【最新word论文】肿节风挥发油对荷瘤小鼠化疗的增效减毒作用【药学专业论文】.doc

1肿节风挥发油对荷瘤小鼠化疗的增效减毒作用作者：吕圭源陈素红张园陈雁虹吕秀娟华波颜美秋【摘要】 ［目的］研究肿节风挥发油（SGE）对环磷酰胺（CTX）治疗H22、S180 小鼠的增效和减毒作用 ［方法］建立小鼠体内移植性肉瘤、肝癌模型，通过两种给药途径，观察肿节风挥发油与环磷酰胺联合用药对荷瘤小鼠抑瘤率的影响；观察 SGE 拮抗 CTX 引起血小板、白细胞及血红蛋白下降 ［结果］肿节风挥发油与 CTX 合用时，对肝癌 H22、肉瘤 S180 两种肿瘤均有不同程度的抑瘤增效作用CTX（10mg/kg 或 15mg/kg）分别联用 iv.SGE（36.6mg/kg） ，对小鼠 H22、S180 的抑瘤率均高于相应剂量的单用 CTX（P<0.05） ；CTX（20mg/kg）联用 ig.SGE（73.2mg/kg） ，对 H22 的抑瘤率高于单用CTX（P<0.05） 肿节风挥发油能明显拮抗 CTX 引起的血小板、白细胞下降（P<0.05～0.01） ［结论］肿节风挥发油能增强 CTX 的抗肿瘤作用，同时减轻 CTX 的毒性关键词】肿节风挥发油环磷酰胺增效减毒肿节风是金粟兰科草珊瑚属植物草珊瑚 Sarcandraglabra(Thunb.)Nakai 的干燥全草［1］ ，又名草珊瑚、九节茶、接骨木。

肿节风味苦、辛、性平，归心、肝经辛能行散，苦凉泄热，即除外侵之风湿，有解内蕴之热毒肿节风注射液具有抗肿瘤、抗菌消炎、抗病毒作用，适用于肌肉注射，其生产工艺以水煎煮提取，酒精沉淀去杂质临床前需要稀释，有可能造成二次污染为寻找新的抗癌增效、减毒剂，本课题组提取得到肿节风挥发油，通过 H22、S180 两种荷瘤模型，采用两种给药途径，观察与 CTX 联合应用对肿瘤的影响1 材料1.1 药物肿节风药材，浙江国镜药业有限公司；肿节风挥发油（SGE） ，取肿节风药材经水蒸气蒸馏法提取挥发油，临用前配制成剂量为1.83mg/ml、2.75mg/ml、3.66mg/ml；注射用环磷酰胺：江苏恒瑞医药股份有限公司，批号为 06070721；氯化钠注射液：国营张家港制药厂，批号 060615031.2 瘤株小鼠肉瘤 S180、小鼠肝癌 H22，浙江中医药大学生命科学院提供1.3 仪器 HeraeusBiofuge 冷冻离心机，德国 Heraeus；PowerWave340 酶标仪，美国 BioTek 1.4 动物昆明种小鼠，体重 18～22g，雌雄各半，浙江中医药大学动物中心提供，动物许可证号为 SCXK（沪）2003-0003。

2.方法22.1 两种给药途径对 CTX 的增效作用实验［2］动物分组：昆明种小鼠，体重 18～22g，随机分成 7 组①SGEiv：模型对照组（NS） 、两组单用 CTX1、2 组（10mg/kg、15mg/kg） ，另设 CTX+SGE1、2 组（10mg/kg、15mg/kg）分别加用SGE（18.3mg/kg、36.6mg/kg） ，每组 12 只小鼠模型对照组 iv 生理盐水，CTX组 ip.，SGE 给药组 iv.，0.1ml/10g，连续 12 天②SGEig：模型对照组（NS） 、两组单用 CTX 组（10mg/kg、20mg/kg） ，另设 CTX+SGE3、4 组（10mg/kg、20mg/kg）分别加用 SGE（18.3mg/kg、36.6mg/kg） ，每组 12 只小鼠模型对照组 ig 生理盐水，CTX 组 ip.，0.1ml/10g，SGE 给药组ig.，0.2ml/10g，连续 12d取昆明种小鼠 S180/H22 细胞腹腔内接种 8d 的种鼠，无菌条件下吸出 1～2ml 牛奶状、较粘稠的腹水，先用 0.4%苔盼蓝染色，计活细胞率>90%，血球计数板计数癌细胞数，以 DHanks 稀释调整细胞浓度为1×107 个/ml，每只小鼠 0.1ml 右前肢腋窝皮下接种。

于末次给药后的第 2 天脱处死小鼠，完整剥取瘤块，称重，比较单用 CTX 治疗组与联用 SGE 组间抑瘤率的差异，观察 SGE 的增效作用抑瘤率（%）=（对照组平均瘤重－给药组平均瘤重）/对照组平均瘤重×100%2.2SGE 对 CTX 致荷瘤小鼠血细胞下降的影响［3］取昆明种小鼠 60 只，随机分成 5 组，即正常对照组，模型对照组（CTX） ，SGE 剂量组（18.3mg/kg、27.5mg/kg、36.6mg/kg） ，每组 12 只除正常对照组外，各组动物均 ip.60mg/kgCTX，1 次/d，连续 7dSGE 组按照剂量 iv.，0.1ml/10g，于停药后 24h 自小鼠眼眶静脉取血，EDTAK2 抗凝，测白细胞数量、血小板数量、血红蛋白浓度2.3 统计学处理数据采用 t 检验，以 x±s 表示3 结果3.1SGEiv 给药与 CTX 合用对 S180 荷瘤小鼠增效的影响表 1 显示，与模型对照组比较，CTX 无论是单用还是与 SGE 合用，均能明显减小 S180 荷瘤小鼠的瘤重（P<0.05～0.01） 当 CTX（10mg/kg 或 15mg/kg）分别与SGE（36.6mg/kg）合用，其抑瘤率均较相应剂量的单用 CTX 升高（P<0.05） 。

CTX10mg/kg、15mg/kg 单用的抑瘤率分别为 45.24%、49.74%，联用SGE36.6mg/kg 的抑瘤率则分别为 68.13%、69.81%，提高抑瘤率为50.60%、40.34%结果表明肿节风挥发油 iv 给药与 CTX 合用对 S180 荷瘤小鼠具有增效作用表 1SGEiv 给药与 CTX 合用对 S180 荷瘤小鼠增效的影响（略）与模型对照组比较,*P<0.05,**P<0.01；与 CTX 组比较：△P<0.05,△△P<0.013.2SGEiv 给药与 CTX 合用对 H22 荷瘤小鼠增效的影响表 2 显示，与模型对3照组比较，CTX 无论是单用还是与 SGE 合用，均能明显减小 H22 荷瘤小鼠的瘤重（P<0.01） 当 CTX（10mg/kg 或 15mg/kg）分别与 SGE（36.6mg/kg）合用，其抑瘤率均较相应剂量的单用 CTX 升高（P<0.05） CTX10mg/kg、15mg/kg 单用的抑瘤率分别为 43.80%、40.91%，联用 SGE36.6mg/kg 的抑瘤率为59.93%、62.04%，提高抑瘤率为 36.83%、51.65%。

结果表明肿节风挥发油 iv 给药与 CTX 合用对 H22 荷瘤小鼠具有增效作用表 2SGEiv 给药与 CTX 合用对 H22荷瘤小鼠增效的影响（略）与模型对照组比较,*P<0.05,**P<0.01；与 CTX 组比较：△P<0.05,△△P<0.013.3SGEig 给药与 CTX 合用对 S180 荷瘤小鼠增效的影响表 3 显示，与模型对照组比较，CTX 无论是单用还是与 SGE 合用，均能明显减小 S180 荷瘤小鼠的瘤重（P<0.05～0.01） 当 CTX（10mg/kg 或 20mg/kg）分别与SGE（73.2mg/kg）合用，其抑瘤率均较相应剂量的单用 CTX 组有升高趋势CTX10mg/kg、20mg/kg 单用的抑瘤率分别为 44.47%和 56.33%，联用SGE73.2mg/kg 的抑瘤率则分别为 57.59%、69.34%，提高抑瘤率为29.50%、23.09%结果表明肿节风挥发油灌胃给药与 CTX 合用对 S180 荷瘤小鼠具有一定增效作用表 3SGEig 给药与 CTX 合用对 S180 荷瘤小鼠增效的影响（略）与模型对照组比较,*P<0.05,**P<0.01；与 CTX 组比较：△P<0.05,△△P<0.013.4SGEig 给药与 CTX 合用对 H22 荷瘤小鼠增效的影响表 4 显示，与模型对照组比较，CTX 无论是单用还是与 SGE 合用，均能明显减小 H22 荷瘤小鼠的瘤重（P<0.05～0.01） 。

当 CTX（20mg/kg）与 SGE（73.2mg/kg）合用，其抑瘤率较单用 CTX 明显升高（P<0.05） CTX10mg/kg、20mg/kg 单用的抑瘤率分别为37.80%、45.19%，联用 SGE73.2mg/kg 的抑瘤率则分别为 46.76%、57.48%，提高抑瘤率为 23.70%、27.19%结果表明肿节风挥发油灌胃给药与 CTX 合用对 H22荷瘤小鼠具有一定增效作用表 4SGEig 给药与 CTX 合用对 H22 荷瘤小鼠增效的影响（略）与模型对照组比较,*P<0.05,**P<0.01；与 CTX 组比较：△P<0.05,△△P<0.013.5SGE 对 CTX 致荷瘤小鼠血细胞下降的影响表 5 显示，与正常对照组比较，CTX（60mg/kg）组小鼠的 WBC、PLT、Hb 均显著下降（P<0.01） ；与 CTX 模型组比较，SGE（27.5mg/kg、36.6mg/kg）均能显著增加 WBC、PLT 数量（P<0.01～0.05） ；SGE（18.3mg/kg）能增加 PLT 数量（P<0.05） 结果表明肿节风挥发油能明显回升化疗药 CTX 所引起的白细胞、血小板下降，从而降低化疗药的毒性。

4表 5SGE 对 CTX 的减毒作用（略）与模型对照组比较,*P<0.05,**P<0.01；与 CTX 组比较：△P<0.05,△△P<0.014 讨论据 WHO 报告，目前全球每年新发的癌症病人约 1000 万，死亡 620 万预计未来 25 年内将有 3 亿新病历，有 1 亿死于肿瘤肿瘤已经成为人类的主要死亡原因之一化学治疗虽能直接杀伤肿瘤细胞，抑制肿瘤生长，但也引起许多不良反应，尤其对骨髓造血功能的抑制更为明显，使患者的血液细胞减少［4］ 如何提高肿瘤对化疗药物的敏感性并减轻化疗药物的不良反应是目前肿瘤治疗领域中越来越引起人们重视并值得探讨的问题对化疗中的减毒、增效作用不能孤立的看，而要将两者有机的结合起来使之相辅相成《中国药典》2005 年版记载：肿节风具有清热凉血，活血消斑，祛风通络等功效现代药理研究表明肿节风具有抗菌消炎、抑制流感病毒、抗肿瘤、镇痛等多种活性［5］ 肿节风抗肿瘤实验研究的文献报道至今已有 30 年的历史临床上肿节风主要用于胰腺癌、胃癌、直肠癌、食管癌及急性白血病［67］ 本实验采用两种肿瘤模型、两种给药途径，研究肿节风挥发油对 CTX 治疗肝癌H22、肉瘤 S180 的增效作用、以及对 CTX 所致白细胞减少的作用。

证明了肿节风挥发油能够提高 CTX 的抗肿瘤效果，并能拮抗 CTX 所引起的白细胞总数、血小板数量下降说明肿节风挥发油能够辅助化疗药物 CTX 增强抗肿瘤作用，同时减轻CTX 的毒性参考文献】［1］国家药典委员会.中华人民共和国药典［S］.北京:化学工业出版社，2005:154155.［2］李仪奎.中药药理实验方法学［M］.上海科学技术出版社，2006:777781.［3］赵诗云.肿节风对小鼠白细胞和血小板的影响［J］.上海实验动物科学,2000,20(3):154156.［4］高春义.蜂胶提取物对肿瘤化疗药物减毒作用的实验与临床研究［J］.中国生化药物杂志,2000,21(2):90．［5］孙文娟,李晶,兰凤英,等.肿节风注射液抗小鼠肝癌 HepA22 的作用5及毒理［J］.中成药,2003,25(4):313315.。