血清α-淀粉酶活性的测定(迈克).ppt

血清α-淀粉酶（AMS或AMY）活性 的测定 Reagent for α- Amylase Testn一、原理n二、测定方法n三、参考值n四、临床意义n五、注意事项n六、方法学评 价一、原理：n样品中α-淀粉酶（1，4-α-D-葡萄糖水解酶，又 称淀粉内切酶，对1，4-糖苷键连接的葡萄糖有 特异性催化淀粉分子及糖原中的α-1，4葡萄 糖苷键水解，产生葡萄糖、麦芽糖及含有α-1，6 糖苷键支链的糊精，在淀粉（已知浓度）充分的 条件下，反应后加入碘液与未被水解的淀粉结合 成蓝色复合物，其颜色的深浅与未经酶促反应的 空白管比较，从而推算出淀粉酶的活力n注：1、生物界存在α和β两种淀粉酶，但人体内 仅有α-淀粉酶n 2、淀粉酶分子量40000 ~ 50000,很易由肾 排出二、测定步骤： n各管混匀， 660nm波长，以蒸馏水调零 ，测定各管吸光度值试 剂 测定（U） 空白（B）样 品 （ml） 0.02 —蒸馏水 （ml） — 0.02试剂 R1（ml） 1.00 1.00各管混匀，置37度水浴7.5分钟。

试剂 R2（ml） 1.00 1.00蒸馏水 （ml） 5.00 5.00 2、计算：n 注：淀粉浓度 0.4g/L n样品AMY活力（苏氏单位）=n样品AMY活力（苏氏单位)=注解n①0.4——淀粉浓度n②5.0—— 1单位定义消耗淀粉mg数n③15 —— 1单位定义反应时间n④7.5 —— 酶的实际作用时间n⑤100—— 1单位定义用血清n⑥0.02—— 样品取量3、AMY活性单位定义：n100ml血清中的淀粉酶在37℃， 15分钟水解5mg淀粉为1个单位4、半自动生化仪的使用n①测定法：终点法n②温 度：37℃n③波 长：623nmn④吸 量：1000 μln⑤参考范围：60~180Un⑥线性范围：0~400U三、参考值：血清：60~180U苏氏单位n尿液：100 ~ 1200U苏氏单位四、临床意义：n 淀粉酶主要由胰腺和唾液腺分泌，肺 、肝、甲状腺、脂肪等组织亦含有此酶 血清淀粉酶测定主要用于急性胰腺炎的诊 断一般于发病后6~12h开始升高， 12~24h达峰值，2~5d恢复正常，因此血 清淀粉酶活性显著升高对急性胰腺炎的早 期诊断价值较大。

淀粉酶可通过肾小球滤 过，尿淀粉酶于发病后12~24h开始升高 ，持续时间长，下降比血清淀粉酶慢，故 胰腺炎后期测尿淀粉酶更有价值慢性胰腺炎、胰腺癌、急性阑尾炎 、溃疡性穿孔、肠梗阻、流行性腮腺炎 、唾液腺化脓等血清淀粉酶均可升高 肾功能障碍时，血清淀粉酶升高，尿淀 粉酶降低各种肝病患者，血、尿淀粉 酶同时降低五、注意事项：n1、样品为不溶血的血清、血浆或尿液（pH值 应调至7.0）样品应在低温条件下运输保存，血 清或血浆中淀粉酶2~8℃可稳定30天，室温可 稳定7天n2、如果样品中AMY活力大于400苏氏单位或测 定管吸光度小于空白管吸光度一半时，应将样 品稀释后再进行测定，测定结果乘以稀释倍数 n3、加入显色剂及蒸馏水后，应立即比色，否则 可致结果偏高使用血浆时应选用肝素抗凝n4、如遇黄疸、溶血或乳糜标本时应作样品空白 六、方法学评价1.淀粉遇碘呈蓝色反应属有机化学的经典 型反应，方法可靠，反应特异性高 2.线性范围：0~400苏式单位（U/L） 3.精密度：批内CN≤10% 4.准确度：不准确度≤20% 5.空白吸光度：空白管在660nm波长处， 10mm光径，吸光度≥0.45。