基因重组和基因工程.doc

第十七章 基因重组和基因工程一、单项选择题1.限制性核酸内切酶切割DNA后产生 A. 5′磷酸基和3′羟基基团的末端 B. 5′磷酸基和3′磷酸基团的末端 C. 5′羟基和3′羟基基团的末端 D. 3′磷酸基和5′羟基基团的末端 E. 以上都不是 2. 可识别并切割特异DNA序列的酶是 A. 非限制性核酸外切酶 B. 限制性核酸内切酶 C. 限制性核酸外切酶 D. 非限制性核酸内切酶 E. DNA酶3. 有关限制性核酸内切酶，以下哪个描述是错误的？A. 识别和切割位点通常是4～8个bp长度 B. 大多数酶的识别序列具有回文结构C. 在识别位点切割磷酸二酯键 D. 只能识别和切割原核生物DNA分子 E. 只能切割含识别序列的双链DNA分子4. 在重组DNA技术中催化形成重组DNA分子的酶是 A. 解链酶 B. DNA聚合酶 C. DNA连接酶 D. 内切酶 E. 拓扑酶 5. 对基因工程载体的描述，下列哪个不正确？A. 可以转入宿主细胞 B. 有限制酶的识别位点 C. 可与目的基因相连 D. 是环状DNA分子 E. 有筛选标志6. 克隆所依赖的DNA载体的最基本性质是 A. 卡那霉素抗性 B. 青霉素抗性 C. 自我复制能力 D. 自我表达能力 E. 自我转录能力 7. 重组DNA技术中常用的质粒DNA是 A. 病毒基因组DNA的一部分 B. 细菌染色体外的独立遗传单位 C. 细菌染色体DNA的一部分 D. 真核细胞染色体外的独立遗传单位 E. 真核细胞染色体DNA的一部分 8. 下列哪种物质一般不用作基因工程的载体？A. 质粒 B. 噬菌体 C. 哺乳动物的病毒 D. 逆转录病毒ＤＮＡE. 大肠杆菌基因组9. 关于pBR322质粒描述错误的是 Ａ．有一些限制酶的酶切位点 Ｂ．含有1个ori.Ｃ．含有来自大肠杆菌的lacZ基因片段 Ｄ．含个氨卞青霉素抗性基因Ｅ．含四环素抗性基因。

10. 以ｍＲＮＡ为模板催化ｃＤＮＡ合成需要下列酶 A. RNA聚合酶 B. DNA聚合酶C. Klenow片段 D. 逆转录酶 E. ＤＮＡ酶11. 催化聚合酶链反应需要下列酶 A. RNA聚合酶 B. DNA聚合酶C. TaqDNA聚合酶 D. 逆转录酶 E.限制性核酸内切酶12. 关于ＰＣＲ的描述下列哪项不正确？A. 是一种酶促反应 B. 引物决定了扩增的特异性 C. 扩增产物量大 D. 扩增的对象是ＤＮＡ序列E. 扩增的对象是RNA序列13. 在基因工程中，DNA重组体是指A. 不同来源的两段DNA单链的复性 B. 目的基因与载体的连接物C. 不同来源的DNA分子的连接物 D. 原核DNA与真核DNA的连接物E. 两个不同的结构基因形成的连接物14. 基因工程操作中转导是指 A. 把重组质粒导入宿主细胞 B. 把DNA重组体导入真核细胞C. 把DNA重组体导入原核细胞 D. 把外源DNA导入宿主细胞E. 以噬菌体或病毒为载体构建的重组DNA导入宿主细胞15. 重组DNA的筛选与鉴定不包括哪一方法 A. 限制酶酶切图谱鉴定 B. PCR扩增鉴定C. 显微注射 D. 蓝白筛选E.　抗药筛选二、多项选择题1. 在分子克隆中，目的DNA可来自A.原核细胞染色体DNA B.真核细胞染色体DNAC.人工合成的DNA D.聚合酶链反应E.真核细胞mRNA反转录获得的cDNA2. 重组DNA技术基本过程包括 A.目的基因的获取 B.克隆载体的构建C.目的DNA与载体的连接 D.将重组体导入受体菌E.重组DNA分子转化受体菌的筛选3. 分子克隆又称A.基因克隆 B.DNA克隆C.单克隆抗体制备 D.构建基因组DNA文库E. 基因重组 4. 参与聚合酶链反应体系的组分有 A. DNA引物 B. 目的DNAC. 三磷酸脱氧核苷 D. Taq DNA聚合酶E. RNA聚合酶5．从基因组DNA文库或cDNA文库分离、扩增某一感兴趣基因的过程就是A.基因克隆 B.分子克隆C.DNA克隆 D.构建基因组DNA文库E.重组DNA技术6. 可用作克隆基因载体的DNA有A.细菌质粒DNA B.真核细胞基因组DNAC.病毒DNA D.酵母人工染色体E.噬菌体DNA7．将重组DNA分子导入受体细菌的方法有A.接合 B.转座 C.感染 D.转染 E.转化8．转染真核细胞的方法有A. 磷酸钙共沉淀法 B. 电穿孔C. DEAE葡聚糖法 D. 脂质体载体法E. 显微注射法9．下述操作可能用于基因工程过程的是Ａ．DNA的制备和酶解 Ｂ．不同来源DNA的拼接Ｃ．重组DNA导入受体细胞 Ｄ．细菌的生长和繁殖Ｅ．核酸分子杂交10．关于质粒DNA的叙述正确的是A.是基因组DNA的组成部分 B.具有独立复制功能C.含有抗生素抗性基因 D.含有感兴趣的目的DNAE.具有编码蛋白质的功能三、填空题１、DNA重组技术主要涉及两大核心技术：　　　和　　　。

２、一个完整的基因克隆过程应包括：目的基因的获取， _________ 的选择与改造， _________ 的连接，重组 DNA 分子 受体细胞， 出含感兴趣基因的重组 DNA 转化细胞 ３、限制性核酸内切酶是由________产生的一类识别 _____ ，并在识别位点切割　　　键的核酸内切酶 ４、科学家感兴趣的外源基因又称 _____ ，其来源有_____、_____、_____、_____等几种途径５、常用的目的基因与载体连接的方式有_____、_____、_____、_____ ６、根据采用的克隆载体性质不同，将重组 DNA 分子导入细菌的方法有___ 、 ___等 ７、基因组文库含有组织或细胞的____信息，cDNA文库含有组织或细胞的____信息8、 载体的本质是 ，它应具备下列基本条件： 、 、 、 和 四、名词解释 1. 基因工程　 　2. DNA重组　　 3. 克隆　 4. DNA克隆　5. 目的基因 6. 基因载体　　 7. 质粒　　 8. 限制性核酸内切酶　9. 基因文库　　 10. cDNA文库 11. 转化　　　 12. 转导13. 转染五、问答题１. 载体应具备以下基本条件２. 常用的工具酶有哪些？其主要用途是什么？３. 重组DNA技术常包括哪些基本步骤：４. 常用的目的基因的获取方法有哪些？５. 常用的目的基因与载体的连接方法有哪些？５. 何谓限制性核酸内切酶？写出大多数限制性核酸内切酶识 DNA 序列的结构特点。

６. 解释质粒，为什么质粒可作为基因载体参考答案 一、单项选择题1.Ａ 　2.Ｂ　 3.Ｄ 4.Ｃ 5.Ｄ 6.Ｃ 7.Ｂ 　8.Ｅ 　9.Ｃ　 10.Ｄ　11.Ｃ　12.Ｅ　13.Ｂ　14.E　15.Ｃ二、多项选择题1.Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ　2.Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ 　3.Ａ、Ｂ、Ｅ 　4.Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ5.Ａ、Ｂ、Ｃ　 6.Ａ、Ｃ、Ｄ、Ｅ　 7.Ｃ、Ｄ、Ｅ　 8.Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ9.Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ、Ｅ　　10.Ｂ、Ｃ　三、填空题１． DNA重组、克隆２． 载体、目的基因与载体、导入、筛选３． 细菌、双链DNA中的特定碱基序列、磷酸二酯４． 目的基因、制备基因组文库、构建cDNA文库、PCR扩增、人工合成DNA技术５． 黏性末端连接、平头末端连接、人工接头法、同源多聚尾连接法６． 转化、转导７． DNA、 mRNA8． DNA、具有独立复制能力、具有多克隆位点、具有筛选标志、具有足够的容量、能导入受体细胞四、名词解释 1、是指在体外将DNA分子“剪切”并重新“拼接”形成一个新的重组DNA分子，然后将它导入细菌或动物细胞内使之表达，产生出人类所需要的基因产物或改造新的生物品种。

2、是指用酶学方法将不同来源的DNA进行切割、连接，组成一个新的DNA分子的过程3、克隆(clone)原指一个亲本细胞经无性繁殖产生无数个相同细胞的子代群体的过程4、是指将重组DNA分子导入到合适的受体细胞中，使其扩增和繁殖，以获得大量的相同的DNA分子，又称分子克隆或基因克隆5、要分离和克隆的相应基因常称为目的基因因目的基因片段需插入载体，导入宿主细胞内进行复制或表达，所以对宿主细胞DNA而言，又称它为外源性基因或外源性DNA6、能够携带外源DNA进入受体细胞内进行复制或表达的DNA分子，被称为基因载体7、是独立于。