溴苯腈对小鼠肝组织能量代谢的影响及巯基化合物的干预.doc

急诊医学专业毕业论文 [精品论文] 溴苯腈对小鼠肝组织能量代谢的影响及巯基化合物的干预关键词：溴苯腈 线粒体 呼吸链复合物 能量代谢 N-乙酰半胱氨酸 二巯丙磺钠 反相-高效液相法摘要：目的： 1.探讨溴苯腈对小鼠离体肝组织线粒体呼吸链复合物Ⅰ～Ⅳ活性的影响 2.建立溴苯腈急性中毒模型，观察溴苯腈对小鼠肝组织能量代谢的影响，并探巯基化合物二巯丙磺钠(Na-DMPS)、N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC)对其的干预 方法： 1.差速离心法分离提取ICR小鼠肝组织线粒体，随机分成正常对照组与溴苯腈染毒组，每组6个样本，染毒组线粒体悬浮液加入终浓度为130 mg/L的97％溴苯腈原药，两组均于30℃培养箱内孵育0.5 h后，分光光度法测定肝组织离体线粒体呼吸链酶复合物Ⅰ～Ⅳ活性 2.ICR小鼠40只，每组8只，随机分成正常对照组(A组)、溴苯腈急性中毒组(B组)、Na-DMPS组(C组)、NAC组(D组)与NAC联用Na-DMPS(E组)组，用反相高效液相色谱(RP-HPLC)法测定各组小鼠肝组织腺苷酸ATP、ADP、AMP含量，并计算总腺苷酸(TAN)及细胞能荷(EC)值；电镜观察各组肝细胞线粒体超显微结构改变。

3.用SPSS13.0统计学软件进行分析，计量资料以均数士标准差(x±S)表示，多组间差异比较采用单因素方差分析，两组间差异比较采用t检验，P<0.05为差异有显著性意义 结果： 1.肝组织线粒体悬液体外溴苯腈染毒后，线粒体呼吸链复合物Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ活性较正常对照组明显降低(P<0.05)，呼吸链复合物Ⅱ活性有升高趋势，但差异无统计学意义(P>0.05) 2.与A组比较，B组小鼠肝组织ATP、TAN含量和EC水平均明显降低(P<0.05)，AMP含量均较A组升高(P<0.05) 3.与B组比较，药物干预组(C、D、E组)ATP含量、EC水平均明显升高(P<0.05)，AMP含量均明显下降(P<0.05)，E组TAN含量较B组明显升高(P<0.05)，C、D组TAN含量有升高趋势，但差异无统计学意义(P>0.05)；两药单用组(C组与D组)比较，各指标差异均无统计学意义(P>0.05)；两药联用组(E组)与C、D组比较，EC水平较C组升高(P<0.05)，较D组略高，但差异无统计学意义(P>0.05)，ATP、TAN含量有升高趋势，AMP含量有降低趋势，但差异均无统计学意义(P>0.05)。

4.B组肝细胞线粒体明显肿胀，线粒体嵴断裂，数量减少，甚至空泡化；药物干预组(C、D、E组)肝细胞线粒体病变均较B组明显减轻，表现为散在的肝细胞线粒体轻度肿胀 结论： 1.小鼠肝组织离体线粒体经溴苯腈染毒后，线粒体呼吸链复合物Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ活性降低，可能为溴苯腈急性中毒所致能量代谢障碍机制之一 2.小鼠溴苯腈急性中毒导致肝组织能量代谢障碍，可能为溴苯腈急性中毒肝组织损伤毒理机制之一 3.巯基化合物Na-DMPS、NAC单用及联用均可改善小鼠溴苯腈急性中毒所致的肝组织能量代谢障碍，对肝组织有较好的保护作用，以两者联用效果最佳 4.溴苯腈染毒后，小鼠肝细胞线粒体损伤较明显，经巯基化合物Na-DMPS、NAC单用及联用干预后，线粒体病变明显减轻，可能与其改善肝组织能量代谢障碍有关正文内容 目的： 1.探讨溴苯腈对小鼠离体肝组织线粒体呼吸链复合物Ⅰ～Ⅳ活性的影响 2.建立溴苯腈急性中毒模型，观察溴苯腈对小鼠肝组织能量代谢的影响，并探巯基化合物二巯丙磺钠(Na-DMPS)、N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC)对其的干预 方法： 1.差速离心法分离提取ICR小鼠肝组织线粒体，随机分成正常对照组与溴苯腈染毒组，每组6个样本，染毒组线粒体悬浮液加入终浓度为130 mg/L的97％溴苯腈原药，两组均于30℃培养箱内孵育0.5 h后，分光光度法测定肝组织离体线粒体呼吸链酶复合物Ⅰ～Ⅳ活性。

2.ICR小鼠40只，每组8只，随机分成正常对照组(A组)、溴苯腈急性中毒组(B组)、Na-DMPS组(C组)、NAC组(D组)与NAC联用Na-DMPS(E组)组，用反相高效液相色谱(RP-HPLC)法测定各组小鼠肝组织腺苷酸ATP、ADP、AMP含量，并计算总腺苷酸(TAN)及细胞能荷(EC)值；电镜观察各组肝细胞线粒体超显微结构改变 3.用SPSS13.0统计学软件进行分析，计量资料以均数士标准差(x±S)表示，多组间差异比较采用单因素方差分析，两组间差异比较采用t检验，P<0.05为差异有显著性意义 结果： 1.肝组织线粒体悬液体外溴苯腈染毒后，线粒体呼吸链复合物Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ活性较正常对照组明显降低(P<0.05)，呼吸链复合物Ⅱ活性有升高趋势，但差异无统计学意义(P>0.05) 2.与A组比较，B组小鼠肝组织ATP、TAN含量和EC水平均明显降低(P<0.05)，AMP含量均较A组升高(P<0.05) 3.与B组比较，药物干预组(C、D、E组)ATP含量、EC水平均明显升高(P<0.05)，AMP含量均明显下降(P<0.05)，E组TAN含量较B组明显升高(P<0.05)，C、D组TAN含量有升高趋势，但差异无统计学意义(P>0.05)；两药单用组(C组与D组)比较，各指标差异均无统计学意义(P>0.05)；两药联用组(E组)与C、D组比较，EC水平较C组升高(P<0.05)，较D组略高，但差异无统计学意义(P>0.05)，ATP、TAN含量有升高趋势，AMP含量有降低趋势，但差异均无统计学意义(P>0.05)。

4.B组肝细胞线粒体明显肿胀，线粒体嵴断裂，数量减少，甚至空泡化；药物干预组(C、D、E组)肝细胞线粒体病变均较B组明显减轻，表现为散在的肝细胞线粒体轻度肿胀 结论： 1.小鼠肝组织离体线粒体经溴苯腈染毒后，线粒体呼吸链复合物Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ活性降低，可能为溴苯腈急性中毒所致能量代谢障碍机制之一 2.小鼠溴苯腈急性中毒导致肝组织能量代谢障碍，可能为溴苯腈急性中毒肝组织损伤毒理机制之一 3.巯基化合物Na-DMPS、NAC单用及联用均可改善小鼠溴苯腈急性中毒所致的肝组织能量代谢障碍，对肝组织有较好的保护作用，以两者联用效果最佳 4.溴苯腈染毒后，小鼠肝细胞线粒体损伤较明显，经巯基化合物Na-DMPS、NAC单用及联用干预后，线粒体病变明显减轻，可能与其改善肝组织能量代谢障碍有关目的： 1.探讨溴苯腈对小鼠离体肝组织线粒体呼吸链复合物Ⅰ～Ⅳ活性的影响 2.建立溴苯腈急性中毒模型，观察溴苯腈对小鼠肝组织能量代谢的影响，并探巯基化合物二巯丙磺钠(Na-DMPS)、N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC)对其的干预 方法： 1.差速离心法分离提取ICR小鼠肝组织线粒体，随机分成正常对照组与溴苯腈染毒组，每组6个样本，染毒组线粒体悬浮液加入终浓度为130 mg/L的97％溴苯腈原药，两组均于30℃培养箱内孵育0.5 h后，分光光度法测定肝组织离体线粒体呼吸链酶复合物Ⅰ～Ⅳ活性。

2.ICR小鼠40只，每组8只，随机分成正常对照组(A组)、溴苯腈急性中毒组(B组)、Na-DMPS组(C组)、NAC组(D组)与NAC联用Na-DMPS(E组)组，用反相高效液相色谱(RP-HPLC)法测定各组小鼠肝组织腺苷酸ATP、ADP、AMP含量，并计算总腺苷酸(TAN)及细胞能荷(EC)值；电镜观察各组肝细胞线粒体超显微结构改变 3.用SPSS13.0统计学软件进行分析，计量资料以均数士标准差(x±S)表示，多组间差异比较采用单因素方差分析，两组间差异比较采用t检验，P<0.05为差异有显著性意义 结果： 1.肝组织线粒体悬液体外溴苯腈染毒后，线粒体呼吸链复合物Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ活性较正常对照组明显降低(P<0.05)，呼吸链复合物Ⅱ活性有升高趋势，但差异无统计学意义(P>0.05) 2.与A组比较，B组小鼠肝组织ATP、TAN含量和EC水平均明显降低(P<0.05)，AMP含量均较A组升高(P<0.05) 3.与B组比较，药物干预组(C、D、E组)ATP含量、EC水平均明显升高(P<0.05)，AMP含量均明显下降(P<0.05)，E组TAN含量较B组明显升高(P<0.05)，C、D组TAN含量有升高趋势，但差异无统计学意义(P>0.05)；两药单用组(C组与D组)比较，各指标差异均无统计学意义(P>0.05)；两药联用组(E组)与C、D组比较，EC水平较C组升高(P<0.05)，较D组略高，但差异无统计学意义(P>0.05)，ATP、TAN含量有升高趋势，AMP含量有降低趋势，但差异均无统计学意义(P>0.05)。

4.B组肝细胞线粒体明显肿胀，线粒体嵴断裂，数量减少，甚至空泡化；药物干预组(C、D、E组)肝细胞线粒体病变均较B组明显减轻，表现为散在的肝细胞线粒体轻度肿胀 结论： 1.小鼠肝组织离体线粒体经溴苯腈染毒后，线粒体呼吸链复合物Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ活性降低，可能为溴苯腈急性中毒所致能量代谢障碍机制之一 2.小鼠溴苯腈急性中毒导致肝组织能量代谢障碍，可能为溴苯腈急性中毒肝组织损伤毒理机制之一 3.巯基化合物Na-DMPS、NAC单用及联用均可改善小鼠溴苯腈急性中毒所致的肝组织能量代谢障碍，对肝组织有较好的保护作用，以两者联用效果最佳 4.溴苯腈染毒后，小鼠肝细胞线粒体损伤较明显，经巯基化合物Na-DMPS、NAC单用及联用干预后，线粒体病变明显减轻，可能与其改善肝组织能量代谢障碍有关目的： 1.探讨溴苯腈对小鼠离体肝组织线粒体呼吸链复合物Ⅰ～Ⅳ活性的影响 2.建立溴苯腈急性中毒模型，观察溴苯腈对小鼠肝组织能量代谢的影响，并探巯基化合物二巯丙磺钠(Na-DMPS)、N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC)对其的干预 方法： 1.差速离心法分离提取ICR小鼠肝组织线粒体，随机分成正常对照组与溴苯腈染毒组，每组6个样本，染毒组线粒体悬浮液加入终浓度为130 mg/L的97％溴苯腈原药，两组均于30℃培养箱内孵育0.5 h后，分光光度法测定肝组织离体线粒体呼吸链酶复合物Ⅰ～Ⅳ活性。

2.ICR小鼠40只，每组8只，随机分成正常对照组(A组)、溴苯腈急性中毒组(B组)、Na-DMPS组(C组)、NAC组(D组)与NAC联用Na-DMPS(E组)组，用反相高效液相色谱(RP-HPLC)法测定各组小鼠肝组织腺苷酸ATP、ADP、AMP含量，并计算总腺苷酸(TAN)及细胞能荷(EC)值；电镜观察各组肝细胞线粒体超显微结构改变 3.用SPSS13.0统计学软件进行分析，计量资料以均数士标准差(x±S)表示，多组间差异比较采用单因素方差分析，两组间差异比较采用t检验，P<0.05为差异有显著性意义 结果： 1.肝组织线粒体悬液体外溴苯腈染毒后，线粒体呼吸链复合物Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ活性较正常对照组明显降低(P<0.05)，呼吸链复合物Ⅱ活性有升高趋势，但差异无统计学意义(P>0.05) 2.与A组比较，B组小鼠肝组织ATP、TAN含量和EC水平均明显降低(P<0.05)，AMP含量均较A组升高(。