博落回生物碱凝胶剂的制备研究.doc

1博落回生物碱凝胶剂的制备研究作者：田晶，郁建平，葛永辉，齐柳娅【摘要】 目的采用正交设计优化博落回总生物碱凝胶剂的处方工艺方法利用卡波姆为主要辅料制备博落回总生物碱凝胶剂考察卡波姆 940，聚乙二醇 600，甘油，吐温 80 对博落回总生物碱凝胶剂的综合外观评分以及体外释放的影响结果取博落回总生物碱 2%，卡波姆 940 2%，聚乙二醇 600 5%，甘油 5%，吐温-80 1%，用三乙醇胺调 pH 至 6～7，可制成黄色透明状半固体凝胶剂结论用正交法优选制备出的凝胶均匀细腻，稠度适宜，涂展性及体外释药性较好 【关键词】 博落回生物碱; 凝胶剂; 卡波姆; 体外释放博落回 Macleaya cordata (Willd) R.Br 系罂粟科博落回属植物，在我国分布广泛，资源丰富其性寒，味辛、苦涩，有清热解毒、抗菌消炎、杀虫止痒等功效民间也有直接用博落回煎煮外敷用于治疗湿疹以及真菌感染[1]郁建平等[2]研究了博落回中的生物碱对黄曲霉、黑曲霉、木霉、青霉、根霉、米曲霉、毛霉和酵母 8 种真菌的抑菌作用，结果表明其生物碱对 8 种真菌均有不同程度的抑制作用，其中盐酸血根碱的抗菌效力较强，抗菌谱广。

我们从博落回中分离得到的生物碱，经药效学实验证实，对皮癣真菌具有一定的抑制作用，将其制成中药凝胶剂用于皮癣真菌引起的皮肤病，有一定的新颖性和实用性本文采用新型药用辅料卡波姆 940 研制了博落回中总生物碱凝胶剂，并考察了其体外释药性质1 仪器与药品21.1 仪器紫外分光光度仪 TU-1901(北京普析通用仪器有限责任公司);旋转蒸发仪(上海亚荣生化仪器厂);1004 电子分析天平(上海天平仪器厂);立式扩散池(自制);pH 复合电极 (上海精密科学仪器有限公司);微孔滤膜 0.45 μm(上海市新亚净化器件厂);E-201-C78-1 型磁力加热搅拌器(江苏大地自动化仪器厂)1.2 药品博落回生物碱(实验室自制，纯度约为 70%);博落回生物碱凝胶剂(实验室自制);卡波姆 940(安徽山河药用辅料有限公司);聚乙二醇 600(天津市东和盛泰化工商贸有限公司);甘油(湖南尔康制药有限公司);三乙醇胺(天津市科沃化工有限公司);吐温 80(广州凌飞化工有限公司)Sprague-Dawiey(SD)大鼠，SPF 级，雄性，体质量 200～240 g，由重庆腾鑫生物技术有限公司提供2 方法与结果2.1 含量测定方法[3]精密称取血根碱盐酸盐对照品约 3.5 mg，加 95%乙醇定容至 100 ml，分别精密称取 1.0，2.0，3.0，4.0，5.0，6.0ml 置于 20 ml 容量瓶中，加95%乙醇至刻度，摇匀，制成 1.75～10.5 μg/ml 的梯度溶液，用紫外可见分光光度计在 284 nm 波长测定吸光度，绘制血根碱盐酸盐 95%乙醇溶液的标准曲线，得到回归方程 Y=0.070 2X+0.003 3, r=0.999 9。

根据标准曲线计算博落回生物碱凝胶剂中总生物碱的含量2.2 博落回生物碱凝胶剂的制备2.2.1 基本处方和制备工艺[4～7]取卡波姆 940 适量，加入蒸馏水浸泡，搅拌使其溶胀成均匀糊状，再分别加入适量尼泊金乙酯，吐温-80，滴加三乙醇胺调节pH 至 6.0～8.0(作为空白基质备用)另外称取博落回生物碱约 2 g，加入 PEG-3600，甘油使其溶解后加入空白基质中，加水至 100 g，搅拌即得 2.2.2 体外药物释放度考察[8]选用处理好的大鼠皮作为凝胶剂中药物释放度测定用膜，将大鼠皮用 502 胶固定于立式扩散池之间，准确称取卡波姆空白凝胶剂 1.0 g 均匀涂于大鼠皮上，接收池中加入 12.5 ml 的 20 %的 PEG-600 生理盐水溶液，恒温水浴为32 ℃，持续搅拌下，于第 12 h 取出接收池中全部滤液，用 0.45 μm 微孔滤膜过滤后，在 284 nm 波长处测定吸光度，用 20%的 PEG-600 生理盐水做空白对照，反复测定 4 次，其吸光度为 0说明卡波姆 940 空白凝胶剂对博落回生物碱的紫外测定没有影响另取同样立式扩散池，供体池中加入准确称量的博落回凝胶剂 1.0 g，接收池中加入 12.5 ml PEG-600 生理盐水溶液，恒温水浴为 32 ℃,持续搅拌下，分别于 1，2，3，4，6，12 h 取出接收池中适量溶液(立即补充等体积 32 ℃ 20%的PEG-600 生理盐水溶液)，用 0.45 μm 微孔滤膜过滤后，在 284 nm 波长测定吸光度，根据回归方程计算浓度，从而计算出药物累积释放百分率。

2.2.3 正交实验设计将吐温-80 分为 0.5 %，0.8 %，1 % 3 个水平，甘油分为 1 %，3 %，5 %等 3 个水平，卡波姆 940 分为 1.5 %，2 %，2.5 % 3 个水平， PEG-600分为 5 %，10 %，15 % 3 个水平，制成凝胶将吐温 80，甘油，卡波姆，PEG-600，按 4 因素 3 水平进行正交实验因素水平见表 1表 1 正交因素水平2.2.4 正交实验结果及分析按照“2.2.2”项下的方法，考察不同处方药物的体外药物释放度，观察期外观性状，对其综合评分进行直观分析结果见表 2，方差分析结果见表 3通过 R 值直观分析对该工艺影响的因素程度为 ABDC，较优的处方条件为 A3B2C1D3,由方差分析结果可知，B、C、D 没有显著性影响，综合考虑，最佳处方为吐温-80 1 %，甘油 5 %，卡波姆 2 %，PEG-600 5 %42.2.5 工艺验证取卡波姆 940 2 g，加入三蒸水 80 ml，浸泡，搅拌使其溶胀成均匀糊状，滴加三乙醇胺调节 pH 约为 7另取博落回总生物碱 2 g，加入甘油 5g 以及 PEG-600 5 g 使其溶解后加入空白基质中，最后加入吐温-80 1 g。

以及羟苯乙酯 0.2 g，补加三蒸水至 100 g，搅拌均匀所得凝胶为黄色透明状半固体物质，均匀细腻，稠度适宜，涂展性好，体外释放较好，按照“2.2.2”项下的方法测定药物释放度结果见表 4表 2 正交实验直观分析结果表 3 正交实验方差分析结果表 4 博落回总生物碱凝胶体外药物释药百分率测定结果3 讨论在博落回生物碱凝胶剂的制备过程中，采用了新型的高分子药用辅料卡波姆，其具有优良的流变学性质与增湿、润滑能力，对皮肤和粘膜没有刺激性，在皮肤上铺展性良好用卡波姆制备的凝胶剂具有易涂洗、表观均匀等优点卡波姆短流变性、高粘度、高清澈度，低耐离子性及耐剪切性，性质稳定，不氧化，不水解，耐高温，用其制备凝胶剂，工艺简单，稳定性好因此卡波姆适合皮肤局部用药凝胶剂的制备本文用正交实验法筛选出了外观均匀，粘度适宜的博落回总生物碱凝胶的最优处方但是制备的凝胶在放置过程中，由于卡波姆分子的充分膨胀，以及其它辅料的吸湿性，若不注意妥善保存，则会出现一定的吸潮现象博落回生物碱凝胶剂在 20 %的 PEG-600 生理盐水溶液中的药物释放度与吐温-80 的量，以及卡波姆膨胀程度有关卡波姆可与碱性药物生成盐并形成可溶性凝胶发挥缓释作用，药物的释放在 4 h 后明显加快。

参考文献】[1] 宋有林. 博落回酊剂治疗手足股癣 30 例[J]. 中医外治杂志， 2000，5：41.5[2] 郁建平，赵东亮，孟祥斌，等. 博落回生物碱对 8 种真菌的抑菌作用[J]. 山地农业生物学报，2006，25(1)：89.[3] 林 平，赵世萍. 博落回总生物碱的紫外分光光度测定法[J]. 中国中药杂志，1989，14(3)：39.[4] 刘红霞. 药用辅料速查手册，第 1 版 [M]. 北京：化学工业出版社，2007：92.[5] 吕 乐. 皮肤外用软膏基质变更的考察因素[J]. 中国新药杂志，2008，17(12)：1085.[6] 张国友，宜 艳. 阿奇霉素凝胶的制备和质量控制[J]. 中国药师，2003，6(4)：207.[7] 张国雨，金 青，崔 波，等. 盐酸小檗碱透皮吸收软膏剂处方的筛选[J]. 齐鲁药事，2007，26(17)：677.[8] 刘建文. 药理实验方法学—新技术与新方法，第 2 版[M].北京：化学工业出版社，2008：410.。