草履虫的培养方法.doc

草履虫的培养方法一、草履虫(Paramecium草履虫属于原生动物门的纤毛纲，是一类体型较大的原生动物，在自 然界广泛分布，又容易采集和培养，是观察研究原生动物的好材料草履 虫种类很多，其中体型最大和最常见的是大草履虫(Paramecium caudatum)L采集草履虫通常生活在水流速度不大的水沟、池塘和稻田中，大多积聚在 有机质丰富，光线充足的水面附近当水温在14〜22C时，繁殖最旺盛， 数目最多、草履虫的这些习性，是确定采集地点和方法的重要依据1) 到水沟、池塘采集草履虫水沟和池塘是草履虫的主要生活场所 在气候温暖的季节，到水质没有污染的水沟、池塘岸边，选择枯枝落叶多 的地方，用广口瓶沿水面采集池水，这样的池水往往含有许多草履虫为 了更有把握，可在不同地点多采几瓶采集后，广口瓶内要放置少许水草， 瓶口不要加盖，以免草履虫因缺氧而窒息死亡回到实验室后，要把盛有池水的广口瓶放在温暖、明亮、阳光又不直 射的地方，使瓶中的革履虫迅速繁殖三五天以后，对着光线用肉眼观察， 如果看到水中有许多小白点在不停地游动，很可能就是草履虫这时，用 吸管吸取一滴带有小白点的水，放在载玻片上，用显微镜进行观察，在视 野中会看到各种微小生物。

如果发现有象倒置的草鞋一样的小动物，不停 地螺旋运动，那就是草履虫，采集就成功了2) 到稻田采集草履虫在稻田灌水期间，寻找田中的旧稻茬，用广口 瓶在稻茬附近取水，随后放进几根旧稻草这样的水中往往会有许多草履虫返回实验室后，放在温暖明亮处，三五天后，用显微镜检查是否有草 履虫存在3) 从新鲜稻草上采集草履虫当环境变得干旱或寒冷时，草履虫能向 身体表面分泌一层蛋白质的薄膜，虫体不吃不动，进入休眠状态这种状 态叫作包囊在稻田水抽干时，草履虫便形成许多包囊，附着在稻草近根 部的儿节茎上因此，可选取新鲜稻草近根部的儿节，剪成3~4厘米长 的小段，放入广口瓶中，注入清水，放在明亮温暖处，一周以后，用显微 镜检查是否有草履虫2. 配制培养液草履虫的食物主要是细菌为了培养繁殖草履虫，必须配制含有大量 细菌的培养液培养液的配制方法通常有以下两种⑴稻草培养液取新鲜洁净的稻草，去掉上端和基部的几节，将中部 稻茎剪成3〜4厘米长的小段，按1克稻草加清水100毫升的比例，将稻 草和清水放入大烧杯中，加热煮沸10-15分钟，当液体呈现黄褐色时停 止加热这样的液体，由于加热煮沸，只留下了细菌芽抱，其它生物已均 被杀死，为培养草履虫创造了良好条件。

为了防止空气中其它原生动物的 包囊落入和蚊虫产卵，烧杯口要用双层纱布包严然后放置在温暖明亮处 进行细菌繁殖经过3〜4天，稻草中的枯草杆菌的芽泡开始萌发，并依靠稻草液中 的丰富养料迅速繁殖，液体逐渐混浊，等到大量细菌在液体表面形成了一 层灰白色薄膜时，稻草培养液便制成了由于草履虫喜欢微碱性环境，如 果培养液呈酸性，可用1%碳酸氢钠调至微碱性，但pH值不能大于7.5⑵麦粒培养液将5克麦粒(大麦、小麦均可)放入1000毫升清水 中，加热煮沸，煮到麦粒胀大裂开为止然后在温暖明亮处放置3〜4天， 便制成了麦粒培养液，此时培养液中已繁殖有大量的细菌3. 接种接种是指将采集来的草履虫转移到培养液的过程接种草履虫时必须 提纯，否则会混入其它小动物这不但会影响草履虫的纯度，而且一旦混 入草履虫的天敌水轮虫(Rotaria),将会使培养液中草履虫的数量急剧下降接种时，先将含有草履虫的水液吸到表面皿中，再将表面皿置于低倍 显微镜或解剖镜下检查，发现有草履虫后，用口径不大于0.2毫米的微吸 管，将表面皿中草履虫逐个吸出，接种到培养液的广口瓶中进行繁殖如 果要培养纯系的草履虫，可按上述方法，在显微镜或解剖镜下，从表面皿 中吸出一个草履虫，放入盛凹玻片中，上面再覆盖一片凹玻片，用以防止 培养液干燥。

待草履虫经过横分裂达到20〜30个个体时，移到培养液的 广口瓶中进行繁殖4. 培养(1) 将接种有草履虫的培养液的广口瓶，放在温暖明亮处进行培养，培 养液的容器口要用纱布包严大约1周后，就会有大量草履虫出现2) 如果是长期培养，就要定期更新培养液这是因为随着虫体大量繁 殖，培养液中营养逐渐减少，而虫体排出代谢物却又不断增加，这就会引 起草履虫数量减少甚至全部死亡因此在培养过程中，每隔3天左右须更 新一次培养液更新时，用吸管从广口瓶底部吸去培养液及沉淀物，每次要吸去一半培养液，加入等量新鲜培养液这样可使草履虫长期得到保存草履虫的采集和培养1、采集地点：在比较肥沃、水不太流动的污水沟、河沟或池塘里，沟水较浅， 淤泥黑色，泥表有一乳白色的薄膜方法：用器皿轻轻刮取白连同少许的水放于瓶中；或用器皿从表层取一些水，向光观察，如果发现其中有针尖大小的小白点在游动，这可 能就是草履虫和其他原生动物，可以采回来2、 分离牛肉汁分离法取载玻片平放在台上，先用清洁的吸管吸取牛肉汁, 滴一滴在玻片左端；再用另一根小吸管吸取草履虫液，滴在玻片右端用 解剖针从牛肉汁一端引一条沟，把这两个液滴连接起来草履虫对牛肉汁 反应较敏感，它们很快经过小沟被引到牛肉汁一端来。

待草履虫聚集后用 吸水纸切断水线，用吸管吸取牛肉汁中的草履虫，接种到培养液内，就可 培养出大量草履虫供实验用3、 培养牛奶液培养 将牛奶液搅拌均匀后，移入草履虫，温度保持在摄氏22 度，二三FI后，草履虫迅速繁殖，并且出现处于分裂生殖状态的草履虫 5 口内虫体数量达到高峰，以后每隔2星期在原有的培养液内再加入牛奶 液，可长期维持草履虫的生活1草履虫种源的采集在无化学污染的 湖泊、池塘、小河和城市公园内水域，用500ml烧杯取一些水，在水中取 —些落叶放入烧杯，投入15粒小麦20~28C静置10d后镜检，可发现 许多草履虫另-•种方法是取水体内水生植物在杯内洗，反复数次，用防 蚊网过滤，滤下液静置5~8d,投入15粒小麦，水面附近有白色移动的水 纹，取之可作为草履虫培养的种源2草履虫纯培养 常规接种方法，用微吸管在解剖镜下取一个草履虫 移到厚凹玻片(lml)内，反复用备好的培养液洗5次，再移入备有20ml 培养液的试管内培养1〜2周后扩大培养3草履虫短期高密度快速培养方法3.1培养液配方小麦粒培养液：将10-12粒小麦放入500ml湖水，煮沸5min,加盖 冷却24h后接种蛋白腺培养液：lg蛋白腺融入500ml自来水，煮沸，加盖冷却24h后 接种。

牛奶培养液：将鲜牛奶以L 200的比例调配(酸奶更好)后接种大米培养液：将10粒米浸入500ml自来水中，加盖放置24h后接种栅藻培养液：实验室培养的栅藻，稀释4倍后接种湖水培养液：从无污染的湖中取水，煮沸，加盖放置24小时后接种3.2培养方法 培养初期，小麦粒培养液是最好的方法，在试管内放 入1粒煮过的小麦粒，置于无太阳光直射的地方，2周后用100ml的烧杯 扩大培养，杯内投入5粒煮过的麦粒，每天滴入1滴稀释3倍的鲜奶使 用蛋白腺和牛奶要注意加入的量不要过多；移入500ml烧杯后，每天加入 1〜2滴牛奶，十天左右可以得到高密度的草履虫种群，不需要进行种群**,即可用于教学实验；蛋白月东不能长期放置，会发臭，变质，利用蛋白腺培 养草履虫比利用牛奶更难控制牛奶和蛋白腺的投放量与草履虫数量成正 比初次操作，应把培养液平均5份，置于5只100ml烧杯，编号1〜5； 培养的第一周，在编号1~5的烧杯里分别投放1、2、4、7、12滴稀释10 倍后的牛奶，每天观察2次；第二周饵料的投放量总结第一周的培养结果 进行适当调整湖水和栅藻培养液只能维持草履虫10-16天的营养，用 于初期的少量培养比较好操作。

大米培养液的水质较浑浊培养期间，烧杯口需要用3~4层纱布封口，以防其他原生动物包囊 进入培养液另外，需要每天早晚2次进行检查，发现草履虫**于水底, 表明溶液中养料不足，倒掉一半上清1.本学院2003级学生；2 .本学院2002级学生；3.本学院2000级学生;4.通讯作者：wangll8@液，加入适量营养液；发现草履虫**在烧杯上部或水线以下的玻璃壁 上，表明溶液中溶氧不足，原因是草履虫密度过高或是水环境恶化应立 即把草履虫移入新液或扩大培养；发现草履虫日渐减少，可能有吸管虫等 草履虫天敌，此时应倒掉所有培养的草履虫，将器皿清洗干净，重新接种 培养4高密度草履虫种群的常年培养与管理4.1培养 取带绿色的湖水200ml于250ml的锥形瓶中，投入10粒 小麦，取4层纱布封口，煮沸5min,静置两天接种数毫升己经提纯的草 履虫，置于阴暗背光处10〜15d后准备3~5个1000ml锥形瓶，每个瓶盛 湖水750ml,投入20粒小麦，纱布封口，煮沸5min0 2d后每个瓶接种草 履虫50mlo培养温度10〜28C (一年室内温度变化范围)4.2管理每周观察一次，如果草履虫分布于锥形瓶底，上层分布很 少或没有，应立刻煮麦粒加入。

如果当天无时间煮麦粒，可先加入一滴牛 奶；如果草履虫**在瓶壁或培养液上层，表明培养液缺氧或营养过剩，这 种情况大多出现在滴加过多牛奶后的第2d,或加入过多麦粒后的3〜4d, 或培养液加入过多，水面上升，水面与空气接触的表面积变小而造成草履 虫缺氧，应立即把上层的草履虫移到干净的锥形瓶，加入适量滤纸过滤的 湖水每2〜3周更新一次麦粒，用13号水生生物网过滤一次培养液，网上 物洗入大烧杯作为小型淡水涡虫的饵料或稀释后接种水蚤或轮虫5草履虫采集液、培养液和废弃液的综合开发利用草履虫培养液 和置换出来的废液将其稀释3倍后接种水蚤，2~3周后会出现许多水蚤; 将其稀释2倍后接种轮虫(Rotaria), 2〜3周后会出现许多轮虫草履虫 是小达氏涡虫(Microdalyellia)、杰氏涡虫(Gieysztoria)等小型淡水涡虫 的理想饵料,—只饥饿的中国小达氏涡虫(Microdalyellia sinensis) lmin 内能捕食20〜40只草履虫也是实验室人工孵化东方蛛螺、小型观赏或 实验用鱼的开口饵料轮虫是培养大口涡虫的优质饵料，一只饥[1]饿的管大口涡虫(Macrostomum tuba), 5min内能捕食30多只 旋轮虫。

草履虫培养废液稀释3倍后倒入大瓷盘，实验室夜间开窗，不久有许多摇蚊幼虫滋生，取羽化前的摇蚊幼虫喂淡水三肠目涡虫，可以3〜5个月不换水在50kg容量的玻璃缸内注满清水，植入3〜5条水草，并用剪草法控制水草数量，靠窗，3d后把废弃的草履虫采集液或培养液2000ml倒入玻璃缸，移入枝角类，2周后移入数条三肠目、 大口虫目涡虫，可以维持水蚤、水蝗、涡虫生长繁殖达3〜5个月水蝗、 三角涡虫、大口涡虫、草履虫、轮虫可以混养；水蚤被水蝗捕食；水蝗的 排泄物和被水蝗杀死沉于水底的死水蚤被涡虫摄食，可以起到净化水质的 作用；涡虫的排泄物被细菌分解，细菌和有机碎屑又被草履虫、轮虫和水 蚤捕食；草履虫、轮虫又是大口涡虫的饵料这种培养条件下，不必换水， 水质清澈，玻璃缸壁不长青苔，保持一定水位高度即可我们实验室数年 来模仿自然生态，建立这种生态培养模式，节约许多人力和水资源，并 且在这种人工水生态环境下成功繁殖出一种淡水针海绵（见图）6草履虫的收集、麻醉及其食物泡观察6.1收集草履虫 采用冷冻法：把1000ml草履虫液倒入量桶内，放入 100g冰块，待冰融化后，用虹吸法抽除上清液即可草履虫遇冷下沉，是 收集草履虫的理想方法。

6.2麻醉草履虫 一滴草履虫液滴在玻片上，加一滴5%的乙醇，1~ 2min后加盖玻片，草履虫渐渐停止活动，不变形，纤毛摆动非常缓慢，伸 缩泡和纤毛的活动以及细胞核易于观察5%的乙醇溶液需要用。