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七、生物利用度与生物等效性 生物利用度生物利用度n生物利用度生物利用度(bioavailability,BA)是指药物吸是指药物吸收进入大循环的速度与程度收进入大循环的速度与程度 n生生物物利利用用度度可可分分绝绝对对生生物物利利用用度度与与相相对对生生物物利利用度n绝绝对对生生物物利利用用度度是是以以静静脉脉注注射射制制剂剂为为参参比比标标准准,通常用于原料药及新剂型的研究通常用于原料药及新剂型的研究n相相对对生生物物利利用用度度则则是是剂剂型型之之间间或或同同种种剂剂型型不不同同制制剂剂之之间间的的比比较较研研究究,一一般般是是以以吸吸收收最最好好的的剂剂型或制剂型或制剂为参比标准为参比标准 意义意义n它它是是药药物物制制剂剂质质量量的的重重要要指指标标,是是新新药药开开发与研究的基本内容发与研究的基本内容n药药典典及及部部颁颁标标准准收收载载的的药药物物,改改变变剂剂型型而而不不改改变变给给药药途途径径,测测定定生生物物利利用用度度有有更更重重要的意义要的意义,可以免作临床验证可以免作临床验证n有有些些药药物物临临床床指指标标不不够够明明确确而而生生物物利利用用度的测定更显重要度的测定更显重要。

AUC  Tmax  Cmaxn药药物物血血药药浓浓度度-时时间间曲曲线线下下的的面面积积AUC与与药药物物吸收总量成正比吸收总量成正比,因此它因此它代表药物吸收的程度代表药物吸收的程度n达峰时达峰时Tmax表示吸收的速度表示吸收的速度n而而峰峰浓浓度度Cmax是是与与治治疗疗效效果果及及毒毒性性水水平平有有关关的的参参数数,也也与与药药物物吸吸收收数数量量有有关关Cmax太太大大,超超过过最最小小毒毒性性浓浓度度,则则能能导导致致中中毒毒若若Cmax达达不到有效浓度不到有效浓度,则无治疗效果则无治疗效果生物等效性.n在在相相同同实实验验条条件件下下,给给予予相相同同剂剂量量的的药药剂剂等等效效制制剂剂,它它们们吸吸收收的的速速度度与与程程度度没没有有明明显差别的产品叫显差别的产品叫生物等效生物等效产品n当当吸吸收收速速度度的的差差别别没没有有临临床床上上的的意意义义时时,某某些些药药物物制制剂剂其其吸吸收收程程度度相相同同而而速速度度不不同同,也可认为也可认为生物等效生物等效药剂等效性n药剂等效性药剂等效性是指同一药物相同剂量制成是指同一药物相同剂量制成同一剂型同一剂型,但非活性成分不一定相同但非活性成分不一定相同,在在含量、纯度、含量均匀度、崩解时间、含量、纯度、含量均匀度、崩解时间、溶出速率符合同一规定标准的制剂。

溶出速率符合同一规定标准的制剂生物等效性与药剂等效性不同二者的主要区别n药药剂剂等等效效性性没没有有反反映映药药物物制制剂剂在在体体内内的的情况情况n生生物物利利用用度度或或生生物物等等效效性性的的研研究究,反反映映了了药药物物制制剂剂的的生生物物学学标标准准,对对临临床床疗疗效效提提供供直接的证明直接的证明目前实际要求进行生物利用度的药物主要有 n(1)新新开开发发的的药药物物产产品品,特特别别是是口口服服制剂n(2)改变剂型的产品改变剂型的产品 n(3)改改变变处处方方与与工工艺艺的的产产品品(仿仿制制产产品品)以下几类药物,进行生物利用度研究更有必要n1.预防与治疗严重疾病的药物预防与治疗严重疾病的药物n2.治疗指数窄的药物治疗指数窄的药物n3.水溶性低的药物水溶性低的药物n4.溶解速度慢的药物溶解速度慢的药物n5.有胃肠道中生物转化或在胃肠中不稳定的药有胃肠道中生物转化或在胃肠中不稳定的药物物 n6.有特殊理化性质的药物有特殊理化性质的药物n7.赋形剂比例高的产品赋形剂比例高的产品预防与治疗严重疾病的药物n这类药物的质量对治疗效果影响较大这类药物的质量对治疗效果影响较大,生物利用度上的差别生物利用度上的差别,有时会带来严有时会带来严重的后果。

重的后果治疗指数窄的药物n治疗指数治疗指数是是毒性浓度与有效浓度毒性浓度与有效浓度的比值的比值n治疗指数窄的药物制剂如苯妥英治疗指数窄的药物制剂如苯妥英钠，若生物利用度不一致钠，若生物利用度不一致,过高过高可能引起中毒可能引起中毒,过低可能达不到过低可能达不到治疗浓度治疗浓度水溶性低的药物n例如水溶解度低于例如水溶解度低于5mg/ml的的,此类药物溶解少此类药物溶解少,如果剂型设计如果剂型设计不当或制剂处方设计不好不当或制剂处方设计不好,均能均能影响生物利用度影响生物利用度溶解速度慢的药物n溶解速度慢的药物溶解速度慢的药物,用用法定方法在法定方法在30min内溶解少于内溶解少于50%的药物也就是在整个吸收过程中也就是在整个吸收过程中,溶解速溶解速度是限速步骤度是限速步骤,药物剂型因素对这药物剂型因素对这类药物制剂生物利用度有显著的类药物制剂生物利用度有显著的影响影响有胃肠道中生物转化或在胃肠中不稳定的药物n此类制剂若设计不好，常造成生物此类制剂若设计不好，常造成生物利用度低利用度低n通常需包衣或制成特殊剂型通常需包衣或制成特殊剂型有特殊理化性质的药物n如多晶型药物如多晶型药物,溶剂化物、粒度影响溶剂化物、粒度影响吸收的药物吸收的药物赋形剂比例高的产品n如如赋形剂与活性成分之比为赋形剂与活性成分之比为5:1的的情情况。

因为赋形剂多况因为赋形剂多,有时对主药会产有时对主药会产生一定的影响生一定的影响免做生物等效性试验的药物有些国家市售非处方药物:其中包括n维生素类的保健用品维生素类的保健用品;n经经有有关关主主管管部部门门批批准准免免作作临临床床试试验验的新的非处方复方制剂的新的非处方复方制剂;n长长期期使使用用后后安安全全系系数数大大的的处处方方药药物物转变为非处方药物转变为非处方药物评价(测定)生物利用度的方法. n血药浓度法血药浓度法n尿药浓度数据法尿药浓度数据法绝对生物利用度相对生物利用度梯形法积分法尿药浓度数据法（7个半衰期）生物利用度(生物等效性)的实验设计 n研究对象研究对象n试验制剂与标准参比制剂试验制剂与标准参比制剂n分析方法的指标与要求分析方法的指标与要求n单剂量给药计划单剂量给药计划n单剂量试验结果处理单剂量试验结果处理n生物利用度的计算生物利用度的计算n多次给药计划多次给药计划n结果处理结果处理n结果统计分析结果统计分析研究对象n一一般般在在人人体体内内进进行行应应选选择择正正常常、、健健康康的的自自愿愿受受试试者者,受受试试者者应应在在各各种种条条件件一一致致的的情情况况下下进进行行。

个个别别毒毒性性大大的的药药物物如如抗抗癌癌药药,可可以以采采用用动动物物) n受受试试者者选选择择条条件件:年年龄龄一一般般18~40岁岁,男男性性,体体重重为为标标准准体体重重, 受受试试者者应应经经过过肝肝、、肾肾功功能能及及心心电电图图等等项项检检查查,试试验验前前停停用用一一切切药药物物, 试试验验期期间间,禁忌烟酒禁忌烟酒n受受试试者者人人数数,可可考考虑虑12例例国国外外一一般般用用24例例新新药药研研究究到到底底选选用用多多少少例例,应应根根据据卫卫生生行行政政部部门颁布的指导原则的规定确定门颁布的指导原则的规定确定,不得随意制订不得随意制订 试验制剂与标准参比制剂n试试验验制制剂剂应应是是中中试试以以上上规规模模生生产产出出来来的的,国国外外规规定定为为大大生生产产批批量量的的10%或或10万万片片以以上上的的规规模n绝绝对对生生物物利利用用度度研研究究,需需选选择择静静脉脉注注射射剂剂作作为为标准参比制剂标准参比制剂n相相对对生生物物利利用用度度或或生生物物等等效效性性的的研研究究,可可选选用用已已批批准准上上市市的的、、质质量量优优良良的的同同类类剂剂型型或或相相关关剂剂型型产产品品为为参参比比制制剂剂。

应应该该说说明明,上上述述已已批批准准上上市市系系指指国国内内经经批批准准上上市市与与国国外外产产品品经经我我国国卫卫生生部门批准在我国上市的产品部门批准在我国上市的产品分析方法的指标与要求n测测定定方方法法要要求求专专属属性性强强、、准准确确性性高高、、精精密、灵敏的分析方法密、灵敏的分析方法n要要求求绝绝对对回回收收率率不不低低于于70%,日日内内、、日日间间相相对对标标准准偏偏差差(RSD%)小小于于10%,浓浓度度很很低低(如如ng水平水平),也可小于也可小于15%或或20%n并提供分析方法的最低检测浓度并提供分析方法的最低检测浓度单剂量给药计划n如如试试验验制制剂剂与与参参比比制制剂剂两两种种进进行行比比较较则则采采用用双双处理、两周期随机交叉试验设计处理、两周期随机交叉试验设计n两两周周期期间间称称洗洗净净期期,一一般般相相当当药药物物10个个半半衰衰期期,通常一周通常一周 n给给药药剂剂量量一一般般应应与与该该制制剂剂临临床床治治疗疗剂剂量量一一致致,且且被被试试验验制制剂剂与与标标准准制制剂剂总总剂剂量量应应相相等等如如非非临临床床治治疗疗剂剂量量,应应提提供供剂剂量量设设置置的的足足够够依依据据。

若剂量不等应说明原因若剂量不等应说明原因n对对非非线线性性动动力力学学的的药药物物要要用用两两个个不不同同剂剂量量进进行行试验试验具体方案n受受试试者者禁禁食食10h后后,早早晨晨空空腹腹时时以以200ml水水将将药药吞吞服服,服服药药后后4h时时统统一一食食谱谱的的标标准准餐n整整个个采采样样时时间间至至少少3~5个个半半衰衰期期如如果果药药物物半半衰衰期期未未知知,采采样样需需持持续续到到血血药药浓浓度度为峰浓度的为峰浓度的1/10~1/20采样安排采样安排:n根根据据预预试试验验结结果果进进行行,一一个个完完整整的的口口服服血血药药浓浓度度一一时时间间曲曲线线,应应包包括括吸吸收收相相、、平平衡衡相与消除相相与消除相n服服药药前前采采样样一一次次,吸吸收收相相与与平平衡衡相相各各采采样样3次次,消除相采样消除相采样4~8次次,总数总数11~15次n对对个个别别药药物物,若若采采样样次次数数较较少少,应应说说明明理理由由单剂量试验结果处理n列列出出试试验验制制剂剂与与标标准准参参比比制制剂剂每每一一个个受受试试的的血血药药浓浓度度与与时时间间的的原原始始数数据据,同同时时计计算平均值与标准差算平均值与标准差,列表并作图列表并作图n计计算算每每受受试试者者生生物物利利用用度度或或生生物物等等效效性性有关参数有关参数,并求出平均值与标准差并求出平均值与标准差,列表列表nAUCo-t用梯形法计算。

用梯形法计算nT1/2=0.693/KnCmax、、Tmax通通过过实实验验数数据据直直接接求求出出,或用抛物线法求得或用抛物线法求得生物利用度的计算n绝绝对对生生物物利利用用度度与与相相对对生生物物利利用用度度：：用用药时曲线下面积的数据进行计算药时曲线下面积的数据进行计算多次给药计划(多剂量给药计划 n缓缓释释、、控控释释制制剂剂除除进进行行单单剂剂量量试试验验外外,还还要要求求进行多次给药试验进行多次给药试验n多多次次给给药药同同样样采采用用交交叉叉试试验验设设计计,洗洗净净期期一一周周,受受试试者者选选择择、、人人数数、、制制剂剂、、分分析析方方法法等等研研究究条条件件与单剂量法相同与单剂量法相同,n缓缓释释、、控控释释制制剂剂按按设设计计要要求求给给药药(如如每每天天一一次次或或二二次次),若若参参比比制制剂剂为为普普通通速速释释制制剂剂,则则按按临临床常规方法给药床常规方法给药(如每天二次或三次如每天二次或三次) ；；具体方案n连连服服一一定定时时间间，，不不少少于于待待测测药药物物7个个半半衰衰期期后后,开开始始测测定定谷谷浓浓度度,至至少少测测三三次次,以以确确证证达达到到稳稳态态。

达达稳稳态态后后至至少少要要测测定定一一个个剂剂量量间间隔隔的的血血药药浓浓度度-时时间间曲曲线线,特特别别要要注注意意测测定定给给药药前前(0时时间间)与与剂剂量量间间隔隔末末(τ时时间间)的的血血药药浓浓度度,其其他他采采样样时时间间可可参参考考单单剂剂量量实实验验安安排排,以以便便求求得得生生物物利利用用度度n 最最好好能能测测定定达达稳稳态态后后全全天天服服药药的的血血药药浓浓度度-时时间间曲曲线线,特特别别对对那那些些在在一一天天内内吸吸收收与与处处置置容容易易发生节律变化的药物发生节律变化的药物多剂量试验的结果处理 n实验数据整理与单剂量试验相同实验数据整理与单剂量试验相同n然然后后计计算算每每一一个个受受试试者者生生物物利利用用度度或或生生物物等等效效性性有有关关参参数数,并并求求出出平平均均值值与与标标准准差差,列表平均稳态血药浓度结果统计分析 n试试验验结结果果应应进进行行统统计计分分析析,并并作作出出判判断断相相对对生生物物利利用用度度值值差差异异在在土土20％％时时,一一般般认为可以被接受认为可以被接受n生生物物等等效效性性标标准准是是试试验验制制剂剂生生物物利利用用度度的的参参数数AUC平平均均值值的的90%可可信信限限, 应应落落在在标标准准参参比比制制剂剂的的80％％-125%置置信信区区间之间。

间之间Cmax则在则在70%-145％之间％之间生物等效性统计分析n统统计计分分析析宜宜采采用用方方差差分分析析、、双双单单侧侧检检验验、、置信区间、内叶斯分析置信区间、内叶斯分析等等n由由于于AUC,因因不不呈呈正正态态分分布布,应应先先将将其其进进行对数转换行对数转换,才可进行方差分析才可进行方差分析方差分析 n方差分析方差分析是检验差异的传统方方差分析方差分析是检验差异的传统方法法,且为其它方法的基础且为其它方法的基础n方差分析的统计假设是方差分析的统计假设是:n①①样品的随机化样品的随机化;n②②方差齐性方差齐性;n③③统计模型的可加性统计模型的可加性;n④④残差的独立性和正态性残差的独立性和正态性 在生物等效性评价中方差分析的基础是n①①受试者的选择与分配应是随机的受试者的选择与分配应是随机的n②②试验组与参比组的误差来源和影响因试验组与参比组的误差来源和影响因素应当相等或至少相当素应当相等或至少相当n③③误差的作用具有可加性误差的作用具有可加性,如受试者、周如受试者、周期间、药物间的作用应该具可加性期间、药物间的作用应该具可加性,且上且上述作用之间无交互影响述作用之间无交互影响。

n④④实验数据应是正态分布实验数据应是正态分布n若满足不了上述条件需采用其它措施如若满足不了上述条件需采用其它措施如数据的对数转换数据的对数转换以符合上述条件以符合上述条件n许多生物学资料是非正态分布许多生物学资料是非正态分布,接近于对接近于对数正态分布由血药浓度数据计算出的数正态分布由血药浓度数据计算出的AUC和和Cmax趋于偏态分布趋于偏态分布,它们的变异它们的变异随平均值增大而增大随平均值增大而增大,对数转换后可改善对数转换后可改善这种情况这种情况,使其变异与平均值无关使其变异与平均值无关 n方差分析方差分析用来检验试验组与参比组组内用来检验试验组与参比组组内与组间差异与组间差异,评价受试者、试验周期、制评价受试者、试验周期、制剂间的变异和其它试验设计的变异剂间的变异和其它试验设计的变异n一般差异的显著性水平定为一般差异的显著性水平定为0.05方差方差分析是显著性检验分析是显著性检验,不是等效性检验不是等效性检验双单侧检验(two one-sided test)n双单侧检验双单侧检验用于可信限检验用于可信限检验,确定试验制确定试验制剂与参比制剂生物利用度参数平均值的剂与参比制剂生物利用度参数平均值的差异是否在允许范围内差异是否在允许范围内。

双单侧检验的假设为   分别为试验制剂与参分别为试验制剂与参比制剂比制剂AUC或或Cmax的对数均值的对数均值:   r1为生物等效的低侧为生物等效的低侧界限界限,   r2为高侧界限为高侧界限;   如检验参数为如检验参数为AUC,则则r1=0.8,     r2 =1.25检验统计量n式中式中S为样本误差均方的为样本误差均方的平方根平方根,由方差分析结果由方差分析结果得到得到,n为样本人数为样本人数,t1和和t2均服从自由度均服从自由度υ的的t分分布布(υ均误差均方自由度均误差均方自由度),临界值为临界值为t1-a它可以它可以查查t单侧分位数表得到单侧分位数表得到当当t1>t1-a,t2> t1-a同同时成立时成立,则拒绝则拒绝Ho,接受接受Hl,即认为两制剂生物等即认为两制剂生物等效置信区间n置信区间分析生物等效性分析中常用置信区间分析生物等效性分析中常用90%的置信区间分析的置信区间分析n即为试验制剂的生物利用度有即为试验制剂的生物利用度有90％的可％的可能性在此范围之间能性在此范围之间 公式体内外相关性研究 n一旦这种关系建立后一旦这种关系建立后,n就就可可能能用用体体外外试试验验代代替替体体内内试试验验,即即用用体体外外溶溶出出或或释释放放试试验验结结果果作作为为制制剂剂产产品品体体内生物利用度特性的指示内生物利用度特性的指示。

n同同时时,也也可可用用于于筛筛选选处处方方,保保证证制制剂剂产产品品体内外性能的一致性体内外性能的一致性 体内外相关性有三种情况 n整个体外溶出、释放时间过程和整个体整个体外溶出、释放时间过程和整个体内时间过程之间存在相关关系内时间过程之间存在相关关系 n体外溶出时间过程和体内时间过程的参体外溶出时间过程和体内时间过程的参数之间存在相关关系数之间存在相关关系n单点相关单点相关 整个体外溶出、释放时间过程和整个体内整个体外溶出、释放时间过程和整个体内时间过程之间存在相关关系时间过程之间存在相关关系 n具有这种相关关系具有这种相关关系·其体外溶出曲线，其体外溶出曲线，和体内整个吸收曲线存在相关关系和体内整个吸收曲线存在相关关系,这是这是最高水平的相关系最高水平的相关系n体内吸收曲线可通过体内吸收曲线可通过Wagner-Nelson法法或或Loo-Reegelman法求得 体外溶出时间过程和体内时间过程的参数之间存在相关关系 n这一相关的方法主要是利用统计矩分析原理这一相关的方法主要是利用统计矩分析原理,可以将体外平均溶出时间和体内平均滞留时间可以将体外平均溶出时间和体内平均滞留时间或体内平均溶出时间进行比较。

或体内平均溶出时间进行比较n如如:a：：体外平均溶出时间对体内平均溶出时间体外平均溶出时间对体内平均溶出时间nB：：体外平均溶出时间对体内平均滞留时间体外平均溶出时间对体内平均滞留时间nC：：体外溶出速度常数对体内吸收速度常数体外溶出速度常数对体内吸收速度常数为单点相关关系n某一溶出时间点某一溶出时间点,如如T50%、、T90%,和某一药和某一药动学参数如动学参数如AUC、、Cmax或或tmax存在相关关存在相关关系可有以下三种情况系可有以下三种情况（（1）某一特定时间点体外溶出量和体内药动学）某一特定时间点体外溶出量和体内药动学参数之间相关性参数之间相关性n(2)体外溶出某一百分数所需时间与体内药动体外溶出某一百分数所需时间与体内药动学参数之间有相关性学参数之间有相关性n(3〉〉体外溶出参数与体内药动学参数之间有相体外溶出参数与体内药动学参数之间有相关性关性某一特定时间点体外溶出量和体内药动学参数之间相关性n如a:时间t时的溶出量对AUCnB:时间t时的溶出量对CmaxnC:时间t时的溶出量对平均滞留时间MRT体外溶出某一百分数所需时间与体内药动学参数之间有相关性na :Tx%对对AUCnb :Tx%又才又才Cmaxnc : Tx%对对MRT体外溶出参数与体内药动学参数之间有相关性n a:溶出速度常数kd或K。

对Cmax或AUCnB: MDT体外对Cmax或AUC影响生物利用度的因素 n剂型的影响剂型的影响n药物在胃肠道内的代谢分解药物在胃肠道内的代谢分解n肝脏首过作用肝脏首过作用n受试者本身变易的影响受试者本身变易的影响剂型的影响 n同同种种药药物物不不同同剂剂型型,生生物物利利用用度度往往往往不不同同同同种种剂剂型型,由由于于处处工工艺艺不不同同,有有时时生生物物利利用度也不同用度也不同n产产生生这这种种现现象象的的原原因因,主主要要剂剂型型的的性性质质与与处方组成影响药物的吸收处方组成影响药物的吸收n这这个个问问题题是是当当前前某某些些产产品品质质量量存存在在的的主主要要问问题题,应应通通过过改改进进剂剂型型设设计计和和制制剂剂处处方方加以解决加以解决药物在胃肠道内的代谢分解 n某某些些药药物物在在胃胃肠肠道道内内停停留留时时间间较较长长,易易受受胃胃肠肠内内微微生生物物或或酶酶的的作作用用而而发发生生代代谢谢分分解解,使生物利用度降低使生物利用度降低 肝脏首过作用 n心心得得安安、、利利多多卡卡因因等等药药物物均均有有一一定定程程度度的肝脏首过作用的肝脏首过作用n首首过过作作用用的的程程度度,可可以以用用药药物物口口服服或或静静注注后得到的曲线下的面积来预测。

后得到的曲线下的面积来预测受试者本身变易的影响 n测测求求生生物物利利用用度度,应应进进行行交交叉叉试试验验,以以消消除除受受试试者之间药物清除率者之间药物清除率(KV)的变异n但但是是有有时时这这些些研研究究仍仍受受到到受受试试者者本本身身变变异异的的影影响响,也也就就是是同同一一受受试试者者对对同同次次数数所所给给药药物物消消除除作作用用不不完完全全相相同同,药药物物消消除除变变异异越越大大,F或或Fr估估算的标准差也越大算的标准差也越大n为为了了减减少少个个体体自自身身差差异异性性的的影影响响,一一般般假假设设分分布布容容积积不不变变,而而校校正正消消除除速速度度常常数数或或半半期期的的差差别这就是半衰期校正法别这就是半衰期校正法,n 研究目的及内容 n临临床床前前进进行行药药物物动动力力学学研研究究,目目的的在在于于了了解解新新药药在在动动物物体体内内动动态态变变化化的的规规律律及及特特点点,给临床合理用药提供参考给临床合理用药提供参考;n其其内内容容包包括括药药物物的的吸吸收收、、分分布布、、排排泄泄、、蛋蛋白白结结合合等等根根据据数数学学模模型型,求求算算重重要要的的药物动力学参数药物动力学参数 药物在生物样品中的分离与测定 n建立一个专属性强、准确、重现性好、灵敏的测定方法 n(一一)专属性专属性n(二二)重现性重现性.n(三三)灵敏度灵敏度.n(四四)标准曲线及回收率标准曲线及回收率n(五五)分离及测定分离及测定专属性n必必须须证证明明所所测测药药物物为为原原形形药药或或其其代谢产物。

代谢产物重现性n用用RSD%表示表示n药药物物加加入入生生物物样样品品中中反反复复测测定定的的相相对对标标准准偏偏差差,在在实实际际所所用用标标准准曲曲线线(至至少少四四个个浓浓度度)范范围围内内,日日内内变变异异系系数数争争取取达达到到5%以以内内,但但不不能能越越过过10%或或20%(ng水平水平)灵敏度n一般以一般以ng(或或ug/ml)生物样品表示生物样品表示n要求能测出要求能测出3~5个半衰期后的血药浓度个半衰期后的血药浓度n或者能检测出或者能检测出Cmax的的1/10浓度标准曲线及回收率n1.要要指明药物的化学纯度指明药物的化学纯度n2.要要制制备备药药物物在在血血、、尿尿、、粪粪、、胆胆汁汁及及组组织织匀匀浆浆等等中中的的标标准准曲曲线线,每每条条标标准准曲曲线线在在应应用用浓浓度度范范围围内内,最最少少包包含含四四个个药药物物浓浓度度;并指出其相关系数并指出其相关系数n3、、要要注注意意不不同同组组织织的的空空白白干干扰扰及及回回收收率率可能不同可能不同，绝对回收率低于，绝对回收率低于70％％分离及测定n1.根根据据实实验验室室条条件件,首首选选先先进进的的HPLC、、GC等等分离方法分离方法,以及紫外、荧光以及紫外、荧光等测定方法等测定方法n2.用用放放射射性性核核素素标标记记药药物物,在在用用前前要要进进行行纯纯度度检检查查,放放化化纯纯度度要要〉〉95%。

定定位位标标记记要要指指明明标标记记位位置置尽尽量量不不用用以以曝曝射射制制备备的的非非定定位位3H标标记物n3.放放射射免免疫疫法法和和酶酶标标免免疫疫法法具具有有一一定定特特异异性性,灵灵敏敏度度高高,但但原原药药与与其其代代谢谢产产物物或或内内源源性性物物质质常有交叉反应常有交叉反应,需提供证据需提供证据,说明其特异性说明其特异性n4.生生物物检检定定法法常常能能反反映映药药效效学学本本质质,一一般般特特异异性性较较差差,最最好好用用特特异异性性高高的的方方法法予予以以对对比比、、证证明明,否则要加以说明否则要加以说明动物选择与注意事项 n必必须须采采用用成成年年、、健健康康动动物物常常用用动动物物为为大鼠、小鼠、兔、豚鼠大鼠、小鼠、兔、豚鼠,狗狗等n首首选选动动物物与与性性别别尽尽量量与与药药效效学学或或毒毒理理学学研究所用动物一致研究所用动物一致n尽量在尽量在清醒状态清醒状态下进行n动物进实验室应饲养动物进实验室应饲养3~5d再开始实验再开始实验n给给药药途途径径要要选选择择拟拟在在临临床床上上用用的的途途径径(如如有特殊情况有特殊情况,要加以说明要加以说明 药物动力学参数测定 n血药浓度血药浓度-时间曲线时间曲线(药药-时曲线时曲线) n药药-时曲线与数据处理时曲线与数据处理n实验报告材料实验报告材料血药浓度-时间曲线1.给给药药后后取取血血时时间间应应注注意意到到下下列列三三个个相相的的时时间间点点分布分布,先做预试先做预试,摸索各自范围摸索各自范围,静静脉脉注注射射:分分布布相相、、平平衡衡相相和和消消除除相相。

血血管管外外给给药药,吸吸收收相相、、平平衡衡相相和和消消除除相相实实验验观观察察期期不不小于小于3个半衰期个半衰期2.口口服服给给药药,一一般般在在给给药药前前禁禁食食12h研研究究口口服服给药给药,不宜选用兔和反刍动物如羊不宜选用兔和反刍动物如羊等3.最最好好从从同同一一动动物物多多次次采采样样,尽尽量量避避免免用用多多只只动动物合并样品物合并样品4、、剂剂量量的的选选择择：：在在有有效效安安全全范范围围内内，，要要选选择择三三种剂量种剂量药时曲线及数据处理n1.要要提提出出描描述述血血-药药时时程程的的数数学学表表达达式式,并并确确定定其参数其参数,对线性房室模型对线性房室模型,一般要提供一般要提供:n静静脉脉注注射射:T1/2(α)、、T1/2(B)、、k12、、k21、、K10、、V、、Cl、、AUC...n血血管管外外给给药药:Ka、、Tl/2、、  Cl、、AUC、、V、、Cmax、、Tmax…n非非线线性性过过程程:常常以以Michaelis-Menten式式表表达达,要要提提供供Vm及及km值值n2.在在做做了了静静脉脉及及口口服服给给药药后后,可可计计算算原原料料药药的的绝对生物利用度绝对生物利用度。

n3.如如用用电电子子计计算算机机处处理理数数据据,应应指指出出所所用用程程序序名称实验报告材料n1.每每只只动动物物、、每每个个时时间间点点的的原原始始数数据据、、均数及标准误或标准差均数及标准误或标准差n2.比较曲线拟合计算值与观测值的符合比较曲线拟合计算值与观测值的符合程度药物的分布n选用大鼠或小鼠做分布试验较为方便选用大鼠或小鼠做分布试验较为方便n选选择择一一个个剂剂量量(一一般般以以治治疗疗剂剂量量为为宜宜)后后,、、至至少少测测定定药药物物在在心心、、肝肝、、脾脾、、肺肺、、肾肾、、胃胃肠肠道道、、生生殖殖腺腺、、脑脑、、体体脂脂、、骨骨髓髓肌肌等等组组织织的的分分布布特特别别注注意意药药物物在在靶靶器器官官(包包括括药药效效学学与与毒毒理理学学)的的分布n以以药药-时时曲曲线线作作参参考考,选选2-3个个时时间间点点分分别别代代表表分分布布相相(或或吸吸收收相相)、、平平衡衡相相和和消消除除相相的的药药物物分分布布消消除除相相的的组组织织分分布布必必须须包包括括在在内内)每每个个时时间点的组织间点的组织,必须有必须有至少至少5只动物的数据只动物的数据 药物的排泄1.尿和粪的药物排泄试验尿和粪的药物排泄试验    2.胆汁排泄胆汁排泄:   1、尿和粪的药物排泄试验尿和粪的药物排泄试验n要将动物放入代谢笼内要将动物放入代谢笼内,给药后不同时间给药后不同时间间隔收集尿或粪全部样品。

记录尿体积间隔收集尿或粪全部样品记录尿体积,混匀混匀,取一部分样品取一部分样品,测定药物浓度尿、测定药物浓度尿、粪应每隔一定时间收集粪应每隔一定时间收集1次次,以测定药物以测定药物经此途径排泄的速度经此途径排泄的速度    2、胆汁排泄、胆汁排泄一一般般用用大大鼠鼠在在麻麻醉醉下下作作胆胆管管插插管管引引流流;待待动动物物清清醒醒后后,以以各各种种途途径径给给药药,并并以以合合适适的的时间间隔分段收集胆汁时间间隔分段收集胆汁,进行药物测定进行药物测定药物与血浆蛋白的结合n研研究究药药物物与与血血浆浆蛋蛋白白结结合合的的方方法法很很多多,如如平平衡衡透透析析法法、、超超过过滤滤法法、、分分配配平平衡衡法法、、凝胶过滤法、光谱法凝胶过滤法、光谱法等等n其其中中以以平平衡衡透透析析法法最最简简单单、、经经济济,但但较较费费时时,一一般般约约需需24h方方达达平平衡衡,最最好好置置冷冷室室进行进行,以免药物或蛋白质破坏以免药物或蛋白质破坏n其其它它方方法法各各有有优优缺缺点点,根根据据所所研研究究药药物物的的理化性质及实验室条件理化性质及实验室条件,均可供选择使用均可供选择使用血浆蛋白结合的百分数计算。

n如如按按各各种种透透析析法法进进行行实实验验,应应按按下下式式计计算算药物与血浆蛋白结合的百分数药物与血浆蛋白结合的百分数n结结合合百百分分数数={1-（（滤滤出出液液(自自由由形形)浓浓度度/总浓度）总浓度）}×100％％注意事项:n(1)药药物物与与血血浆浆蛋蛋白白结结合合程程度度受受很很多多因因素素影影响响,如如血血浆浆pH、、血血浆浆浓浓度度、、药药物物浓浓度度等等血血浆浆pH应应固固定定为为7.4,至至少少选选择择三三个个血药浓度血药浓度(包括有效浓度在内包括有效浓度在内)进行实验进行实验n(2)必必须须证证明明药药物物与与半半透透膜膜本本身身有有无无结结合合,应做对照予以校正应做对照予以校正 n(3)可可被被血血浆浆转转化化的的药药物物,要要加加少少量量酶酶抑抑制剂制剂,以终止其转化以终止其转化总结n通通过过全全面面实实验验观观察察,要要对对该该药药在在动动物物体体内内的药代动力学特点做综合性论述的药代动力学特点做综合性论述n包包括括吸吸收收、、分分布布、、消消除除的的特特点点,自自尿尿、、粪粪、、胆胆汁汁的的排排泄泄情情况况,有有无无蛋蛋白白结结合合,结结合合百百分分数数,有有无无积积蓄蓄,在在什什么么器器官官或或组组织织积积蓄蓄,积蓄程度等。

积蓄程度等n如如首首次次发发现现的的新新药药,应应对对药药物物的的主主要要去去向向做探讨做探讨,以免积蓄中毒以免积蓄中毒治疗药物监测在药物动力学中的应用n治治疗疗药药物物监监测测（（IDM)是是近近年年来来临临床床药药学学发发展展较较快快的的一一个个新新领领域域也也是是药药物物动动力力学学应用的一个方面应用的一个方面n它它是是以以药药物物动动力力学学与与药药效效学学基基础础理理论论为为指指导导,借借助助先先进进分分析析技技术术与与电电子子计计算算机机手手段段检检测测血血药药浓浓度度,探探讨讨药药物物在在体体内内的的过过程程,使给药方案个体化使给药方案个体化,主要工作n协助医师选择药物协助医师选择药物n设计给药方案设计给药方案n评价患者对药物治疗的反应评价患者对药物治疗的反应n确定是否需要进行血药浓度测定确定是否需要进行血药浓度测定n测定血液或其它体液中的药物浓度测定血液或其它体液中的药物浓度n对血药浓度数据进行药物动力学评价对血药浓度数据进行药物动力学评价n必要时重新调整给药方案必要时重新调整给药方案n继续血药浓度监测继续血药浓度监测n当患者由于其它因素导致治疗效果较差时，能当患者由于其它因素导致治疗效果较差时，能够推荐特殊处理方法够推荐特殊处理方法下列情况需进行治疗药物监测n1、给予同一剂量后个体差异大的药物、给予同一剂量后个体差异大的药物n2、具非线性动力学特征的药物、具非线性动力学特征的药物n3、治疗指数小、毒性反应强的药物、治疗指数小、毒性反应强的药物n4、毒性反应不易识别，用量不当或用量、毒性反应不易识别，用量不当或用量 不足的临床反应难以识别的药物不足的临床反应难以识别的药物n5、患者胃肠道、肝、肾疾病，影响药物、患者胃肠道、肝、肾疾病，影响药物吸收、代谢、排泄吸收、代谢、排泄n6、常规剂量下没有看到疗效，测血药浓、常规剂量下没有看到疗效，测血药浓度有助于分析原因度有助于分析原因n7、常规剂量下出现毒性反应、常规剂量下出现毒性反应n8、怀疑由于合并用药而出现的异常反应、怀疑由于合并用药而出现的异常反应n9、诊断和外理药物过量或中毒、诊断和外理药物过量或中毒n10、为确定新药的群体给药方案，进行、为确定新药的群体给药方案，进行临床药动学研究临床药动学研究建立灵敏的血药浓度或其他体液浓度的测定方法n这这是是治治疗疗药药物物监监测测的的前前提提,若若方方法法不不准准,则则可可导导致致错错误误的的结结果果,常常用用的的方方法法有有高高效效液液相相.色色谱谱法法,荧荧光光偏偏振振免免疫疫法法、、酶酶免免疫疫法法等等,其其中中以以高高效效液液相色谱法与荧光偏振免疫法为常用。

相色谱法与荧光偏振免疫法为常用n在在测测定定一一个个药药物物的的血血药药浓浓度度时时,首首先先对对方方法法进进行行确确证证,测测定定三三个个浓浓度度的的回回收收率率及及相相对对标标准准偏偏差差RSD%,同同时时要要求求出出方方法法的的灵灵敏敏度度即即最最低低检检测浓度与检测限测浓度与检测限TDM与临床诊断n在在治治疗疗过过程程中中,有有时时病病人人症症状状增增多多,是是病病情情加加重重还还是是药药物物中中毒毒需需诊诊断断清清楚楚,否否则则带带来严重的效果来严重的效果n某某癫癫痫痫病病人人,连连续续服服用用苯苯妥妥英英钠钠,发发作作仍仍不不能能控控制制, 经经采采血血分分析析监监测测,患患者者苯苯妥妥英英钠钠血血药药浓浓度度40mg/L,正正常常治治疗疗范范围围应应为为10-2Omg/mL,故故患患者者确确系系苯苯妥妥英英钠钠中中毒毒,于是停服苯妥英钠于是停服苯妥英钠,后症状缓解后症状缓解TDM与给药方案nIDM的的核核心心是是个个体体化化给给药药,药药物物的的疗疗效效不不是是完完全全由由剂剂量量决定决定,而是由血药浓度决定的而是由血药浓度决定的,n由由剂剂量量到到血血药药浓浓度度受受到到许许多多因因素素的的影影响响,尤尤其其是是病病人人的的生生理理、、病病理理因因素素的的影影响响,因因此此要要根根据据病病人人情情况况用用药药即即个个体体化化给给药药。

而而个个体体化化给给药药关关键键是是获获得得个个体体参参数数,多多次次采采血血可可以以求求出出病病人人药药动动力力学学参参数数,但但临临床床不不易易接接受受,近近年年来关于来关于群体药动学群体药动学的发展的发展,为这问题的解决提出办法为这问题的解决提出办法n在在临临床床取取1-2个个点点,然然后后将将此此数数据据与与文文献献上上得得到到的的该该药药物物的的群群体体参参数数混混合合运运算算,即即可可得得到到个个体体的的药药动动学学参参数数,可依此计算给药剂量、间隔时间、制订个体给药方案可依此计算给药剂量、间隔时间、制订个体给药方案TDM与有效安全用药n合合理理用用药药要要保保证证安安全全有有效效,治治疗疗药药物物监监测测是保证某些药物安全有效的重要手段是保证某些药物安全有效的重要手段, n患患者者庆庆大大霉霉素素血血药药浓浓度度监监测测结结果果, 庆庆大大霉霉素素有有效效血血药药浓浓度度为为11~8mg/L,血血药药浓浓度度过过高高将将会会带带来来严严重重毒毒副副反反应应, 两两次次给给药药间间隔隔时时间间太太短短,会会使使血血药药浓浓度度升升高高，，故故应应进进行调整行调整,避免了严重不良后果避免了严重不良后果 TDM与中毒急救nTDM能能及及时时准准确确对对中中毒毒物物进进行行定定性性与与定定量量监监测测,有针对性地采取救治措施有针对性地采取救治措施,提高救治的成功率。

提高救治的成功率n某某医医院院有有一一患患者者吞吞服服大大量量安安眠眠药药,但但具具体体药药名名不不详详, 采采血血用用多多种种安安眠眠药药为为外外标标进进行行定定量量分分析析,速速可可眠眠呈呈阳阳性性反反应应,血血药药浓浓度度高高达达34mg/l,进进行行血血透透析析,再再次次采采取取血血进进行行.监监测测,速速可可眠眠血血浓浓下下降降至至11.5mg/L,患患者者自自主主呼呼吸吸恢恢复复,次次日日神神志恢复给药方案设计n给给药药方方案案就就是是为为治治疗疗提提供供药药物物剂剂量量和和给给药药间间隔隔的的一一种种计计划划表表,以以达达到到合合理理用用药药的的目的目的 根据半衰期确定给药方案n1.确定给药间隔时间确定给药间隔时间: n2.负荷剂量加倍负荷剂量加倍确定给药间隔时间n一一般般选选用用τ=T1/2,这这种种办办法法对对多多数数药药物物是是适适用用的的,此方案不会在体内造成积累此方案不会在体内造成积累,故用药较安全故用药较安全n但但一一些些杀杀菌菌性性抗抗菌菌药药如如利利福福平平、、青青霉霉素素等等,因因抗抗菌菌效效力力及及其其后后续续杀杀菌菌作作用用与与药药物物血血浆浆峰峰浓浓度度有关有关,故可将故可将每次用量加大而给药次数减少每次用量加大而给药次数减少,n一一些些半半衰衰期期较较短短的的药药物物,一一般般应应参参照照半半衰衰期期长长短短在在一一天天内内多多次次给给药药,不不能能简简化化为为一一次次给给药药,否否则剂量将大大增加则剂量将大大增加,而使毒性增加。

而使毒性增加n有有些些半半衰衰期期特特别别长长的的药药物物按按半半衰衰期期给给药药,血血药药浓浓度度波波动动太太大大,所所以以,将将总总剂剂量量分分次次服服用用, 比比较较安全 负荷剂量加倍n关关于于负负荷荷剂剂量量为为维维持持量量的的2倍倍,其其原原理理已已讨论过讨论过n当当采采用用T=T1/2给给药药,用用首首次次剂剂量量加加倍倍法法可可收收到到迅迅速速控控制制病病情情之之效效,如如抗抗菌菌药药(磺磺胺胺、、土土霉霉素素））用用于于控控制制感感染染,苯苯妥妥英英钠钠用用于于控控制制心心律律失失常常等等,都都可可用用首首次次剂剂量量加加倍倍法 根据平均稳态血药浓度制订给药方案n对某一药物制剂对某一药物制剂,其其k、、V或或cl、、F基本上基本上恒定恒定,只能通过调节只能通过调节Xo或或τ,以达到治疗所以达到治疗所需平均稳态血药浓度的目的需平均稳态血药浓度的目的n如如果果药药物物治治疗疗血血药药浓浓度度范范围围很很窄窄,且且半半衰衰期期很很短短,为为了了不不使使血血药药浓浓度度波波动动太太大大,给给药药次次数数可可频频繁繁一一些些,可可超超过过每每天天4次次,但但这这类药物最好采用缓释剂型。

类药物最好采用缓释剂型使稳态血药浓度控制在一定浓度范围内的给药方案 根据最低稳态血药浓度制定给药方案例与肾衰病人的剂量调整n肾是肾是机体调整体液和电解质平衡，排除代谢废机体调整体液和电解质平衡，排除代谢废物和药物的重要器官物和药物的重要器官n肾功能减退不仅影响体内体液和电解质平衡，肾功能减退不仅影响体内体液和电解质平衡，而且会引起机体生理和代谢功能的变化，改变而且会引起机体生理和代谢功能的变化，改变药物的分布和蛋白结合以及药物消除，进而改药物的分布和蛋白结合以及药物消除，进而改变药物动力学性质和药效学变药物动力学性质和药效学n对于治疗指数较小的药物，如不进行剂量调整，对于治疗指数较小的药物，如不进行剂量调整，有可能发生药物中毒等不良反应有可能发生药物中毒等不良反应方法n1、根据患者的药物清除率和消除速度常根据患者的药物清除率和消除速度常数调整剂量数调整剂量n2、、Wagner法法n3、、Ritschel一点法一点法n4、重复一点法、重复一点法缓释、控释制剂的定义 n《《中中国国药药典典》》对对缓缓释释、、控控释释制制剂剂的的定定义义已已有有明明确规定确规定:n缓缓释释制制剂剂指指口口服服药药物物在在规规定定溶溶剂剂中中,按按要要求求缓缓慢慢地地非非恒恒速速释释放放,且且每每日日用用药药次次数数与与相相应应普普通通制制剂剂比比较较至至少少减减少少1次次或或用用药药间间隔隔时时间间有有所所延延长的制剂。

长的制剂n控控释释制制剂剂指指口口服服药药物物在在规规定定溶溶剂剂中中,按按要要求求缓缓慢慢地地恒恒速速或或接接近近恒恒速速释释放放,且且每每日日用用药药次次数数与与相相应应普普通通制制剂剂比比较较至至少少减减少少一一次次或或用用药药间间隔隔时时间有所延长的制剂间有所延长的制剂缓释、控释制剂的特点n1、、对对半半衰衰期期短短的的或或需需要要频频繁繁给给药药的的药药物物.可可以以减减少少服服药药次次数数,如如普普通通制制剂剂每每天天3次次,制制成成缓缓释释或或控控释释制制剂剂改改为为每每天天1次次这这样样可可以以大大大大提提高高病病人人服服药药的的顺顺应应性性,使使用用方方便便特特别别适适用用于于需需要要长长期期服服药药的的慢慢性性疾疾病的患者病的患者n2、、使使血血药药浓浓度度平平稳稳,避避免免峰峰谷谷现现象象,有有利利于降低药物的毒副作用于降低药物的毒副作用缓释、控释制剂的类型 n1.骨骨架架片片:有有亲亲水水凝凝胶胶骨骨架架片片(含含胃胃内内滞滞留留漂漂浮浮片片)、蜡质骨架片、不溶性骨架片）、蜡质骨架片、不溶性骨架片）n2.缓释或控释颗粒缓释或控释颗粒(或微囊或微囊)压制片压制片n3.缓释或控释胶囊缓释或控释胶囊(内含小丸或颗粒或小片内含小丸或颗粒或小片)n4.渗透泵控释片渗透泵控释片-n5.透皮给药系统透皮给药系统n6.避孕给药系统、植入剂、眼用控释膜剂避孕给药系统、植入剂、眼用控释膜剂.n7.脉冲式给药系统与自调式给药系统脉冲式给药系统与自调式给药系统缓释、控释制剂的设计 n药物的选择药物的选择n设计要求设计要求n缓、控制剂的剂量计算缓、控制剂的剂量计算n缓控制剂药物动力学模拟设计缓控制剂药物动力学模拟设计n缓、控制剂的处方与工艺设计缓、控制剂的处方与工艺设计药物的选择n缓缓释释、、控控释释制制剂剂一一般般适适用用于于半半衰衰期期较较短短的的药药物物,如如T1/2=2-8h半半衰衰期期小小于于1h或或大大于于24h的的,一一般不宜制成缓释、控释制剂。

般不宜制成缓释、控释制剂n其其他他如如剂剂量量很很大大的的、、药药效效甚甚剧剧的的以以及及溶溶解解吸吸收收很很差差的的药药物物,剂剂量量需需要要精精密密调调节节的的药药物物,一一般般也也不宜制成缓释或控释制剂不宜制成缓释或控释制剂n抗抗菌菌素素类类药药物物,由由于于其其抗抗菌菌效效果果依依赖赖于于峰峰浓浓度度,故一般不宜制成缓释、控释制剂故一般不宜制成缓释、控释制剂设计要求n1、生物利用度(bioavailability):缓释控释制剂的相对生物利用度一般应在普通制剂80%-120%的范围内n2、若该药物吸收部位主要在胃与小肠,宜设计每12h服1次,若药物在大肠也有一定吸收,则可考虑设计24小时服1次n3.峰浓度与谷浓度之比应等于或小于普通制剂, 制剂血药浓度平稳缓释、控释制剂的剂量计算 n关关于于缓缓释释、、控控释释制制剂剂的的剂剂量量,一一般般根根据据普普通制剂的用法和剂量通制剂的用法和剂量n可可采采用用药药物物动动力力学学方方法法进进行行计计算算,但但涉涉及及因因素素很很多多,如如人人种种因因素素,计计算算结结果果,仅仅供供参参考考缓释、控释制剂体外、体内评价 n体外释放度试验体外释放度试验(一一)溶出度试验方法溶出度试验方法1.转篮法转篮法(第一法第一法) 2.桨法桨法(第二法第二法)3.小杯法小杯法(二二)释放度试验方法释放度试验方法n1、可用溶出度测定第一法与第二法的装置、可用溶出度测定第一法与第二法的装置.n2、转瓶法、转瓶法n3、、流室法流室法释放试验的介质n溶溶出出介介质质及及pH常常用用人人工工胃胃液液、、人人工工肠肠液液,0.1mol/L盐盐酸酸,pH6.8的的磷磷酸酸缓缓冲冲液液或或pH4~8的的缓缓冲冲液液。

个个别别难难溶溶性性药药物物可可加加少少量量十十二二烷烷基基硫硫酸酸钠钠（（0.5%以以下下)、、异异丙丙醇醇、、乙乙醇醇(浓浓度度10%以以下下,不不得得超超过过30%),最最好好不不用用氢氢醇醇类类的的溶出介质溶出介质,如要使用应提供体内外相关依据如要使用应提供体内外相关依据n溶溶出出介介质质的的量量要要能能使使药药物物溶溶出出保保持持较较好好的的漏漏槽槽状状态态,一一般般要要求求不不少少于于形形成成药药物物饱饱和和溶溶液液的的量量的的3倍倍,并脱气试验安排与释放度标准n至少测定三个时间点至少测定三个时间点n1、、1-2小时，释放量控制在小时，释放量控制在15％％-40％％主要考察是否有突释主要考察是否有突释n2、、4-6小时，释放量控制在小时，释放量控制在50％％-70％％n3、、7-10小时，释放量控制在小时，释放量控制在70％以上，％以上，此点说明释药基本完全此点说明释药基本完全药物释入机制n扩散作用扩散作用n溶解作用溶解作用n渗透压作用渗透压作用n离子交换作用离子交换作用再见！谢谢大家！。