
实验三环境因素对微生物的影响.ppt
17页单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,实验三、环境因素对微生物的影响,一、实验目的,1.,了解,温度,对微生物生长的影响;,2.,了解,抗生素,(青霉素、氨苄青霉素等)的抗菌范围,学习抗菌谱试验的基本方法3.,了解,消毒剂,(碘酒或酒精)对微生物分布的影响4.,了解,紫外线,杀菌对微生物的作用特点,二、实验原理,1.,温度,:,影响微生物生长与存活的最重要因素自然界的微生物可根据对温度的适应性分为,低温型、中温型和高温型但不管哪一种温度型的微生物,都有生长温度范围分为,最高、最适和最低,生长温度在最适宜温度里生长良好:超过最高温度细胞死亡;低于最低温度细胞被抑制或死亡2.,抗生素,对微生物生长的影响:抗生素是,某些微生物,在生长代谢过程中,产生的,能抑制或杀死其它微生物的,次生代谢产物,每种抗生素都有它固定的抗菌范围和抗菌谱例如,青霉素,只对,革兰氏阳性菌,具有抗菌作用;,多粘菌素,只对革兰氏阴性菌有作用,这类抗生素称为,窄谱抗生素,;,另一些抗生素对多种细菌具有作用,例如,四环素,、,土霉素,对许多革兰氏阳性菌和阴性菌都有作用称为,广谱抗生素。
二、实验原理,比如,氨苄青霉素,,对革兰氏阳性球菌、,变形杆菌,、沙门氏菌、痢疾杆菌、产气荚膜杆菌、,大肠杆菌,及流感杆菌等都有很好的抗菌效果二、实验原理,3.,化学消毒剂,对微生物分布的影响,人体,皮肤,分布着一定种类与数量的微生物使用,化学消毒剂,对皮肤进行,表面消毒,是医院里进行无菌操作常用的方法之一二、实验原理,4.,紫外线,的杀菌作用,波长为,200-300nm,的紫外线都有杀菌能力,其中以,260nm,的杀菌能力最强,其杀菌机理是,抑制,DNA,复制,以及产生,臭氧和,H,2,O,2,而产生一定的杀菌作用但紫外线,穿透力弱,,一般适用于,表面消毒,和,空气消毒,二、实验原理,三、实验材料,1,、,菌种,:大肠杆菌、白色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌等2,、,药敏片,:,青霉素、庆大霉素、环丙沙星、菌必治,四、实验步骤,1.,温度,对微生物生长的影响(,每组,),(,1,),菌种,:大肠杆菌,(,白葡,),、枯草芽孢杆菌2,),培养基,:取肉汤培养基,(液体培养基),5,支,3,),接种,:分别接种,大肠杆菌,(,白葡,),和,枯草芽孢杆菌,各,2,支,试管,余下,1,支不接种,作阴性,对照,。
4,),加热,:取接种的,大肠杆菌,(,白葡,),和,枯草芽孢杆菌,培养基各,1,支,于,100,作用,15min,后取出,冷水冲凉5,支试管,放入,37,温箱培养5,),观察,:培养,24h,后,观察现象,并记录2.,抗生素,对微生物生长的影响,(,1,),菌种,:,大肠杆菌(,G,)、,白色,葡萄球菌或金黄色葡萄球菌(,G,)2,),接菌,用,接种环,刮取一环菌体,轻放在平板上;将,无菌的棉签,在,无菌水,(,液体培养基,),中润湿;用湿润的无菌棉签将平板上的菌体,均匀涂布,2,种不同的菌,各做,1,个,平板四、实验步骤,(,3,),放置药敏片,:用,无菌镊子,取,4,种,不同的抗生素,药敏片,各,1,个,,贴在平板上(每个平板放,4,个),轻轻压一下,倒置注意:,在贴滤纸条时,不要,在培养基上,拖动,滤纸片,避免抗生素溶液在培养基中扩散时分布不均匀4,),培养,:平板于,37,培养,24h,后观察、记录实验现象四、实验步骤,3.,化学消毒剂,对微生物分布的影响,(,1,),分区,:,将,1,个,营养琼脂平板分为,4,个,区域;,(,2,人,1,个平板,每人,2,个区),(,2,),接种,:,2,名同学,直接用手指,在平板的,2,个区域划之字形,待用,碘酒,/,酒精棉球,消毒后,,稍候片刻,再在另外,2,个区域,划之字形,;,(,3,),培养,:平板于,37,培养,24h,后观察、记录实验现象。
四、实验步骤,甲,乙,4.,紫外线,的消毒作用(,穿透,作用),(,1,),菌种:,大肠杆菌、白色葡萄球菌,(,2,),接菌:,用,接种环,刮取一环菌体,轻放在平板上;将,无菌的棉签,在,无菌水,(,液体培养基,),中润湿;用湿润的无菌棉签将平板上的菌体,均匀涂布,可做,1,种菌,也可做,2,种(中间划线),】,四、实验步骤,4.,紫外线,的消毒作用(,穿透,作用),(,4,),照射,:用平皿盖,半遮盖平板,,置于,紫外灯照射,15min,5,),培养,:盖上平皿盖,,于,37,培养,24h,后观察实验现象四、实验步骤,思考题,如果药敏实验的抑菌带隔一段时间后又长出少许菌落,你如何解释这种现象?,要 求,上交实验报告,写清楚实验现象,并解释实验结果。
