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不同ph值pbs配制.doc

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  • 卖家[上传人]:自***
  • 文档编号:79203040
  • 上传时间:2019-02-16
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    • PBS缓冲液的配制PBS是最普遍不过的实验室缓冲液,但其配方各异以下是总结: 母液的配制: 0.2M Na2HPO4:称取 71.6g Na2HPO4-12H2O,溶于 1000ml 水0.2M NaH2PO4:称取 31.2g NaH2PO4-2H2O,溶于1000ml 水各种浓度PB(pH=7.4)的配制:先配 0.2M PB (pH=7.4,100ml):取19ml 0.2mol/L的 NaH2PO4, 81ml 0.2mol/L 的 Na2HPO4, 即可然后 只需将0.2M PB (pH=7.4)按相应比例适当稀释 即可,如:0.1M PB(PH=7.4) :取 500ml 0.2M PB,加水稀释至 1000ml 即可0.01M PB (PH=7.4):取50ml 0.2M PB,加水稀释至 1000ml 即可0.02M PB (PH=7.4):取100ml 0.2 M PB,加水稀释至 1000ml 即可 若需要 NaCl的话,加入 NaCl 至0.9%(g/100ml)即可 另:其它各种另 PH值的 0.2M PB(100ml)配方 :pH       0.2M NaH2PO4(ml)         0.2M Na2HPO4(ml)5.7             93.5                          6.55.8             92                             8            5.9             90                             106.0             87.7                          12.36.1             85                             156.2             81.5                          18.56.3             77.5                          22.56.4             73.5                          26.56.5             68.5                          31.56.6             62.5                          37.56.7             56.5                          43.56.8             51                            496.9              45                           557.0              38                           627.1              33                           677.2             28                            727.3              23                           777.4              19ml                         81ml7.5              16                           847.6              13                           877.7             10.5                          0.57.8              8.5                          91.57.9             7                              938.0             5.3                           94.70.01M 磷酸盐缓冲液(PBS)配制方法称取8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4,溶于800ml蒸馏水中,用HCl调节溶液的pH值至7.4,最后加蒸馏水定容至1L即可。

      在15lbf/in2(1034×105Pa)高压下蒸气灭菌(至少20分钟),保存存于室温或4℃冰箱中需要注意的是,通常所说的浓度0.01M 指的是缓冲溶液中所有的磷酸根浓度,而非Na 离子或K 离子的浓度,Na 离子和K 离子只是用来调节渗透压的如果是用于免疫组化的话,则需要在配置的时候分别加入100 u/ml青霉素和链霉素之后再调PH、定容、灭菌消毒PBS是磷酸缓冲液的简称,不仅伪狂犬病毒要用它稀释,一般的有活性的生物制剂都要用它来稀释,原因就是它具有盐平衡、可调整的适宜pH缓冲作用,蒸馏水不具有盐平衡作用,可以破坏生物蛋白的结构及生物特性;生理盐水不具有调整pH的作用,对完整的、具有活性的物质不能保证其在最适条件下参与生物反应,所以使用PBS是首选 PBS也不是万能的,有的生物活性物质需要的条件比PBS还要高,就需要在平衡缓冲液中加入更多的成分,维持最佳的条件保证生物活性物质保持其最完整的特性文献查得:磷酸缓冲液(PBS):NaCl 8.0g,KH2PO4 0.2g,Na2HPO4 2.9g,KCl 0.2g,重蒸水1000mL,调pH至7.4。

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