curveexpert 1.3 ELISA拟合说明.doc

精品文档】如有侵权，请联系网站删除，仅供学习与交流curveexpert 1.3 ELISA拟合说明.....精品文档......ELISA的标准曲线一般使用专门的曲线拟合工具，如：Curve Exert1.3下面以Curve Exert1.3为例说明怎么样制作：1 启动“Curve Expert1.3”2 X轴输入标准品的OD值，Y轴输入所对应的浓度值，如图：3．单击[运行] 按钮（上图红圈圈），出现如下对话框 4．单击[ok]按钮，出现如下两个对话框，关闭下面一个对话框 关闭下面一个对话框 5. 在对话框的右上角出现一些曲线的名称，从“1”开始依次点击曲线名称，在右下角会出现相应拟合的曲线， 根据拟合的曲线选取ELISA拟合度最佳的曲线双击，出现如下对话框：注意：选择系数（即“r”值）最好的曲线方程来进行运算在下面的对话框右上角有“r”值 ，当“r”值越接近1拟合度越好 7．按[Ctrl]键+[L]键，（或者在上图的界面上点击鼠标右键，出现analyze选项），出现如下对话框： 8．输入标准的OD值，单击[Calculate]按忸，即可得到待测蛋白的实际含量标本稀释了N倍，运算出的数值应再乘以N）。

9. 如想得到ELISA拟合曲线的方程，可在步骤6的对话框空白处右击，选择”Information” 10. 得到如下对话框：点击“Copy”在你需要的位置粘贴即可得到如下数据：Rational Function: y=(a+bx)/(1+cx+dx^2)当抗原或抗体浓度过高时，对应的ELISA读数不会再显著升高，这时会达到一个平台期，同样在低浓度时也有一个平台期只有在适当的浓度时才会出现类似直线的曲线，所以一般数据都要进行多参数拟和，才能得到能更准确反映实验结果的曲线，常用的有sigmoid、logistic曲线等。