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Abcam抗体产品保存指南.doc

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  • 卖家[上传人]:206****923
  • 文档编号:37520703
  • 上传时间:2018-04-17
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    • AbcamAbcam 产品保存指南产品保存指南抗体保存得当与否,直接决定了抗体的活性和使用效果!如果抗体保存得当, 大部分抗体活性都可以维持数月甚至数年本指南以 Abcam 抗体保存方法为主,同样也可以应用到其他绝大部分公司的抗 体产品!请谨记!无论何时请按照说明书推荐的保存条件正确保存抗体!请按照说明书推荐的保存条件正确保存抗体!1. 收到抗体后请务必在请务必在 12000rpm12000rpm 离心离心 1-51-5 分钟分钟后再打开管盖进行分装和保存 (如果抗体体积小于 50ul,请延长离心时间至 5 分钟,以保证全部抗体均离心 下来)!Abcam 的抗体使用非常特殊的储存管,只有在 12000rpm 离心 1-5 分钟才能将附 着在管壁或盖内的抗体全部离心下来即使是在 10000rpm 离心也会导致离心不 完全,导致出现抗体的量不足的现象!2. 对于 Abcam 大部分抗体,比较合适的保存方式是分装后保存在分装后保存在 -20℃-20℃ oror - - 80℃80℃ o对绝大多数抗体来说,保存在-20℃是完全足够了没有任何证据显示保存 在-80℃会有更多的好处!o分装可以最大程度的降低反复冻融对抗体活性的损害,同时也降低了由于 多次从同一管中吸取抗体造成的污染可能性。

      o分装的量以一次实验用完为好,最少不能少于 10ul 每份因为分装体积越 小,抗体的浓度越可能会受到蒸发以及管壁吸附的影响o复融后的分装抗体如果一次用不完,将剩余母液保存在 4℃,避免再冻起 来!o抗体工作液应该当天配制当天用完,在 4℃ 尽量不要超过 1 天o绝对避免将抗体保存在自动除霜冰箱中尽量将抗体保存在冰箱里层,而 不是门上3. 大部分抗体收到后 4℃短暂保存 1-2 周对抗体活性是没有影响的如果抗体很快(1-2 周)会使用,推荐在 4℃保存,这是为了避免反复冻融对抗 体活性的损害如果要长期保存则最好是在-20℃ or -80℃最关键的一点是 要根据说明书推荐的方式来正确的保存抗体!但是,腹水形式的产品请在收到后立即冻起来!因为该类产品含有大量的蛋白 酶,长期在 4oC 保存会导致抗体的降解!4. 大部分抗体的运输条件:一般的运输过程需要 1-2 周的时间,所以是在 4℃ 的条件下来完成的4℃运输最主要的目的是为了避免反复冻融对抗体活性的损害(如果使用干 冰运输,那么收到时抗体是冻起来的,为了分装就需要解冻这就多了一次冻 融的过程)所以运输过程中绝对避免干冰运输!特殊抗体的保存条件:特殊抗体的保存条件: 酶联抗体酶联抗体:永远保存在 4℃,避免冻起来。

      否则会导致酶活性的下降或者丧失偶联抗体偶联抗体:所有偶联抗体都需要在棕色管中或使用锡箔纸避光 4℃保存尤其是荧 光抗体,对光极为敏感,因此在所有的实验阶段也是要避光操作的!IgG3 的同型对照的同型对照:永远保存在 4℃,避免冻起来因为如果出现冻融过程,该抗 体非常容易形成多聚体无论是保存还是运输,绝对避免反复冻融!无论是保存还是运输,绝对避免反复冻融! 反复冻融会导致抗体变性,导致多聚体形成,从而降低抗体的结合能力!抗体保存其它相关信息:抗体保存其它相关信息: 关于加入甘油保存:关于加入甘油保存: 有些人会加 50%的甘油到抗体中来避免反复冻融,甘油在-20℃ 会降低冰点 这对很多抗体可能是可行的但是 abcam 仅对非常小的一部分抗体检测过其在 这种条件下的稳定性;而 Abcam 只对按照推荐条件保存的抗体提 供质量保证! 加入甘油的溶液不建议在-80℃保存,因为这已经超过了甘油的冰点如果您要 加入甘油来保存抗体的话,请谨慎注意无菌操作,避免污染!关于蛋白保护剂:关于蛋白保护剂: 蛋白在高浓度时更不容易降解(1 mg/ml 或者更高),这就是为什么在抗体中 加入 BSA 之类作为稳定剂的原因了;另一方面,加入的蛋白也可以减少抗体由 于管壁吸附所造成的损失。

      但是如果抗体要用来 标记的话,则不能加入蛋白稳 定剂,因为这些稳定剂会和抗体一起竞争结合标记物关于叠氮化钠(关于叠氮化钠(sodiumsodium azideazide)的使用:)的使用: 为了防止微生物污染,叠氮化钠经常被加入到抗体中(终浓度 0.02% (w/v)) Abcam 的很多抗体已经含有了 0.02%-0.05%的叠氮化钠,在说明书的“Storage buffer”中有标明的在下述情况中不能使用叠氮化钠:在下述情况中不能使用叠氮化钠:如果抗体用于染色或处理活细胞,用于体内研究:叠氮化钠在抵抗微生物的同时,对其它大部分有机物也是有毒的,因为它阻断 了线粒体的 cytochrome electron transport system.要偶联带有氨基基团的抗体:叠氮化钠会干扰任何含有氨基基团的偶联,因此在进行偶联之前,应将叠氮化 钠去除偶联后的抗体可以加入叠氮化钠保存,但是浓度只能是 0.01%对于 需要偶联的抗体,thimerosal (merthiolate)可以替代叠氮化钠作为保护剂!注:叠氮化钠的去除方式: 可以通过凝胶电泳或过滤的方式去除!IgG 的分子量是 150kDa (IgM 是~ 600kDa); 叠氮化钠的分子量只有 65Da。

      使用 cut off 14kDa 的滤膜即可将叠 氮化钠从抗体中去除。

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