儿用于接种室、菌种菌袋培养 室、菇棚环境消毒。

2．1．7生石灰用于接种棚、菌种菌袋培养 室、菇棚等过道地面的消毒 2．2常用灭菌工具与设备 2．2．1酒精灯常用于食用菌实验室、接种 箱、接种室、接种帐内接种等无菌操作酒精灯点 燃后火焰外焰温度达600—750℃可在几秒时间 内杀灭接种铲、接种钩、菌种瓶口表面杂菌；并使火 焰上方几厘米内成为无菌区，接种操作同时用于封 闭菌种袋(瓶)和被接种袋(瓶)口，防止空间游离杂 菌进人 2．2．2紫外线灯 常用于食用菌实验室、接 种箱、接种室、接种帐内接种等无菌操作和菌种培 养室空气净化紫外线可以杀灭各种微生物，包括 细菌繁殖体、芽孢、分支杆菌、病毒、真菌、立克次体 和支原体等，凡被上述微生物污染的表面、水和空 气均可采用紫外线消毒 2．2．3 电力高压灭菌锅 大型容积70～ IOOL，小型容积IOL左右，额定工作压力 1．5MWcm2，灭菌温度121 125℃常用于接种工 具、试管菌种培养基、小容量培养基灭菌多用于 试管母种(一级种)培养基灭菌使用方便、快捷， 灭菌效果好 2．2．4超净工作台超净工作台原理是在特 定的空间内，室内空气经预过滤器初滤，由小型离 心风机压人静压箱，再经空气高效过滤器二级过 滤，从空气高效过滤器出风面吹出的洁净气流具有 一定的和均匀的断面风速，可以排除工作区原来的 空气，将尘埃颗粒和生物颗粒带走，以形成无菌的 高洁净的工作环境。

常用于实验室、接种室等菌种 生产的无菌操作 2．2．5臭氧离子风机臭氧(03)是一种强氧 化剂、消毒剂和催化剂，在消毒学上属于过氧化物 类消毒剂，具有广谱高效杀菌作用臭氧能破坏或 分解细菌的细胞壁，迅速扩散透入细胞里，氧化破 坏了细胞内的酶而杀死病原菌臭氧在水中分解 的中间产物氢氧基具有很强的氧化性，可以分解一 般氧化剂难以破坏的有机物，而且反应完全、速度 快臭氧为气体消毒剂，其杀菌过程为强氧化作 用，使微生物细胞中的多种成分产生反应，从而发 生不可逆转的变化而死亡臭氧灭活病毒是臭氧 直接破坏核糖核酸或脱氧核糖核酸臭氧杀灭细 菌和霉菌类微生物是臭氧首先破坏细胞膜，使细胞 膜受损，导致新陈代谢障碍并抑制其生长常用于 接种室和培养室消毒 2．2．6燃料高压灭菌锅 容积1．0 1．5m3， 额定工作压力1．5MWcm2，灭菌温度121～125oC 常用于二级菌种、三级菌种和小型菌袋培养基 灭菌 2．2．7蒸汽高压灭菌柜容积1．0～1．5m3， Te 额定工作压力1．5MP／cm2，灭菌温度121～125℃ 常用于二级菌种、三级菌种和小型菌袋培养基 灭菌 2．2．8常用蒸汽灭茵灶(槽) 一般为砖混结 构底座，上面铺钢筋铁帘或木制帘，帘下设有承重 支撑底座、通气道、冷凝水排水孔。

灭菌灶(槽)底 座高400cm、平面面积25m2左右，四周边缘台面宽 600cm，镶嵌钢筋钩环和钢管立柱灭菌灶(槽)底 座留有1～2个通气孔和管道，外接常压锅炉供气 2．2．9高压蒸汽锅炉常使用中小型高压蒸 汽锅炉，根据灭菌锅容量和菌袋数量来选择锅炉大 小大锅炉供气充足，灭菌效果好 2．2．10常压蒸汽锅炉 常使用中小型常压 蒸汽锅炉，根据灭菌锅容量和菌袋数量来选择锅炉 大小可以同时用2个小型锅炉供气，加水时可持 续供气，供气充足，灭菌效果好 3 消毒灭菌方法与注意事项 3．1 菌种接种室、接种帐、接种箱和培养室的 消毒处理 3．1．1接种室消毒经常使用的接种室要每 隔5～7天消毒杀菌1次先用3％来苏儿向地面喷 洒，向空气喷雾以及擦洗四壁和桌面进行消毒；借 来苏儿喷雾后的湿度，然后用二氧化氯气雾杀菌剂 点燃熏蒸，使用剂量依说明书，如果2日内不接种， 剂量可加倍；若要准备接种，要在前一天将菌种、接 种袋(瓶)、接种工具、工作服放人接种室后，用来苏 儿喷雾处理和二氧化氯气雾熏蒸，次El接种前用紫 外线灯照射30分钟后，方可接种接种室的日常 湿度不宜过大，也不宜过低，湿度过大容易滋生杂 菌，尤其是雨季更要通风降低湿度；过于干燥容易 起尘，空间杂菌飞扬增加感染几率。

3．1．2接种箱消毒接种箱一般放在接种室 内，使用前一定要严格消毒处理，与接种室消毒处 理同时进行接种前一天用高锰酸钾水溶液里外 擦洗一遍，再用二氧化氯气雾杀菌剂熏蒸1 Et，次 日使用接种前将菌种、接种袋(瓶)、接种工具放 入接种箱内，用来苏儿喷雾处理和二氧化氯气雾熏 蒸3O分钟后开始接种接种箱封闭要严，要有多 层纱布通气孑L，保持酒精灯氧气供给和杂菌过滤 接种箱接种方便，低成本，接种成功率高 特种经济动植~]／2014年03期47 T瓣 3．1．3接种帐消毒接种帐一般安排在接种 棚内，接种后菌袋就地培养，接种帐流动作业接 种棚要按照接种室消毒处理方法预先进行消毒杀 菌处理接种帐的消毒杀菌处理与接种室、接种棚 相同，每次接种处理一次一般经一夜熏蒸，烟雾 自然消散，即可进入接种接种帐接种数量大、时 间长，最好每帐不超过3 000袋，每次接种时间不超 过3小时 接种室(棚)、培养室(棚)一定要保持清洁干 净，不宜乱放杂物，尤其是有机物料和杂菌污染袋， 要及时清除采用夏季休闲、阳光照射、雨季开放、 阶段消毒杀菌方式来防止环境杂菌积累 3．2试管母种(一级种)的灭菌 3．2．1首先将内层灭菌桶取出，再向外层锅 内加入适量的水，使水面与三角搁架相平为宜。

注 意防止水量太少出现干锅现象 3．2．2装入待灭菌工具与试管培养基注意 不要装得太挤，以免妨碍蒸汽流通而影响灭菌效 果注意防止物品堵塞排气阀和安全阀通气孔 3．2．3清理密封胶圈锅口，加盖封闭，勿使漏 气，关闭排气阀 3．2．4供电加热，让锅内的温度随蒸汽压力 增加而逐渐上升当锅内压力升No．05MPa／cm2压 力时，停电排除冷空气，直到锅内压力为0，关闭排 气阀供电继续加热，直到0．15MPa／cm2压力后，持 续30分钟 3．2．5关闭电源，让灭菌锅内温度自然下降， 当压力表的压力降至0时，打开排气阀，旋松螺栓， 打开盖子，取出试管培养基 3．3原种栽培种(二、三级种)的灭菌 通常采用中大型高压灭菌锅(柜)灭菌操作 过程基本与小型高压灭菌锅大致相同，只是增加排 污和灭菌时间当压力达No．05MPa／cm2压力时， 通过打开底部排水阀排放冷气，排放内锅沉积的污 水如果灭菌物是菌种瓶需达到额定压力持续灭 菌时间1．5～2．0小时如果是1．1kg菌袋需持续 灭菌时间2．0—2．5小时 3．4栽培袋的灭菌 通常采用常压灭菌锅(灶)灭菌最好用自制 的菌袋周转筐，装好料袋，整齐摆放在帘子上，不用 48特种经济动植物／2014年03期 铺麻袋片，灭菌时间短，效果好，料袋保持原型和松 紧度。

如果不用周转筐直接摆放堆置，要求稳固整 齐，不倒堆，一般堆放3 000标准袋(扁径15 X 55cm) 用棚膜和棚被扣盖，用绳子绑紧，固定在铁栏 上，棚被底角用沙袋压实，准备灭菌使用常压蒸 汽锅炉供气，装锅前锅炉先点火，或和装锅同时起 火大火攻头，保证气压，争取在4～64,时内使菌 袋达到100℃，达到100~C后不掉火，不降温，保持 24～28小时，即可达到灭菌效果，料袋数量增加， 适当加长灭菌时间 4 接种过程中的无菌操作 4．1试管母种(一级种)接种操作 4．1．1操作过程事先做好接种室、接种箱 或净化台的消毒处理消毒以后进入接种室在 净化台前或接种箱内，用75％的酒精溶液棉球擦 双手、接种铲(钩)及母种试管口处点燃酒精灯 左手持住母种试管(上)和空白斜面试管(下)，使两 试管口处于火焰上方，火焰封口；右手持接种钩 (上)小指夹持棉塞(下)将接种钩用火焰杀菌后， 挑取母种豆粒大小菌丝块，迅速移接到空白斜面中 央，将棉塞塞回试管 4．1．2注意事项 4．1．2．1酒精灯火焰要高酒精灯火焰不够 高时，火焰周围的无菌范围小，不利于无菌操作，也 易造成接种钩灼烧灭菌不彻底，影响接种后的成 品率。

4．1．2．2母种试管表面和管口要灭菌彻底 作为接种物的母种试管表面并未处于无菌环境下 保存，因此，接种时要注意试管表面和管口的灭菌 拔下棉塞后，在酒精灯火焰上转动2～3圈，这样可 有效地减少杂菌造成的污染 4．1．2．3拔塞、取种、接种及塞棉塞必须在火 焰上方或附近操作母种试管和待接种的试管一 旦打开棉塞，就不能远离火焰，因为只有在火焰周 围-~E4,范围内才是无菌的 4．1．2．4接种钩要灼烧彻底接种钩最好用 较薄的材料制成，灼烧时烧至红色并注意接种钩 灼烧的长度，灼烧长度以试管长度为度，在火焰上 方反复灼烧3～4次即可 朝鲜蓟栽培管理 Te ●周淑荣 董昕瑜 包秀芳(中国农业科学院特产研究所 吉林长春 130112) ●郭文场(中国人民解放军军事医学科学院长春离职干部休养所 吉林长春130062) 朝鲜蓟(Cynara scoiymus)为菊科菜蓟属多年生 草本植物，是由菜蓟演变而成的，南欧及中亚西亚 有野生种，又名菊蓟、菜蓟、法国百合、荷花百合、洋 百合、洋蓟、刺菜蓟其以花蕾期的种苞及花托为 主要食用部分，叶柄经软化栽培后也可以食用朝 鲜蓟原产地中海沿岸，2 000多年前的罗马人开始 食用，现以法国、意大利、西班牙栽培居多，是欧州 许多国家的高档蔬菜。

l9世纪由法国传人我国云 南、上海、浙江、湖南、山东、北京、陕西等地，已栽培 试种我国台湾省有较大的面积栽种，。