
不同ph值pbs配制.doc
2页PBS缓冲液的配制PBS是最普遍不过的实验室缓冲液,但其配方各异以下是总结: 母液的配制: 0.2M Na2HPO4:称取 71.6g Na2HPO4-12H2O,溶于 1000ml 水0.2M NaH2PO4:称取 31.2g NaH2PO4-2H2O,溶于1000ml 水各种浓度PB(pH=7.4)的配制:先配 0.2M PB (pH=7.4,100ml):取19ml 0.2mol/L的 NaH2PO4, 81ml 0.2mol/L 的 Na2HPO4, 即可然后 只需将0.2M PB (pH=7.4)按相应比例适当稀释 即可,如:0.1M PB(PH=7.4) :取 500ml 0.2M PB,加水稀释至 1000ml 即可0.01M PB (PH=7.4):取50ml 0.2M PB,加水稀释至 1000ml 即可0.02M PB (PH=7.4):取100ml 0.2 M PB,加水稀释至 1000ml 即可 若需要 NaCl的话,加入 NaCl 至0.9%(g/100ml)即可 另:其它各种另 PH值的 0.2M PB(100ml)配方 :pH 0.2M NaH2PO4(ml) 0.2M Na2HPO4(ml)5.7 93.5 6.55.8 92 8 5.9 90 106.0 87.7 12.36.1 85 156.2 81.5 18.56.3 77.5 22.56.4 73.5 26.56.5 68.5 31.56.6 62.5 37.56.7 56.5 43.56.8 51 496.9 45 557.0 38 627.1 33 677.2 28 727.3 23 777.4 19ml 81ml7.5 16 847.6 13 877.7 10.5 0.57.8 8.5 91.57.9 7 938.0 5.3 94.70.01M 磷酸盐缓冲液(PBS)配制方法称取8g NaCl、0.2g KCl、1.44g Na2HPO4和0.24g KH2PO4,溶于800ml蒸馏水中,用HCl调节溶液的pH值至7.4,最后加蒸馏水定容至1L即可。
在15lbf/in2(1034×105Pa)高压下蒸气灭菌(至少20分钟),保存存于室温或4℃冰箱中需要注意的是,通常所说的浓度0.01M 指的是缓冲溶液中所有的磷酸根浓度,而非Na 离子或K 离子的浓度,Na 离子和K 离子只是用来调节渗透压的如果是用于免疫组化的话,则需要在配置的时候分别加入100 u/ml青霉素和链霉素之后再调PH、定容、灭菌消毒PBS是磷酸缓冲液的简称,不仅伪狂犬病毒要用它稀释,一般的有活性的生物制剂都要用它来稀释,原因就是它具有盐平衡、可调整的适宜pH缓冲作用,蒸馏水不具有盐平衡作用,可以破坏生物蛋白的结构及生物特性;生理盐水不具有调整pH的作用,对完整的、具有活性的物质不能保证其在最适条件下参与生物反应,所以使用PBS是首选 PBS也不是万能的,有的生物活性物质需要的条件比PBS还要高,就需要在平衡缓冲液中加入更多的成分,维持最佳的条件保证生物活性物质保持其最完整的特性文献查得:磷酸缓冲液(PBS):NaCl 8.0g,KH2PO4 0.2g,Na2HPO4 2.9g,KCl 0.2g,重蒸水1000mL,调pH至7.4。
