蛋白质指纹标记与抗肿瘤药物治疗疗效预测的应用研究1ppt课件.ppt

蛋白质指纹标志与抗肿瘤药物治疗疗效预测的运用研讨山西省肿瘤医院山西省肿瘤医院裴毅裴毅前言前言 每个医生都希望药到病除，但是药物的临床适应症与疗效是有差别的 为什么？ 由于恶性肿瘤化疗有耐药性 原发性耐药 获得性耐药〔继发性耐药〕 这种耐药性是与恶性肿瘤的多变异特性和异质体特性有关的，使得抗肿瘤药物顺应症与实践平均治疗效果有较大差别 由于耐药问题现阶段程度只能是治疗后才知道，不能提早预测所以假设在治疗前就知道某种抗肿瘤药物的耐药性—— 疗效预测，那么能有效地防止盲目用药，将有效地提高药物的抗肿瘤治疗效果前言前言　　　我的研讨生谢莉在选择其研讨方向时向我报告希望用SELDI技术预测吉非替尼治疗非小细胞肺癌的疗效　——这是一个有价值的提示前言前言目前公认的抗肿瘤药物耐药机制有：目前公认的抗肿瘤药物耐药机制有：①①膜蛋白介导的药物外排机制，包括膜蛋白介导的药物外排机制，包括P-糖蛋白糖蛋白 ②②酶介导的多药耐药酶介导的多药耐药 如谷胱甘肽如谷胱甘肽S—转移酶转移酶 、谷胱、谷胱甘肽过氧化物酶、拓扑异构酶甘肽过氧化物酶、拓扑异构酶③③凋亡调控基因介导凋亡调控基因介导 　可以看出耐药与蛋白质的产生和　可以看出耐药与蛋白质的产生和/或增多有关。

或增多有关　但是针对某一种化疗方案及抗肿瘤治疗药物是与　但是针对某一种化疗方案及抗肿瘤治疗药物是与哪一种蛋白质有关，目前无法知道哪一种蛋白质有关，目前无法知道根底研讨根底研讨SELDI〔〔Surface-enhanced laser desorption/ionization 〕技〕技术的全称是术的全称是[SELDI-TOF-MS]，即外表，即外表加强激光加强激光解析离子飞行时间质谱技术，其结果是解析离子飞行时间质谱技术，其结果是用用MS〔质谱计〔质谱计mass spectrometer〕在一焦平〕在一焦平面上，按面上，按被检物质的质荷比〔被检物质的质荷比〔M/Z〕大小，依次〕大小，依次记录其含记录其含量的大小〔丰度〕进展描画量的大小〔丰度〕进展描画 其最大特点是可以高效、快速地海量其最大特点是可以高效、快速地海量捕捉未捕捉未知蛋白质，以指纹进展结果描画知蛋白质，以指纹进展结果描画根底研讨根底研讨•　　　•　　　这是蛋白质指纹图——质谱图，每个指纹〔质谱峰〕代表一组蛋白质根底研讨根底研讨　　　多项研讨阐明多药耐药多与蛋白质有关，不同化疗方案和药物是何种蛋白质异常，目前不清楚。

SELDI技术有海量捕获未知蛋白质的特征，所以采用SELDI技术检测肿瘤患者化疗前的血液有能够发现能预测耐药的蛋白质指纹，用于指点临床用药科学假说科学假说科学假说图示科学假说图示肿瘤耐药与某种未知蛋白质有关且都存在于人体血清中SELDI可以大量捕获未知蛋白质借助于SELDI技术检测肿瘤患者血液有能够发现耐药蛋白质，并以指纹描画科学任务设计〔回想性资料〕科学任务设计〔回想性资料〕科学任务设计〔回想性资料〕 取化疗前或抗肿瘤治疗前患者血清 一切患者图谱分组 SELDI检测不同疗效图谱不同疗效图谱不同疗效图谱比较不同疗效图谱比较某种化疗方案和药物某种化疗方案和药物疗效评价疗效评价按疗效分组按疗效分组不同疗效特征指纹拟合不同疗效特征指纹拟合标明标明M/Z和丰度和丰度预备化疗预备化疗SELDI检测检测制定化疗方案制定化疗方案实施实施疗效验证疗效验证MATLAB拟合曲线拟合曲线第一阶段第一阶段第三阶第三阶段段第二阶段第二阶段如何按疗效分组如何按疗效分组 —分组不正确，结果是错误的　分组不正确，结果是错误的　　　目前药物抗肿瘤治疗效果分析有两　　目前药物抗肿瘤治疗效果分析有两个特点：个特点： 　　 1.疗效界定界限是明确的疗效界定界限是明确的 　　2.临床实践判别是模糊的临床实践判别是模糊的研讨任务瓶颈〔关键问题及技术〕研讨任务瓶颈〔关键问题及技术〕如何按疗效分组如何按疗效分组 —分组不正确，结果是错误的　分组不正确，结果是错误的　如如SD的判别是肿块减少和增大＜的判别是肿块减少和增大＜25%，而，而PR的判别是肿块减少＞的判别是肿块减少＞50%。

按上述规范临床按上述规范临床判别就比较模糊判别就比较模糊——肿块丈量的模糊性和测肿块丈量的模糊性和测量值界定的模糊性量值界定的模糊性 研讨任务瓶颈〔关键问题及技术〕研讨任务瓶颈〔关键问题及技术〕　　由于化疗效果判别是模糊的计数分析，即不确切的计量分析而按疗效分组在交界值分配方向具有明确的模糊性——应先建立数学模型〔MATLAB拟合曲线〕，看二者之间有无函数关系，来决议下一步的研讨步骤研讨任务瓶颈〔关键问题及技术〕研讨任务瓶颈〔关键问题及技术〕MATLAB 拟合曲线的运用拟合曲线的运用 MATLAB是矩阵实验室〔是矩阵实验室〔Matrix Laboratory〕〕的简称，其曲线拟合技术是指利用图形用户的简称，其曲线拟合技术是指利用图形用户接口接口或利用书写或利用书写M文件的方法，设法找出某条光文件的方法，设法找出某条光滑的滑的曲线，它能最正确地拟合数据曲线，它能最正确地拟合数据,但不用经过每但不用经过每个点，个点，实现两个变量的曲线拟合，其思想是使数据实现两个变量的曲线拟合，其思想是使数据点的点的误差平方和最小误差平方和最小 研讨任务瓶颈〔关键问题及技术〕研讨任务瓶颈〔关键问题及技术〕MATLAB 拟合曲线的运用拟合曲线的运用以疗效分组，按丰度大小排序以疗效分组，按丰度大小排序——X轴轴丰度的量化值丰度的量化值——Y轴〔察看疗效变化轴〔察看疗效变化进程中与丰进程中与丰度的函数关系〕度的函数关系〕研讨任务瓶颈〔关键问题及技术〕研讨任务瓶颈〔关键问题及技术〕MATLAB 拟合曲线的分析拟合曲线的分析假设耐药与蛋白含量有关，上升曲线代假设耐药与蛋白含量有关，上升曲线代表耐表耐药蛋白，而下降曲线代表抗耐药蛋白。

药蛋白，而下降曲线代表抗耐药蛋白研讨任务瓶颈〔关键问题及技术〕研讨任务瓶颈〔关键问题及技术〕临床运用〔一〕吉非替尼〔一〕吉非替尼〔一〕吉非替尼〔一〕吉非替尼吉非替尼治疗非小细胞肺癌能否耐药的标识指纹的拟合曲线图吉非替尼治疗非小细胞肺癌能否耐药的标识指纹的拟合曲线图 注：注：(a)为为M/Z:8693 (b)为为M/Z:6887 (c)为为M/Z:13000-14000(a)(b)(c)结论：结论： M/Z：： 6887、、8693、、13000-14000均下调根本均下调根本不构成峰簇为吉非替尼治疗非小细胞肺癌有效的不构成峰簇为吉非替尼治疗非小细胞肺癌有效的指纹标识指纹标识 M/Z：： 6887、、8693、、13000-14000均上调构成均上调构成较显著峰簇为吉非替尼治疗非小细胞肺癌无效的较显著峰簇为吉非替尼治疗非小细胞肺癌无效的指纹标识指纹标识 〔一〕吉非替尼〔一〕吉非替尼〔一〕吉非替尼〔一〕吉非替尼8400 8900 13000 140006887±30H+8693±50H+CR+PRSDPD吉非替尼治疗非小细胞肺癌耐药指纹图吉非替尼治疗非小细胞肺癌耐药指纹图〔一〕吉非替尼〔一〕吉非替尼〔一〕吉非替尼〔一〕吉非替尼 6887 8693 13000-14000CR+PRSDPD吉非替尼治疗耐药指纹放大图吉非替尼治疗耐药指纹放大图〔一〕吉非替尼〔一〕吉非替尼〔一〕吉非替尼〔一〕吉非替尼 6887 8693 13000-14000替吉奥治疗消化道肿瘤能否耐药的标识指纹的拟合曲线图替吉奥治疗消化道肿瘤能否耐药的标识指纹的拟合曲线图 注：注：(a)为为M/Z:2868 (b)为为M/Z:1204 (c)为为M/Z:4176(a)(b)(c)〔二〕〔二〕〔二〕〔二〕FOLFOX-4FOLFOX-4结论：结论： M/Z：： 2868下调，下调， M/Z：： 1204、、4176上调为上调为FOLFOX-4治疗胃肠道肿瘤有效的治疗胃肠道肿瘤有效的指纹标识。

指纹标识 M/Z：： 2868上调，上调， M/Z：： 1204、、4176下调为下调为FOLFOX-4治疗胃肠道肿瘤无效的治疗胃肠道肿瘤无效的指纹标识指纹标识 〔二〕〔二〕〔二〕〔二〕FOLFOX-4FOLFOX-4FOLFOX-4治疗大肠癌耐药指纹图治疗大肠癌耐药指纹图 1204 2868 4176稳定定组无效无效组 〔二〕〔二〕〔二〕〔二〕FOLFOX-4FOLFOX-4 1204 2868 4176FOLFOX-4耐药指纹图放大图稳定定组无效无效组〔二〕〔二〕〔二〕〔二〕FOLFOX-4FOLFOX-4 2868 1204 4176注：注：(a)为为M/Z:9175 (b)为为M/Z:7900 (c)为为M/Z:8860替吉奥治疗消化道肿瘤能否耐药的标识指纹的拟合曲线图替吉奥治疗消化道肿瘤能否耐药的标识指纹的拟合曲线图 (a)(b)(c)〔三〕替吉奥〔三〕替吉奥〔三〕替吉奥〔三〕替吉奥结论：结论： M/Z：：7900上调，上调，M/Z：： 8860、、9175下下调为替吉奥治疗胃肠道肿瘤有效的指纹标调为替吉奥治疗胃肠道肿瘤有效的指纹标识。

识 M/Z：：7900下调，下调，M/Z：： 8860、、9175上上调为替吉奥治疗胃肠道肿瘤无效的指纹标调为替吉奥治疗胃肠道肿瘤无效的指纹标识 〔三〕替吉奥〔三〕替吉奥稳定定组无效无效组 7900 8860 9175替吉奥耐药指纹图替吉奥耐药指纹图〔三〕替吉奥〔三〕替吉奥〔三〕替吉奥〔三〕替吉奥稳定定组无效无效组 8860 9175 7900替吉奥耐药指纹图放大图〔三〕替吉奥〔三〕替吉奥〔三〕替吉奥〔三〕替吉奥 上述的结果证明：抗肿瘤药物及化疗方案治疗恶性肿瘤的疗效借助于SELDI技术是可以预测的，这将有效地减少盲目用药，真正实现个体化化疗 所以蛋白质指纹技术可以作为选择抗肿瘤药物和化疗方案顺应症的标识——一种新类型肿瘤标志物〔抗肿瘤治疗疗效预测〕 我们置信蛋白质指纹作为抗肿瘤治疗疗效预测的新标志，将会广泛运用于肿瘤内科〔药物〕治疗的各个领域，将会被宽广医学同仁认可和运用！。