基因工程的原理和技术上课.pptx

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,#,怎样能在大肠杆菌中生产出人的胰岛素呢？,基因工程的基本原理,：,让人们感兴趣的基因（,目的基因,）在宿主细胞中,稳定和高效表达,第二节,基因工程的原理和技术,1,、获取目的基因2,、形成重组,DNA,分子3,、将重组,DNA,导入受体细胞4,、筛选含有目的基因的受体细胞5,、目的基因的表达爱情五步曲：,1,、找准目标,2,、约会牵手,3,、进入殿堂,4,、神父作证,5,、爱情结晶,基,因工程的一般操,作步骤,基因工程基本操作步骤的演示,：,1.,获取目的基因,化学方法合成,从基因文库获得目的基因,用,PCR,技术,扩增目的基因,基因序列,已知,基因序列,未知,2.,形成重组,DNA,分子,用一定的,_,切割质粒，使其出现一个切口，露出,_,用,_,切断目的基因，使其产生,_,将切下的目的基因片段插入质粒的,_,处，,再加入适量,_,，形成了一个重组,DNA,分子限制酶,粘性,末端,同一种限制酶,切口,DNA,连接酶,相同,的粘性,末端,质粒,含目的基因的,DNA,分子,同一种限,制酶处,理（一般）,一个切口,两个黏性末端,两个切口,获得目的基因,DNA,连接酶,重组,DNA,分子（重组质粒）,过程,:,3.,将重组,DNA,导入受体细胞,将目的基因导入微生物细胞,CaCl,2,处理受体细,胞（大肠杆菌），增,大细胞壁的通透性,。

将目的,基,基因导,入,入动物,细,细胞,显微注,射,射法,（将基,因,因表达,载,载体提,纯,纯，用,显,显微仪,注,注射到,受,受精卵,中,中）,农杆菌,转,转化法,（表达,载,载体导,入,入农杆,菌,菌，再,让,让农杆,菌,菌感染,植,植物细,胞,胞）,将目的,基,基因导,入,入植物,细,细胞,农杆菌,转,转化法,基因枪,法,法,花粉管,通,通道法,将目的,基,基因导,入,入植物,细,细胞,四环素,抗性基因,氨苄青霉,素抗性基因,4.,筛选含,有,有目的,基,基因的,受,受体细,胞,胞,如何筛,选,选含有,胰,胰岛素原基因的大,肠,肠杆菌,呢,呢？,A,B,C,D,把每个,大,大肠杆,菌,菌分别,放,放在有,氨苄青,霉,霉素的,培,培养基,中,中生长,，,，看能,否,否长出,菌,菌落，再作出判断,5.,目的基,因,因的表,达,达,无表达产物,无表达产物,有表达产物,无表达产物,细菌的,检,检测，,将,将每个,受,受体细,胞,胞单独,培,培养形,成,成菌落,，,，检测,菌,菌落中,是,是否有,目,目的基,因,因的表,达,达产物,淘汰,无,无表达,产,产物的,菌,菌落，,保,保留有,表,表达产,物,物的进,一,一步培,养,养、研,究,究。

1,）以下,说,说法正,确,确的是,（,（,）,）,A,、所有,的,的限制,酶,酶只能,识,识别一,种,种特定,的,的核苷,酸,酸序列,B,、质粒,是,是基因,工,工程中,唯,唯一的,运,运载体,C,、运载,体,体必须,具,具备的,条,条件之,一,一是：,具,具有多,个,个限制,酶,酶切点,，,，以便,与,与外源,基,基因连,接,接,D,、基因,控,控制的,性,性状都,能,能在后,代,代表现,出,出来,C,练习,2,）有关基,因,因工程,的,的叙述,中,中，错,误,误的是,（,（,）,）,A,、,DNA,连接酶,将,将黏性,末,末端的,碱,碱基对,连,连接起,来,来,B,、限,制,制性内,切,切酶用,于,于目的,基,基因的,获,获得,C,、目的,基,基因须,由,由运载,体,体导入,受,受体细,胞,胞,D,、人,工,工合成,目,目的基,因,因不用,限,限制性,内,内切酶,A,练习,3,）有关基,因,因工程,的,的叙述,正,正确的,是,是,（,（,）,）,A,、限制,酶,酶只在,获,获得目,的,的基因,时,时才用,B,、重组,质,质粒的,形,形成在,细,细胞内,完,完成,C,、质粒,都,都可作,为,为运载,体,体,D,、蛋白,质,质的结,构,构可为,合,合成目,的,的基因,提,提供资,料,料,D,练习,4,）基因工,程,程是在,DNA,分子水,平,平上进,行,行设计,施,施工的,。

在基,因,因操作,的,的基本,步,步骤中,，,，不进,行,行碱基,互,互补配,对,对的步,骤,骤是,（,（,）,）,A,、人工,合,合成目,的,的基因,B,、目的,基,基因与,运,运载体,结,结合,C,、将目,的,的基因,导,导入受,体,体细胞,D,、目的,基,基因的,检,检测和,表,表达,C,练习,人工合,成,成基因,的,的方法,反转录,法,法,根据已,知,知的氨,基,基酸序,列,列合成,DNA,甲硫氨,酸,酸,苯丙氨,酸,酸,色氨酸,蛋白质,：,：,信使,RNA,AUGUUUUGG,或,AUGUUCUGG,基因或,DNA,TACAAAACC,ATGTTTTGG,TACAAAACC,ATGTTTTGG,或,利用,PCR,技术扩,增,增目的,基,基因,DNA,合成仪,DNA,合,合成仪,能自动,进,进行化,学,学合成,的,的仪器,，,能按设,计,计自动,连,连接,脱氧核,苷,苷酸,的设备,人工合,成,成基因,的,的方法,反转录,法,法,根据已,知,知的氨,基,基酸序,列,列合成,DNA,甲硫氨,酸,酸,苯丙氨,酸,酸,色氨酸,蛋白质,：,：,信使,RNA,AUGUUUUGG,或,AUGUUCUGG,基因或,DNA,TACAAAACC,ATGTTTTGG,TACAAAACC,ATGTTTTGG,或,基因文,库,库：,将含有某,种,种生物,不,不同基,因,因的许,多,多,DNA,片断，导入,受,受体菌的群,体,体中储存，,各,各个受体菌,分,分别含有这,种,种生物的不,同,同基因，称,为,为基因文库。

基因文库的,构,构建：,关于基因工,程,程的图片：,我国生产的部分基因,工程疫苗和药物,转生长激素,鲤,鲤鱼,转基因超级,小,小鼠,我国生产的,部,部分基因工,程,程疫苗和药,物,物,对照,抗虫,转基因抗虫棉花和普通棉花,果实耐贮藏,，,，在,25,温度下，可,贮,贮藏,40,50,天，较对照,延,延长贮藏期,20,30,天转基因耐贮,藏,藏番茄和普,通,通番茄,转基因抗除,草,草剂玉米,施用除草剂,，,，杂草被杀,死,死，转基因,抗,抗除草剂的,玉,玉米不受影,响,响（右侧为,未,未施用除草,剂,剂的对照）,9,、,静,静,夜,夜,四,四,无,无,邻,邻,，,，,荒,荒,居,居,旧,旧,业,业,贫,贫,12,月,月-2212,月,月-22,Wednesday,December28,2022,10,、雨中,黄,黄叶树,，,，灯下,白,白头人,20:43:2920:43:2920:43,12/28/2022 8:43:29PM,11,、以,我,我独,沈,沈久,，,，愧,君,君相,见,见频,12,月,月-2220:43:2920:43,Dec-2228-Dec-22,12,、故人江,海,海别，几,度,度隔山川,。

20:43:2920:43:2920:43,Wednesday,December28,2022,13,、乍见翻疑,梦,梦，相悲各,问,问年12月-2212月-2220:43:2920:43:29,December 28,2022,14,、,他,他,乡,乡,生,生,白,白,发,发,，,，,旧,旧,国,国,见,见,青,青,山,山,28,十,十,二,二,月,月20228:43:29,下,下,午,午20:43:2912,月,月-22,15,、比,不,不了,得,得就,不,不比,，,，得,不,不到,的,的就,不,不要,十二,月,月228:43,下,下,午,午12,月,月-2220:43,December28,2022,16,、行动出,成,成果，工,作,作出财富,2022/12/28 20:43:2920:43:29,28 December2022,17,、做前,，,，能够,环,环视四,周,周；做,时,时，你,只,只能或,者,者最好,沿,沿着以,脚,脚为起,点,点的射,线,线向前,8:43:29 下,午,午8:43 下,午,午20:43:2912月-22,9,、没有失败,，,，只有暂时,停,停止成功！,。

12月-2212月-22,Wednesday,December28,2022,10,、很多事情,努,努力了未必,有,有结果，但,是,是不努力却,什,什么改变也,没,没有20:43:2920:43:2920:43,12/28/20228:43:29 PM,11,、,成,成,功,功,就,就,是,是,日,日,复,复,一,一,日,日,那,那,一,一,点,点,点,点,小,小,小,小,努,努,力,力,的,的,积,积,累,累,12,月,月-2220:43:2920:43,Dec-2228-Dec-22,12,、世间,成,成事，,不,不求其,绝,绝对圆,满,满，留,一,一份不,足,足，可,得,得无限,完,完美20:43:2920:43:2920:43,Wednesday,December 28,2022,13,、不,知,知香,积,积寺,，,，数,里,里入,云,云峰,12,月,月-2212,月,月-2220:43:2920:43:29,December28,2022,14,、,意,意,志,志,坚,坚,强,强,的,的,人,人,能,能,把,把,世,世,界,界,放,放,在,在,手,手,中,中,像,像,泥,泥,块,块,一,一,样,样,任,任,意,意,揉,揉,捏,捏,。

28,十,十,二,二,月,月20228:43:29,下,下,午,午20:43:2912,月,月-22,15,、楚塞三湘,接,接，荆门九,派,派通十二月 228:43,下,下午12月-2220:43,December 28,2022,16,、少,年,年十,五,五二,十,十时,，,，步,行,行夺,得,得胡,马,马骑,2022/12/2820:43:2920:43:29,28December2022,17,、,空,空,山,山,新,新,雨,雨,后,后,，,，,天,天,气,气,晚,晚,来,来,秋,秋,8:43:29,下,下,午,午8:43,下,下,午,午20:43:2912,月,月-22,9,、杨柳,散,散和风,，,，青山,澹,澹吾虑,12月-2212月-22,Wednesday,December 28,2022,10,、阅读一,切,切好书如,同,同和过去,最,最杰出的,人,人谈话20:43:2920:43:2920:43,12/28/2022 8:43:29 PM,11,、越是没,有,有本领的,就,就越加自,命,命不凡12月-2220:43:2920:43,Dec-2228-Dec-22,12,、越是无能,的,的人，越喜,欢,欢挑剔别人,的,的错儿。

20:43:2920:43:2920:43,Wednesday,December28,2022,13,、,知,知,人,人,者,者,智,智,，,，,自,自,知,知,者,者,明,明,胜,胜,人,人,者,者,有,有,力,力,，,，,自,自,胜,胜,者,者,强,强,12,月,月-2212,月,月-2220:43:2920:43:29,December28,2022,14,、意志,坚,坚强的,人,人能把,世,世界放,在,在手中,像,像泥块,一,一样任,意,意揉捏,28,十,十二月20228:43:29 下,午,午20:43:2912月-22,15,、最具挑,战,战性的挑,战,战莫过于,提,提升自我,十二月228:43,下,下午12月-2220:43,December28,2022,16,、,业,业,余,余,生,生,活,活,要,要,有,有,意,意,义,义,，,，,不,不,要,要,越,越,轨,轨,2022/12/。