实验五激素对血糖浓度的影响ppt课件.ppt

实验五激素对血糖浓度的影响血糖平衡血糖平衡人体内血糖的来源和去路人体内血糖的来源和去路食物中的糖类食物中的糖类 消化、吸收消化、吸收肝糖原肝糖原分解分解脂肪等非糖物质脂肪等非糖物质转化转化血糖3.89~6.11mmol/LCO2+H2O+能量能量氧化分解氧化分解肝糖原、肌糖原肝糖原、肌糖原合成合成脂肪、某些氨基酸等脂肪、某些氨基酸等转变转变血糖：指血液中葡萄糖血糖：指血液中葡萄糖血糖维持在恒定程度血糖维持在恒定程度⑴⑴调理血糖程度的激素：胰理血糖程度的激素：胰岛素、胰高血糖素、糖皮素、胰高血糖素、糖皮质激素和激素和肾上腺素⑵⑵胰胰岛素和素和肾上腺素是上腺素是调理血糖理血糖浓度的两种重要激素，度的两种重要激素，前者使血糖前者使血糖浓度降低，后者使血糖度降低，后者使血糖浓度升高 ⑶⑶血糖程度异常：血糖程度异常：⑴⑴高血糖及糖尿病；高血糖及糖尿病； ⑵⑵低血糖低血糖实验目的实验目的 掌握葡糖糖氧化酶法〔掌握葡糖糖氧化酶法〔GOD-POD〕测定血糖〕测定血糖的原理及方法的原理及方法 察看胰岛素、肾上腺素对血糖浓度的影响察看胰岛素、肾上腺素对血糖浓度的影响 了解家兔耳缘静脉取血的方法了解家兔耳缘静脉取血的方法血糖血糖测定的常用方法定的常用方法测定方法测定方法无机化学法：无机化学法： Folin-Wu法法有机化学法：邻甲苯胺法有机化学法：邻甲苯胺法酶法：葡萄糖氧化酶法酶法：葡萄糖氧化酶法二、实验原理葡萄糖氧化酶法红色的醌类化合物颜色深浅在一定范围内与葡萄糖浓度成正比，在红色的醌类化合物颜色深浅在一定范围内与葡萄糖浓度成正比，在505nm505nm处测定吸光度，与规范管比较可计算出血糖的浓度。

处测定吸光度，与规范管比较可计算出血糖的浓度规范管法规范管法 A标标=C标标KLA测测=C测测KLC测测=A标标A测测×C标待待测测I0规规范范I0A测测A标标C测测三、仪器与试剂酶酚混合试剂酶酚混合试剂处置后的葡萄糖运用液〔处置后的葡萄糖运用液〔5mmol/L5mmol/L〕〕草酸钠抗凝剂草酸钠抗凝剂25%25%葡萄糖葡萄糖蛋白沉淀剂蛋白沉淀剂肾上腺素肾上腺素 〔〔1mg/mL1mg/mL〕〕胰岛素〔胰岛素〔1U/mL1U/mL〕〕　　实验器材：实验器材： 分光光度计、注射器、台式磅秤、兔分光光度计、注射器、台式磅秤、兔 台、三棱针、试管、试管架、漏斗台、三棱针、试管、试管架、漏斗实验动物：实验动物： 饥饿饥饿1616小时以上兔子四只小时以上兔子四只四、操作步骤四、操作步骤1、动物预备〔1〕分组每一列用一只兔子第1、3列做胰岛素对血糖浓度的影响第2、4列做肾上腺素对血糖浓度的影响〔〔2〕称重与固定〕称重与固定记录体重记录体重称重称重四肢向上固定四肢向上固定2、制备抗凝管、制备抗凝管每列取每列取2只干只干净且枯燥的且枯燥的试管，管，标好好“实验前〞和前〞和“实验后〞，后〞，草酸草酸钠在在讲台上，用台上，用药匙加一平匙的抗凝匙加一平匙的抗凝剂〔草酸〔草酸钠〕，〕，晃晃动试管使管壁上沾有抗凝管使管壁上沾有抗凝剂。

3.预备激素预备激素胰岛素〔胰岛素〔1U/mL〕〕 0.75U/Kg 0.75mL/Kg1kg兔子预备胰岛素兔子预备胰岛素0.75mL肾上腺素〔肾上腺素〔1mg/mL〕〕 0. 5mg/Kg0.5mL/Kg1kg兔子预备胰岛素兔子预备胰岛素0. 5mL4、去蛋白质血滤液制备、去蛋白质血滤液制备取取2支试管，每管中取蛋白沉淀剂支试管，每管中取蛋白沉淀剂4mL,其中其中1管标管标注实验前，另外注实验前，另外1管标注实验后管标注实验后去蛋白质血滤液制备〔待第去蛋白质血滤液制备〔待第5和和6步终了，取全血步终了，取全血制备〕：取全血制备〕：取全血0.2mL，参与上述管混匀，室温，参与上述管混匀，室温放置放置7分钟过滤分钟过滤5.注射前取血注射前取血耳缘静脉取血法：耳缘静脉取血法：拔毛拔毛酒精擦拭酒精擦拭( (用手弹动〕用手弹动〕三棱针刺破三棱针刺破静脉放血静脉放血搜集于抗凝管中〔约搜集于抗凝管中〔约1-2mL)边取血边摇动抗凝管边取血边摇动抗凝管制备去蛋制备去蛋白血滤液白血滤液6.注射激素注射激素 抓住兔子，腹部朝上，抓住兔子，腹部朝上，提起腹部皮肤，刺入皮下时提起腹部皮肤，刺入皮下时有落空感，然后缓慢注入激有落空感，然后缓慢注入激素素腹腔腹腔注射注射 胰岛素胰岛素 0.75U/Kg 肾上腺素肾上腺素 0.5mg/Kg0.5h1h取血〔取血〔2mL〕〕制备去蛋白血滤液制备去蛋白血滤液取血〔取血〔2mL〕〕制备去蛋白血滤液制备去蛋白血滤液7. GOD-POD7. GOD-POD法测血糖法测血糖试剂(ml)测定管定管（注射前）（注射前）测定管定管（注射后）（注射后）标准管准管空白管空白管去蛋白血去蛋白血滤液液0.50.5––处理后的理后的葡萄糖葡萄糖标准液准液––0.5–蛋白沉淀蛋白沉淀剂–––0.5酶酚混合酚混合试剂3.03.03.03.0充分混匀，充分混匀，37℃ 水浴水浴15min 505nm处比色以空白管比色以空白管调零，零，读取取规范管及范管及测定管定管吸光度吸光度值。

按表配液按表配液实验结果与计算实验结果与计算计算：计算：规范管葡萄糖浓度：规范管葡萄糖浓度：5mmol/LC测=A标A测×C标 测定管血糖浓度〔测定管血糖浓度〔mmol/L〕〕＝＝测定管吸光度测定管吸光度 规范管吸光度规范管吸光度×5mmol/L实验结果与计算实验结果与计算经过计算比较家兔注射激素前、后血糖浓度的经过计算比较家兔注射激素前、后血糖浓度的变换变换正常人血糖浓度：正常人血糖浓度：3.89～～6.11mmol/L验证胰岛素降血糖，肾上腺素升血糖验证胰岛素降血糖，肾上腺素升血糖结合实际课的内容分析激素影响血糖的机制结合实际课的内容分析激素影响血糖的机制Ø临床：血糖检测是目前诊断糖代谢异常相关疾病临床：血糖检测是目前诊断糖代谢异常相关疾病的主要根据的主要根据Ø科研：在代谢疾病的研讨中，常测定血糖在某科研：在代谢疾病的研讨中，常测定血糖在某些药物的研讨中，也涉及血糖的测定些药物的研讨中，也涉及血糖的测定。

测定血糖的意定血糖的意义本卷须知本卷须知抓取兔子时小心被兔子抓伤抓取兔子时小心被兔子抓伤试管一定要标志清楚试管一定要标志清楚用漏斗过滤时，不要用水润湿用漏斗过滤时，不要用水润湿用加样枪加取量要准确用加样枪加取量要准确。