医学实验室校准和比对浦春.ppt

医学实验室校准与比对医学实验室校准与比对 皖南医学院弋矶山医院皖南医学院弋矶山医院 浦浦 春春 philipcpu@philipcpu@卫生部规定卫生部卫生部《《医疗机构临床实验室管理办法医疗机构临床实验室管理办法》》第三章第三章 医疗机构临床实验室质量管理医疗机构临床实验室质量管理第二十四条　医疗机构临床实验室应当保证第二十四条　医疗机构临床实验室应当保证检测系统的完整性和有效性，对需要校检测系统的完整性和有效性，对需要校准的检验仪器、检验项目和对临床检验准的检验仪器、检验项目和对临床检验结果有影响的辅助设备定期进行校准结果有影响的辅助设备定期进行校准安徽省等级医院评审标准中相关条例安徽省等级医院评审标准中相关条例二级医院评审标准二级医院评审标准二级医院评审标准二级医院评审标准三级医院评审标准三级医院评审标准ISO15189ISO151895.3 实验室设备实验室设备 注：适用时，在本准则中实验室设备指仪器设备、参考物注：适用时，在本准则中实验室设备指仪器设备、参考物质、消耗品、试剂和分析系统质、消耗品、试剂和分析系统5.3.4 应保持影响检验性能的每件设备的记录，至少应包括：应保持影响检验性能的每件设备的记录，至少应包括： h) 项中提到的项中提到的性能记录应包括所有校准和性能记录应包括所有校准和/或验证报告或验证报告/证证明的复件明的复件，内容包括日期、时间、结果、调整、可接受标，内容包括日期、时间、结果、调整、可接受标准以及下次校准和准以及下次校准和/或验证的日期，在两次维护或验证的日期，在两次维护/校准之间校准之间的核查频次的核查频次.5.6 检验程序的质量保证检验程序的质量保证5.6.2 适用且可能时，实验室应确定检验结果的不确定度。

适用且可能时，实验室应确定检验结果的不确定度5.6.3 应设计并实施测量系统校准和正确度验证计划，应设计并实施测量系统校准和正确度验证计划， a) 参加适当的实验室比对计划参加适当的实验室比对计划CLIA’884、化验结果的比较化验结果的比较 如果实验室对某一项目的测定采用两种相似如果实验室对某一项目的测定采用两种相似的方法，则所在组室的负责人必须每年两次对有的方法，则所在组室的负责人必须每年两次对有关的化验结果进行比较工作，步骤如下：关的化验结果进行比较工作，步骤如下： 一、选择适当数量的标本一、选择适当数量的标本 二、确定可接受的标准二、确定可接受的标准 三、三、进行两种方法测定结果的比较，如达不到标进行两种方法测定结果的比较，如达不到标 准，要有解决措施准，要有解决措施 四、记录全过程，并保存两年四、记录全过程，并保存两年 校校准准 比对比对一一. .几个基本概念几个基本概念 1. .溯源溯源 2.2.标准品标准品 3.3.检测系统检测系统 4.4.不确定度不确定度 5.5.校准和校准确认校准和校准确认 1.溯源溯源•溯溯源源（（traceabilitytraceability））: :通通过过一一条条具具有有规规定定不不确确定定度度的的不不间间断断的的比比较较链链，，使使测测量量结结果果或或测测量量标标准准的的值值能能够够与与规规定定的的参参考考标标准准（（通通常常是是与与国国家家标标准准或或国国际际标标准准））联联系系起起来的特性。

［来的特性［VIMVIM：：19931993，定义，定义6.106.10］］ 溯源目的溯源目的•对病人的标本进行检验并报告可靠的结果对病人的标本进行检验并报告可靠的结果•医学检验的传统：对收集的患者标本只做医学检验的传统：对收集的患者标本只做一次检验，就发出报告因此，发出报告一次检验，就发出报告因此，发出报告的可靠性必须体现两个基本要求的可靠性必须体现两个基本要求: 精密度：重复性好；精密度：重复性好； 准确度：和参考方法具有可比性准确度：和参考方法具有可比性溯源性溯源性•临床检验始终以临床检验始终以分析过程准确度分析过程准确度度量结度量结果的准确度果的准确度•分析过程准确度：检测均值和作为真值分析过程准确度：检测均值和作为真值的可接受值间的一致性度量分析过程的可接受值间的一致性度量分析过程准确度的方法称方法学比较准确度的方法称方法学比较溯源性溯源性•在方法学比较中，在方法学比较中，“真值真值”即是参考方法即是参考方法对患者标本的检测结果因此，常用检测对患者标本的检测结果因此，常用检测系统对患者标本的检测结果，在计量单位系统对患者标本的检测结果，在计量单位相同的前提下，若能使结果的量值和参考相同的前提下，若能使结果的量值和参考方法的结果量值一致，说明结果准确。

方法的结果量值一致，说明结果准确•所以在溯源性和标准化中，传递结果可靠所以在溯源性和标准化中，传递结果可靠性的最重要方法为性的最重要方法为方法学比较方法学比较实现溯源性的必备条件实现溯源性的必备条件 1 1．．建建立立“公公司司一一级级参参考考品品”，，由由公公司司选选择择国际上知名的参考实验室委托定值国际上知名的参考实验室委托定值 2.2.设立公司内部使用的设立公司内部使用的“一级校准品一级校准品” 3.3.需要建立公司生产用的商品应用校准品需要建立公司生产用的商品应用校准品（（Working CalibratorWorking Calibrator），日常供应的校），日常供应的校准品为商品校准品（准品为商品校准品（Business Business CalibratorCalibrator）2.校准品校准品 1 1．衡量一个检测系统（检验方法）．衡量一个检测系统（检验方法）的基本分析性能有的基本分析性能有4 4点：点： 不精密度、不精密度、 不准确度、不准确度、 病人结果可报告范围、病人结果可报告范围、 分析灵敏度分析灵敏度校准品校准品2 2．标准品．标准品•传统的临床检验，要使检验结果可靠或传统的临床检验，要使检验结果可靠或有依据，往往有一个标准品有依据，往往有一个标准品(Standard)(Standard)。

校准品校准品 3 3．校准品和定值．校准品和定值 为了克服因纯标准液和病人样品间为了克服因纯标准液和病人样品间的基体差异，对检验结果的严重误的基体差异，对检验结果的严重误差，差，2020年前开始引用具有与病人样年前开始引用具有与病人样品基体相似的校准品替代标准品，品基体相似的校准品替代标准品，用于日常工作用于日常工作校准品校准品•使用了自动化分析仪，日常检验的精密度使用了自动化分析仪，日常检验的精密度得到了显著的提高；在优良试剂盒的配合得到了显著的提高；在优良试剂盒的配合下，病人结果的可报告范围也可以满足临下，病人结果的可报告范围也可以满足临床要求；大多常规检验项目没有对极低浓床要求；大多常规检验项目没有对极低浓度的临床要求这样，度的临床要求这样，结果的可靠性的关结果的可靠性的关键是准确度因此，实现新鲜病人标本结键是准确度因此，实现新鲜病人标本结果的溯源性，成为使校准品值实现溯源性果的溯源性，成为使校准品值实现溯源性常规临床化学测定的常规临床化学测定的校准品定值过程校准品定值过程 SI SI制单位定义制单位定义 一级校准品一级校准品 二级校准品二级校准品 生产应用校准品生产应用校准品 产品校准品产品校准品 常规样品常规样品 二级参考检测方法二级参考检测方法 一级参考检测方法一级参考检测方法 厂商选择的检测方法厂商选择的检测方法 厂商常备的检测方法厂商常备的检测方法 用户常规的检测方法用户常规的检测方法结果结果 不确定度不确定度理解校准品理解校准品•可是，尽管校准品的主要来源是人可是，尽管校准品的主要来源是人的血清，为了使校准品内的一些分的血清，为了使校准品内的一些分析物水平达到某个程度，而且形成析物水平达到某个程度，而且形成稳定的产品，稳定的产品，所有的校准品、控制所有的校准品、控制品、室间调查品等都是处理过的血品、室间调查品等都是处理过的血清。

和原来的天然血清间又产生了清和原来的天然血清间又产生了新的基体差异新的基体差异理解校准品理解校准品•使用校准品的目的，是使检测系统对病使用校准品的目的，是使检测系统对病人标本检测结果，实现溯源性人标本检测结果，实现溯源性•校准品定值在系列标准化内容中，是一校准品定值在系列标准化内容中，是一个最突出的课题个最突出的课题•实现病人结果的溯源性，必须在校准品实现病人结果的溯源性，必须在校准品定值过程中，自始至终使用病人新鲜标定值过程中，自始至终使用病人新鲜标本•坚持使用方法学比较实验，验证结果的坚持使用方法学比较实验，验证结果的可靠性理解校准品理解校准品 新鲜病人标本是最佳校准品新鲜病人标本是最佳校准品 须明确的，所有用于检验中的检测方法、须明确的，所有用于检验中的检测方法、仪器、试剂等都是用来检测病人新鲜仪器、试剂等都是用来检测病人新鲜标本的，不是用来检测校准品这样的标本的，不是用来检测校准品这样的处理过样品处理过样品 标准化标准化•19721972年，由年，由ISOISO出版出版T T．．R R．．B B．．SandersSanders主编的主编的《《标准化的目的与原理标准化的目的与原理》》一书对一书对标准化下的定义是：标准化下的定义是：“在所有有关方面在所有有关方面的协作下，进行有秩序的特定活动所制的协作下，进行有秩序的特定活动所制定并实施各项规则的过程定并实施各项规则的过程。

标准品是标准化必备条件标准品是标准化必备条件•和临床检验的实践和需求结合起来，和临床检验的实践和需求结合起来，可以简单理解为：可以简单理解为：为了实现临床检验为了实现临床检验结果的溯源性，检测系统的生产厂商结果的溯源性，检测系统的生产厂商的所有努力，进行有秩序的特定活动的所有努力，进行有秩序的特定活动所制定并实施各项规则的过程为标准所制定并实施各项规则的过程为标准化化 理解校准品理解校准品•如果先用公认的参考方法检测病人标本，如果先用公认的参考方法检测病人标本，再以具有参考值的病人标本去校准某检再以具有参考值的病人标本去校准某检测系列（包括方法、试剂、仪器），此测系列（包括方法、试剂、仪器），此时该检测系列再检测其他新鲜病人标本时该检测系列再检测其他新鲜病人标本时，被检测的病人标本结果的溯源性可时，被检测的病人标本结果的溯源性可上溯至公认的参考方法也即用新鲜病上溯至公认的参考方法也即用新鲜病人标本是校准检测系列的最佳校准品人标本是校准检测系列的最佳校准品由于新鲜病人标本的局限性，由于新鲜病人标本的局限性，加工的稳加工的稳定血清将成为商品化的校准品材料定血清将成为商品化的校准品材料。

 标准化的各要素标准化的各要素校准品校准品试剂试剂分析仪分析仪检测系统的要素检测系统的要素3.检测系统检测系统•完成一个检验项目检测所涉及的仪器、试完成一个检验项目检测所涉及的仪器、试剂、校准品、操作程序、质量控制、保养剂、校准品、操作程序、质量控制、保养计划等的组合，称为检测系统计划等的组合，称为检测系统•若是手工操作，还必须包括具体的操作人若是手工操作，还必须包括具体的操作人员检测系统检测系统仪器仪器试剂试剂校准品校准品检测方法的分类检测方法的分类检测方法分类大致上可以分为三类：检测方法分类大致上可以分为三类：•确认方法（确认方法（Definitive methodDefinitive method）；）；•参考方法（参考方法（Reference methodReference method）；）；•常规方法（常规方法（Routine methodRoutine method）参考方法示例参考方法示例 总胆固醇测定总胆固醇测定•确认方法为同位素稀释质谱（确认方法为同位素稀释质谱（ID-MSID-MS）法；）法；•参考方法为硫磷铁法（皂化参考方法为硫磷铁法（皂化- -抽提抽提- -浓硫酸、浓硫酸、磷酸显色）；磷酸显色）；•常规方法为酶法（胆固醇酯酶、胆固醇氧化常规方法为酶法（胆固醇酯酶、胆固醇氧化酶、过氧化物酶、酶、过氧化物酶、TrinderTrinder显色终点法）。

显色终点法）•美国美国NISTNIST建立的标准参考品有：建立的标准参考品有： 纯胆固醇纯胆固醇SRM911SRM911；冻干人血清；冻干人血清SRM909SRM909常用的参考品代码常用的参考品代码1．．CRM ＝欧洲共同体认可的参考品，＝欧洲共同体认可的参考品， 2．．SRM ＝＝ 美国的标准参考品美国的标准参考品3．．ID-MS ＝＝ 同位素稀释－质谱分析同位素稀释－质谱分析4．．CDC = 疾病控制中心疾病控制中心5．．NIBSC ＝＝ 英国的国家生物标准和控制研英国的国家生物标准和控制研 究院究院 通过方法学比较确定定值通过方法学比较确定定值仪器校验仪器校验公公司司组组合合的的检检测测系系统统和和初步校准品定值（初步校准品定值（· ·））方法学比较方法学比较标标准准化化过过程程信信号号Ctar为为具具有有参参考考值值血血清清在在公公司司组组合合的的检检测测系系统统上上的的检测结果检测结果Cref为参考血清的参考值为参考血清的参考值校准品的溯源性依据（示例）校准品的溯源性依据（示例） 火焰光度法火焰光度法 K〔〔钾钾（（ISE））〕〕 SRM 927 Protein Total〔〔总蛋白总蛋白〕〕 一级标准（称量法）一级标准（称量法） Lactate〔〔乳酸乳酸〕〕 WHO，，SP1-01 Apo-A1〔〔载脂蛋白载脂蛋白A1〕〕 ID-MS Abell Kendall CHOL〔〔胆固醇胆固醇〕〕 电量滴定法电量滴定法Cl〔〔氯氯（（ISE））〕〕 Doumas方法方法TBIL〔〔总胆红素总胆红素〕〕 IFCC 1983 手工方法手工方法 ALP〔〔碱性磷酸酶碱性磷酸酶〕〕 CRM 470Alb〔〔白蛋白白蛋白（（BCP））〕〕 参考方法或参考品参考方法或参考品 项目（分析物）项目（分析物）检测系统性能基本内容检测系统性能基本内容•六大性能：六大性能： 不精密度（总不精密度）不精密度（总不精密度） 不准确度（方法学比较结果）不准确度（方法学比较结果） 病人结果可报告范围病人结果可报告范围 分析灵敏度（检测限）分析灵敏度（检测限） 分析特异性分析特异性 参考范围参考范围4.4.不确定度不确定度不确定度不确定度(uncertainty of a measurement)(uncertainty of a measurement) ：表征合理地赋予被测量之值的分散性，：表征合理地赋予被测量之值的分散性，与测量结果相联系的参数。

与测量结果相联系的参数 1999年年:我国发布我国发布 《《测量不确定度评定与表示测量不确定度评定与表示》》•在国家标准在国家标准GB/T15481-2000中，中，5.4.6明确明确规定：规定：“校准实验室应具有并应用评定测校准实验室应具有并应用评定测量不确定度的程序量不确定度的程序 •不确定度可较好表明基准、校准的水平，不确定度可较好表明基准、校准的水平，产生测量不确定度的原因产生测量不确定度的原因1.测量过程中随机效应及系统效应均会导致测量过程中随机效应及系统效应均会导致测量不确定度，数据处理中的修约也会导测量不确定度，数据处理中的修约也会导致不确定度致不确定度 2.测量结果的不确定度反映了对被测量之值测量结果的不确定度反映了对被测量之值的认识不足，借助于已查明的系统效应对的认识不足，借助于已查明的系统效应对观测结果进行修正后，所得到的只是被测观测结果进行修正后，所得到的只是被测量的估计值，而修正值的不确定度以及随量的估计值，而修正值的不确定度以及随机效应导致的不确定度依然存在机效应导致的不确定度依然存在 测量不确定度应用测量不确定度应用•批内变异【CV (w) 】 •批间变异【CV （b）】•偏倚变异【CV (bias) 】•不确定度【CV (syst) 】•其他原因的不确定【CV (oth) 】 U=（（√CV (w)2 +CV （b）2 +CV (syst) 2+ CV (oth)2 ））×25.5.校准和校准确认校准和校准确认 校准校准:是检测和调整仪器或检测系统读数的是检测和调整仪器或检测系统读数的过程过程,以建立检测分析物的仪器测量和分析以建立检测分析物的仪器测量和分析物的实际浓度间的关系物的实际浓度间的关系. 校准确认校准确认:是对已知浓度的材料是对已知浓度的材料,和患者标本和患者标本一样的方式作检测一样的方式作检测,用于确保检测系统在可用于确保检测系统在可报告范围内能准确地检测患者样品报告范围内能准确地检测患者样品. --择自择自CLIA’88校准品校准品试剂试剂 仪器仪器病人标本检验结果病人标本检验结果校准校准按检测程序按检测程序 检测检测具溯源性和可比性具溯源性和可比性 二二. .校准校准1.计量部门进行的校准检测计量部门进行的校准检测 强制性执行，每年一次；强制性执行，每年一次； 包括比色计、分析天平、酶标仪、包括比色计、分析天平、酶标仪、PH仪等。

仪等  2.厂家提供的校准厂家提供的校准 举例说明举例说明 --- Sysmax UF-1000i仪器校准报告仪器校准报告Sysmax UF-1000i仪器校准流程仪器校准流程•进行仪器进行仪器环境确认环境确认,包含温度包含温度,湿度，接入电压及试湿度，接入电压及试剂的有效性剂的有效性•进行测量项目进行测量项目(RBC、、WBC、、EC、、CAST、、BACT)本底确认本底确认,本底符合仪器要求本底符合仪器要求•进行仪器进行仪器携带污染率携带污染率试验试验•使用仪器配套校准品使用仪器配套校准品(calibrator)进行进行仪器性能校仪器性能校准准,包含仪器总计数包含仪器总计数,灵敏度灵敏度,电导率电导率;各项参数若有各项参数若有偏移则进行调整偏移则进行调整•使用仪器配套质控使用仪器配套质控(UF ⅡⅡ CONTROL-H, UF ⅡⅡ CONTROL-L)进行校准后的验证试验进行校准后的验证试验,符合质控要符合质控要求求•取新鲜尿液标本进行测量项目的取新鲜尿液标本进行测量项目的重复性试验重复性试验,各项各项CV符合仪器要求符合仪器要求Sysmax UF-1000i 校准内容校准内容1.每年校准每年校准2次（工程师负责校准）。

次（工程师负责校准）2.仪器的校准条件：排除各种原因后质控未能通仪器的校准条件：排除各种原因后质控未能通过，主要部件更换后或仪器远距离搬动，或严过，主要部件更换后或仪器远距离搬动，或严重故障须重新校准重故障须重新校准3.校准验证：校准后即做质控，结果符合质控范校准验证：校准后即做质控，结果符合质控范围，校准后及时做精密度测试和线性测试围，校准后及时做精密度测试和线性测试4.精密度：取两个不同值标本，每份连续测精密度：取两个不同值标本，每份连续测11次次结果，去除第一次结果进行统计要求符合精结果，去除第一次结果进行统计要求符合精密度标准密度标准5.线性：分别取富含白细胞和红细胞的尿液线性：分别取富含白细胞和红细胞的尿液,高、高、中、低值三份用改良牛鲍氏计数池计数中、低值三份用改良牛鲍氏计数池计数20次取次取均值作为理论值各稀释尿样（鞘液稀释）用均值作为理论值各稀释尿样（鞘液稀释）用UF-1000i各计数各计数20次，取均值做回归分析结次，取均值做回归分析结果判断：果判断：b要在要在1.00±0.1 校准结果校准结果1.测试条件条件实验室环境实验室环境环境温度环境温度湿度湿度电源电源　　　　　　25℃℃41%220 VAC　　　　　　试剂试剂序号序号试剂名称试剂名称代号代号试剂批号试剂批号失效期失效期1UF ⅡⅡ SEATHUTSA80062009/06/112UF ⅡⅡ SEARCH（（SED））USSA80022009/03/273UF ⅡⅡ SEARCH（（BAC））USBA80022009-030264UF ⅡⅡ PACK（（SED））UPSA80022009/04/025UF ⅡⅡ PACK（（BAC））UPBA80022009/04/02 校准结果校准结果试验材料试验材料校准物校准物:UF ⅡⅡ CONTROL-L LOT NO:YA8007 EXP.DATE: 2009-01-08 参数参数RBCWBCECCASTBACTConductivity单位单位（（/uL））（（/uL））（（/uL））（（/uL））（（/uL））Ms/cm测试值测试值38.940.99.95.21161.68.5靶值靶值40.839.79.35.65198.08.5范围范围20.419.95.64.5259.41.7结论结论合格合格合格合格合格合格合格合格合格合格合格合格校准结果校准结果2.空白空白　　　　　参数参数RBCWBCECCASTBACT单位单位（（/uL））（（/uL））（（/uL））（（/uL））（/uL）B010.0 0.0 0.0 0.00 0.0 判定标准判定标准≤≤1110.21结论结论合格合格合格合格合格合格合格合格合格参数参数SED Total CountBAC Total Count单位单位countcountcountcountB011334判定标准判定标准≤≤3003000结论结论合格合格合格合格校准结果校准结果3.重复性（重复性（变异系数异系数 C CV））试验材料试验材料新鲜尿标本新鲜尿标本　　　　　　　　　参数参数RBCWBCECCASTBACT单位单位（（/uL））（（/uL））（（/uL））（（/uL））（（/uL））1199.8 817.4 85.1 21.82 706.2 ……..…….………..……..10190.6 802.2 81.1 22.79 722.4 MEAN197.52 813.70 78.59 22.576 712.10 SD5.198 12.077 4.095 1.532 11.911 CV2.63%1.48%5.21%6.79%1.67%判定标准判定标准CV≤≤10.0%10.0%30.0%40.0%10.0%结论结论合格合格合格合格合格合格合格合格合格合格校准结果校准结果4.携携带污染染　　　　　　　　　　试验方案说明试验方案说明取高浓度尿液样本（取高浓度尿液样本（RBC>5000 count/Ul,BACT>10000 count/uL））.混合均匀后连混合均匀后连续测定三次，测定值分别为续测定三次，测定值分别为H1、、H2、、H3；再取低浓度尿液样本，连续测定；再取低浓度尿液样本，连续测定3次，次，测定值分别为测定值分别为L1、、L2、、L3。

按公式计算携带污染率按公式计算携带污染率携带污染率携带污染率 =（（L1－－L3））×100%　（（H3－－L3））　　　试验日期试验日期 　　　　　　　　　试验材料试验材料新鲜尿标本新鲜尿标本　　　　　　　　　参数参数RBCBACT　　　　　　　　单位单位（（/uL））（（/uL））　　　　　　　H15,405.5 10,298.9 　　　　　　　H25,418.2 14,763.6 　　　　　　　H35,437.3 13,236.2 　　　　　　　L13.3 36.6 　　　　　　　L21.9 38.5 　　　　　　　L31.5 32.5 　　　　　　　携带污染率携带污染率0.03%0.03%　　　　　　　要求要求≤≤0.1%0.05%　　　　　　　　结论结论合格合格合格合格　　　　　　　 校准结果校准结果5.校准校准 校准物检测结果及计算校准系数校准物检测结果及计算校准系数参数SED ParticleBAC ParticleConductivity单位（/uL）（/uL）Ms/cm定值定值817.5 817.5 36.2 1811.0 823.6 36.7 2827.9 817.8 36.2 3821.4 801.6 36.2 4827.6 833.6 37.2 5824.4 801.5 37.5 6806.0 804.4 36.9 MEAN(均值)819.72 813.75 36.78 SD9.143 13.361 0.527 CV1.12%1.64%1.43% 偏差（%） （均值-定值）100/定值0.27%0.46%1.61%偏差要求偏差要求≤≤5.00%5.00%3.00%结论结论(是否是否需要校准需要校准)不需校准不需校准不需校准不需校准不需校准不需校准校准系数校准系数（定值（定值/均均值）值）99.73%100.46% 仪器原有仪器原有校准系数校准系数94.692Y=0.0212X-41.4242新的校准新的校准系数系数 校准结果校准结果6.校准校准仪器的灵敏器的灵敏度参数度参数试验方案说试验方案说明明做校准时灵敏度参数应该符合校正表中的要求做校准时灵敏度参数应该符合校正表中的要求试验材料试验材料校准物校准物:UF Ⅱ CALIBRATOR LOT NO:A8007 EXP.DATE: 2008-11-08:UF Ⅱ CALIBRATOR LOT NO:A8007 EXP.DATE: 2008-11-08参数参数S-FSCS-FSCWS-FLHS-FLLS-SSCB-FSCB-FLH单位单位chchchchchchchchchchch测试值测试值108.4025.7017.2130.820.890.4 144.7 低限低限107.9025.1016.3123.120.389.5 111.0 高限高限114.5026.7020.2166.524.895.0 150.2 结论结论合格合格合格合格合格合格合格合格合格合格合格合格合格合格校准结果校准结果7.仪器校正后的器校正后的验证　　　　参数参数RBCWBCECCASTBACTConductivity单位单位（（/uL））（（/uL））（（/uL））（（/uL））（（/uL））Ms/cm测试值测试值197.6 819.3 73.8 21.10754.835.9靶值靶值200.1 824.7 81.6 19.46821.336.5范围范围40.0 164.9 40.8 9.73205.33.7结论结论合格合格合格合格合格合格合格合格合格合格合格合格2.自建检测系统校准自建检测系统校准（（1）校准前准备）校准前准备 选择性能良好的试剂盒选择性能良好的试剂盒 实验室挑选适合自己仪器的产品实验室挑选适合自己仪器的产品 实验室应建立完整和详细的操作规程实验室应建立完整和详细的操作规程 确定实验室溯源性的目标确定实验室溯源性的目标 实验室校准的目标向较为可靠检测系统靠拢实验室校准的目标向较为可靠检测系统靠拢 以患者的新鲜标本为实验对象以患者的新鲜标本为实验对象 以方法学比较为验证手段以方法学比较为验证手段 实现自建检测系统溯源性的步骤（（2）确定自建系统为实验室实现溯源性的目标）确定自建系统为实验室实现溯源性的目标•对仪器进行一次对仪器进行一次完整的保养完整的保养，确认仪器处于良好状态。

确，确认仪器处于良好状态确保用于仪器上的水质优良保用于仪器上的水质优良•所有实验过程都必须有分析过程的所有实验过程都必须有分析过程的质量控制质量控制•使用自选试剂盒，在仪器上进行精密度实验一般的检验使用自选试剂盒，在仪器上进行精密度实验一般的检验项目以项目以CLIA’ 88允许误差的允许误差的1/ 4为指标为指标(不能超出根据生物不能超出根据生物学变异确定的不精密度要求学变异确定的不精密度要求)如果为新选择的试剂盒，如果为新选择的试剂盒，进行批内和天间的两个进行批内和天间的两个精密度实验精密度实验 •对自选试剂盒和仪器组合的对自选试剂盒和仪器组合的可报告范围可报告范围的评估•进行初步的进行初步的方法学比较方法学比较；相关系数超过；相关系数超过0. 975，说明两方，说明两方法间的系统误差可以用得到的直线回归式进行分析在为法间的系统误差可以用得到的直线回归式进行分析在为自建检测系统确定校准关系时，希望方法学比较的截距要自建检测系统确定校准关系时，希望方法学比较的截距要小，若方法学比较结果不仅截距小、斜率极其接近小，若方法学比较结果不仅截距小、斜率极其接近1，这，这意味着实验室自建检测系统对标本的检测结果，和溯源目意味着实验室自建检测系统对标本的检测结果，和溯源目标检测系统对标本的检测结果非常接近。

标检测系统对标本的检测结果非常接近•以患者标本为临时校准品，对自建系统的校准，在以上实以患者标本为临时校准品，对自建系统的校准，在以上实验的基础上，已经证明自建系统的验的基础上，已经证明自建系统的精密度，可报告范围精密度，可报告范围符合要求，方法学比较结果符合要求，方法学比较结果实现自建检测系统溯源性的步骤•寻求寻求稳定校准品稳定校准品是保持使用自建检测系统对患者标本检测是保持使用自建检测系统对患者标本检测结果可以溯源至目标检测系统关键购买一批质量好、知结果可以溯源至目标检测系统关键购买一批质量好、知名度高的公司冻干控制品，最好能考虑使用名度高的公司冻干控制品，最好能考虑使用1~2年的量•购买的控制品，不采用原公司的定值按照使用要求，复购买的控制品，不采用原公司的定值按照使用要求，复溶控制品将控制品当作一个样品在经血清校准后的自溶控制品将控制品当作一个样品在经血清校准后的自建系统上进行多次检测建系统上进行多次检测(至少至少3 次以上次以上)，取均值在保持，取均值在保持原自建检测系统上的仪器、试剂盒和操作程序不变的情况原自建检测系统上的仪器、试剂盒和操作程序不变的情况下，以该控制品的检测均值为下，以该控制品的检测均值为“校准值校准值”；然后；然后,再对一批再对一批患者血清患者血清(内含分析物量分布于整个可报告的范围内含分析物量分布于整个可报告的范围)进行经进行经血清校准后的血清校准后的自建系统和可溯源系统方法学比较实验自建系统和可溯源系统方法学比较实验。

若若能保持所有标本结果差异在能保持所有标本结果差异在CLIA’ 88允许误差的允许误差的1/4内，内，说明说明“自建校准品自建校准品”对对“自建检测系统校准成功自此，自建检测系统校准成功自此，实验室建立了自己的完整检测系统实验室建立了自己的完整检测系统 三三. .比对比对 【目的目的】： 在目标检测系统上定值后校准自建检测在目标检测系统上定值后校准自建检测系统，经校准验证和方法比对，实现自建系统，经校准验证和方法比对，实现自建检测系统与目标系统检测结果的可比性检测系统与目标系统检测结果的可比性1.比对程序比对程序1. 根据各检测系统的情况，根据各检测系统的情况，确定确定性能良好的，性能良好的，有溯源性的检测系统为目有溯源性的检测系统为目标检测系统标检测系统 2. 实验前对实验前对仪器进行常规维护与保养仪器进行常规维护与保养，各实验室按常规方法进行校准和，各实验室按常规方法进行校准和质控3. 标本的收集、处理标本的收集、处理：：⑴⑴要求使用当天的标本每份应有足够的量，不够时可以将含量相近的要求使用当天的标本每份应有足够的量，不够时可以将含量相近的两份标本混合，不能多于二份。

两份标本混合，不能多于二份⑵⑵尽可能使尽可能使50%的实验标本分析物的含量在参考区间外、可报告范围内，的实验标本分析物的含量在参考区间外、可报告范围内，各个标本分析物含量越宽越好各个标本分析物含量越宽越好⑶⑶不要使用对任何一方法有干扰的标本不要使用对任何一方法有干扰的标本4.测定测定：：⑴⑴ 由专人至少收集由专人至少收集20份标本进行一致性的比较份标本进行一致性的比较⑵⑵每份标本进行双份检测，每份标本进行双份检测， 在在1天或天或3~5天完成检测，开始检测时间应相天完成检测，开始检测时间应相近，且都应在近，且都应在2小时内检测完毕小时内检测完毕⑶⑶标本按标本按1、、2、、3、、4、、5、、6顺序排列先测一遍，然后将顺序倒过来做第顺序排列先测一遍，然后将顺序倒过来做第二次检测得出数据二次检测得出数据⑷⑷定期实施比对（每季度一次），及时解决比对中出现的问题，并保留定期实施比对（每季度一次），及时解决比对中出现的问题，并保留记录比对分析的数据处理比对分析的数据处理1.数据收集与处理数据收集与处理2.不采用已明确有人为误差的结果不采用已明确有人为误差的结果3.按按EP9-A文件进行方法间离群值检查。

将每一个标本两方文件进行方法间离群值检查将每一个标本两方法的前后法的前后2个测定值一一对应，求出对应值之间的差值和个测定值一一对应，求出对应值之间的差值和所有差值的平均值，以差值的平均值的所有差值的平均值，以差值的平均值的4倍为判断限，两倍为判断限，两方法间标本的成对差值应小于判断限方法间标本的成对差值应小于判断限4.比较方法（比较方法（X）测定范围的检验：）测定范围的检验：X的分布范围是否合适，的分布范围是否合适，可用相关系数可用相关系数(r)作粗略估计，如作粗略估计，如r≥0.975，则认为，则认为X范围合范围合适，直线回归统计的斜率和截距可靠；如适，直线回归统计的斜率和截距可靠；如r＜＜0.975，则使，则使用部分个别差异法计算平均偏差用部分个别差异法计算平均偏差 5.计算线性回归方程：实验方法计算线性回归方程：实验方法Y=bX+a6.计算方法间的系统误差：根据临床使用要求，将各个项目计算方法间的系统误差：根据临床使用要求，将各个项目给定的医学决定水平浓度给定的医学决定水平浓度Xc代入回归方程，计算实验方法代入回归方程，计算实验方法（（Y）与比较方法（）与比较方法（X）之间的系统误差（）之间的系统误差（SE）。

SE=︱︱Yc-Xc︱︱，相对偏差，相对偏差 SE% =SE/Xc×100%比对分析结果的判断比对分析结果的判断1.临床可接受性能判断：以美国临床实验室修正法规临床可接受性能判断：以美国临床实验室修正法规（（CLIA’88）规定的室间质量评价标准为靶值）规定的室间质量评价标准为靶值±允许误差允许误差(T±10%)的的1/4(T±2.5%)作为日间作为日间CV的允许范围的允许范围，以系统误，以系统误差（差（%SE）小于）小于CLIA’88规定的室间质量评价标准的规定的室间质量评价标准的1/2(T±5%)为临床可接受标准为临床可接受标准，以医学决定水平处的系统误，以医学决定水平处的系统误差来判断检测系统间是否可以接受差来判断检测系统间是否可以接受2.统计学处理：不同检测系统质控物结果的统计采用随机区组统计学处理：不同检测系统质控物结果的统计采用随机区组设计资料的方差分析；不同检测系统新鲜血清测定结果的设计资料的方差分析；不同检测系统新鲜血清测定结果的统计采用随机区组设计资料的方差分析、可靠性分析、相统计采用随机区组设计资料的方差分析、可靠性分析、相关分析和回归分析所有数据均在关分析和回归分析。

所有数据均在Excel和和SPSS软件包上软件包上进行3.不确定度的评定：通过建立数学模型、不确定度的评定：通过建立数学模型、分析寻找各项影响因分析寻找各项影响因素及运用数理统计方法素及运用数理统计方法，对医学检测实验室指标测量不确，对医学检测实验室指标测量不确定度进行合理的评定定度进行合理的评定4.比对分析：比对分析偏差大于允许范围，应将自建检测系统比对分析：比对分析偏差大于允许范围，应将自建检测系统重新进行校正，并查找可能引起的偏差原因，加以解决重新进行校正，并查找可能引起的偏差原因，加以解决5.本比对程序应用于同一检测项目在不同系统中检测结果的比本比对程序应用于同一检测项目在不同系统中检测结果的比对应保证三至四个月进行一次，如遇仪器大修、更换试对应保证三至四个月进行一次，如遇仪器大修、更换试剂、方法则应及时进行剂、方法则应及时进行2.比对结果的判断比对结果的判断 ⑴将比对结果制成表格，根据结果判断为：将比对结果制成表格，根据结果判断为： 合格合格和和不合格不合格 ⑵⑵不合格时启动整改程序；不合格时启动整改程序； ⑶⑶表格上报科室质量管理员，并存档；表格上报科室质量管理员，并存档； ⑷⑷结果上报科主任。