
实验4——DNS法测还原糖ppt课件.ppt
5页实验四:还原糖的测定水杨酸法,1. 实验原理 在氢氧化钠和丙三醇存在下,还原糖能将3,5二硝基水杨酸中的硝基还原为氨基,生成氨基化合物此化合物在过量的氢氧化钠碱性溶液中呈桔红色,在540nm波长处有最大吸收,在一定浓度范围内其吸光度与还原糖含量呈线性关系,2. 适用范围及特点 此法适用于各类食品中还原糖含量的测定,具有准确度高、重现性好、操作简便、快速等优点,尤其适用于大批样品的测定3. 实验试剂 3,5二硝基水杨酸溶液:称取6.5g 3,5二硝基水杨酸溶于少量水中,移入1000mL容量瓶中,加入2mol/L氢氧化钠溶液325mL,再加入45g丙三醇,摇匀,冷却后定容到1000mL4. 测定方法 准确吸取0、 2、 3、 4、 5、6、 7mg/mL的葡萄糖标准溶液各1mL,样液2mL,分别置于25mL比色管中,各加入3,5二硝基水杨酸溶液2mL,用蒸馏水补齐至10mL刻度线,置沸水浴中煮5min显色,然后以流水迅速冷却,用水定容到25mL,摇匀以空白调零,在540nm处测定吸光度,绘制标准曲线,计算样品中还原糖的含量4. 结果计算,其中: A从标准曲线上求得的葡萄糖质量,mg V定样品溶液定容的体积,mL W样样品的质量,mg V测测定时的取样体积,mL,。
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