植物组织培养白牡丹.doc

白牡丹(Graptover iaTitubans)景天科石莲花属多肉植物是风 车草属 Graptopeta 丨 um 的胧月 Graptopeta I um paraguayens i s 与石 莲花属Echever i a的静夜Echeveria derenbergii杂交培育出来的，茎 叶多肉化，全株有白粉，茎健壮，互生叶排列成莲座形，叶片倒卵形， 先端急尖茎叶多肉化，叶色灰白至灰绿，叶片表面有淡淡的白粉， 叶尖在阳光下会出现轻微的粉红粉，茎健壮，互生叶排列成莲座形， 叶片倒卵形，先端急尖，白色的叶子如牡丹花绽开，子株坚韧而繁多 歧伞花序自叶腋伸出，花半开形，5枚花瓣浓黄色，花瓣上有红色细 点，开花期春季春天和秋天是生长期，可以全日照夏天轻微休眠 通风遮阳，炎热夏季每个月4到5次水，不浇透以维持植株的正常 生长就可以，夏季水太大容易腐烂冬天温度低于5度就要逐渐断水， 3度以下保持盆土干燥，尽量保持不低于零下3度，寒冷的冬季水分 大了会烂根白色的叶子如牡丹花绽开，子株坚韧而繁多生长速度 快，枝叶茂盛繁殖主要靠植株侧芽，叶插和砍头，砍头后从残存茎 根上长出的新芽来延续后代，且非常容易长侧芽，存活率比较高，叶 插可以获得大批的苗，是大棚繁殖的首选，春季是侧芽爆发的季节， 此时繁殖生长最快了，白牡丹可以四季繁殖的，小叶片丢土表或者插 土里就可以长出独立的植株来。

春至秋为生长时节，土干透了再浇水, 浇水过勤容易腐烂，夏季注意通风冬天进入休眠期，控制浇水量， 在室内过冬［大部分时间都呈白色［平常为白色，日照时间增加后 叶尖及叶边会变为粉红色几乎全年都可以生长，夏季同样要做好防 晒与通风工作，一定要多见阳光，缺少阳光后会变得非常难看与不健康，同时容易滋生病害每天日照六七个小时左右白牡丹可以防辐 射、趣味、美观、净化空气、吸甲醛，适宜办公室及与电脑有关工作 的人养殖，具有很强的观赏价值白牡丹多为叶插繁殖，利用植物组 织培养技术，可以通过芽、花、根实现立体快繁，提高繁殖率，减少 生产成本等，将对人类的生活带来极大的收益1材料与方法1.1材料实验材料为多肉植物白牡丹，购于合肥花卉市场，外植体选取为： 侧芽、花梗、根1.2培养条件(I )启动培养基：MS-6-BA 0. 5 mg/L (单位下同)+ KT Img/L; (2 ) 分化培养基：MS + 6 — BA 1+ KT2+NAA 0. 1mg/L ; (3 )继代与增殖 培养基：MS + 6-B A 0.5 + NAAO. 05 ; (4 )复壮与生根培养基：1/2 MS + NAAO. 1以上培养基均加入3%蔗糖和0.6%倍力凝(POlyg e I), pH5. 8。

培养温度为(2 5 士 2) C ,光照时间10h八J 一’，总光照 强度约为 60pmol/(m2，s)1.3方法1.3.1外植体的灭菌处理方法与外植体部位的选择选取温室内栽种的成年植株，分别取其春生花径上部分、侧芽和根， 大小差异不大分别约30枝，用肥皂水或洗洁精清洗干净，自来水冲 洗2~3遍，然后后用无菌水浸洗十分钟，超净工作台中用70%的酒精 浸泡30s，用0. 1%的氯化汞(PH调至中性后加入0. 05%Tween-20)浸泡灭菌，浸泡时将30枝不同的外植体分为6组，每组5枝，灭菌时 间分别为2，4, 6, 8, 10, 12分钟，取出接种于MS-6-BA 0. 5 mg/L + KT Img/L的初代培养基上，每瓶接一个，接30瓶，21天后统计外植体 的污染与死亡情况得出外植体较有效的灭菌时间1.3.2丛生芽，根的诱导以1/2MS为基本培养基，分别设计含有6-BA0.5、1.0、2. 0、4、Omg/L, 以及NAAO. 02、0.05、0.1、0. 2mg/L的16个组合的培养基，将上述 初代培养的试管苗接种到这16个培养基上，每瓶接一个，每组30瓶, 经常观察从生芽的诱导情况，约30天后统计结果，筛选出较好的培 养基。

1.3. 3生根培养待丛生芽长至约2cm高时，转接到附加不同浓度的6-BA和NAA的培 养基上每瓶接两株，每组15瓶，观察生根情况，约21天统计生根数目1.3.4试管苗的移栽待试管苗根长到1.0cm左右时移栽，采用赤玉土；稻壳炭=3; 1作为 基质，颗粒直径在3mm以下，经高压灭菌后装入苗砵将开口炼苗两 天后的出瓶苗取出，洗去培养基，一个月后统计成活率2.预期结果与分析2.1不同时间对外植体的灭菌效果根据设计好的方案，用0. 1%的氯化汞灭菌效果可能如下培养基浸泡时接种被污染号间i✓TV\fw活数目亡数目活率％12min2020024 min2020036 min201019548 min2085725510 min20710350612 min205150。