中药材薄层层析ppt课件.ppt

中药材的中药材的薄层色谱法薄层色谱法鉴别鉴别. 薄层色谱法：薄层色谱法：在中药材及其制剂的定性鉴在中药材及其制剂的定性鉴别中得到广泛的应用，这主要是由于其具有别中得到广泛的应用，这主要是由于其具有分分离分析离分析双重功能，大大提高了鉴别工作的灵敏双重功能，大大提高了鉴别工作的灵敏度和专属性，成为中药鉴别的重要方法度和专属性，成为中药鉴别的重要方法 薄层色谱法还可用于药品的薄层色谱法还可用于药品的杂质检查杂质检查和和含含量测定 中国药典大多数品种采用中国药典大多数品种采用硅胶硅胶薄层色谱法，薄层色谱法，少数使用聚酰胺薄层色谱法和氧化铝薄层色谱少数使用聚酰胺薄层色谱法和氧化铝薄层色谱法 .1. 1.薄层色谱法鉴别的理论基础薄层色谱法鉴别的理论基础 基基于于相相同同物物质质在在同同一一色色谱谱条条件件下下，表表现现出出相相同同的的色色谱谱行行为为这这一一基基本本规规律律在在同同一一块块薄薄层层板板上上点点加加供供试试品品和和对对照照物物，在在相相同同条条件件下下展展开开，显显色色检检出出色色谱谱斑斑点点后后，将将所所得得供供试试品品与与对对照照物物的的色色谱谱图进行对比分析，从而对药品进行定性鉴别。

图进行对比分析，从而对药品进行定性鉴别2.2.薄层色谱的特点薄层色谱的特点 简便、快速、易普及、具有分离和分析双重功能，且可采简便、快速、易普及、具有分离和分析双重功能，且可采用共薄层对照分析法，故专属性亦较强用共薄层对照分析法，故专属性亦较强3 3、对照物的选择、对照物的选择 对对照照物物分分为为对对照照品品（主主要要为为有有效效成成分分和和特特征征性性成成分分的的单单体体，也包括对照提取物）和也包括对照提取物）和对照药材对照药材两种 对照物的设置对照物的设置有以下有以下三种三种方式：方式：1 1）对照品对照：）对照品对照： 用用已已知知中中药药制制剂剂某某一一种种有有效效成成分分或或特特征征性性成成分分对对照照品品制制成成对对照照液液，与与样样品品在在同同一一条条件件下下层层析析，比比较较相相同同位位置置有有无无同同一一颜颜色色（或或荧荧光光）的的斑斑点点，来来检检测测是是否否含含有有某某原原料料药药材材可可设设置置一一种或数种种或数种对照品2 2）对照药材对照：）对照药材对照：缺乏对照品的情况下使用缺乏对照品的情况下使用.3 3）对照品和对照药材同时对照）对照品和对照药材同时对照(“(“双对照双对照”)”) 为为了了准准确确检检验验制制剂剂投投料料的的真真实实性性，有有时时仅仅用用对对照照品无法鉴别出来，这时可增加原药材作为对照药材。

品无法鉴别出来，这时可增加原药材作为对照药材 例例如如含含有有黄黄连连、黄黄柏柏的的制制剂剂，单单用用小小檗檗碱碱对对照照品品来来鉴鉴别别是是不不足足足足以以说说明明的的，此此时时应应增增加加黄黄连连作作为为对对照照药材进行检视药材进行检视 要要求求样样品品色色谱谱图图中中的的主主要要斑斑点点应应与与对对照照品品和和对对照照药药材材色色谱谱图图中中的的有有关关斑斑点点相相一一致致，从从而而大大大大提提高高了了薄薄层层色色谱谱鉴鉴别别法法的的专专属属性性和和整整体体性性，可可有有效效地地检检出出药药品品是否使用了假冒药材是否使用了假冒药材 .4 4、影响薄层色谱鉴别的主要因素、影响薄层色谱鉴别的主要因素 影影响响因因素素较较多多，例例如如供供试试液液的的净净化化程程度度，吸吸附附剂剂的的性性能能和和薄薄层层板板的的质质量量、点点样样的的质质量量、展展开开剂剂的的组组成成和和饱饱和和情情况况、对对照照品品的的纯纯度度、展展开开的的距距离离、相相对对湿湿度度和和温温度度等等主主要要的的有有以以下下四四个方面：个方面：1 1）样品的预处理及供试液的制备）样品的预处理及供试液的制备 中中药药的的成成分分复复杂杂，未未知知成成分分多多，在在制制剂剂中中往往往往各各种种成成分分尽尽可可能能多多的的提提取取出出来来，其其中中既既有有欲欲测测成成分分也也有有“杂杂质质”，常常常常由由于于相相互互干干扰扰或或背背景景污污染染而而难难以以得得到到满满意意的的分分离离效效果果，甚甚至至难难以以辨认，因此供试液的净化程度就很关键。

辨认，因此供试液的净化程度就很关键 为为了了得得到到较较清清晰晰的的色色谱谱图图，供供试试液液的的制制备备要要求求：被被测测成成分分尽可能多的提取出来，杂质要尽可能多的除去尽可能多的提取出来，杂质要尽可能多的除去2 2）薄层色谱的点样）薄层色谱的点样 点点样样是是关关键键的的一一步步，既既关关系系到到能能否否得得到到可可重重现现的的薄薄层层色色谱谱，也也关关系系到到定定量量结结果果的的准准确确与与否否，不不良良的的点点样样是是测测定定误误差差的的主主要要来源3 3）吸附剂的活性与相对湿度的影响）吸附剂的活性与相对湿度的影响 硅硅胶胶为为亲亲水水性性吸吸附附剂剂，其其含含水水量量越越高高，吸吸附附活活性性越越弱弱，自自点点样样开开始始直直展展开开前前，薄薄层层板板都都是是暴暴露露在在空空气气中中，其其活活性性取取决决于于空空气气的的相相对对湿湿度度，薄薄层层板板在在不不同同的的相相对对湿湿度度条条件件下下，其其吸吸附附活活性亦不同，致使薄层色谱重现性较差性亦不同，致使薄层色谱重现性较差 .4 4）温度的影响）温度的影响 在在其其他他条条件件相相同同时时，展展开开时时的的温温差差较较大大会会导导致致斑斑点点扩扩散散及及被被分分离离物物质质的的R Rf f值值和和物物质质的的相相互互分分离离度度不不一一致致，影影响响薄薄层层色色谱谱的的重现性。

重现性 六、仪器与材料（略）六、仪器与材料（略）七、操作步骤七、操作步骤 一一般般操操作作步步骤骤为为：供供试试液液的的制制备备制制备备薄薄层层板板（制制板板）点点样样展开展开显色与检视显色与检视1.1.供试液制备：供试液制备：包括提取和净化（包括提取和净化（除去杂质，消除干扰除去杂质，消除干扰）常常用用的的预预处处理理方方法法有有：溶溶剂剂提提取取法法（包包括括冷冷浸浸、回回流流、超超声声提提取取）；萃萃取取法法，升升华华法法，蒸蒸馏馏法法、小小型型层层析析柱柱的的柱柱色色谱谱法法、离子交换法等离子交换法等2.2.制备薄层板（略）制备薄层板（略）3.3.点样点样 定量点样定量点样 . 原原点点起起始线始线5mm8mm815cm11.5cm溶剂前沿溶剂前沿展展开开剂剂液面液面（展开距离）（展开距离）(点样位置点样位置). 4.4.展开（略）展开（略） 5. 5.显色与检视显色与检视 颜色较深的成分：颜色较深的成分：可直接在日光下检视其斑点可直接在日光下检视其斑点 无色或浅色的成分：无色或浅色的成分：多用喷雾法或浸渍法以适宜的显色剂显多用喷雾法或浸渍法以适宜的显色剂显色，或再加热使之显色。

色，或再加热使之显色 有荧光的物质：有荧光的物质：或遇某些试剂可激发荧光的物质可在紫外灯或遇某些试剂可激发荧光的物质可在紫外灯（365nm365nm）下观察荧光色谱下观察荧光色谱 有的成分：有的成分：可用试剂的蒸气（如可用试剂的蒸气（如碘蒸气、氨蒸气碘蒸气、氨蒸气）熏蒸显色熏蒸显色 无色有紫外吸收且不产生荧光的成分：无色有紫外吸收且不产生荧光的成分：可用可用荧光淬灭法荧光淬灭法显色即在含有荧光剂的硅胶板（如硅胶即在含有荧光剂的硅胶板（如硅胶GF254GF254板），在紫外光灯板），在紫外光灯（254nm254nm）下观察板面上该成分形成的荧光淬灭色谱下观察板面上该成分形成的荧光淬灭色谱 .6.6.记录记录 薄层色谱图象可采用摄像薄层色谱图象可采用摄像设备拍照，以光学照片或电子设备拍照，以光学照片或电子图象的形式保存也可以用扫图象的形式保存也可以用扫描仪记录相应的色谱图描仪记录相应的色谱图7.7.结果判断结果判断 供试品色谱中，在与对照供试品色谱中，在与对照品、对照药材或对照提取物色品、对照药材或对照提取物色谱的相应的位置上，显相同颜谱的相应的位置上，显相同颜色或荧光的斑点，则判断为符色或荧光的斑点，则判断为符合定。

合定薄层色谱数码相机成像系统.实验二、黄连的薄层色谱鉴别实验二、黄连的薄层色谱鉴别 （1）供试液：黄连粉末）供试液：黄连粉末0.2g+甲醇甲醇6ml振荡振荡10min 滤液滤液 （2）对照药材溶液：黄连对照药材同上法操作，滤液为对）对照药材溶液：黄连对照药材同上法操作，滤液为对 照药材溶液照药材溶液 （3）薄层板：硅胶）薄层板：硅胶GF254硅胶板硅胶板 （4）点样量：各）点样量：各25l（用微量毛细管）（用微量毛细管） （5）展开剂：苯）展开剂：苯-醋酸乙酯醋酸乙酯-甲醇甲醇-异丙醇异丙醇-水，水， (6 : 3 : 1.5 : 1.5: 0.3) 约约20ml （6）展开方法：氨蒸汽饱和，展开至前沿约）展开方法：氨蒸汽饱和，展开至前沿约1cm，取出，晾干取出，晾干 （7）显色方式：紫外光灯）显色方式：紫外光灯(365nm)下，观察荧光斑点下，观察荧光斑点 . 1.1.黄连黄连 2. 2.黄连黄连 3. 3.黄连黄连 黄连黄连 黄连黄连 黄连黄连 ( (味连味连) ) （云连（云连) () (雅连雅连) () (野连野连) () (日本黄连日本黄连) ).。