小鼠肝脏RNA的抽提纯化与鉴定优秀课件.ppt

实验二实验二小鼠肝脏小鼠肝脏RNARNA的抽提纯化与鉴定的抽提纯化与鉴定小鼠肝脏小鼠肝脏RNARNA的抽提纯化与鉴定优的抽提纯化与鉴定优秀秀实验目的实验目的|掌握掌握RNARNA操作注意事项操作注意事项|了解鉴定了解鉴定RNARNA含量和质量的方法含量和质量的方法|了解了解RNARNA抽提原理抽提原理|熟悉熟悉RNARNA抽提方法抽提方法小鼠肝脏小鼠肝脏RNARNA的抽提纯化与鉴定优的抽提纯化与鉴定优秀秀实验原理实验原理|理论基础：理论基础： 真核生物结构基因有内含子真核生物结构基因有内含子 基因在转录水平的表达基因在转录水平的表达|实验原理：四步骤实验原理：四步骤 组织或细胞匀浆组织或细胞匀浆 分离总分离总RNARNA 纯化纯化RNARNA 检测检测RNARNA的纯度及完整性的纯度及完整性小鼠肝脏小鼠肝脏RNARNA的抽提纯化与鉴定优的抽提纯化与鉴定优秀秀理论基础理论基础 |真真核核生生物物中中绝绝大大多多数数基基因因有有内内含含子子，，如如直直接接由由基基因因组组克克隆隆目目的的基基因因，，不不利利于于编编码码基基因因的的序序列列分分析析及及体体外外利利用用原原核核细细胞胞表表达达。

提提取取RNARNA并并逆逆转转录录形形成成cDNAcDNA或或构构建建cDNAcDNA文文库库是获取真核生物表达基因的主要手段是获取真核生物表达基因的主要手段检检测测基基因因在在转转录录水水平平的的表表达达，，需需检检测测mRNAmRNA含量，定量含量，定量RT-PCRRT-PCR是主要方法之一是主要方法之一 小鼠肝脏小鼠肝脏RNARNA的抽提纯化与鉴定优的抽提纯化与鉴定优秀秀内含子内含子 外显子外显子小鼠肝脏小鼠肝脏RNARNA的抽提纯化与鉴定优的抽提纯化与鉴定优秀秀实验原理|抽抽提提RNARNA的的关关键键在在于于去去除除DNADNA与与蛋蛋白白质质，，常常用用酸酸性性酚酚法法在在酸酸性性条条件件下下苯苯酚酚可可溶溶解解DNADNA而而不不溶溶解解RNARNA，，同同时时酚酚又又是是蛋蛋白白变变性性剂剂利利用用酸酸性性酚酚试试剂剂加加氯氯仿仿共共抽抽提提，，可可一一步步完完成成细细胞胞的的裂裂解解以以及及蛋蛋白白质质与与RNARNA的的分分离离最最后后利用异丙醇沉淀，即可获得纯化的总利用异丙醇沉淀，即可获得纯化的总RNARNA小鼠肝脏小鼠肝脏RNARNA的抽提纯化与鉴定优的抽提纯化与鉴定优秀秀RNARNA产物的鉴定产物的鉴定|RNARNARNARNA的纯度与含量用紫外分光光度法检验。

的纯度与含量用紫外分光光度法检验的纯度与含量用紫外分光光度法检验的纯度与含量用紫外分光光度法检验v高纯度高纯度高纯度高纯度RNARNARNARNA的的的的A260/A280A260/A280A260/A280A260/A280应处于应处于应处于应处于1.61.61.61.6至至至至1.81.81.81.8之间，之间，之间，之间，vA260A260A260A260与与与与RNARNARNARNA浓度呈正比，浓度呈正比，浓度呈正比，浓度呈正比，1 OD = 40μg/ml RNA1 OD = 40μg/ml RNA1 OD = 40μg/ml RNA1 OD = 40μg/ml RNARNARNARNARNA的完整性可通过电泳检测的完整性可通过电泳检测的完整性可通过电泳检测的完整性可通过电泳检测vRNARNARNARNA为为为为单单单单链链链链分分分分子子子子，，，，二二二二级级级级结结结结构构构构复复复复杂杂杂杂，，，，需需需需先先先先经经经经甲甲甲甲酰酰酰酰胺胺胺胺变变变变性，再进行甲醛变性琼脂糖凝胶电泳性，再进行甲醛变性琼脂糖凝胶电泳性，再进行甲醛变性琼脂糖凝胶电泳性，再进行甲醛变性琼脂糖凝胶电泳。

v细细细细胞胞胞胞总总总总RNARNARNARNA以以以以rRNArRNArRNArRNA含含含含量量量量最最最最高高高高，，，，电电电电泳泳泳泳时时时时可可可可观观观观察察察察到到到到18S18S18S18S与与与与28S 28S 28S 28S rRNArRNArRNArRNA两两两两条条条条清清清清晰晰晰晰条条条条带带带带，，，，且且且且亮亮亮亮度度度度之之之之比比比比接接接接近近近近1:21:21:21:2，，，，表表表表明明明明RNARNARNARNA没没没没有有有有发发发发生生生生降降降降解解解解泳泳泳泳道道道道前前前前缘缘缘缘还还还还可可可可观观观观察察察察到到到到一一一一条条条条较较较较为为为为模模模模糊糊糊糊且且且且亮亮亮亮度度度度较较较较弱弱弱弱的的的的条条条条带带带带，，，，主主主主要要要要由由由由5S5S5S5S、、、、5.8S 5.8S 5.8S 5.8S rRNA rRNA rRNA rRNA 与与与与tRNAtRNAtRNAtRNA组成小鼠肝脏小鼠肝脏RNARNA的抽提纯化与鉴定优的抽提纯化与鉴定优秀秀RNARNA电泳结果示意图电泳结果示意图28S18S5S小鼠肝脏小鼠肝脏RNARNA的抽提纯化与鉴定优的抽提纯化与鉴定优秀秀RNARNA电泳结果凝胶成像图电泳结果凝胶成像图28 S18 S 5 S小鼠肝脏小鼠肝脏RNARNA的抽提纯化与鉴定优的抽提纯化与鉴定优秀秀取小鼠肝组织匀浆取小鼠肝组织匀浆|处死小鼠处死小鼠|匀浆匀浆 取肝取肝50~100g Trizol 1ml 匀浆匀浆小鼠肝脏小鼠肝脏RNARNA的抽提纯化与鉴定优的抽提纯化与鉴定优秀秀RNARNA纯化操作步骤纯化操作步骤|加加加加 入入入入 氯氯氯氯 仿仿仿仿 0.2ml0.2ml0.2ml0.2ml，，，， 剧剧剧剧 烈烈烈烈 振振振振 荡荡荡荡 ，，，， 室室室室 温温温温 放放放放 置置置置 10101010分分分分 钟钟钟钟 。

12000rpm12000rpm12000rpm12000rpm离心离心离心离心15min15min15min15min，取上清 （（（（离离离离心心心心后后后后溶溶溶溶液液液液分分分分为为为为三三三三相相相相，，，，即即即即上上上上层层层层的的的的水水水水相相相相、、、、下下下下层层层层的的的的有有有有机机机机相相相相以以以以及及及及中中中中间间间间的的的的变变变变性性性性蛋蛋蛋蛋白白白白小小小小心心心心吸吸吸吸取取取取上上上上层层层层水水水水相相相相，，，，绝绝绝绝不不不不能能能能有有有有中中中中层蛋白混入层蛋白混入层蛋白混入层蛋白混入加加加加 入入入入 异异异异 丙丙丙丙 醇醇醇醇 0.5ml0.5ml0.5ml0.5ml，，，， 振振振振 荡荡荡荡 混混混混 匀匀匀匀 ，，，， 室室室室 温温温温 放放放放 置置置置 10101010分分分分 钟钟钟钟 ，，，，12000rpm12000rpm12000rpm12000rpm离心离心离心离心10min10min10min10min，弃上清 （（（（加加加加入入入入50505050％％％％的的的的异异异异丙丙丙丙醇醇醇醇沉沉沉沉淀淀淀淀核核核核酸酸酸酸。

异异异异丙丙丙丙醇醇醇醇的的的的用用用用量量量量应应应应与与与与以以以以上上上上所取上清液的体积相当所取上清液的体积相当所取上清液的体积相当所取上清液的体积相当1ml 751ml 751ml 751ml 75％乙醇洗涤沉淀，％乙醇洗涤沉淀，％乙醇洗涤沉淀，％乙醇洗涤沉淀，12000rpm12000rpm12000rpm12000rpm离心离心离心离心5min5min5min5min，重复一次重复一次重复一次重复一次空空空空气气气气干干干干燥燥燥燥沉沉沉沉淀淀淀淀，，，，溶溶溶溶解解解解于于于于20μl 20μl 20μl 20μl DEPC-HDEPC-HDEPC-HDEPC-H2 2 2 2O O O O留留留留样样样样2μl2μl2μl2μl，，，，其其其其余－余－余－余－70℃70℃70℃70℃保存备用保存备用保存备用保存备用小鼠肝脏小鼠肝脏RNARNA的抽提纯化与鉴定优的抽提纯化与鉴定优秀秀RNA电泳操作步骤|制制制制备备备备琼琼琼琼脂脂脂脂糖糖糖糖凝凝凝凝胶胶胶胶：：：：首首首首先先先先将将将将0.5g0.5g0.5g0.5g琼琼琼琼脂脂脂脂糖糖糖糖溶溶溶溶化化化化于于于于32ml32ml32ml32ml水水水水，，，，冷冷冷冷却却却却至至至至60℃60℃60℃60℃。

加加加加入入入入5×5×5×5×甲甲甲甲醛醛醛醛变变变变性性性性凝凝凝凝胶胶胶胶电电电电泳泳泳泳缓缓缓缓冲冲冲冲液液液液10ml10ml10ml10ml，，，，37373737％％％％甲甲甲甲醛醛醛醛水水水水溶溶溶溶液液液液9ml9ml9ml9ml，，，，混混混混合合合合均均均均匀匀匀匀并灌制胶板并灌制胶板并灌制胶板并灌制胶板取取取取1μl 1μl 1μl 1μl RNARNARNARNA溶溶溶溶液液液液，，，，加加加加入入入入甲甲甲甲酰酰酰酰胺胺胺胺- - - -上上上上样样样样缓缓缓缓冲冲冲冲液液液液9μl9μl9μl9μl，，，，95℃95℃95℃95℃变性变性变性变性5 5 5 5分钟，迅速冰浴冷却分钟，迅速冰浴冷却分钟，迅速冰浴冷却分钟，迅速冰浴冷却150V150V150V150V电泳电泳电泳电泳30303030分钟，紫外灯下观察电泳结果分钟，紫外灯下观察电泳结果分钟，紫外灯下观察电泳结果分钟，紫外灯下观察电泳结果小鼠肝脏小鼠肝脏RNARNA的抽提纯化与鉴定优的抽提纯化与鉴定优秀秀分光光度法操作步骤分光光度法操作步骤|加加1μl RNA1μl RNA溶液于溶液于0.4ml DEPC-H0.4ml DEPC-H2 2O O，，充分混匀，读取充分混匀，读取260nm260nm与与280nm280nm的吸光的吸光度数值。

度数值小鼠肝脏小鼠肝脏RNARNA的抽提纯化与鉴定优的抽提纯化与鉴定优秀秀操作注意事项（一）操作注意事项（一）|因因为为RNARNA酶酶分分布布广广、、活活性性强强、、且且难难以以失失活活，， 使使RNARNA极易降解，操作时应特别注意：极易降解，操作时应特别注意：X高压消毒实验器皿，烤干高压消毒实验器皿，烤干X以以0.1% 0.1% DEPCDEPC过过夜夜处处理理所所有有试试剂剂配配置置用用水水，，并高压消毒并高压消毒X抽提抽提RNARNA时，应戴手套和口罩，少说话时，应戴手套和口罩，少说话小鼠肝脏小鼠肝脏RNARNA的抽提纯化与鉴定优的抽提纯化与鉴定优秀秀操作注意事项（二）操作注意事项（二）|DEPCDEPC是是强强烈烈的的烷烷化化剂剂，，通通过过与与RNARNA酶酶的的活活性性基基团团组组氨氨酸酸的的咪咪唑唑环环反反应应而而抑抑制制RNARNA酶酶活活性性，，是是消消除除外外源源性性RNARNA酶酶的的主主要要方方法法但但CEPCCEPC有有致致癌癌作作用用，，并并具具有有很很强强的的反反应应性性，，因因此此注注意：意：X使用时，不直接接触使用时，不直接接触XDEPCDEPC处处理理的的器器皿皿和和水水必必须须经经高高压压灭灭菌菌处处理理，，使使DEPCDEPC分解后使用。

分解后使用小鼠肝脏小鼠肝脏RNARNA的抽提纯化与鉴定优的抽提纯化与鉴定优秀秀操作注意事项（三）操作注意事项（三）|为为避避免免酶酶蛋蛋白白反反复复冻冻溶溶而而失失去去活活性性，，酶酶制制剂剂溶溶于于5050％％的的甘甘油油中中，，-20-20o oC C储储存存可可保保持持液液状状但但高高浓浓度度的的甘甘油油对对酶酶促促反反应应有有抑抑制制作作用用，，因因此此酶酶的的用用量量不不能能超超过过反反应应体体积积的的1/101/10在在进进行行各各种种酶酶促促反反应应时时，，应应首首先先加加水水，，再再加入其它成分，最后加酶加入其它成分，最后加酶小鼠肝脏小鼠肝脏RNARNA的抽提纯化与鉴定优的抽提纯化与鉴定优秀秀u)B4IbPiWp%w0D7KeRkYr*y2F9MgTn#u)B4IbPiWp%w0D6KdRkYr*y2F9MgTn#u)B4IbPiVp$w+D6KdRkYr*y2F9MgTn#u)B4HbOiVp$w+D6KdRkYr*y2F9MgTn#t)A4HbOiVp$w+D6KdRkYr*y2F9MfTm#t)A4HbOiVp$w+D6KdRkYr&y1F8MfTm#t)A4HbOiVp$w+D6KdQkXr&y1F8MfTm#t)A4HbOiVp$w+C6JdQkXr&y1F8MfTm#t)A4HbOhVo$v+C6JdQkXr&y1F8MfTm#t)A3HaOhVo$v+C6JdQkXr&y1F8MfTmZt(A3HaOhVo$v+C6JdQkXr&y1F8LfSmZt(A3HaOhVo$v+C6JdQkXq&x1E8LfSmZt(A3HaOhVo$v+C6JcQjXq&x1E8LfSmZt(A3HaOhVo$v-C5JcQjXq&x1E8LfSmZt(A3HaNhUo!v-C5JcQjXq&x1E8LfSmZt(z3GaNhUo!v-C5JcQjXq&x1E8LfSlZs(z3GaNhUo!v-C5JcQjXq&x1E7LeSlZs(z3GaNhUo!v-C5JcQjWq%x0E7LeSlZs(z3GaNhUo!v-C5IcPjWq%x0E7LeSlZs(z3GaNhUo!u-B5IcPjWq%x0E7LeSlZs(z3G9NgUn!u-B5IcPjWq%x0E7LeSlZs*z2G9NgUn!u-B5IcPjWq%x0E7LeRlYs*z2G9NgUn!u-B5IcPjWq%x0D7KeRlYs*z2G9NgUn!u-B5IcPiWp%w0D7KeRlYs*z2G9NgUn!u-B4IbPiWp%w0D7KeRlYs*z2G9NgQkXr&y1F8MfTm#t)A3HaOhVo$v+C6JdQkXr&y1F8MfSmZt(A3HaOhVo$v+C6JdQkXr&y1E8LfSmZt(A3HaOhVo$v+C6JdQkXq&x1E8LfSmZt(A3HaOhVo$v+C6JcQjXq&x1E8LfSmZt(A3HaOhVo!v-C5JcQjXq&x1E8LfSmZt(A3HaNhUo!v-C5JcQjXq&x1E8LfSmZt(z3GaNhUo!v-C5JcQjXq&x1E8LeSlZs(z3GaNhUo!v-C5JcQjXq&x0E7LeSlZs(z3GaNhUo!v-C5JcQjWq%x0E7LeSlZs(z3GaNhUo!v-C5IcPjWq%x0E7LeSlZs(z3GaNhUn!u-B5IcPjWq%x0E7LeSlZs(z3G9NgUn!u-B5IcPjWq%x0E7LeSlZs*z2G9NgUn!u-B5IcPjWq%x0E7KeRlYs*z2G9NgUn!u-B5IcPjWq%w0D7KeRlYs*z2G9NgUn!u-B5IcPiWp%w0D7KeRlYs*z2G9NgUn!u-B4IbPiWp%w0D7KeRlYs*z2G9NgTn#u)B4IbPiWp%w0D7KeRlYs*z2F9MgTn#u)B4IbPiWp%w0D7KeRlYr*y2F9MgTn#u)B4IbPiWp%w0D6KdRkYr*y2F9MgTn#u)B4IbPiWp$w+D6KdRkYr*y2F9MgTn#u)B4IbOiVp$w+D6KdRkYr*y2F9MgTn#u)A4HbOiVp$w+D6KdRkYr*y2F9MfTm#t)A4HbOiVp$w+D6KdRkYr*y1F8MfTm#t)A4HbOiVp$w+D6KdRkXr&y1F8MfTm#t)A4HbOiVp$w+C6GaNhUo!v-C5JcPjWq%x0E7LeSlZs(z3GaNhUo!v-B5IcPjWq%x0E7LeSlZs(z3GaNhUn!u-B5IcPjWq%x0E7LeSlZs(z3G9NgUn!u-B5IcPjWq%x0E7LeSlYs*z2G9NgUn!u-B5IcPjWq%x0E7KeRlYs*z2G9NgUn!u-B5IcPjWq%w0D7KeRlYs*z2G9NgUn!u-B5IbPiWp%w0D7KeRlYs*z2G9NgUn!u)B4IbPiWp%w0D7KeRlYs*z2G9NgTn#u)B4IbPiWp%w0D7KeRlYs*z2F9MgTn#u)B4IbPiWp%w0D7KeRkYr*y2F9MgTn#u)B4IbPiWp%w0D6KdRkYr*y2F9MgTn#u)B4IbPiWp$w+D6KdRkYr*y2F9MgTn#u)B4HbOiVp$w+D6KdRkYr*y2F9MgTn#t)A4HbOiVp$w+D6KdRkYr*y2F9MfTm#t)A4HbOiVp$w+D6KdRkYr*y1F8MfTm#t)A4HbOiVp$w+D6KdQkXr&y1F8MfTm#t)A4HbOiVp$w+C6JdQkXr&y1F8MfTm#t)A4HbOiVo$v+C6JdQkXr&y1F8MfTm#t)A3HaOhVo$v+C6JdQkXr&y1F8MfTmZt(A3HaOhVo$v+C6JdQkXr&y1F8LfSmZt(A3E7LeSlYs*z2G9NgUn!u-B5IcPjWq%x0E7KeRlYs*z2G9NgUn!u-B5IcPjWp%w0D7KeRlYs*z2G9NgUn!u-B5IbPiWp%w0D7KeRlYs*z2G9NgUn!u)B4IbPiWp%w0D7KeRlYs*z2G9MgTn#u)B4IbPiWp%w0D7KeRlYs*y2F9MgTn#u)B4IbPiWp%w0D7KeRkYr*y2F9MgTn#u)B4IbPiWp%w0D6KdRkYr*y2F9MgTn#u)B4IbPiVp$w+D6KdRkYr*y2F9MgTn#u)B4HbOiVp$w+D6KdRkYr*y2F9MgTn#t)A4HbOiVp$w+D6KdRkYr*y2F8MfTm#t)A4HbOiVp$w+D6KdRkYr&y1F8MfTm#t)A4HbOiVp$w+D6KdQkXr&y1F8MfTm#t)A4HbOiVp$v+C6JdQkXr&y1F8MfTm#t)A4HbOhVo$v+C6JdQkXr&y1F8MfTm#t)A3HaOhVo$v+C6JdQkXr&y1F8MfTmZt(A3HaOhVo$v+C6JdQkXr&y1E8LfSmZt(A3HaOhVo$v+C6JdQkXq&x1E8LfSmZt(A3HaOhVo$v+C6JcQjXq&x1E8LfSmZt(A3HaOhVo!v-C5JcQjXq&x1E8LfSmZt(A3HaNhUo!v-C5JcQjXq&x1B4IbPiWp%w0D7KeRlYs*z2G9MgTn#u)B4IbPiWp%w0D7KeRlYs*y2F9MgTn#u)B4IbPiWp%w0D7KdRkYr*y2F9MgTn#u)B4IbPiWp%w+D6KdRkYr*y2F9MgTn#u)B4IbPiVp$w+D6KdRkYr*y2F9MgTn#u)A4HbOiVp$w+D6KdRkYr*y2F9MgTm#t)A4HbOiVp$w+D6KdRkYr*y2F8MfTm#t)A4HbOiVp$w+D6KdRkYr&y1F8MfTm#t)A4HbOiVp$w+D6JdQkXr&y1F8MfTm#t)A4HbOiVp$v+C6JdQkXr&y1F8MfTm#t)A4HbOhVo$v+C6JdQkXr&y1F8MfTm#t(A3HaOhVo$v+C6JdQkXr&y-B5IcPjWq%x0E7LeSlZs*z2G9NgUn!u-B5IcPjWq%x0E7LeRlYs*z2G9NgUn!u-B5IcPjWq%x0D7KeRlYs*z2G9NgUn!u-B5IcPiWp%w0D7KeRlYs*z2G9NgUn!u-B4IbPiWp%w0D7KeRlYs*z2G9NgUn#u)B4IbPiWp%w0D7KeRlYs*z2F9MgTn#u)B4IbPiWp%w0D7KeRlYr*y2F9MgTn#u)B4IbPiWp%w0D7KdRkYr*y2F9MgTn#u)B4IbPiWp%w+D6KdRkYr*y2F9MgTn#u)B4IbOiVp$w+D6KdOhVo!v-C5JcQjXq&x1E8LfSmZt(A3HaNhUo!v-C5JcQjXq&x1E8LfSmZt(z3GaNhUo!v-C5JcQjXq&x1E8LeSlZs(z3GaNhUo!v-C5JcQjXq&x0E7LeSlZs(z3GaNhUo!v-C5JcQjWq%x0E7LeSlZs(z3GaNhUo!v-C5IcPjWq%x0E7LeSlZs(z3GaNhUn!u-B5IcPjWq%x0E7LeSlZs(z3G9NgUn!u-B5IcPjWq%x0E7LeSlZs*z2G9NgUn!u-B5IcPjWq%x0E7KeRlYs*z2G9NgUn!u-B5IcPjWq%w0D7KeRlYs*z2G9NgUn!u-B5IcPiWp%w0D7KeRlYs*z2G9NgUn!u-B4IbPiTm#t)A4HbOhVo$v+C6JdQkXr&y1F8MfTm#t(A3HaOhVo$v+C6JdQkXr&y1F8MfSmZt(A3HaOhVo$v+C6JdQkXr&y1E8LfSmZt(A3HaOhVo$v+C6JdQjXq&x1E8LfSmZt(A3HaOhVo$v+C5JcQjXq&x1E8LfSmZt(A3HaOhVo!v-C5JcQjXq&x1E8LfSmZt(A3HaNhUo!v-C5JcQjXq&x1E8LfSmZs(z3GaNhUo!v-C5JcQjXq&x1E8LeSlZs(z3GaNhUo!v-C5JcQjXq&x0E7LeSlZs(z3GaNhUo!v-C5JcPjWq%x0E7LeSlZs(z3GaNhUo!v-B5IcPjWq%x0E7LeSlZs(z3GaNhUn!u-B5IcPjWq%x0E7LeSlZs(z3G9NgUn!u-B5IcPjWq%x0E7LeSlYs*z2D6KdRkYr*y1F8MfTm#t)A4HbOiVp$w+D6KdRkXr&y1F8MfTm#t)A4HbOiVp$w+D6JdQkXr&y1F8MfTm#t)A4HbOiVo$v+C6JdQkXr&y1F8MfTm#t)A4HaOhVo$v+C6JdQkXr&y1F8MfTm#t(A3HaOhVo$v+C6JdQkXr&y1F8MfSmZt(A3HaOhVo$v+C6JdQkXr&x1E8LfSmZt(A3HaOhVo$v+C6JdQjXn!u-B5IcPjWq%w0D7KeRlYs*z2G9NgUn!u-B5IcPiWp%w0D7KeRlYs*z2G9NgUn!u)B4IbPiWp%w0D7KeRlYs*z2G9NgTn#u)B4IbPiWp%w0D7KeRlYs*z2F9MgTn#u)B4IbPiWp%w0D7KeRlYr*y2F9MgTn#u)B4IbPiWp%w0D6KdRkYr*y2F9MgTn#u)B4IbPiWp$w+D6KdRkYr*y2F9MgTn#u)B4IbOiVp$w+D6KdRkYr*y2F9MgTn#t)A4HbOiVp$w(A3GaNhUo!v-C5JcQjXq&x1E8LfSmZs(z3GaNhUo!v-C5JcQjXq&x1E8LeSlZs(z3GaNhUo!v-C5JcQjXq&x0E7LeSlZs(z3GaNhUo!v-C5JcPjWq%x0E7LeSlZs(z3GaNhUo!v-B5IcPjWq%x0E7LeSlZs(z3GaNhUn!u-B5IcPjWq%x0E7LeSlZs(z2G9NgUn!u-B5IcPjWq%x0E7LeSlYs*z2G9NgUn!u-B5IcPjWq%x0E7KeRlYs*z2G9NgUn!u-B5Ic小鼠肝脏小鼠肝脏RNARNA的抽提纯化与鉴定优的抽提纯化与鉴定优秀秀。